全 文 ：第 12卷第 2 期
1 9 9 3 年 6 月
浙江水产学院学报
J OU RN A L O FZ H E J IA N G C O L LE G E O F F IS H E ER IS
V o ] 12
,
J u n
. ,
N o
.
2
1 9 9 3
单胞藻浓缩 、 保藏及应用
技术的初步研究
蒋霞敏 朱艺峰 王志铮. 周盛梅辛
(水产养植系)
摘要 本文报道以明矾等为浓缩剂 , 对多种单细胞藻类进行浓缩和再培养 , 在比较的基础上 ,
得出各种藻的较适浓缩剂及浓缩剂量 。 同时将浓缩的藻类经低温数月保存后 , 进行三级 扩种培养
和对中国对虾幼体及褶皱臂尾轮虫进行直接投喂效果试验 , 结果表明与常规培养藻无差异 。
关键词 单胞藻 , 浓缩 , 保藏 , 效果试验
单细胞藻类是水产经济动物人工育苗所必需的饵料 。 目前 , 一般育苗厂在培育单细胞藻
类时 , 常受自然条件影响 , 特别是阴雨天气 , 单细胞藻类生长、 繁殖相当缓慢 , 往往造成供
不应求 , 从而大大影响了育苗生产。 如果能在适宜的时机预先大量培养单胞藻 , 并加以浓缩
保藏 , 待需要时 , 直接进行投喂或进行大量扩种培养 , 这样不仅简化了育苗季节单胞藻的培
养工序 , 缩短培养周期 , 而且大大减少了外界条件的干扰 , 满足育苗需要 , 保证育苗顺利进
行。 但迄今为止 , 国内外有关单胞藻的浓缩保藏方面报道较少 , 仅 日本的代田昭彦 、 冈内正
典分别提到单胞藻的几种保存方法〔 3 , ` ] 。 国内也只有曾呈奎 、 吴超元在《单细胞藻类 养殖》一
书中提到 : 可用明矾和石灰作沉淀浓缩剂来浓缩小球藻和扁藻 , 河北省水产研究所 崔 秀 林
等 [ ’ ]用硫酸铝按浓缩过新月菱形藻 , 并作了冷冻储存的实验 。 作者于工9 9。年 9 月至 1 9 9 2年 6
月将各种单胞藻用物理 、 化学方法进行单胞藻的浓缩 、 保藏及培养试验 , 同时用浓缩藻直接
进行了中国对虾幼体及褶皱臂尾轮虫投喂效果试验 , 取得了良好的效果 。
材 料 与 方 法
一 、 培养条件
1
. 藻种 小球藻 C h l o : e l l a s p p
扁藻 P入a t g 脚 o n a s s p p
三角褐指藻 p无a e o d a c t万e u m t: i c已: n u t“ e m
新月菱形藻 N i t: s c人艺a c l o s t e , fu m
湛江叉鞭金藻 J s o e h份 s艺5 g a l吞a n a
2
. 培养用水 自然海水经暗沉淀、 过滤、 煮沸 , 比 重 为 1 . 0 16 一 1 . 0 1 9 、 p H 为 8 . 0 一
本文于 1 9 9 2年 9 月收到 , 1 9 93年 3 月修改。
岑本院蛤届海水养殖专业毕业生 。
浙江水产学院学报 1 2卷
8
。
2
。
二 、 浓缩方法
1
. 分别用明矾 、 氢氧化钠 、 高锰酸钾 、 漂白粉 、 硫酸铜 、 氯化钠等作为浓缩剂 , 配成一
定浓度待用 。
2
. 根据单胞藻种类 、 个体大小 、 活动状况及对 p H 、 盐度的适应情况 , 设计一定浓度梯
度 、 平行 2组 , 在实验过程中找出沉淀剂的致死浓度和不沉淀浓度 。
3
. 经 2 4小时黑暗处理 , 用虹吸法吸弃上清液 , 保留相同体积的浓缩藻 , 计数上清液藻密
度 , 计算出 ;
N 浓 二 卫琪亡翼李攀道 P 浓缩 =
V o 一 V 尼
( V
。 一 V 清 ) x N 浓
N
。
V
。 K 1 0 0%
其中 : N 。 : 原藻密度 V 。 : 原藻体积
N 清 : 上清液藻密度 V 清 : 上清液体积
N 浓 : 浓缩藻密度 P 浓缩 : 浓缩率
三 、 保藏方法
1
. 常温保藏 分别用三角烧瓶和食品袋 ( 20 X 15 c m ) , 盛装浓缩藻置于室内弱光处 (自
然光照 。一 5 0 0 L u x ) 、 常温 ( 1 0一 2 5℃ ) , 保存三个月 。
2
