全 文 ：第 4期
近年来，赤潮在全世界范围内频发，对近海水域
生态环境和沿海水产业的可持续发展造成了极大的
威胁。因此，用于赤潮预防、控制和减缓（PCM）的技术
和方法引起了科学界和相应管理机构的重视[1-2]。在这
些技术和方法中，利用大型海藻进行赤潮预防、控制
和减缓表现出显著的应用潜力。一系列研究成果表
明，利用大型海藻对赤潮进行生物控制的方法显示出
环境友好和低成本等优点[1-2]，为赤潮防控提供了新的
思路、研究方法和方向。
目前，已经发现某些大型海藻对赤潮微藻生长的
抑制作用。例如，龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）、羊
栖菜（Sargassum fusiforme）、马尾藻（Sargassum spp.）、
蜈蚣藻（Grateloupia filicina）、石花菜（Gelidium anansii），
孔石莼（Ulva pertusa）和缘管浒苔（Enteromorpha linza）
能抑制东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense）、中肋
骨条藻（Skeletonema costatum）、塔玛亚历山大藻
《环境科学与技术》编辑部：（网址）http://fjks.chinajournal.net.cn（电话）027-87643502（电子信箱）hjkxyjs@vip.126.com
收稿日期：2015-06-07；修回 2015－08－01
基金项目：江苏省自然科学基金青年基金项目（BK20140446）；连云港市科技攻关工业项目（CG1310）；江苏省高校自然科学研究项目（13KJB170001）；
淮海工学院自然科研基金（Z2014006）；江苏省海洋资源开发研究院开放课题（JSIMR201314）；淮海工学院大学生创新实验项目（Z201411641105001）
作者简介：浦寅芳（1969-），女，高级实验师，学士，主要从事海洋生化工程研究，（电子信箱）puyinfang88@163.com；*通讯作者，（电子信箱）syy-999@
163.com。
Environmental Science & Technology
第 39卷 第 4期
2016年 4月
Vol. 39 No.4
Apr. 2016
浦寅芳，苏振霞，肖辉,等.刺松藻抑藻活性物质分离的初步研究[J].环境科学与技术，2016，39（4）：53-57.PuYinfang，SuZhenxia，XiaoHui,etal.Study on
anti-algal substances isolated fromCodium fragile[J]. Environ ental Science & Technology，2016，39（4）：53-57.
刺松藻抑藻活性物质分离的初步研究
浦寅芳 1， 苏振霞 1， 肖辉 2， 张志恒 1， 王俊 1， 孙颖颖 1*
（1.淮海工学院海洋学院，江苏 连云港 222005； 2.江苏省海洋资源开发研究院，江苏 连云港 222000）
摘 要：采用甲醇浸泡刺松藻干粉末，适当处理后，制备到此海藻的甲醇提取物（过滤和减压蒸干）。抑藻活性检测表明，当浓度为
4.0 mg/mL时，此甲醇提取物明显抑制了米氏凯伦藻的生长。进一步采用 2种液液萃取方法，对此提取物进行分离，共获得 8个液液萃取
分离组分。这些组分对米氏凯伦藻均表现出抑藻活性。在此基础上，采用化学成分系统预试验方法，初步分析了这些抑藻活性组分的化学
成分。结果表明，刺松藻甲醇提取物的液液萃取分离组分中主要含有鞣质、有机酸和黄酮。最后，对抑藻活性组分进行了硅胶 GF254薄层层
析检测，得到了较为适宜的展开剂，为后续采用硅胶柱层析进行分离纯化奠定了良好的实验基础。目前，国内外尚未见刺松藻抑藻活性物
质的相关研究。
关键词：抑藻活性物质； 刺松藻； 分离； 赤潮微藻
中图分类号：X172 文献标志码：A doi：10.3969/j.issn.1003-6504.2016.04.011 文章编号：1003-6504(2016)04-0053-05
Study on Anti-algal Substances Isolated from Codium fragile
PU Yinfang1， SU Zhenxia1， XIAO Hui2， ZHANG Zhiheng1，
WANG Jun1， SUN Yingying1*
（1. Ocean School，Huaihai Institute of Technology，Lianyungang 222005，China；
2. Jiangsu Research Institute of Marine Resource Development，Lianyungang 222000，China）
Abstract：Codium fragile，a species of green macro-algae，was treated and made into dry powder that was then soaked in
methanol，and thereby the methanol extract （MECF）was obtained. It was found that MECF，when in concentration of 4.0
mg/mL，effectively inhibited the growth of Karenia mikimitoi. Furthermore，experimental partitioning of MECF was carried
out using two different methods of liquid-liquid extraction，which resulted in eight solvent fractions that all showed inhibition
to Karenia mikimitoi. Chemical constituents of these fractions of MECF were analyzed as well，which indicated the presences
of bioactive compounds such as tannin，organic acids and flavones. Finally，the eight fractions were applied to silica gel
thin-layer chromatography （TLC）to get the appropriate developing agent for subsequent isolation and purification by silica
gel column chromatography.
