作 者 :李晓丹
期 刊 :东北林业大学 2013年 03期 页码:56
关键词:百子莲;胚性愈伤组织;玻璃化法超低温保存;遗传稳定性;生理生化;
摘 要 :本研究以百子莲胚性愈伤组织为试验材料,通过试验得出以下结论: (1)建立了百子莲胚性愈伤组织的玻璃化法超低温保存体系。取继代培养20d后的百子莲胚性愈伤组织50±10mg,在4℃低温条件下、0.5mol/L蔗糖的MS培养基上预培养2d,然后在室温下将250±10mg胚性愈伤组织放入含2mL装载液的冷冻管中处理60min,去除装载液后,在0℃条件下放入2mL玻璃化溶液(PVS2)处理40min,快速投入液氮1h后,于40℃水浴中解冻90s,快速吸除PVS2溶液后,用去装载液洗涤3次,每次间隔10min,置于恢复培养基上24h后,测定细胞成活率(TTC)达56.9%,胚性愈伤组织能够正常增殖...