. 低温保藏 调节冰箱温度为 7一 10 ℃ , 把包扎好的盛有浓缩藻的三角烧瓶和食品袋置
于其中。
四 、 效果试验
1
. 保藏后培养 把各种方法得到的浓缩 藻 保 存 后 , 分别用 M A V 培养液进行 扩种培
养。 培养水库 1 0 毫升 、 设平行 2 组 , 定时进行细胞计数 , 以比较各种浓缩剂及其浓度对藻类
的影响和保藏方法 的优劣 。
2
. 浓缩小球藻与普通小球藻的生长比较培养试验 取低温保藏的浓缩小球藻和 普 通小
球藻 , 用5 0 毫升三角烧瓶接种 , 密度为 10 0 万 /毫升 , 各二个平行组 。 浓缩小球藻又增设一
组接种密度为 2 0 万 /毫升 。 培养条件水温 19 ℃ , 自然光照 , 比重 1 . 0 18 一 1 . 01 9 , p H S . 2 。
3
. 浓缩小球藻直接投喂中国对虾幼体效果试验
( 1) 虾苗 无节幼体 ( N 。 )取 自浙水院水产苗种试验场 。
(2 ) 培养容器 15 升玻璃园缸 。
( 3) 试验内容 每日从 N 。 开始至 M , 分别投喂浓缩小球藻与普通小球藻 , 各期 投 喂藻
密度详见表 9 , 幼体放苗密度为 45 万 /米“ , 育苗按常规操作 * , 每 日记录变态率 、 成活率。 设
平行组 。
4
. 浓缩小球藻直接投喂轮虫效果试验
( l) 褶皱臂尾轮虫 取 自宁波市水产研究所。
(2 ) 培养容器 同上 。
( 3) 试验 内容 每 日分别投喂浓缩小球藻与普通小球藻 , 详见表 1 2 , 轮虫 接 种密度 0 . 5
个 /毫升 , 培养方法按常规方法进行 [“ 1。
5
. 生产性应用试验 用 4 0 p p m 明矾浓缩的三角褐指藻及新月菱形藻 , 保存后于牡年乓
* 农业部水产局 · 19 朋 , 中国狱虾工厂化育苗攀术规趁
2 期 单胞藻浓缩 、 保藏及应用技术的初步研究
月在浙江省普陀区小湖对虾育苗厂进行大量扩种培养 , 培养水泥池 4 m x 4m 火 o . s m , 培养用
水经 1 2小时 5 0 p pm 漂白粉处理后 , 用等量硫代硫酸钠中和 。 p H 8 . 。 , 比重 1 . 0 18 一 1 . 0 1 9 , 自
然光照 , 水温 20 ℃一 2 ℃ 。
结 果 与 讨 论
一 、 浓缩剂与浓缩效果
为 了寻找快速有效的浓缩方法 , 我们 分别 用 明矾〔K A L ( 5 0 ` ) : · 12 H 2 0 〕、 氢 氧 化钠
(N a 0 H )
、 高锰酸钾 ( K M n o ` ) 、 硫酸铜 ( C n S O` ) 、 漂白粉 ( C a ( OC I ) : 、 氯化钠 ( N a C I )等作
为浓缩剂 , 进行藻类浓缩试验 , 结果如下 :
1
。 明矾剂量及浓缩效果
考虑到明矾水解能产生吸附能力很强的〔A L (O H s) 〕, 它能吸附水中悬浮物。 故首 先 以
明矾为浓缩剂 , 对新月菱形藻和三角褐指藻进行试验结果见表 1 , 从第一批试验中可以看出:
明矾浓度 以 1。。 p p m 左右效果较佳 ; 高于 2 0 0 p pm , 藻体全部变色死亡 , 小于 1 0 p p m , 藻体
沉淀效果不佳 , 上清液中残留大量藻类 。 因此适宜的浓度应在 10 ~ 1。。 p p m 之间。
表 1 不同明从浓度的沉沈效果
原 藻密度 沉淀剂浓度
( P P m )
过 5 小时上清
液藻密度
过2 4小时上清
液藻密度
浓缩藻密度
万 /毫升
浓缩倍数
(倍 )
浓 缩 率
(% )
85200
勺自
2一óRénù内JnU工,d3`1白110空125
43 5万 /毫升
沉淀乳 白色
} ! } _ _ }
第一试验批
8 3
3 5
1 5
1 3
::
n
ù日o,白J住伪hOC
4 30 万 /毫升
1 0 0 }
1 0
1
” 」 」 」
第二批试验
月才tnJRt甘7t了ùó臼93487
ō了J任廿J八6
一匕,.月任
n仙1.二”oùO`
,土1二玉,口妇O白.