Key words：anti-algal substances；Codium fragile；isolation；red tide microalgae
第 39卷
（Alexandrium tamarense）和赤潮异弯藻（Heterosigma
akashiwo）的生长[3-8]。珊瑚藻（Lithophyllum spp.）和鼠
尾藻（Surgassum thunbergii）抑制赤潮异弯藻和中肋
骨条藻的生长[9-10]。真江篱（Gracilaria verrucosa）和浒
苔（Ulva prolifera）抑制米氏凯伦藻（Karenia mikimitoi）
的生长[11-12]。然而，目前尚未见刺松藻（Codium fragile）
抑制赤潮微藻的报道。
刺松藻是一种世界性分布的绿藻，具有抗肿瘤、
抗菌、抗病毒和抗凝血等作用。本文采用甲醇浸泡刺
松藻干粉末，适当处理后，采用 2种液液萃取方法，对
甲醇提取物进行初步分离。抑藻活性检测后，采用化
学成分系统预试验方法，分析抑藻活性组分的化学成
分。最后，进行抑藻活性组分的硅胶 GF254薄层层析检
测，获得了较为适宜的展开剂，为后续采用硅胶柱层
析分离纯化刺松藻的抑藻活性物质奠定了良好的实
验基础。
1 材料与方法
1.1 实验材料
米氏凯伦藻（Karenia mikimitoi）由江苏省海洋生
物技术重点建设实验室保存，f/2培养基中培养，培养
温度为（20±0.1）℃，光照强度 40 μmol/（m2·s），光暗比
为 12∶12。
刺松藻半干品来自于采购商，40 ℃下烘干 4 d后，
粉碎（≤0.3 mm）。
天然海水经过脱脂棉和 300目筛绢过滤，煮沸、
冷却，pH 值和盐度分别调节至 8.5和 30备用（实验
所用海水均做如上处理）。
无水甲醇、乙酸乙酯和丙酮为分析纯。
1.2 刺松藻抑藻活性物质的提取
500 g刺松藻干粉末，置于 5 000 mL锥形瓶中，
加入 3 000 mL甲醇，常温、黑暗浸泡。10 d后，滤纸过
滤除去残渣，并用 0.22 μm有机系滤膜除去颗粒物干
扰。40 ℃旋转蒸发除去甲醇，获得浸膏，即为刺松藻的
甲醇提取物（MECF）。取适量提取物进行抑藻活性检
测，其余提取物加入适量蒸馏水，充分振荡，4 ℃静置。
12 h后，3 500 r/min下离心 15 min，收集上清液，进行
液液萃取分离。
1.2.1 不同极性溶剂液液萃取分离
上清液加入石油醚（60~90 ℃）萃取 3~4 次，上层
减压蒸干得石油醚相浸膏（组分 A1），下层 40 ℃减压
蒸发除去甲醇后，加入适量蒸馏水后，用乙酸乙酯萃
取 3~4次，减压蒸干获得乙酸乙酯相浸膏（组分 B1）。
下层 40 ℃减压蒸发除去甲醇后，加入正丁醇萃取 3~4
次，减压蒸干分别得到正丁醇相浸膏（组分 C1）和水
相浸膏（组分 D1），4 ℃保存备用。
1.2.2 不同 pH下乙酸乙酯液液萃取分离
上清液用 1.0 mol/L NaOH 调 pH至 11，乙酸乙
酯萃取 3次。乙酸乙酯相合并后，40 ℃减压蒸干，得浸
膏（组分 A2）。下层加入 1.0 mol/L HCl调节 pH至 7，
乙酸乙酯萃取 3次后，乙酸乙酯相合并，减压蒸干得
到浸膏（组分 B2）。用 1.0 mol/L HCl调下层溶液 pH
至 2，乙酸乙酯萃取 3次。上层和下层分别减压蒸干
后，获得乙酸乙酯浸膏（组分 C2）和水相浸膏（组分
D2），4 ℃保存。
1.3 硅胶 GF254薄层层析检测
将刺松藻甲醇提取物的液液萃取分离组分，分别
以石油醚∶乙酸乙酯（2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2，V∶V）和氯
仿∶甲醇（16∶1、10∶1、9∶1、8∶1、4∶1、2∶1、1∶1，V∶V）为展开
剂，进行硅胶GF254薄层层析检测，紫外 254 nm下观察。
1.4 抑藻活性检测
1.4.1 刺松藻甲醇提取物的抑藻活性实验
分别加入一定体积 MECF到 f/2培养基中，混合
