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第 4 3 卷 第 1 期温 州 医 学 院 学 报
2012-07-27
温州市科技局科研基金资助项目（Y20100007）。
赵凤（1 9 8 8 -），女，湖南湘潭人，硕士生。
黄可新，教授，硕士生导师，Email：kxhuang88@
126.com。
温州南麂海域冈村凹顶藻化学成分研究
赵凤，尹健，黄可新
（温州医学院 天然创新药物研究所，浙江 温州 325035）
凹顶藻Laurencia在分类学上隶属于红藻门，红
藻纲，仙菜目，松节藻科，凹顶藻属。近年来，凹顶
藻属海藻由于富含结构新颖的倍半萜、二萜、三萜和
C15-多聚乙酰等化合物而成为海洋天然产物化学研究
的热点对象之一[1-3]。冈村凹顶藻L.okamurai为温州
南麂岛海域低潮带优势物种，郭跃伟等[4]从中发现
了大量溴代月桂烷型倍半萜化合物。现代药理实验
表明，这些化合物具有抗真菌[4]、抗细菌[5-7]、抗肿
瘤[8]、抗氧化[9]、细胞毒[10-11]、驱虫[12]、镇痛[13]等
收稿日期：
基金项目：
作者简介：
通信作者：
多种生物活性。然而，这些化合物的生态学功能至
今仍不清楚，这在一定程度上限制了该海藻资源的
开发和利用。本研究旨在对温州南麂岛冈村凹顶藻
L.okamurai化学成分和抗污活性进行探索，以期从
中获得高效防污先导化合物。
1 材料和仪器
冈村凹顶藻于2011年8月采集自温州南麂海
域，标本保存在温州医学院天然创新药物研究所标
本室，标本编号为2011001。
柱层析硅胶（200～300目）和薄层色谱硅胶
GF254均为青岛海洋化工产品。凝胶Sephadex LH-
20（Pharmacia公司），安捷伦1100型高效液相色谱
仪（YMC-Pack ODS制备柱250 mm×10 mm，10μm），
[摘　要]目的：对采自温州南麂海域的红藻冈村凹顶藻Laurencia okamurai化学成分开展研究，并对
化合物抗污损活性进行初步筛选。方法：采用正相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱技术对
冈村凹顶藻的乙酸乙酯提取物进行分离纯化，运用现代波谱学方法鉴定化合物结构，并利用纹藤壶幼虫模型
对所得化合物抗污活性进行测试。结果：从冈村凹顶藻中分离并鉴定了8个倍半萜类化合物，分别为
lauinterol（1），isoaplysin（2），asplysin（3），isolaurinterol（4），laurokamurenes A（5），
debromoisolauinterol（6），debromolauinterol（7）和10-bromoisoaplysin（8）；其中化合物1、3-6
表现出显著的抗纹藤壶幼虫附着活性。结论：本研究首次发现冈村凹顶藻中的倍半萜类化合物具有抑制纹
藤壶幼虫附着的抗污功能，为该海藻资源的后续开发利用提供了科学依据。
[关键词] 冈村凹顶藻；倍半萜；结构鉴定；抗污活性
[中图分类号] R284.1[文献标志码] B [文章编号] 1000-2138（2013）01-0056-04
Study on the chemical constituents of red alga Laurencia okamurai collected along the coast of Nanji
Island ZHAO Feng, YIN Jian, HUANG Kexin. Institute of Nature Drugs, Wenzhou Medical College,
Wenzhou, 325035
Abstract: Objective: To study the chemical constituents of red alga Laurencia okamurai YAMADA, and
investigate the antifouling activity of pure compounds. Methods: The compounds were isolated and purified
upon column chromatography using silica gel, Sephadex LH-20 and semi-preparative HPLC, while their structures
were identified on the basis of spectroscopic data analysis. Antifouling activity of the compounds was evaluated
in settlement inhibition assays with laboratory-reared barnacle Balanus amphitrite larvae. Results: Eight known
sesquiterpenes were isolated from the EtOAc extract of L. okamurai. The structures were identified as lauinterol
(1), isoaplysin (2), asplysin (3), isolaurinterol (4), laurokamurenes A (5), debromoisolauinterol (6), debromolauinterol
(7) and 10-bromoisoaplysin (8), respectively. Compounds 1, 3-6 showed significant antifouling activity against
the settlement of barnacle B. amphitrite larvae. Conclusion: This is the first report on the antifouling function of
the sesquiterpenes from L. okamurai.