60 0万 /毫升
6 4 15
6 2 85
6 7 5 7
6 4 5 2
1 2 3 3 7
1 2 4 5 0
7 4 2 5
5 9 6 2
6 2 0 0
1
: :
3845122382637419
八ùJ八1ùùóU一óU“,白,曰n舀几JJ通ùbl介七
第三批试验
从第二批试验中可见 , 随着明矾浓度的增大 , 藻类的沉淀速度加快 , 浓缩效果变佳 , 而考虑
到长时间保存 , 高浓度的浓缩剂可能会对藻类产生不良影响 , 故还是选择 20 一 60 p p m为宜 。
从第三批试验进一步证明 , 明矾浓度为20 ~ 25 p p m 组相比之下 , 效果稍差 , 其它 各组
“ 小时后浓缩率均高于 97 % , 并且经浓缩后三角褐指藻的浓度可依60 0蒯毫升以上 ,有的组
包4 浙江水产学院学报 12卷
甚至高达 1亿 /毫升 。
同样用明矾浓缩其它藻类 , 结果见表 2 。 试验表明 : 小球藻浓缩剂适宜范围为 5~ 40 p pm
表 2 明矶浓缩各种藻的试验结果
试 验 藻
(原藻 密度 )
一一竺下一竺下里一一毕毕一 }明矾剂量 } 上清掖体积 } 上清液密度 1 浓 缩 率 }
( p p m ) { (m l) { (蒯 毫升 ) } (% ) 」
浓缩保藏后培养
接种密度
(万 /毫升 )
备 注
( N t万 /毫升 )
13 4 8
11 7 0
12 1 4
E2 9
明矾剂量
笋 6 0 P p m时 ,
浓缩藻 出现
结 块
óU八Un甘ùù“仙n甘núdl月11.上`月ōùa臼产t廿三口勺月qJ,勺d一ó口ō行`内r脚了御`亡Jnù甘
n乙Jq一b小 球 藻
( 4 2 0万 /毫升 )
名7 . 7 2
8 e
.
0 6
E9 96
9 1
.
7 4
5 96
4 55
吐3 9
3 3 4
3 30
2 90
1 0 4
C 9
5 2
明矶剂量
夕 e 0 P p m 时
出现结块
nénùé八“JO巴J工ù心r叼Ur51ó尸aO幼民1c6)住内日ùa八O八匕U月咬óO丹DLJób姗11`d幻长曰..-,
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内b六j乃了口J月任tnJ1.1ldǎ二é匕dù0nb7ō赶。rLU月了通ù, .九匕ōóù3八1nJIO。OU印`心U价ód勺目nQ一了一ó勺ō毖一匀51óJ.J[a勺J丹才ó行r7一了省t该0onùOù八Uùó1一叮`勺d月性h公U.cO
角 毛 藻
( 17 0万 /毫升 )
5 10
5 0 7
4 89
3 4 2
3 13
2 6 6
2 G4
2 33
On
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U1)nU护叹日目C已口dLO亡曰二10怪口Qé门了dl厅f901ō月皿弓d内ù曰O勺C`山印山一óó勺尸a目atl匕ōJ钾斤日rtl7t门了`ó升才Olnù`J六”几U,口尸舀行了e`,上几J一.
,上曰`一,孟11
球等鞭金藻
(7 它
.
5万 /毫升 )
4 8 6 5
5 3
.
4 2
5 5
. 吕1
62 9 8
5 5
. 吕1
6 5 37
6 5
.
3 7
7 4 92
明矶剂量
笋 1 7 0 P P m时
浓缩藻 出现
结块
湛江叉鞭金藻
5 0
7 0
兮0
1 10
1 30
1 5 0
1 7 0
1份0
2 1 0
2 3 0
5 17
5 0 1
3 7 0
3 6 8
3 6 2
2 CO
2 6 6
15 3
15 7
15 4
明矾 剂量
》 2 3 0 p p m 时
浓缩藻 出现
结块
né0八“Unù一a匕心尸n哎曰亡口刁rJS1上1占O刁`Ut才O曰n匕óJ八n户0néQUno工b内七O乙Cù乙户
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( 10 4
.
