全 文 ：第 31卷第 1期
2007年 1月 　　　　　　　　　　
水　产　学　报
JOURNALOF FISHERIES OF CH INA
　　　　　　　　　　　　Vo.l 31, No. 1　
Jan. , 2007　
文章编号:1000 - 0615(2007)01 - 097 - 08
收稿日期:2006-07-07
资助项目:国家自然科学基金资助项目 (40676077);福建省科技重大专项资助项目 (2004NZ 03);厦门市科技局资助项目
(3502Z20041051)
作者简介:陈昌生(1957 -),男 ,福建平潭人 ,教授,主要从事水产增养殖与育种技术的研究。 E-mail:cschen@ jm u. edu. cn
坛紫菜品系间杂交藻体选育及经济性状的初步研究
陈昌生 , 　徐　燕 , 　纪德华 , 　谢潮添 , 　王玉中 , 　王凤霞 , 　柳佩娟
(集美大学水产学院 ,福建 厦门　361021)
摘要:为了获得杂交的坛紫菜优良品系 ,本实验对野生型坛紫菜(♀)和经过人工诱变选育获
得的红色型 (♂)的坛紫菜进行杂交获得丝状体;丝状体促熟培养后获得杂交子一代叶状体 ,
从子一代中挑选出 5种具有一定生长优势和其它经济性状的藻体 (品系 A、B、C、D、E);对其
分别进行体细胞克隆和丝状体培育 ,获得大量子一代和子二代 。对子一代和子二代进行生长
性状测定和选育 ,并进行抗逆性和藻胆蛋白及叶绿素的测定。初步筛选出生长性状好 、品质优
的子二代 4个品系 B2 、C2 、D2 、E2 ,而且 4个品系的藻红蛋白 、藻蓝蛋白 、别藻蓝蛋白和叶绿素
含量也明显高于对照组 ,其中 D2的 R-RPE含量高达 61. 71‰,最低的品系 E2为 44. 64‰,比对
照组高一倍以上;在 31 ℃下培养 ,品系 C2第 5天叶片中部才开始出现个别针尖般烂点 ,藻体
基部正常 ,表现出一定的耐高温特性 。品系 B2具显著的生长优势和抗高温特性 ,品系 D2、E2
具有一定抗低氮 、磷的特性 ,其中 E2在低氮磷培养 1 ～ 3 d,瞬时增重率为 25. 2%,平均日增长
量为 1. 20 cm d-1 ,在 4 ～ 6 d瞬时增重率和日增长量分别接近 30. 0%和 2. 0 cm d- 1;通过
坛紫菜不同品系的杂交 、单细胞克隆和丝状体细胞育苗技术相结合可以有效的对坛紫菜杂交
藻体的优良性状进行筛选 ,逐步达到选择育种的目的。
关键词:坛紫菜;杂交育种;酶解;丝状体;抗逆性;优势
中图分类号:S 917. 3;S 968. 43+1　　　　　　　文献标识码:A
A prelmi inary study on cultivation of the crossbred Porphyra haitanensis
thallus and the ir econom ic characteristics
CHEN Chang-sheng, XU Yan, JI De-hua, X IE Chao-tian,
WANG Yu-zhong, WANG Feng-xia, LIU Pei-juan
(F isheries College, J imei University, X iamen　361021, China)
Abstract:In order to obtain fine crossbreeding strains of Porphyra haitanensis, the w ild strain(♀) was
crossbred w ith the red stra in(♂) ofP. haitanensis selected through induction ofm utation , to ge t free-liv ing
conchoce lis. The free-living conchocelis was prem a ture ly cultiva ted to obtain the filia l generation (F1)
thallus. O f all the F1 , five hea lthy stra ins ( A , B , C , D , E) have predom inance of grow th and o ther
econom ic characteristics were se lected. Through som ac lon ing and culturing, they generatedm ass F1 and F2.