Key words: Laurencia okamurai; sesquiterpenes; structural identification; antifouling acitivity
·技术与方法·
第 4 3 卷第 1 期
2013 年 1 月
温 州 医 学 院 学 报
Journal of Wenzhou Medical College
Vol.43 No.1
Jan.20 3
DOI:10.13771/j.cnki.33-1386/r.2013.01.004
— 57—
第 4 3 卷 第 1 期
温州奥利生物医学仪器厂的暗箱式三用紫外分析仪
（WP-95-1型），BUCHI旋转蒸发仪（R-205）。所用试
剂均为分析纯或色谱纯，由衢州巨化试剂公司、无
锡市佳妮化工有限公司、Spectrum公司生产。
2 方法
2.1提取与分离 海藻样品采集后，风干并粉碎
（干重278 g），用95%乙醇动态提取4次，每次提
取5 d。减压浓缩得到浸膏109.5 g。将浸膏悬浮
于水中，用乙酸乙酯萃取4次，得到浸膏9.18 g。
乙酸乙酯层浸膏上硅胶色谱柱，用石油醚/乙酸乙
酯20:1、 0:1、2:1进行梯度洗脱，薄层色谱检查
合并相似组分（Fr.1～30）。Fr.1经硅胶柱色谱，以
石油醚/二氯甲烷20:1、5:1、3:1梯度洗脱，得到
化合物1（1894 mg）；Fr.4经硅胶柱色谱，以石油
醚/二氯甲烷20:1洗脱，得到化合物2（5.6 mg）；
Fr.6经硅胶柱色谱，用石油醚/二氯甲烷30:1洗
脱，再经过Sephadex LH-20凝胶柱色谱，以二氯甲
烷/甲醇1:2洗脱，得到得到化合物3（19.8 mg）、
化合物4（11.9 mg）和化合物5（4 mg）；Fr.13经
硅胶柱色谱，以石油醚/丙酮50:1洗脱，得到化合
物6（4.5 mg）；Fr.29用硅胶色谱柱，以石油醚/
丙酮50:1、30:1、 0:1梯度洗脱后，再经硅胶柱
色谱以石油醚/二氯甲烷5:1洗脱，得到化合物7
（5.2 mg）；Fr.2经硅胶柱色谱以石油醚100%洗脱
之后，再用半制备高效液相色谱，90%甲醇做为流
动相，制备得到化合物8（3.5 mg）。
2.2活性实验 将藤壶B.amphitrite成虫在空气
中暴露12 h后，置于海水中，待释放出幼体后，收
集幼虫于25 ℃海水中，以海藻喂养6 d。在24孔
板中加入1 mL灭菌海水，然后加入蜕皮的幼虫，待
测样品以DMSO溶解，配成5个浓度梯度（0.5、1、
5、10、30μg/mL）添加到24孔板中，每个浓度做
3个平行样。设置海水空白对照组和DMSO空白对
照组，加入相同数目的藤壶幼虫，不加入样品。放
入28 ℃的恒温箱中培养24 h，最后通过解剖显
微镜观察24孔板中藤壶幼体的附着个数。藤壶幼
虫附着率=（附着的藤壶幼虫个数/藤壶幼虫总数）
×100%。
对化合物1、3-6共5个样品开展了抗藤壶幼
虫附着活性测试，活性结果较显著，EC50（半有效
抑制浓度）值分别是0.57、5.73、0.80、1.92和
2.28μg/mL。
3 结构鉴定
化合物1：白色晶体，TLC板上在紫外分析仪
254 nm下暗斑明显，茴香醛显色剂显色后加热呈淡
黄色。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ1.14（1H，dt，
J=8.8，4.6 Hz， -3），1.66（1H，dd，J=13.2 Hz，
H-4a），1.66（1H，m，H-4b），1.26（1H，m，H-5a），
2.09（1H，dd，J=13.2 Hz，H-5b），5.12（1H，brs，
7-OH），6.61（ H，s，H-8），7.60（1H，s，H-11），
0.54（1H，dd，J=8.8 Hz，H-12a），0.57（1H，t，
J=4.6 Hz，H-12b），1.31（3H，s，H-13），1.40（3H，
s，H-14），2.29（3H，s，H-15）。以上数据与文献
[14]报道一致，因此确定化合物1为laurinterol。
化合物2：无色油状，TLC板上在紫外分析仪
254 nm下暗斑明显，茴香醛显色剂显色后加热呈紫
红色。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ2.18（1H，m，
H-3），1.20（1H，m，H-4a），1.74（1H，m，H-4b），
1.69（1H，m，H-5a），1.90（1H，m，H-5b），6.60
（1H，s，H-8），6.91（ H，d，J=7.6 Hz，H-10），
6.69（1H，d，J=8.0 Hz，H-11），2.29（3H，s，H-
12），1.52（3H，s，H-13），3.58（1H，d，J=11 Hz，
H-14a），3.68（1H，d，J=11.0 Hz，H-14b），1.12
（3H，d，J=6.7 Hz，H-15）。以上数据与文献[4]报
道一致，因此确定化合物2为isoaplysin。
化合物3：无色针状晶体，TLC板上在紫外分析