5万 /毫升 )
明矾剂量
》 3 90 P Pm时
浓缩藻出现
结块
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扁 藻
( 60 万 /毫升 )
15 0
1 80
2 10
2 4 0
2 7 0
3 0 0
3 3 0
3 6 0
3 9 0
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2 期 单胞藻浓缩 、 保藏及应用技术的初步研究 8 5
最适为 p p 5m ;角毛藻适合范围为10 ~ 80 p pm , 最适为 10 p pm ; 球等鞭金藻适合范围为 30
~ 1 5 0 p p m
, 最适为 7 0 p p m , 湛江叉鞭金藻适合范围为 5 0一 2 1 0 p p m , 最 适 5 0~ 7 0 p p m ;
扁藻适合范围为 15 0~ 36 0 p p很 , 最适为 3 0 0 p pm 。 从中发现 , 要达到相同的浓缩率 , 各种藻
所需的浓缩剂量是不同的 。 我们认为产生这种现象的原因主要有以下三点。 ( 1) 明矾剂 量 的
高低与单胞藻的运动能力有很大关系 。 无鞭毛 、 不运动的悬浮性藻类 (例角毛藻 、 小球藻 )浓
缩剂用量低 ; 有鞭毛 , 运动能力强的藻类 (例金藻 、 扁藻 )浓缩剂用量则高 。 (2 )与藻的个体大
小也有关系 。 一般运动方式相同的种类 , 个
体愈大 , 所需的浓缩剂剂量也愈大。 同为悬
浮性种类的角毛藻和小球藻要达到相同的浓
缩率 , 个体较大的角 毛 藻 (4 ~ 1 0 件 x 3 . 5~
5 妇所需的明矾剂量就大于个体较小的小球
藻 (帕 . 5闭 。 而活动能力 、 个体大小相 近的
球等鞭金藻和湛江叉鞭金藻 , 所需的明矾剂
量大体一致 。 (3 )与藻密度有关 。 对于 同 种
藻在不同藻密度 的情况下 , 要达到相等的浓
缩率所需的浓缩剂剂量也不同 。 我们 曾用明
矾 ( 2 0 、 3 0 、 4 0 、 5 0 p pm )浓缩新月 菱 形 藻
6 30 万 /毫升 , 4 60 万 /毫升 、 3 20 万 /毫升 , 结
果 5 小时以后反映的浓缩率就不同 。 见表 3 。
藻密度高的组 , 藻沉淀缓慢 , 不彻底 , 而藻
密度低的组就相应快且彻底 。 因此在浓缩高
密度藻液时 , 应相应地选择较高浓度的浓缩剂 。
2
. 氮氧化钠剂量和浓缩效果
表 3 不同藻密度与不同明从浓度
的沉淀结果
原藻密度
(万 /毫升 )
沉淀剂浓度
( p p m )
过 5 小时上清液
藻密度 (万 /毫升 )
浓 缩 率
( % )
2 0 E0 8 7
.
0
3 0 3 5 9 4
.
0
4 0 3 0 95
.
0
5 0 2 3 96
.
4
4 6 0 2 O 5 6 87 2
3 0 2 5 9 4
.
5
4 0 1 7 9 6
.
4
5 D 7 9 8
.
6
3 20 2 0 3 7 8 8 4
3 0 1 7 9 4
.
6
4 0 7 6 7
.
8
5 0 3 9 9
.
8
一度刊一留好)
氢氧化钠也能使藻沉淀浓缩 。 从表 4 的 p H 值均上升到 1 0 . 25 一栏来看 , p H 值的突然改
变 、 必将引起藻类不适而发生沉淀 。 通过三批试验已证明 : 用氢氧化钠作为浓缩剂 、 沉淀三
角褐指藻 、 其浓度 的 15 ~ 50 p p m 为宜 , 浓缩率均在 95 %以上 , 而高于 1 0 0 p pm , 就会引起藻
体变色死亡 , 低于 10 p pm , 又达不到理想的浓缩效果 。 同样氢氧化钠 的不同剂 量 对不同藻
的浓缩效果也不一样。 见表 5 , 小球藻由于浓缩作用远不如明矾 , 因而未测 ; 球等鞭金藻的
浓缩率也不如明矾理想 ; 扁藻浓缩剂的适合范围2 . 5~ 12 . 5 p pm , 最适 7 . s p pm ; 湛江叉鞭
金藻适合范围 2 . 5 ~ 1 2 . s p p m , 最适 2 。 s p p m , 角毛藻适合范围为 2 . 5~ l o p p m , 最适 2 . 5~
5 P Pm
。
3
. 其它药品及其浓缩效果
高锰酸钾 、 漂白粉和硫酸铜常用作消毒药品达到一定浓度 , 可以杀死藻类 , 但在某一浓
度范围内 , 它可能既可以使藻体下沉 , 又对藻体无大的伤害 , 为此我们进行了试验 , 结果见
表 6 、 表 7 。 从表 6 的第一批试验可知 : 在高锰酸钾 。 一 2 0 p p m 中 , 24 小时后 观 察 1 p p m
效果不佳 , 2 . s p p m 组藻 颜 色 正 常 (褐色 ) , 说明 s p p m 以上的高锰酸钾不宜作为 三 角褐
指藻浓缩剂 。 第二批试验进一步证明高锰酸钾在 1 . 5~ 4 p p m 范围内浓缩效果较佳 , 浓缩率
大于 93 % , 并随高锰酸钾浓度递升而增大 , 浓缩后藻液密度高达 1 . 2~ 工. 6亿 /毫升由表 7 可
浙江水产学院学报 1 2卷
表 4 氮氧化钠 浓缩三 角揭指藻试验
原藻密度
万 /毫升
N a 0 H浓度
( p pm )
过4 2小时
上清液藻密度
浓缩后密度
万 /毫升
浓 缩 率
( % )
N a O H加 入
后藻液p H值
1 50
7 0
沉淀乳白
3 0 2
1 0
.