The grow th characters of F1 and F2 , stress tolerance, chrom oprotein and chlorophyll conten ts of F2 were
m easured. On the basis of the results, four strains(B2 , C2 , D2 , E2 ) of F2 were first se lec ted, which
possessed great predom inance of grow th and abundant chrom oprote in and chlorophyl.l In add ition, R-RPE ,
R-PC , APC and Ch .l a of the four stra ins were also eviden tly h igher than the con trol group. Am ong them ,
R-RPE con tent ofD2 reached up to 61. 71‰, while the lowest group E2 reached up to 44. 64‰, more than
tw ice than that of the con trol group;at 31 ℃, the cen tral part of 5 d thallus appeared a few p inpo in t-like
rotted poin ts, whereas the base part of tha llus appeared norm al, ind icating h igh temperature resistance.
S train B2 showed ev ident predom inance of grow th and high tem pera ture resistance, wh ile D2 and E2 showed
a certain low n itrogen and phosphorus resistance. Cultured in low nitrogen and phosphorus for 1 - 3 days,
the instan taneous grow th rate ofE2 was 25. 5%, average daily grow th 1. 20 cm d-1 , while during 4 - 6 d,
the instantaneous grow th tate was about 30. 0%, average da ily grow th 2. 0 cm d-1. Therefore, fine
crossbreed ing P. ha itanensis strains can be effective ly obta ined by con join ing the technology of crossbreed ing
of different stra ins, sing le ce ll clon ing and free-living conchoce lis breed ing.
Key words:Porphyra haitanensis;crossbreeding;enzym olysis; free-living conchoce lis;stress to lerance;
predom inance
　　坛紫菜 (Porphyra haitanensis)系暖温性经济
海藻 ,是我国东南沿海特有的养殖品种。近几年 ,
虽然养殖面积增长较快 ,但育种研究滞后 ,加上群
众养殖时种菜选择不当 ,连续多年自养自留自用 ,
近亲繁殖 ,导致品种退化 、耐高温能力减弱 ,原藻
的产量和质量下降 ,病害频繁发生 ,影响坛紫菜养
殖业的健康和持续发展。
对于紫菜栽培业来说 ,良种培育历来都是生
产者十分关注的问题 ,也是许多藻类学者多年来
努力研究的方向。条斑紫菜育种工作起步早 ,且
比较成熟 ,目前已经培养和选育了相当数量的新
品系 ,其中有的已经应用于生产 ,但坛紫菜作为我
国特有的南方养殖品种 ,其新品种选育与杂交育
种研究起步晚 、进展慢 [ 1 - 5] ,迄今为止 ,尚未见到
有关坛紫菜品系间杂交育种成功的报道。本实验
通过对坛紫菜野生选育型和人工诱变选育的红色
型坛紫菜进行杂交 ,然后对其子一代 (F1)和子二
代 (F2)的经济性状和抗逆性进行筛选 ,初步培育