仪254 nm下暗斑明显，茴香醛显色剂显色后加热没
有颜色显现。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ1.86（1H，
m，H-3），1.13（1H，m，H-4a），1.72（1H，m，H-
4b），1.63（1H，m，H-5a），1.78（1H，m，H-5b），
6.59（1H，s，H-8），7.41（ H，m，H-11），2.32（1H，
3，H-12），1.31（ H，s，H-13），1.28（3H，s，H-
14），1.11（3H，d，J=6.5 Hz，H-15）。以上数据与
文献[15]报道一致，因此确定化合物3为aplysin。
化合物4：白色针状晶体，TLC板上在紫外分析
仪254 nm下暗斑明显，茴香醛显色剂显色加热后没
有颜色显现。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ2.85（1H，
m，H-3），2.05（1H，m，H-4a），1.39（1H，m，H-
4b），2.21（ H，m，H-5a），1.60（1H，m，H-5b），
5.60（1H，brs，7-OH），6.73（1H，s，H-8），7.45
（1H，s，H-11），2.31（3H，s，H-12），1.46（3H，s，
H-13），5.10（3H，s，H-14a），4.94（3H，s，H-14b），
1.21（3H，d，J=6.0 Hz，H-15）。以上数据与文献
[4]报道一致，因此确定化合物4为isolaurinterol。
赵凤，等：温州南麂海域冈村凹顶藻化学成分研究
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第 4 3 卷 第 1 期温 州 医 学 院 学 报
化合物5：无色油状，TLC板上在紫外分析仪
254 nm下暗斑明显，茴香醛显色剂显色后呈鲜黄
色。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ2.07（1H，m，H-
3），2.52（1H，m，H-4a），2.09（1H，m，H-4b），
5.75（1H，s，H-5），6.02（1H，s，H-8），7.18（1H，
s，H-11），2.32（3H，s，H-12），0.98（3H，s，H-
13），1.02（3H，s，H-14），1.17（3H，d，J=6.6
Hz，H-15）。13C-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ147.5（C-
1），49.5（C-2），45.0（C-3），38.5（C-4），131.5
（C-5），123.5（C-6），152.5（C-7），117.2（C-8），
138.1（C-9），114.4（C-10），132.1（C- 1），22.9
（C-12），20.7（C-13），26.2（C-14），14.4（C-15）。
以上数据与文献[16]报道一致，因此确定化合物5
为laurokamurenes A。
化合物6：白色针状晶体，TLC板上在紫外分析
仪254 nm下暗斑明显，茴香醛显色剂显色加热后呈
粉红色。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ2.85（1H，m，
H-3），2.06（1H，m，H-4a），1.42（1H，m，H-4b），
2.26（1H，m，H-5a），1.61（ H，m，H-5b），6.67
（1H，s，H-8），6.72（1H，d，J=7.9 Hz，H-10），
7.23（1H，d，J=7.9 Hz，H-11），2.28（3H，s，H-
12），1.47（3H，m，H-13），5.10（1H，d，J=1.2 Hz，
H-14a），4.95（1H，d，J=2.1 Hz，H-14b），1.21（3H，
s，H-15）。以上数据与文献[17]报道一致，因此确
定化合物6为debromoislaurinterol。
化合物7：淡黄色油状，TLC板上在紫外分析仪
254 nm下暗斑较弱，茴香醛显色剂显色加热后呈粉
色。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ1.12（1H，m，H-
3），1.95（1H，m，H-4b），1.65（1H，m，H-4a），
2.10（1H，m，H-5b），1.30（1H，m，H-5a），6.55
（1H，s，H-8），6.69（1H，dd，J=7.8 Hz， -10），
7.39（1H，d，J=7.8 Hz， -11），0.58（1H，t，
J=8.8 Hz， -12b），0.49（1H，dd，J=4.6 Hz， -
12a），1.35（3H，s，H-13），1.42（3H，s，H-14），
2.27（3H，s，H-15）。以上数据与文献[17]报道一
致，因此确定化合物7为debromolaurinterol。
化合物8：无色油状，TLC板上在紫外分析仪