均匀后，接种米氏凯伦藻，培养体系总体积为 100 mL。
米氏凯伦藻接种细胞数量为 5×104 个/mL，MECF 终
浓度依次为 0.5、1.0、2.0、4.0 和 8.0 mg/mL。同时，
设定添加相同体积甲醇的对照组（甲醇加入体积不超过
0.5 mL），每个培养瓶设定 3个平行样。所有培养瓶置
于 GXZ-260B智能型光照培养箱中，温度（26±1）℃，
光照强度 62 μmol/（m2·s），光暗比为 12∶12。每天定时
摇动培养瓶 2次，以防止微藻附壁生长。每隔 1 d从
培养瓶中取 1 mL培养液，用 Lugol’s试剂固定后，计
数藻细胞数量的变化。取样后向培养瓶中加入 1 mL
100倍 f/2培养液，以避免营养耗尽进而影响微藻的
生长。
1.4.2 液液萃取分离组分的抑藻活性实验
将液液萃取分离组分加入到 f/2培养基中，混合
后，接种米氏凯伦藻，培养体系总体积为 40 mL。米氏
凯伦藻接种细胞数量为（14×104~16×104 个/mL，分离
组分终浓度均为 1.25 mg/mL。同时，设定添加相同体
积甲醇的对照组（甲醇加入体积不超过 0.5 mL），每个
培养瓶设定 3个平行样，所有培养瓶置于 GXZ-260B
智能型光照培养箱中，培养条件同上。
1.5 化学成分系统预试验分析
参照化合物常用化学鉴定方法，进行生物碱、酚
酸、脂肪酸、萜类、内酯、鞣酸、有机酸和糖类等 8 种化
合物鉴定试验。
1.6 数据处理
实验数据采用 SPSS 11.5软件包进行独立样本检
验统计分析，p<0.05 为显著性差异，p<0.01为极显著
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第 4期
性差异。
微藻生长抑制率，I=（1－N/N0）×100%，式中，N为
处理组藻细胞数量（×104 个/mL）；N0为对照组藻细
胞数量（×104 个/mL）。
2 结果与分析
2.1 刺松藻甲醇提取物的制备及其对米氏凯伦藻生
长的影响
以 15.0 kg刺松藻干粉末为原料，经甲醇浸泡、过
滤和减压蒸干等适当处理后，制备到 240 g暗绿色甲
醇提取物。将适量此提取物溶解于甲醇中，制备浓度
为 10 g/L母液，进行抑藻活性检测。
图 1表明，随浓度增加，甲醇提取物对米氏凯伦
藻生长的抑制作用明显（p<0.05）增强。当浓度为 4.0
mg/mL时，甲醇提取物明显抑制了米氏凯伦藻的生长，
其对米氏凯伦藻的生长抑制率为 76.5%（10 d）。
2.2 刺松藻甲醇提取物液液萃取分离及其对米氏凯
伦藻生长的影响
采用 2 种液液萃取方法，分别对甲醇提取物
MECF（110 g）进行分离，共制备到 A1、B1、C1和 D1
以及 A2、B2、C2和 D2等 8个组分，质量依次为 25.2、
3.3、8.0和 12.0 g以及 29.4、2.7、3.9和 8.1 g，得率见表1。
将上述 8个组分重新溶解于甲醇，配制浓度为 2 g/L
母液，进行抑藻活性检测，结果见图 2。
在图 2（a）中，组分 A1、B1和 D1对米氏凯伦藻的
生长表现出明显（p<0.05）的抑制作用。第 10天，此 3
个组分对米氏凯伦藻的生长抑制率在 80%以上。同时
可以看出，组分 C1也在一定程度上抑制了米氏凯伦
藻的生长。在培养期间，此实验组藻细胞数量低于对
照组。
4个萃取组分中，组分 A2、B2和 C2显著（p<0.05）
抑制了米氏凯伦藻的生长，第 10天此 3个组分对米
氏凯伦藻的生长抑制率超过 75%。同时可以看出，组
分 D2对米氏凯伦藻也表现出一定的抑藻作用，尽管
在培养期间，此实验组藻细胞数量逐步增加，但仍然
低于对照组（图 2（b）），在整个培养期间，其细胞数量
约为对照组细胞数量的 65%。
综上，对刺松藻甲醇提取物的所有液液萃取分离
组分进行化学成分系统预试验分析。
2.3 刺松藻甲醇提取物液液萃取分离组分的化学成
分检测
由表 2可以看出，组分 A1含有生物碱、鞣质和内