出了生长速度较快 ,品质良好 ,对逆境 (高温和低
氮磷)适应性较强的品系 ,为今后坛紫菜的杂交
育种研究奠定了基础 。
1　材料与方法
1. 1　材料的来源
取自集美大学坛紫菜种质改良与应用实验室
的野生型坛紫菜 (♀)和经过人工诱变选育的红
色型坛紫菜 (♂),进行杂交获得丝状体 (单独培
养的父本和母本没有获得丝状体 ),丝状体促熟
培养后获得杂交 F1叶状体 ,经过大量筛选和单株
充气培养 ,然后从 F1中挑选出 5株具有一定生长
优势和抗逆性状 (抗高温 、抗低氮磷等 )的藻体 ,
分别暂名为品系 A1 、B1、C1、D1 、E1;接着进行体
细胞酶解和单细胞克隆培养获得具有相同性状的
大量藻体 ,再从这 5种 F1群体中挑选出优势株进
行丝状体培养和壳孢子促放 ,获得 F2藻体 ,暂名
为品系 A2 、B2 、C2 、D2 、E2 ,然后分别进行筛选和
培育实验 ,以野生的坛紫菜作为对照组。
1. 2　生长性状测定
生长的测定　　从 F1和 F2中各随机挑选出
30 ～ 40株 、3 ～ 5 cm健康完整的藻体进行单株充
气培养 ,并设置平行组。培养条件为:温度 20 ～
21℃,光照 2 000 lx,光周期 12 D∶12 L ,每隔 5天
进行一次长度 、宽度和鲜重测定 。
测定公式
平均日增长量:E(cm d-1)=(E t -E 0) /t
平均日增重率:W r(%)= (W t W/ 01 /t -1 ×100
瞬时增重率:Gr(%)= (lnW t - lnW0) /t ×100
E t:为培养 t d后的藻体长度;E0:为藻体的初始长
度;Wt:为培养 t d后的藻体鲜重;W0:为藻体的
初始鲜重;t:为两次测量的时间间隔 。
1. 3　抗逆性状测定
耐高温培养实验　利用 6个恒温光照培养
箱 ,每个培养箱的温度单独设置为 31、30、29、28、
27、26 ℃。然后 ,对 F1 、F2和对照组的藻体静水
培养 15 d,每隔 5天对其进行生长性状测定和腐
烂程度观察 。上述各实验进行了重复 ,下同。
低 N、P培养液的制备及实验藻体的培育　
低 N、 P培养液的制备与测定方法见参考文献
[ 6] 。在温度 、光强 、光周期 、充气条件不变的情
况下 ,挑选实验藻体置于低氮磷的培养液中进行
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充气培养 ,直至藻体完全变黄并出现腐烂迹象 ,记
录培养天数 ,然后更换含有 N、P的正常培养液进
行恢复培养 。每天观察 ,每隔 3天测量长 、宽 、重 ,
其它培养条件和测定方法同上 。
1. 4　生化指标测定
叶绿素的测定　　叶绿素测定按 Jensen[ 7]方
法进行 。
总藻胆蛋白的测定与计算　　称取冷冻的藻
体 2 ～ 3 g,用蒸馏水快速洗涤 3次 ,平铺在干净的
3层纱布上 ,在风扇前吹干 , 40 ～ 60 m in ,置于粉
碎器中 ,间歇粉碎至粉末状。每个品系精确称取
2份 ,一份 0. 010 g,另一份 0. 030 g,每份相差不
超过 0. 000 2 g。放在研磨器中 ,加磷酸钠缓冲液
进行研磨至液体中无碎末后定容到 20 mL ,放入
- 20 ℃冰箱中 ,反复冻融 6次以上 ,融化过程中
搅拌使其混合均匀 ,最后一次冻融结束后 ,再用
300目筛绢网过滤 ,滤液在转速 10 000×g , 4℃条
件下离心 20m in,取上清液 ,定容至 50 mL,振荡
后静置 ,分别于 565、615、650 nm波长下测定其吸
光值 ,计算公式如下:
CRPE =0. 123 A565 - 0. 068 A615 +0. 015A650
CRPC =0. 162 A615 - 0. 001A565 - 0. 098 A650
CAPC =0. 171 A650 - 0. 000 6 A565 - 0. 004
A615
其中 , CRPE 、CRPC 、CAPC分别为 R-藻红蛋白 、R-藻蓝
蛋白和别藻蓝蛋白的含量 。
2　结　果
2. 1　各品系的形态特征及其在适宜条件下的生
长发育状况
亲本及各品系的形态特征　　母本采自平潭
自然海区 ,经过人工选育的野生坛紫菜 ,叶片披针
型 ,长度为 20 ～ 90 cm ,宽度为 0. 7 ～ 1. 6 cm ,厚度
为 45 ～ 67 μm ,长宽比的平均值为 45∶1;藻体基
部为褐绿色 ,中上部褐色带紫 ,叶片基部锯齿较
多 ,中上部渐少。父本为人工诱变选育获得。藻
体呈披针形 ,整株棕红色 ,叶片长度为 140 ～ 220