254 nm下暗斑较弱，茴香醛显色剂显色加热后呈淡
粉色。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ2.17（1H，m，
H-3），1.20（1H，m，H-4a），1.72（1H，m，H-4b），
1.69（1H，m，H-5a），1.91（ H，dd，J=11.2，5.6
Hz，H-5b），6.69（1H，s，H-8），7.16（1H，s，H-
11），1.54（3H，s，H-13），3.57（1H，d，J=11.2
Hz，H-14a），3.71（ H，d，J=11.2 Hz，H-14b），
1.13（3H，d，J=6.5 Hz，H-15）。以上数据与文献[17]
报道一致，因此确定化合物8为10-bromoisoaplysin。
4 结论
通过对采自温州南麂海域的冈村凹顶藻Lauren-
cia okamurai的系统化学成分进行研究，我们共分
离得到8个月桂烷型倍半萜，并对其中5个化合物
开展了抗污损活性测试，所筛选化合物均表现出较
显著的抗纹藤壶B.amphitrite幼虫附着作用。其
中，化合物3的活性水平明显低于其他4个化合物，
提示酚羟基是抗污活性的必需基团。本研究为首次
发现冈村凹顶藻中的倍半萜化合物具有良好的抗污
功能，为从该海藻中开发天然海洋防污剂提供了科
学依据。
参考文献:
[1] 季乃云. 凹顶藻次级代谢产物及其生物活性和化学分类学
研究[D]. 中国科学院海洋研究所博士学位论文, 2003.
[2] 史大勇, 贺娟, 许凤, 等. 凹顶藻属海藻化学成分研究进展
[J]. 海洋科学, 2007, 31(4):81-91.
[3] 梁毅. 冈村凹顶藻中倍半萜和C
15
-多聚乙酰类成分研究[D].
中国科学院海洋研究所硕士学位论文, 2009.
[4] Mao SC, Guo YW. Sesquiterpenes from Chinese Red Alga
Laurencia okamurai[J]. Chin J Nat Med, 2010, 8(5):321-
325.
[5] Kladi M, Vagias C, Stavri M, et al. C
15
acetogenins with
antistaphylococcal activity from the red alga Laurencia
glandulifera[J]. Phytochem Lett, 2008, 1(1):31-36.
[6] Vairappan CS, Suzuki M, Ishii T, et al. Antibacterial activity
of halogenated sesquiterpenes from Malaysian Laurencia spp
[J]. Phytochemistry, 2008, 69(13):2490-2494.
[7] Vairappan CS, Kawamoto T, Miwa H, et al. Potent antibac-
terial activity of halogenated compounds against antibi-
otic-resistant bacteria[J]. Planta medica, 2004, 70(11):
1087-1090.
[8] 梁惠, 贺娟, 张士璀, 等. 凹顶藻萜类化合物抑制肿瘤活性
及其对免疫作用的研究[J]. 中国海洋药物杂志, 2005, 24(1):
6-9.
[9] Anggadiredja J, Andyani R, Hayati, et al. Antioxidant activ-
ity of Sargassum polycystum (Phaeohhyta) and Laurencia
obtuse (Rhodophyta) from Seribu Islands[J]. J Appl Phycol,
1997, 9(5):477-479.
[10] Lhulier C, Falkenberg M, Ioannou E, et al. Cytotoxic halo-
genated metabolites from the Brazilian red alga Laurencia
catarinensis[J]. J Nat Prod, 2010, 73(1):27-32.
[11] Sun J, Shi DY Ma M, et al. Sesquiterpenes from the red alga
Laurencia tristicha[J]. J Nat Prod, 2005, 68(6):915-919.
— 59—
第 4 3 卷 第 1 期
[12] Iliopoulou D, Vagias C, Harvala C, et al. C
15
acetogenins
from the red alga Laurencia obtusa[J]. Phytochemistry,
2002, 59(1):111-116.