酯/香豆素，可能含有黄酮，不含蒽醌和萜类/甾体；组
分 B1含有鞣质、黄酮和萜类/甾体，可能含有内酯/香
豆素和有机酸，不含生物碱和蒽醌；组分 C1含有生物
碱、鞣质、有机酸、内酯/香豆素、黄酮和萜类/甾体，可
能含有蒽醌，不含生物碱；组分 D1含有酚类、有机酸、
黄酮、鞣质和萜类/甾体，可能含有内酯/香豆素，不含
生物碱和蒽醌。概括来讲，此 4个分离组分中主要含
有鞣质、有机酸、黄酮和内酯/香豆素，均不含蒽醌。
表 3表明，组分 A2含有生物碱、鞣质、黄酮和萜
类/甾体，可能含有内酯/香豆素和蒽醌，不含有机酸；
组分 B2含有生物碱、鞣质、有机酸、黄酮和萜类/甾体，
可能含有内酯/香豆素和蒽醌；组分 C2含有酚类、有
机酸、黄酮和萜类/甾体，可能含有内酯/香豆素，不含
生物碱和蒽醌；组分 D2含有酚类和黄酮、可能含有内
浦寅芳，等 刺松藻抑藻活性物质分离的初步研究
表 1 刺松藻甲醇提取物液液萃取分离组分得率
Table 1 Yeild of extraction fractions from the methanol extract of
Codium fragile by liquid-liquid extraction
途径 1 途径 2
A1 B1 C1 D1 A2 B2 C2 D2
得率/% 22.9 3.0 7.27 10.9 26.7 2.45 3.54 7.36
注：以MECF为计算基准。
55
第 39卷
酯/香豆素，不含生物碱、有机酸、蒽醌和萜类/甾体。
分析得到，上述 4个分离组分中主要含有黄酮、萜类/
甾体、生物碱、酚类、鞣质和有机酸，可能含有内酯/香
豆素。
综合分析，确定刺松藻中主要含有鞣质、有机酸
和黄酮等化合物。同时发现，2种不同分离途径制备
到的组分含有/可能含有或不含有的化学成分是不
同的，我们认为这可能与提取条件（溶剂和 pH）不
同有关。
2.4 刺松藻甲醇提取物液液萃取分离组分的硅胶
GF254薄层层析检测
2种不同途径制备到的刺松藻液液萃取分离组分
进行硅胶 GF254薄层层析检测，结果见表 4。每个液液
萃取分离组分获得了较为理想的薄层层析展开，为后
续采用硅胶柱层析进行这些组分的分离纯化奠定了
良好的实验基础。
表 2 刺松藻组分的化学成分系统预试验检测结果（途径 1）
Table 2 Chemical constituent analysis results of extraction fractions
from the methanol extract of Codium fragile by liquid-liquid
extraction
检查种类 检测方法
萃取分离组分
A1 B1 C1 D1
生物碱
鞣酸试剂 + + － －
硅钨酸试剂 + － － －
苦味酸试剂 + － － －
碘化铋钾试剂 + + － －
酚类
三氯化铁试剂 + + + －
三氯化铁-铁氰化钾试剂 + + + +
重氮化试剂 － － + +
鞣质
三氯化铁试剂 + + + －
三氯化铁-铁氰化钾试剂 + + + +
明胶试剂 + + + －
有机酸
溴酚蓝试剂 － － + +
溴甲酚绿试剂 － + + +
内酯香豆素
异羟污铁试剂 + + + +
重氮化试剂 － － + +
开环-闭环试剂 + － － －
黄酮
三氯化铝试剂 － + + +
醋酸镁试剂 + + + +
氢氧化钾试剂 － + + +
蒽醌
三氯化铝试剂 － － － －
醋酸镁试剂 － － － －
硼酸试剂 － － + －
萜类甾体 香草醛-浓硫酸试剂 － + + +
注：“+”表示阳性反应，“－”表示阴性反应。
表 3 刺松藻组分的化学成分系统预试验检测结果（途径 2）
Table 2 Chemical constituent analysis results of extraction fractions
from the methanol extract of Codium fragile by liquid-liquid
extraction