cm ,长的可达 300 cm ,宽度为 1. 8 ～ 3. 0 cm ,长宽
比为(58 ～ 65)∶1, 厚度为 28 ～ 35 μm;基部呈脐
形;藻体边缘没有锯齿;叶片较难成熟 ,雄性个体
多 。
选育的各杂交品系的主要形态特征见表 1。
表 1　F1和 F2叶状体的形态特征
Tab. 1　The conform ational character of F1 and F2
品系
s train
藻体形状
sh ape
颜色
co lou r
长度(cm)
leng th
宽度(cm)
w id th
平均长宽比
rate of length
andw id th
厚度(μm)
th ickness
锯齿数量 、大小
quant ity and size
of saw too th
A
A1 长卵型 long ol ivary 红褐色 henna 68～ 93 3. 0 ～ 4. 0 24∶1 26～ 31 无 none
A2 长卵型 long ol ivary 红褐色 henna 78～ 141 4. 0 ～ 5. 0 22∶1 26～ 32 无 none
B
B1 披针型 lan ceo late 褐绿色 taupe 60～ 95 0. 9 ～ 1. 5 72∶1 30～ 34 较多 ,很小 m any, wee
B2 披针型 lan ceo late 茶褐色 tea b rown 73～ 132 1. 2 ～ 1. 8 83∶1 29～ 34 较多 ,很小 m any, wee
C
C1 长卵型 long ol ivary 红褐色 henna 53～ 65 3. 0 ～ 4. 0 15∶1 28～ 35 无 none
C2 长卵型 long ol ivary 褐色 brown 90～ 102 3. 5 ～ 4. 8 21∶1 30～ 35 无 none
D
D1 披针型 lan ceo late 红褐色 henna 90～ 116 0. 7 ～ 1. 2 90∶1 45～ 57 较多 ,较大 m any, b igg ish
D2 亚披针型 sub lanceo late 红褐色 henna 82～ 110 1. 6 ～ 2. 0 40∶1 46～ 55 较多 ,较大 m any, b igg ish
E
E1 披针型 lan ceo late 深褐色 dark pu ce 70～ 150 1. 2 ～ 1. 8 71∶1 41～ 45 较多 ,较大 m any, b igg ish
E2 亚披针型 sub lanceo late 茶褐色 tea brown 60～ 87 1. 6 ～ 2. 1 38∶1 39～ 42 较多 ,很小 m any, wee
　　杂交新品系生长性状的比较　　从表 2可
见 , F1和 F2平均日增长量呈上升趋势 ,在 1 ～ 20
天的培养时间内 ,第 16 ～ 20天的日平均生长量最
大 ,尤其是品系 B2平均日增长量高达 5. 68 cm
d
-1 ,其次是品系 D1和 A2平均日增长量分别达
到 5. 63 cm d- 1和 4. 50 cm d- 1。经选育后 ,品
系 B2和 C2相对 B1和 C1平均日增长量均有所增
加 ,而对照组生长非常缓慢 , 6 ～ 10 d时最大日均
增长量为 1. 45 cm d- 1 ,并在培养 10 d后藻体就
开始腐烂 ,无法测量。从表 3可见 ,各杂交品系的
F1和 F2平均日增重率明显高于对照组 。
2. 2　杂交各品系的抗逆性比较
耐高温能力的比较　　F2在 26、27 ℃生长
正常。对照组在 26 ℃下第 4天就开始出现腐烂
的痕迹 。在 29、30、31℃的高温下 ,各品系藻体开
始出现针尖般烂点的时间如表 4所示。在 31 ℃
情况下 ,品系 C2第 5天叶片中部才开始出现个别
针尖般烂点 ,藻体基部正常 ,表现出一定的耐高温
991期　　　　　　　　　　　　陈昌生 , 等:坛紫菜品系间杂交藻体选育及经济性状的初步研究
特性。
表 2　适宜条件下两代叶状体的平均日增长量
Tab. 2　Average da ily length-increased of two
generations’ tha llus in op tima l cond ition s
cm d - 1
品系 strains 培养时间(d) cul tivate t ime
1 ～ 5 6～ 10 11～ 15 16 ～ 20
A
A1 1. 92±0. 43 4. 06±0. 57 4. 92±0. 74
A2 1. 71±0. 54 3. 33±0. 71 4. 33±0. 77 4. 50±0. 84
B