6
10
.
7 9
n甘八八“月上óU血“U
,口亡上
第一批试验
1 0
.
3 4
1 0
.
4 4
1 0
.
5 3
1 0
.
7 9
n仙0U`八“2
月性6OU第二批试验
10
.
2 5
10 2 9
1 0
.
4 0
1 0
.
4 3
1 0
.
4 7
1 0
.
4 8
1 0
.
4 9
1 0
.
4 9
尸a几bl矛.一了月才。UQn八n刁O曰目曰O甘QU2 1
1 9
12
1 4
1 1
3 35 0
3 93 0
3 1 9 0
3 0 3 0
3 17 0
3 1 2 0
2 6 8 0
2 2 1 0
1520邵3切45
第三批试验
知 : 不管是漂白粉 、 硫酸铜 , 还是氯化钠都不宜作为藻类浓缩剂 。 药品浓度低 , 藻体不宜沉
淀 , 上清液含有大量藻体 , 过高 , 使藻体变色 、 解体死亡 , 所以效果不理想 。
二 、 保藏效果
用化学方法得到的浓缩 藻 分 别置常温与低温 (5 ~ 7℃ )保存 1 一 3 个月 , 结果发现常温
保藏的浓缩藻结块现象比较严重 , 不易摇匀 , 有异腥味 , 这可能是保藏过程中藻 类 代 谢 旺
盛 、 密度过高老化所致 。 而低温保藏的藻类藻液均匀 , 不结块 , 无异味 。 同时经接种培养表
明 (表 8 ) : 冰箱 (5 一 7℃ )保藏的藻种延缓期较短 , 常温保藏的则较长 ; 并且冰箱保藏的藻生
长速度明显大于常温保存的藻 , 所以我们认为浓缩藻保藏还是以低温弱光为宜 。 至于各种藻
低温保藏的最适温度范围还有待于进一步研究。
三 、 浓缩小球筑与普通小球旅生长 曲线对比
为了弄清浓缩保藏后的小球藻的生长情况 , 我们对浓缩小球藻和普通小球藻进行了生长
对比试验 , 试验结果见图 ( 1 ) , 从图 ( 1) 可见 : A 、 B 、 C 三条曲线都明显地反映出小 球 藻的
一般生长规律 , 即都有延缓期、 指数生长期 , 相对生长下降期 … … , 说明浓缩小球藻也能与
普通小球藻一样生长 , 而且生长速度相近 , 无显著差异 。
四 、 单胞兼使用效果
1
. 浓缩小球裁直接投喂中国对虾幼体效果 用 25 p p m 明矾浓缩的小球藻 ( 1亿 /毫升 )
经低温保藏 , 在浙江水产学院水产苗种试验场进行应用性试验 , 结果见 表 9 。 从 表 9 中可
见 , 不管是投喂浓缩小球藻 , 还是普通小球藻 , 对虾幼体均能正常发育 、 变态 , 从无节幼体
( N
。 )到搔状幼体 (Z 3 ) , 成活率在 61 %以上。 对表 9 作方差分析见表 1 0 , 也表明 : 饵料种类对
虾苗成活率无影响 , 即用明矾浓缩的小球藻和普通小球藻对虾苗成活率无影响 , 因此浓缩蔡
完全可用于中国对虾育苗 。
2 期 单胞藻浓缩 、 保藏及应用技术的初步研究 8 7
表 5 氮氧化钠 浓缩各种藻的试验结果
浓 缩 试 验 浓缩保存后培养
N
a
O H
剂
( p pm
上清液体积
( m l )
上清液密度
( 万/ 毫升 )
浓 缩 率
( % )
接 种密度
N
o
( 万/ 毫升 )
N t备 注
(万/ 毫升 )
量)
6 0 9
5 6 4
2 4 4
1 5 1
1 1 5
N a O H 剂量
》 1 2 . P P m 时浓
缩藻 出现结 块
ù
U,1扣O品0口n勺姚“ō叨哎6t`.…O口月,J恤.勺ó月`n吕盛URù叮`月才O口OU斑bJ叹nJ勺`,自目月任ùalóJ一b匕门了厅`片子叮月才,毖ùó尸O257102
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湛江叉鞭 金藻
( 20 5万 /毫升 )
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5 6 6
3 3 6
3 32
2 8 3
2 00
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N a O H剂量
) 15 p p m时浓缩
藻 出现结块
O曰,.d内I几J心`一了R心UJ,日兮通no内匕OJ舀nJ任比n`1二几1一二Jl匕亡毖ùa内`甲了月行了目
扁 藻
( 60 万 /毫升 )
N a O H剂量
》 1 5 p p m 时浓缩
藻出现结块
9
.