注：“+”表示阳性反应，“－”表示阴性反应。
检查种类 检测方法
萃取分离组分
苦味酸试剂 + + － －
碘化铋钾试剂 + + － －
酚类
三氯化铁试剂 － － + +
三氯化铁-铁氰化钾试剂 + + + +
重氮化试剂 － － － +
鞣质
三氯化铁试剂 － － + +
三氯化铁-铁氰化钾试剂 + + + +
明胶试剂 + + － －
有机酸
溴酚蓝试剂 － + + －
溴甲酚绿试剂 － + + －
内酯香豆素
异羟污铁试剂 + + + +
重氮化试剂 － － － +
开环-闭环试剂 + + － －
黄酮
三氯化铝试剂 + + + +
醋酸镁试剂 + + + +
氢氧化钾试剂 － + － +
蒽醌
三氯化铝试剂 － － － －
醋酸镁试剂 － － － －
硼酸试剂 + + － －
A2 B2 C2 D2
生物碱
鞣酸试剂 + + － －
硅钨酸试剂 + + － －
萜类甾体 香草醛-浓硫酸试剂 + + + －
表 4 刺松藻液液萃取分离组分的硅胶 GF254薄层层析检测
Table 4 Separation results by silica gel（GF254）thin-layer chromatography（TLC）
途径 1 途径 2
A1 B1 C1 D1 A2 B2 C2 D2
展开剂
石油醚/乙酸乙酯
(3∶2)
石油醚/乙酸乙酯
(2∶3)
氯仿/甲醇
(1∶1)
氯仿/甲醇
(3∶2)
氯仿/甲醇
(9∶1)
氯仿/甲醇
(8∶1)
氯仿/甲醇
(4∶1)
氯仿/甲醇
(2∶1)
斑点个数 5 5 4 4 6 4 3 5
3 讨论
研究表明，大型海藻直接分泌或体内含有能抑制
赤潮生物生长的化感物质，例如，多管藻属 Polysiphonia
lanosa 产生的聚酚、海头红（Plocamium hamatum）中
的单萜、小珊瑚藻（Corallina pilulifera）中的溴仿[15]、裂
片石莼（Ulva fascisata）[15]、红藻 Neodilsea yendoana、
黄藻 Cladosiphon okamuranus、孔石莼 [15]和龙须菜
（Gracilaria lemaneiformis）[16]中的不饱和脂肪酸、缘管
浒苔的脂肪酸[17]等。
本文采用甲醇浸提，获得刺松藻提取物 MECF。
当浓度为 4.0 mg/mL时，此提取物明显抑制了米氏凯
伦藻的生长（图 1）。Jeong等发现绿藻、褐藻和红藻门
某些海藻的甲醇提取物能抑制多环旋沟藻（Cochlo-
56
第 4期
dinium polykrikoides）、长崎裸甲藻（Gymnodinium
mikimotoi）和红色裸甲藻（Gymnodinium sanguineum）
等赤潮微藻的生长[18]。王仁君等也发现 3种大型海藻
缘管浒苔（Ulva linza）、小珊瑚藻（Corallina pilulifera）
和鼠尾藻（Sargassum thunbergii）的甲醇提取物对东
海原甲藻（Prorocentrum donghaiense）具有强烈的抑制
作用 [19]。孙颖颖等研究表明，浒苔（Enteromorpha
prolifera）甲醇提取物能明显抑制米氏凯伦藻（Karenia
mikimitoi）、中肋骨条藻（Skeletonema costatum）和塔玛
亚历山大藻（Alexandrium tamarense）的生长[20]。
进一步采用 2 种液液萃取分离方法，对甲醇粗
提物进行了初步分离，共制备到 8个萃取分离组分（表
1），这些组分均对米氏凯伦藻的生长表现出了抑制作
用。其中，组分 A1、B1和 D1以及 A2、B2和 C2的抑
藻作用更为强烈。在浓度 1.25 mg/mL，它们对米氏凯
伦藻的生长抑制率超过 75%（10 d）（图 2）。在此基础
上，采用化学成分系统预试验方法，对 8个分离组分
的化学成分进行了初步分析。结果表明，刺松藻甲醇
提取物的液液萃取分离组分中主要含有鞣质、有机酸