B 1 1. 77±0. 46 3. 18±0. 85 3. 70±0. 99
B 2 2. 15±0. 59 4. 35±0. 72 5. 08±0. 94 5. 68±0. 96
C
C 1 1. 33±0. 44 2. 71±0. 63 3. 33±0. 67 3. 71±1. 76
C 2 2. 10±0. 32 2. 97±0. 52 3. 74±0. 66 4. 05±1. 52
D
D
1 2. 03±0. 22 3. 70±0. 33 5. 06±0. 46 5. 63±1. 07
D2 1. 71±0. 42 3. 02±0. 67 3. 74±0. 85 3. 84±0. 90
E
E1 1. 99±0. 43 3. 27±0. 69 4. 62±0. 72
E2 1. 43±0. 23 2. 81±0. 32 3. 55±0. 39 4. 13±0. 55
对照 contro l1. 36±0. 20 1. 45±0. 35
　　注:空白处为藻体绿烂 ,无法测量 ,下同
No tes:The b lanks means that the thallus have rotted and cann’ t
be measured
表 3　适宜条件下不同品系叶状体的平均日增重率
Tab. 3　Average daily we igh t-increased rate of two
generations’ tha llus in op tima l cond ition s %
品系 strains 培养时间(d) cul tivate t ime
1 ～ 5 6～ 10 11～ 15 16 ～ 20
A
A1 44. 70±8. 74 41. 79±4. 62 35. 65±3. 36
A2 49. 59±5. 35 44. 21±3. 24 37. 15±1. 84 31. 69±1. 50
B
B1 37. 41±12. 29 37. 05±4. 90 31. 76±2. 87
B2 41. 14±3. 93 40. 03±2. 17 33. 32±2. 01 32. 65±1. 82
C
C1 36. 43±6. 30 37. 35±3. 89 32. 32±2. 93 30. 03±1. 46
C2 46. 09±5. 58 38. 30±2. 11 32. 89±1. 43 32. 27±1. 41
D
D1 45. 40±5. 27 39. 19±3. 78 33. 99±2. 62 29. 16±2. 06
D2 39. 11±4. 89 37. 20±4. 06 31. 49±2. 68 26. 74±1. 85
E
E1 36. 18±7. 22 35. 65±3. 10 33. 67±1. 88
E2 32. 58±5. 29 32. 99±2. 77 28. 66±1. 94 25. 49±1. 72
对照 control 23. 95±5. 76 20. 58±1. 68
表 4　不同品系在高温下叶片开始出现烂点的时间
Tab. 4　Tim e of the d ifferen t stra in s beg inn ing
to rot in d ifferent h igh temperature
温度(℃)
tem perature
品系 strain
A
2
B
2
C
2
D
2
E
2 对照 con trol
26 - - - 10 - 4
27 12 13 - 9 11 3
28 8 6 8 3 5 2
29 5 3 9 2 2 1
30 5 4 6 2 4 1
31 3 3 5 2 2 1
　　注:“ - ”表示没有腐烂
No tes:“ - ”m eans d id no t rot
　　从图 1 ～图 6可以看出 ,各杂交品系在 26 ～
27℃下 ,叶片长度增长较快;在高温下 , F2平均日
增长量均在 0. 50 cm d- 1以下 (静置培养结果 ,
下同),随着温度的升高 ,各品系的平均日增长量
呈下降趋势 。但 C2在 30 ℃下 ,藻体长度日增长
仍然较快 (图 3),表现出耐高温的特性。对照组
在 30℃时叶片腐烂严重 ,长度增长呈负值(图 6)。
图 1　不同高温下品系 A2平均日增长量
F ig. 1　The ave rage da ily increased-length of A2
in d ifferen t h igh temperature
图 2　不同高温下品系 B2平均日增长量
F ig. 2　The average da ily inc reased-length ofB2