5 8
2
.
5
5
7
.
5
1 0
1 2
.
5
1 5
3 7
.
50
5 3
.
13
5 9
.
3 8
7 0
.
3 1
7 9
.
6 9
7 9
.
6 9
肠J.扭ù众ùOnJ份O口nùn.6`U
.…工`,且丹乙冉bo口忱UlóJ吸J几函怪俘了,人O一曰ó自弓ùó三哑`吸月任通ō尸al从Jō一ó印`ó了曰叮矛ù球等鞭金藻( 7 9万 /毫升 ) 2 . 557 . 5 N a O H剂量》 1 2 5 P P m 时 -浓缩藻 出现结块
8
.
0
1 0
l 艺 . 吞
表 6 高锰酸钾不同浓度的浓缩效果伞
藻 密 度
(万 /毫升 )
K M n O ; 浓度
( p p m )
2 4小时后上清液藻密度
( 万 /毫升 )
浓缩后颜 色
及 密 度
浓 缩 率
… … ` · 。 { , “ 5 】 {第 { } “ · 5 1 “ 5 } …荻 } 3?。 … 5 · “ } ’ i … 过 “香导黄色 …试 】 】 1 0 · o 】 ” 】 l司工 {验 } … “ 0· “ { 0 … 同上 …
1
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} 空 自 } “ 1 0 } 1
月了n6几`n八 l口OJ…内Jl毖月了7OUonO”`OUQé目n曰1 3 00 01 16 0 016 0 0 0
1 36 0 0
12 80 0
12 0 0 0
八6,自有几JnOUJ叹几舀几`,自二
4 0 5
1
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5
2
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2
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5
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3
.
5
4
.
0
第二批试验
* 三角褐指藻
8 8 浙江水产学院学报 1 2奋
表 7 三种药物不同浓度的沉 淀效果*
4 天后上
清 液 藻
浓 度
(万 /毫升 )
5 天后上清 液 藻
密 度
( 万 /毫升)
物度药浓藻度
备 注 备 注
药 物度浓
注备
密 度 ! ( P Pm )
过 4 2小
时上清
液 藻
浓 度
原 藻浓药 物度藻原
密 度 ( P Pm ) ( p p m )
,J八Uln aé月幻行了怂1 87 … 7 3 0 10 27 7乞447 0 沉淀
1 0 00 0 沉淀自
一一
。一?。一黄绿色
105一ZQ23
万 /毫升
17 1
16 6
16 3
15 8
万 /毫升
1 0 } 一
}
沉淀白
万 /毫升 1 空 2 0 0
空白 4 0 5 空 白 选5 0
*
: 三角褐指藻
表 8 浓缩藻经常温和低温保藏后培养效果的比较 *
沉 淀 剂
种 类
沉 淀 荆
浓 度
( p p m )
(万 /毫升 )
常
第 1 天
温 保 藏 ( 10一 2 3 ,C ) (冰 箱 ) 低 温 保 藏 ( 5一 7℃ )
第 3 天 第 5 第 7 天 第 1天 第 3天 l 第 5 天 第 7天
…一训
明 矶
A IK ( 5 0 ` ) 2
·
1 2 H 2 O
2 00
2 3 5
2 0 8
2 3 1
2 0 7
2 1 5
22 3
2 5 5
2 2 5
2 7 2
2 2 2
2 4 0
2 4 5
6 52
6 3 8
5 2 5
5 6 0
5 3 7
5 0 1
2 0 0
2 6 5
2 6 2
2 7 5
2 6 7
2 6 5
2 6 9
4 87
4 17
4 6 5
4 3 0
4 9 0
4 4 6
8 0 0
7 6 0
7 90
8 0 0
7 75
7 5 2
n曰八目勺0taon舀`nQ浦, J几孟ùó
ùb几1工:日únUJLnU1山n`乙心J舀`伙J“一a
氢氧化钠
1 6 0
N
a O H
16 5
17 5
1 90
2 0 8
17 2
17 2
16 9
17 8
3 2 0
3 4 0
3 50
3 C0
32 0
3 G0
32 5
3 30
5 7 0
5 7 0
6 0 0
6 7 0
57 5
55 2
5 4 5
6 32
1 60
1 9 0
2 0 0
1 9 3
1 9 8
1 8 0
2 0 5
2 2 0
1 9 8
5 5 0
5 3 0
5 3 0
5 0 5
4 7 0
5 05
5 1 0
5 2 0
10 6 0
1 00 5
10 35
1 1 0 0
9 1 0
1 0 5 0
1 0 40
1 03 0
高锰酸钾
1
.