和黄酮（表 2和表 3）。目前，尚不能确定哪些化学成分
是 8个分离组分抑藻活性的主要原因，需进一步分离
纯化。化学成分系统预试验结果为后续工作明确了分
离目标和重点。
更进一步采用硅胶 GF254薄层层析对上述 8个分
离组分进行初步检测，获得较为理想的展开结果
（表 4），为后续采用硅胶柱层析进行抑藻活性物质的
分离纯化奠定了良好的实验基础。
[参考文献]
[1] Anderson D M，Cembella A D，Hallegraeff G M. Progress in
understanding harmful algal blooms：paradigm shifts and new
technologies for resea rch，monitoring and management [J].
Annu Rev Mater Sci，2012（4）：143-176.
[2] Tang Y Z，Gobler C J. The green macroalga，Ulva lactuca，
inhibits the growth of seven common harmful algal bloom
species via allelopathy[J]. Harmful Algae，2011（10）：480-
488.
[3] Wang R J，Feng L，Tang X X，et al. Allelopathic growth in－
hibition of Heterosigma akashiwo by the three Ulva spcieces
（Ulva pertusa，Ulva linza，Enteromorpha intestinalis）under
laboratory conditions[J]. Acta Oceanologica Sinica，2012，31
（3）：138-144.
[4] Lu H M，Xie H H，Gong Y，et al. Secondary metabolites
from the seaweed Gracilaria lemaneiformis and their allelo－
pathic effects on Skeletonema costatum [J]. Biochem Syst
Ecol，2011（4）：397-400.
[5] 王悠，俞志明，宋秀贤，等.大型海藻与赤潮微藻以及赤潮微
藻之间的相互作用研究[J].环境科学，2006，27（2）：274-280.
Wang You，Yu Zhiming，Song Xiuxian，et al. Effects of
macroalgae on growth of 2 species of bloom microalgae and
interactions between these microalgae in laboratory culture
[J]. Environmental Science，2006，27（2）：274-280.（in Chi－
nese）
[6] 别聪聪，李锋民，李媛媛，等.六种大型藻浸提液对中肋骨
条藻的抑制及活性成分分离[J].中国海洋大学学报：自然
科学版，2011，41（7/8）：107-112.
Bie Congcong，Li Fengmin，Li Yuanyuan，et al. Inhibitory
effects of 6 macroalgae extracts on Skeletonema costatum and
isolation of allelochemicals[J]. Periodical of Ocean Universi－
ty of China：Natural Science Edition，2011，41（7/8）：107-
112.（in Chinese）
[7] 雷光英，杨宇峰，李宵.龙须菜对赤潮异弯藻和海洋原甲
藻的生长抑制效应[J].海洋环境科学，2010，29（1）：27-31.