in d ifferen t h igh temperature
耐低氮 、磷能力的比较　　经检测 ,人工制作
的低氮 、磷海水中的氮为 (2. 0±0. 12) μg L - 1 ,
是自然海区氮含量的 1 /50 ～ 1 /100;磷为 (2. 5 ±
0. 26) μg L- 1 ,是自然海区磷含量的 1 /15 ～ 1 /
20。 F2和对照组在低氮 、磷的条件下培养 ,藻体
开始变黄时间为 7 ～ 12 d内 (表 5)。培养 1 ～ 3
d,各品系藻体的平均日增长量和瞬时增重率分别
100 水　产　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　31卷
图 3　不同高温下品系 C
2
平均日增长量
F ig. 3　The average da ily increased-length ofC2
in d ifferen t h igh temperature
图 4　不同高温下品系 D2平均日增长量
F ig. 4　The ave rage da ily increased-length of D2
in d ifferen t h igh temperature
图 5　不同高温下品系 E
2
平均日增长量
F ig. 5　The average daily increased-leng th of E2
in d ifferen t h igh temperature
图 6　不同高温下对照组平均日增长量
F ig. 6　The average daily increased-length of the
compar ison in d ifferen t h igh temperature
表 5　不同品系在低氮磷情况下
藻体色泽开始变黄的时间
Tab. 5　Tim e of the d ifferen t stra ins beg inn ing to turn
in to kelly in low n itrogen and phosphorus
品系
s train
A
2
B
2
C
2
D
2
E
2
对照组
contro l
培养天数 /d
cu ltivate tim e
9 9 9 12 12 6
在 0. 85 ～ 1. 80 cm d-1和 25. 22% ～ 37. 91%之
间;随着培养时间的延长 ,瞬时增重率明显呈下降
趋势 ,其中下降幅度最大的为 A2 ,第 1天为 37%,
第 9天瞬时增重率不足 9%,同时平均日增长量
由 1 ～ 3 d的 1. 20 cm d- 1 ,到第 9天降为 0. 54
cm d-1(图 7)。较特别的是 E2在 1 ～ 3 d瞬时
增重率为 25. 2%,平均日增长量为 1. 20 cm
d
-1 ,培养 4 ～ 6 d时的瞬时增重率和日增长量分
别接近 30. 0%和 2. 0 cm d-1 ,以后生长才慢慢下
降 ,表现出耐低氮磷的特性 ,经重复实验 ,结果相同。
图 7　不同品系叶状体在低氮磷
情况下的平均日增长量
F ig. 7　The ave rage da ily increased-length of different
lines of thallus in low n itrogen and phosphorus cond ition
1011期　　　　　　　　　　　　陈昌生 , 等:坛紫菜品系间杂交藻体选育及经济性状的初步研究
2. 3　杂交各品系的品质比较
各品系的藻胆蛋白和叶绿素的含量测定结果
如表 6所示。 F2在 R-RPE具有显著性的优势 ,
D2的 R-RPE含量高达 61. 71‰, B2为 44. 64‰,比
对照组高一倍以上。 A2的 R-RPC、APC和 Ch.l a
的含量低于对照组。
3　讨　论
3. 1　F1和 F2的生长性状分析
对 F1和 F2在培养 10 d时的长度和重量进行
双样本 t检验(表 7),可以看出品系 B、C、D、E的
F1和 F2 ,在长度和重量上均存在差异 ,尤其品系
B的长度和重量增长差异极显著;由表 2和表 3
可知 , B2的平均日增长量和日增重率上都明显高
于 B1 ,在生长性状方面有优势 。品系 C两代之间
的生长差异不大 ,属于正常的遗传 ,而且两代都有
较高的平均日增长量和日增重率 (表 2和表 3),
藻体厚度也明显比对照组薄;总体来看 , F2较 F1
在生长性状上变异幅度降低 [ 8] ,遗传上具有一定
的稳定性。
表 6　F2叶片中藻胆蛋白和叶绿素的含量