5
2
2
.
5
3
3
,
5
4
2 0 0
2 1 5
2 2 0
2 3 0
19 5
2 3 5
2 2 0
2 20
2 3Q
2 44
2 00
2 42
2 4 0
34 0
3 7 0
39 0
3 7 0
4 5 0
4 6 0
2 0 0
K M n O `
2 3 0
2 1 5
2 1 5
2 4 0
2 5 0
2 2 5
2 70
3 05
3 3 0
3 10
3 20
3 3 7
5 7 0
5 60
5 90
5 1 0
6 2 0
6 90
关 三角褐指藻
念期 单胞藻浓缩 、 保藏及应用技术的初步研究 8 9
毛 g N t
3
.
0
2
.
8
艺 6
2
.
4
2
.
2
2 3 4 5 6 7 8 时间 (天 )
图 1 普通小球藻与浓缩小球藻的生长曲线
八 . 普通小球藻 ( 接种 10 。万/ 毫升 ) 的生长曲线
B
. 浓缩小球藻 (接种1 0 万/ 毫升 ) 的生长曲线
C
. 浓缩小球藻 ( 接种2 0 万/ 毫升 ) 的生长曲线
表 9 浓缩 小球藻投喂中国对灯幼体的效果试验
培养 日期
幼 休 发
育 阶 段
投 “ “ “ …竺竺竺矍竺竺竺竺竺竺
( 万 / 毫升 ) } 工 } 亚
竺些竺些塑鲤坚2 }
I
{
亚 }
备
042731109280653“44
.
2 5 1 0 0
.
0 0 1 0 0
.
0 0 10 0
.
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.
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88
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0 0
7 3
.
3 0 从 2 3起加丰年虫
停电停气On石己曰J任, .ùJl,盖.…几b自J内Q,d户Ula七O
084231816572淞八UO口,自目Jst匕尸」n, J怪tQOJU。曰0..…内O左1上O曰丹J咋内」7ū才八匕勺d恤口弓丹O
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1
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2 M s P i
表10 浓缩小球藻投喂 中国对体幼体的方差分析表侧介一 均 : 方 「 ’ F · 日.;蕊石-’ ::: · :: …。一 …F。一 。 = 4一2 . 浓缩小球燕直接投喂轮虫效果 用浓缩小球藻和普通小球藻直接投喂褶皱臂尾轮虫 ,
结果见表 1 1 , 试验表明 : 浓缩小球藻与普通小球藻对轮虫培养效果差异不显著 , 并且在培养
过程中发现 , 用这两种藻培养的轮虫抱卵 (夏卵 )情况良好 ( 2一 3 个卵 /尾 ) , 增殖快 , 说明浓
缩小球藻完全可用于轮虫培养 , 且效果与普通藻相同。
3
。 生产性应用试验 我们用4 0P p m明矾浓缩的三角褐指藻和新月菱形藻共 1 . 5升 ( 1亿 /
g O 浙江水产学院学报 2 1卷
表n 浓缩小球藻培育轮 虫的效果试验
培养时间 藻 密 度
(万 /毫升)
轮 虫数目 (个/毫升 )
i { n
藻 密 度
(万/毫升 )
轮虫数 目 (个/ 毫升)
1
}
”
2 0 0
.
5 0
.
5 2 0 0
.
5 0
.
5
0 4 0 1 1 4 1 1
75 2
.
5 2
.