Lei Guangying，Yang Yufeng，Li Xiao. Inhibitory effects of
Gracilaria lemaneiformis on growth of Heterosigma akashi－
wo and Prorocent rum micans [ J ] . Marine Environmental
Science，2010，29（1）：27-31.（in Chinese）
[8] Jin Q，Donog S L. Comparative studies on the allelopathic
effects of two different strains of Ulva pertusa on Heterosig－
ma akashiwo and Alexanadrium tamarense[J]. J Exp Mar Bi－
ol Ecol，2003，293：41-45.
[9] Nan C R，Zhang H Z，Zhao G Q. Allelopathic interactions
between the macroalga Ulva pertusa and eight microalgal
species[J]. Journal of Sea Researeh，2004，52：259-268.
[10] Suzuki，T，Takabayashi T，Kawaguchi T. Isolation of an al－
lelopathic substance from the crustose coralline algae，Litho－
phyllum spp.，and its effect on the brown alga，Laminaria
religiosa Miyabe（Phaeophyta）[J]. J Exp Mar Biol Ecol，
1998，225：69-77.
[11]王仁君，唐学玺，冯蕾，等.鼠尾藻对赤潮异弯藻和中肋骨
条藻的抑制作用[J]. 应用生态学报，2006，17（12）：2421-
2425.
Wang Renjun，Tang Xuexi，Feng Lei，et al. Inhibitory effect
of Surgassum thunbergii on Heterosigma akashiwo and
Skeletonema costatum[J]. Journal of Applied Ecology，2006，
17（12）：2421-2425.（in Chinese）
[12]刘佳，叶庆富，刘永立，等.氮、磷富营养及海带对赤潮三
角褐指藻生长的影响[J].核农学报，2008，22（4）：499-502.
Liu Jia，Ye Qingfu，Liu Yongli，et al. Effects of nitrogen
and phosphorus eutrophication and Laminaria japonica on
growth of Phaeodactylum tricornutum[J]. Journal of Nuclear
Agricultural Science，2008，22（4）：499-502.（in Chinese）
[13] Huo Y Z ，Zhang J H，Xu S N，et al. Effects of seaweed
Gracilaria verrucosa on the growth of microalgae：a case
study in the laboratory and in an enclosed sea of Hangzhou
Bay，China[J]. Harmful Algae，2010，11（4）：411-418.
（下转第 78页）
浦寅芳，等 刺松藻抑藻活性物质分离的初步研究 57
第 39卷
PCBs，PCNs and PAHs in soils of a highly industrialized
chemical /petrochemical area：temporal trend [ J ] . Chemo -
sphere，2007，66（2）：267-276.
[14] Nadal M，Mari M，Schuhmacher M，et al. Multi -compart -
mental environmental surveillance of a petrochemical area：
levels of micropollutants [ J ] . Environment International，
2009，35（2）：227-235.
[15] Krauss M，Wilcke W. Polychlorinated naphthalenes in urban
soils：analysis，concentrations and relation to other persistent
organic pollutants [J]. Environmental Pollution，2003，122
（1）：75-89.
[16] Kannan K，Imagawa T，Blankenship A L，et al. Isomer -
specific analysis and toxic evaluation of polychlorinated
naphthalenes in soil，sediment and biota collected near the
site of a former chloralkali plant[J]. Environmental Science
and Technology，1998，32（17）：2507-2514.
[17]王学彤，贾金盼，李元成，等.电子废物拆解区农业土壤中
PCNs的污染水平、分布特征与来源解析[J].环境科学，2012，
33（1）：247-252.
Wang Xuetong，Jia Jinpan，Li Yuancheng，et al. Level，
distribution and source identification of polychlorinated
naphthalenes in surface agricultural soils from an electronic
waste recycling area[J]. Environmental Science，2012，33
（1）：247-252.（in Chinese）
[18] Pan J，Yang Y，Xu Q，et al. PCBs，PCNs and PBDEs in
sediments and mussels from Qingdao coastal sea in the frame
of current circulations and influence of sewage sludge [J].
Chemosphere，2007，66（10）：1971-1982.
[19] Zhao X，Zhang H，Fan J，et al. Dioxin-like compounds in
sediments from the Daliao River Estuary of Bohai Sea：
distribution and their influencing factors[J]. Marine Pollution
Bulletin，2011，62（5）：918-925.