Tab. 6　Conten ts of phycob iliprotein and ch lorophy of F
2
thallus ‰
品系 s train R-RPE±SD R-RPC±SD APC±SD Ch.l a±SD Phyco. ±SD
A 2 38. 17±0. 091** 11. 82±0. 020** 9. 28±0. 067 5. 30±0. 030 72. 53±0. 153**
B2 44. 64±0. 025** 22. 75±0. 031* 13. 59±0. 082* 7. 10±0. 043* 81. 00±0. 036**
C2 52. 01±0. 119** 15. 47±0. 606 11. 21±0. 017 6. 43±0. 065* 78. 60±0. 672**
D 2 61. 71±0. 098** 24. 51±0. 080* 16. 47±0. 047** 5. 93±0. 022 102. 69±0. 221**
E2 46. 64±0. 009** 24. 36±0. 022* 14. 24±0. 041* 6. 44±0. 073 85. 246±0. 030**
对照组 con trol 21. 36±0. 465 18. 02±0. 872 10. 67±0. 216 5. 35±0. 076 50. 04±1. 543
　　注:*示差异显著;**示差异极显著
Notes:*The m ean d ifference is sign ifican t at the 0. 05 level;**The m ean d ifference is significant at the 0. 01 leve l
3. 2　杂交品系的抗逆性分析
C2和 B2在抗逆性 (抗高温和低氮磷)方面具
有一定的优势 ,在 30℃和 31 ℃下培养 3 ～ 6 d以
上 ,藻体开始腐烂 ,说明藻体对 30 ℃以上的高温
较敏感 。品系 A2在 26℃、27 ℃下生长量与其它
温度存在显著差异 ,所以对于 A2 , 28 ℃就是其生
长临界温度 ,这一点在图 1中得到验证 。在适当
的高温中 ,蛋白质分子一些亲水键断裂 ,会重新形
成较强的硫氢键 ,使整个分子重新恢复其空间结
构 ,其热稳定性更大 ,耐热性增强[ 9] 。氮 、磷含量
是养殖海藻中继阳光和碳源后最重要的营养元素
之一。一般紫菜在氮磷摩尔比为 13 ～ 15时达到
最佳生长[ 10] ,缺磷植株生长缓慢 ,叶片发绿 ,缺氮
植株瘦小 ,颜色较淡 [ 11] 。厦门周边海域的正常
氮 、磷含量分别为 200 ～ 300 μg L - 1和 37. 5 ～
46. 4μg L- 1。由图 7可见 ,低氮绿下叶片色泽
变浅的时间与低氮磷环境下的生长速度呈负相
关 ,即开始绿烂的时间越长 ,在此过程中紫菜的生
长速度越慢 。本实验中杂交品系 F2在低氮磷培
养液中培养了 9 d,说明坛紫菜不同品系之间存在
着差异 。品系 A2 、B2 、C2较品系 D2和 E2快速的
把体内储存的氮释放出来 ,结果氮的消耗过快 ,过
早的出现浅绿色或浅黄色 。由此说明品系 D2、E2
在低氮磷的情况下释放体内储藏氮磷速度较为缓
慢 ,适应低氮磷环境具有优势 ,也对筛选适应低氮
磷环境强的品系具有一定的作用 。从表 8可见 ,
同一品系在每个时间段的藻体重量增长差异极显
著 ,反映了其对水中和自身体内的氮磷利用情况
不同 ,说明 5种 F2藻体在低氮磷的情况下没有共
同趋势 ,品系间差异明显。
3. 3　杂交品系质量的初步分析
杂交 F2中 5种品系色素蛋白含量对照组相
比差异显著 ,其中 D2比对照组增加 1倍多 。从总
的色素蛋白含量上看 , 5种杂交品系在质量上具
有一定的优势 ,因为 R-RPE和 R-RPC中都是以
丙氨酸含量最高 ,亮氨酸和缬氨酸次之 ,占总和的
40. 0%左右 , APC中以亮氨酸和异亮氨酸含量最
高 ,其次是丙氨酸和缬氨酸约占 45. 0%左右[ 12] ,
丙氨酸 、亮氨酸和缬氨酸在紫菜的鲜味上发挥着
重要作用。
102 水　产　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　31卷
表 7　F1和 F2在培养 10 d时长度 t-检验
Tab. 7　 t-test of the length betw een F1 and F2 a t the ten th day
假定方差相等并行的检验
Leven e’ s tes t for
equ ality of variances
F检验
F
显著性
S ig.