[13] Chatter R, Kladi M, Tarhouni S, et al. Neorogioltriol: A
brominated diterpene with analgesic activity from Laurencia
glandulifera[J]. Phytochem Lett, 2009, 2(1):25-28.
[14] Tsukamoto S, Yamashita Y, Ohta T. New cytotoxic and
antibacterial compounds isolated from the sea hare, Aplysia
kurodai[J]. Mar Drugs, 2005, 3(2):22-28.
[15] Mao SC, Guo YW. A laurane sesquiterpene and rearranged
derivatives from the Chinese red alga Laurencia okamurai
Yamada[J]. J Nat Prod, 2006, 69(8):1209-1211.
[16] Laronze JY, Boukili RE, Patigny D, et al. The rearrange-
ment of some cyclopentanone-aryloximes: synthesis of
(±)aplysin, (±)filiformin and of their debromo analogues
[J]. Tetrahedron, 1991, 47(48):10003-10014.
[17] Mao SC, Guo YW. Cuparene-derived sesquiterpenes from
the Chinese red agla Laurencia okamurai Yamada[J]. Helv
Chim Acta, 2005, 88(5):1034-1039.
（本文编辑：丁敏娇）
带状疱疹性脊髓炎1例报告
宋菁，金露，王小同
（温州医学院附属第二医院 脑科、康复中心，浙江 温州 325027）
[关键词] 带状疱疹；脊髓炎；治疗
[中图分类号] R744.3[文献标志码] B [文章编号] 1000-2138（2013）01-0059-02
·个案报告·
48岁女性患者，因“颈部疼痛2个月，肢体无
力7周，加重3周”收住入院。患者2个月前无明
显诱因下出现右侧颈部闪电样疼痛，同时右侧颈部
出现簇集性疱疹，1周后右侧上肢无力，继而出现
右下肢无力。无畏寒发热，无视物模糊，无视物双
影，无饮水呛咳，无吞咽困难，无大小便失禁。于
当地医院诊断为“带状疱疹性脊髓炎”，予“伐昔洛
韦”治疗。出院时疼痛缓解，仍留有右侧上、下肢
无力。患者3周前无明显诱因下出现左侧颈部闪电
样疼痛，同时左侧颈部出现簇集性疱疹，继而出现
左下肢无力，行走拖沓。无发热畏寒，无头痛，无
视物模糊，无视物旋转，无饮水呛咳，无吞咽困难，
无大小便障碍。当地医院MRI示C1～C6锥体水平脊
髓异常信号；头颅未见异常。腰穿脑脊液常规检查
正常。诊断为“左侧颈部带状疱疹，急性脊髓炎”，
予“甲基强的松龙”冲击和“伐昔洛韦”等治疗，症
状无改善，遂来我院就诊。入院查体：左颈部皮损
已结痂（见图1）；双眼视力、视野粗测正常，眼球
活动正常，瞳孔等大等圆，对光反射灵敏；右侧上、
下肢肌力3级；左侧上肢5级，下肢4级；四肢肌
张力正常；左T4水平以下痛觉减退；四肢腱反射
（+++）；右侧Chaddock征（+-），左侧锥体束征（-）。
入院后查脑脊液：脑脊液蛋白质、糖、氯化物、细
胞数在正常范围，涂片未找到细菌，白蛋白、IgG、
24 h鞘内IgG合成率、IgG指数均正常。颈髓MRI
示： C2～C4锥体水平脊髓增粗，T2高信号（见图
2-3），诊断为“带状疱疹性脊髓炎”。予糖皮质激素、
营养神经等治疗；肌力好转出院。出院1个月后随
访，疼痛减轻，3个月后随访肌力正常，疼痛明显
减轻。
讨论：在水痘-带状疱疹感染期间或感染后，疱
疹性脊髓炎发病率为0.3%[4]。水痘 -带状疱病毒是
亲神经性，感染后可长期潜伏于脊神经后根神经节
或三叉神经半月节内。当机体免疫力降低时，潜在
病毒激活并复制，沿周围神经传到相应的皮肤节段
引起皮疹，极少数情况下可沿神经逆行进入脊髓引
收稿日期：
作者简介：
通信作者：
2012-08-29
宋菁（1 9 8 7 -），女，浙江宁波人，硕士生。
王小同，教授，硕士生导师，Email：wangxiao
tong22@163.com。
第 4 3 卷第 1 期
2013 年 1 月
温 州 医 学 院 学 报
Journal of Wenzhou Medical College
Vol.43 No.1
Jan.2013