5 5 3 73
8 2 1 4
。
5 82 1 4 15 13
3 6 5 6 46 3 4 70 8 6 5 8
8 5 40 18 10 1 49 0 1 10 12 0
5 8 4 10 2 5 5 17 185 6 1 7
毫升 ) , 拿到普陀小湖对虾育苗厂进行生产性应用试验 。 (当时该厂正逢单胞藻供不应求 , 藻
种污染 。 )把浓缩藻直接扩大三级培养 , 结果见表 12 。 从表中可见 , 浓缩藻接种后 ,延缓期相
当短 , 2 #饵料池接种密度为50 万 /毫升二天后 , 水体增加到 2 . 5倍 , 而藻密 度 高 达 14 。万 /毫
升 , 到第四天为2 0万 /毫升 , 已可作为饵料投喂 。 同样3莽饵料池从 2非饵料池接种 , 起始密度为
2 万 /毫升 , 第二天高达 1 80 万 /毫升 , 以后一段时间每天投喂部分藻液 , 又加水至原水位 , 而
藻密度始终维持在 2 0 ~ 3 0 万 /毫升 , 为育苗厂提供了丰富的植物饵料 , 特别是连续阴 天 多
雨 , 育苗厂单胞藻短缺 , 用了浓缩藻 , 这个间题迎刃而解 。 另一方面 , 浓缩藻运输方便 , 可
以直接或间接投喂 , 缩短了中间环节 , 减少敌害生物污染途径 , 与传统单胞藻培 养 方 法 相
比 , 其优越性是显而易见的。
表 12 浓缩藻生产性培养效果
池 号 培养时 间
藻 密 度
(万 /毫升 )
培养水休
(立方米 )
总 藻 量
( 1 0 0亿 ) 备 注
接种浓缩藻 1 . 5升
接种到 3 . 池 0 . 4吨
投饵 0 . 8吨
石均月比26nOC`一勺了
n`jl勺
通`内bRù一`q
.…nó,1I,自n甘ùU00ù匕J,咋`任,几Zn`5 月 5 日5 月 7 日5 月 8 日
5 月 9 日
投饵 1 . 6吨
,`几ó”亡d几舀ùU
dt`
,`匕U八甘n`01勺
J上2
5 月 8 日
5 月 9 日
5 月 1 0 H
从 2 ’ 池接种 0 . 4吨
小 结
1
` 用明矾 、 氢氧化钠作浓缩剂 , 各试验藻的较适浓缩剂量为新月菱形藻和三角褐指藻
(明矾 2 0一 6 0 p p m 、 氢氧化钠 1 . 5一 4 p p m 、 高锰酸钾 1 . 4一 4 p p m ) , 扁藻 (明 矾 2 7 0一 3 0 0
p P m )
、 小球藻 (明矾 5 一 4 0 P Pm ) 、 湛江叉鞭金藻 (氢氧化钠 2 。 5 P P m 、 明矾 5 0一 7 0 PP m ) 、
角毛藻 (氢氧化钠 2 . 5一 5 p p m ) 、 球等鞭金藻 (明矾 50 一 70 p p m ) 。
2
. 浓缩小球藻与普通小球藻接种培养 , 其生长规律和繁殖速度无差异 。
3
. 浓缩藻以低温保藏为宜 。
2 期 单胞藻浓缩 、 保藏及应用技术的初步研究 9 1
4
.用浓缩小球藻直接投喂培养中国对虾幼体 ( N 。一2 3 ) 和轮虫其效果与普通 小球 藻无差
异 , 试验证明 : 浓缩藻完全可用于水产动物生产性育苗 。
参 考 文 献
以〕 崔秀林等 , 1 9 8 2。 浓缩藻冷冻储存小新月菱形藻的试验 。 河北水产科技 , (的 : 4 一 7 。
〔 2〕 湛江水产 学校主编 , 1 9 8。。 海洋饵料生物培养 。 农业 出版社 。
仁3〕 冈内正典 , 1 9 9 1。 饵料用微藻的大量培养技术开 发及其利用。 国外水产 ( 2 ) : 17 一2 。
〔们 代 田昭彦 , 1 9 74 。 水产饵料生物学 。 垣星社厚生阁版 。
A P R E L IM IN A R Y S T U D Y O N C O N C E N T R A T IO N
S T O R A G E A N D A P P L I C A T IO N O F S IN G L E
C E L L A L G A E
J i a n g X i a m i n Z h u Y i f e n g W
a n g Z h i z h e n g Z h o u S h e n g m e i
( Z h e j i a n g F i s h e r ie s C o l l e g e
,
N in g bo 3 1 5 0 1 0 )
A b s t t 妞C t
T h i s P a P e r r e P o r t s s o m e e o n e e n t r a t i v e a g e n t s s uc h a 3 a lu m e t e
.
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c o n e e n t r a t e e o m m o n s i n g le e e l l a lg a e
.
o n t h e b a s i s o f t h e co m p a r is o n
,
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s a g e a r e o b t a in e d f o r t h e P r a e t i e a l
u s e二 H a v i n g b e e n s t o r e d s e v e r a l m o n t hs i n lo w t e m p e i t u r e , t he a lg a e
e o n e e n t r a t e d a r e e u l t i v a t e d a g a in a n d f e d P
e n a e u s o : i e n t a l i s l a i v a e a n d
刀: a c h艺o n u s p l艺c a t i l i s . T h e r e s u l t s s h o w n o d if f e r e n e e b e t w e e n a lg a e e o n e e n t r -
a t e d a n d g e n e r a l a lg a e
.
K e y w o v d s : S i n g l e e e l l a lg a e
,
C o n e e n t r a t io n
,
S t o r a g e
,
A p p l ie a t i o n