[20] Pan X，Tang J，Chen Y，et al. Polychlorinated naphthalenes
（PCNs）in riverine and marine sediments of the Laizhou Bay
area，North China[J]. Environ Pollut，2011，159（12）：3515-
3521.
[21] Eljarrat E，Caixach J，Jimenez B，et al. Polychlorinated
naphthalenes in sediments from the Venice and Orbetello
lagoons，Italy[J]. Chemosphere，1999，38（8）：1901-1912.
[22] Gevao B，Harner T，Jones K C. Sedimentary record of
polychlorinated naphthalene concentrations and deposition
fluxes in a dated lake core[J]. Environ Sci Technol，2000，34
（1）：33-38.
[23] Yamashita N，Kannan K，Imagawa T，et al. Vertical profile
of polychlorinated dibenzo -p -dioxins， dibenzofurans，
naphthalenes，biphenyls，polycyclic aromatic hydrocarbons
and alkylphenols in a sediment core from Tokyo Bay，Japan
[J]. Environ Sci Technol，2000，34（17）：3560-3567.
[24] Lundgren K，Tysklind M，Ishaq R，et al. Flux estimates and
sedimentation of polychlorinated naphthalenes in the northern
part of theBaltic Sea[J]. EnvironPollut，2003，126（1）：93-105.
[25] Castells P，Parera J，Santos F J，et al. Occurrence of
polychlorinated naphthalenes，polychlorinated biphenyls and
short -chain chlorinated paraffins in marine sediments from
Barcelona（Spain）[J]. Chemosphere，2008，70（9）：1552-
1562.
[26] Helm P A，Milne J，Hiriart -Baer V，et al. Lake -wide
distribution and depositional history of current- and past-use
persistent organic pollutants in Lake Simcoe，Ontario，Canada
[J]. J Great Lakes Res，2011，37（l3）：132-141.
（上接第 57页）
[14] Wang C，Yu R C，Zhou M J. Effects of the decomposing
green macroalga Ulva （Enteromorpha） prolifera on the
growth of four red-tide species[J]. Harmful Algae，2012，16：
12-19.
[15]金秋.大型海藻孔石莼对赤潮微藻克生作用的实验研究及
其克生物质的分离和鉴定[D].青岛：中国海洋大学，2005.
Jin Qiu. Studies on the Allelopathic Effects of Macroalga Ul－
va pertusa on Red Tide Microalgae and Isolation and Char－
acterization of Its Allelochemicals [D]. Qingdao:Ocean Uni－
versity of China，2005.（in Chinese）
[16]卢慧明.大型海藻龙须菜化学成分及其对中肋骨条藻化感
作用研究[D].广州：暨南大学，2011.
[17]赵妍.大型海藻缘管浒苔（Enteromorpha linza）对两种海洋
微藻克生效应的初步研究及克生物质的分离与鉴定[D].
青岛：中国海洋大学，2010.
Zhao Yan. Allelopathic Effect of Enteromorpha linza on Two
Species of Marine Microalgae and the Allelochemi -cals’
Isolation and Characterization [D ] . Qingdao :Ocean Uni－
versity of China，2010.（in Chinese）
[18] Jeong J H，Jin H J，Sohn C H，et al. Algicidal activity of the
seaweed Corallina pilulifera against red tide microalgae[J]. J
Appl Phycol，2000，12：37-43.
[19] Wang R J，Xiao H，Wang Y，et al. Effects of three
macroalgae，Ulva linza（Chlorophyta），Corallina pilulifera
（Rhodophyta）and Sargassum thunbergii（Phaeophyta）on
the growth of the red tide microalga Prorocentrum dong －
haiense under laboratory conditions [J]. Journal of Sea Re－
search，2007，58：189-197.
[20]孙颖颖，刘筱潇，王长海.浒苔提取物对 4种赤潮微藻生
长的抑制作用[J].环境科学，2010，31（6）：1663-1669.
Sun Yingying，Liu Xiaoxiao，Wang Changhai. Growth inhi－
bition of the four species of red tide microalgae by extracts
from Enteromorpha prolifera extracted with the five solvents
[J]. Environmental Science，2010，31（6）：1663-1669.（in
Chinese）
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