平均数相等的 t-test
t-tes t for equality o f means
t
自由度
d f
显著性(双尾)
S ig. (2-tailed)
平均数差异
mean
difference
标准误的差异
std. error
d ifference
95%的置信区间的差异
95% confid ence in terval
o f th e difference
low er upper
A
方差相等时
equal variances
assum ed
2. 819 0. 099 0. 669 58 0. 506 1. 466 67 2. 190 74 -2. 918 57 5. 851 90
方差不等时
equal variances
not assumed
0. 669 53. 479 0. 506 1. 466 67 2. 190 74 -2. 926 48 5. 859 81
B
方差相等时
equal variances
assum ed
1. 167 0. 284 - 5. 588 58 0. 000** - 12. 650 00 2. 263 80 - 17. 181 49 - 8. 118 51
方差不等时
equal variances
not assumed
- 5. 588 56. 067 0. 000 - 12. 650 00 2. 263 80 - 17. 184 82 - 8. 115 18
C
方差相等时
equal variances
assum ed
1. 939 0. 169 - 2. 072 58 0. 043* - 2. 776 67 1. 339 84 -5. 458 65 -. 0946 8
方差不等时
equal variances
not assumed
- 2. 072 55. 860 0. 043 - 2. 776 67 1. 339 84 -5. 460 84 -. 0924 9
D
方差相等时
equal variances
assum ed
13. 781 0. 000 3. 277 58 0. 002* 7. 750 60 2. 365 27 3. 016 00 12. 485 19
方差不等时
equal variances
not assumed
3. 277 46. 669 0. 002 7. 750 60 2. 365 27 2. 991 40 12. 509 79
E
方差相等时
equal variances
assum ed
9. 126 0. 004 2. 244 58 0. 029* 3. 080 00 1. 372 84 0. 331 97 5. 828 03
方差不等时
equal variances
not assumed
2. 244 40. 020 0. 030 3. 080 00 1. 372 84 0. 305 43 5. 854 57
　　注:*示差异显著;**示差异极显著
No tes:*The mean d ifferen ce is s ign ifican t at the 0. 05 level;**Them ean d ifferen ce is s ignifican t at th e 0. 01 level
表 8　低氮磷情况下 F
2
增重的品系和测量时间双因素方差分析
Tab. 8　Two way analysis of var iance of strain s and m easure-tim e of F2 in low n itrogen and phosphorus
来源
sou rce
第三类离差平方和
typ eⅢ sum of squares
自由度
df
平均离差方
m ean square
F检验
F
显著性
s ig.
校正模型 correctedm od el 6 342. 459(a) 14 453. 033 20. 191 0. 000
截距 ln tercep t 283 392. 554 1 283 392. 554 12 630. 367 0. 000
品系 s train 1 202. 318** 4 300. 580 13. 396 0. 000
测量时间 m eterage tim e 3 476. 296** 2 1 738. 148 77. 467 0. 000
品系 ×测量时间 s train ×t ime 2 696. 007** 8 337. 001 15. 020 0. 000
误差 error 7 538. 965 336 22. 437
总和 to tal 310 310. 655 351
校正总和 co rrected total 13 881. 425 350
　　注:a回归平方为 0. 457(调整后的回归方差为 0. 434)
No tes:R squared=0. 457(adjusted R squared=0. 434)
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与化学组成研究 [ J] .海洋湖沼 , 1997, 24(4):350
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关键词取词的一般原则
(1)GB7713 87规定:每篇报告 、论文应选取 3 ～ 8个词作为关键词 。
(2)所选的重要概念应是构成主题中心的概念。在构成主题中心的概念中 ,首先要选取形
成论文中心论点的最主要概念。
(3)所选的重要概念对主题中心应有修饰和限定作用 。选好主题中心概念后 ,还应从多方
面选择围绕主题中心的关联主题要素 ,例如表示种类 、作用 、方法 、性质 、结构 、条件 、用途 、归属 、
时间 、场所 、原理 、过程 、结构的概念可作为主题要素。
(4)注意选择隐含在字里行间的重要概念和对主题背景 、动机 、经过及对今后课题有信息价
值的概念 。
(5)选词不宜过多或过少 ,过多会造成过量标引 ,过少会遗漏一些有价值的信息点 ,容易造
成误检或漏检 。
(6)关键词应该是名词 、术语或名词性词组。一般地说 ,虚词不能做关键词 ,有些实词 (动
词 、形容词 、副词等 )也不宜选用。
(7)此外 ,随着科学技术的发展 ,新的科技名词术语不断出现 ,许多科技论文选用的关键词
都是在现有的主题词表中没有列出的新学科或新技术术语 。使用这些新的自由词时应看其是否
符合下列条件:①具有独立的检索意义;②促进新的学科或技术发展;③被国内外科技文献的检
索系统接纳;④与国际上著名科技刊物特别是著名检索刊物关键词的选用接轨 。
(8)规范的书写方法是关键词,有些文章写成主题词或关键字是不对的。关键词之
间应用;而不应该用、或 “ , ”等连接 。
(9)要求书写与中文关键词对应的英文关键词 。
104 水　产　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　31卷