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嫣红蔓离体繁殖技术研究



全 文 :第 26卷第 1期    西 南 农 业 大 学 学 报 (自然科学版) Vol.26 ,No.1
2004年 2月 Journal of Southwest Agricultural University(Natural Science) Feb.2004
文章编号:1000-2642(2004)01-0061-03
嫣红蔓离体繁殖技术研究①
王力超 ,孙 聪 ,吕庆松
(西南农业大学 园艺园林学院 ,重庆 400716)
摘要:嫣红蔓带芽嫩茎及茎尖的最适初代培养基是1/2MS+BA 1.0 mg/L +NAA 0.05 mg/ L ,完全的MS 配方易导致玻
璃化;在继代培养时 , 交替采用增殖培养基 1/2 MS+BA 0.3 mg/ L +NAA 0 ~ 0.01 mg/L和增高培养基1/2 MS+BA 0.1
~ 0.2 mg/L , 这样便能保证既有较高的增殖率 ,繁殖的芽苗又比较长;嫣红蔓芽苗的最佳生根培养基是 1/ 2 MS+IBA
0.01 mg/L。
关 键 词:嫣红蔓;离体繁殖;培养基
中图分类号:S 681.9      文献标识码:A
STUDY ON THE PROPAGATION OF HYPOESTES PHYLLOSTACHYA IN VITRO
WANG Li-chao , SUN Cong , L Qing-song
(College of Horticulture and Landscape , Southwest Agricultural University , Chongqing 400716 , China)
Abstract:Tissue culture was made with the stem-segments and shoot tips of Hypoestes phyllostachya as explants.The optimum media were 1/ 2
MS + BA 1.0 mg/ L +NAA 0.05 mg/ L for primary culture , 1/2MS + BA 0.3 mg/ L +NAA 0~ 0.01 mg/ L for multiplication and 1/2 MS
+ BA 0.1~ 0.2 mg/ L for shoot growth.The best rooting medium was 1/2 MS + IBA 0.01 mg/L.
Key words:Hypoestes phyllostachya;in vitro propagation;culture medium
  嫣红蔓又名粉点木 、枪刀药 、红点草 、鹃泪草等 ,
系爵床科枪刀药属多年生常绿草本植物 ,原产于马达
加斯加。嫣红蔓株高约 70 cm ,盆栽苗高 20 ~ 30 cm ,
叶对生 ,全缘 ,叶面橄榄绿 ,布满粉红色或白色斑点 ,
有`粉霜 、`红霜 、` 玫瑰红霜 及`白霜 等多个品种 ,
风格异雅 ,是极有特色的观叶植物 。适合庭园点缀或
作盆栽观赏 ,近年开始在国内流行 。目前国内尚未见
嫣红蔓离体快繁的报道 ,生产上仍采用常规的扦插与
分株繁殖[ 1] ,繁殖率较低 。本文采用茎尖培养的方
法 ,研究嫣红蔓离体繁殖各种条件 ,以期为嫣红蔓的
繁殖提供一条新途径 。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为嫣红蔓(Hypoestes phyllostachya) 白
霜 品种的 1 a 生盆栽苗。剪取其带顶芽的幼嫩枝
梢 ,经自来水冲洗后 ,待用 。
1.2 培养基
初代培养基为MS 和 1/2 MS附加 BA 1.0 mg/L
+NAA 0.05 mg/L;增殖培养基由 1/2 MS附加不同浓
度的 BA与 NAA组成(表1);以含不同浓度 IBA的 1/
2 MS 培养基作生根试验。各种培养基还加蔗糖 30
g/L(生根培养基 20 g/L),凝固剂卡拉胶6 g/ L ,pH 调
至 5.8。
1.3 试验方法
1.3.1 外植体灭菌与初代培养 在无菌条件下 ,将
待用的材料用 75%酒精表面消毒处理 5 s ,取出后置
于 0.1%升汞液中灭菌 10 min 。然后用无菌水冲洗 4
次 ,用灭菌滤纸吸干表面余水。
将灭菌后的嫣红蔓嫩枝切成 1.0 cm 长的带芽小
① 收稿日期:2003-06-20
作者简介:王力超(1959-),男 ,重庆合川人,西南农业大学副研究员 ,从事园林植物育种的教学与研究。
DOI :10.13718/j.cnki.xdzk.2004.01.016
段 ,接种到初代培养基中。每瓶 4段 ,共 10瓶 ,计 40
段。
1.3.2 继代增殖培养 取 1.0 ~ 2.0 cm 长的无根芽
苗转入继代增殖培养中 ,每处理 10瓶 ,每瓶 3 ~ 4苗。
40 d后统计增殖效果 。
1.3.3 生根培养 取 1.5 ~ 2.0 cm长的无根芽苗转
入生根培养进行诱根培养 ,每处理 10 瓶 ,每瓶 3 苗。
30 d后统计生根率。
1.4 培养条件
将接种好的材料置于 1 500 lx 的光照条件下培
养 ,日光灯照明 14 h/d ,培养温度为 22℃±3℃。
2 试验结果
2.1 初代培养的效果
在2种初代培养基上培养 20 d后 ,部分材料因
污染而死 ,成活部分均长出了芽丛。但继续培养到
40 d发现 ,不仅少数外植体上出现了呈白色的愈伤组
织 ,玻璃化现象也越来越严重 ,其中MS+BA 1.0 mg/
L +NAA 0.05mg/L 培养基的玻璃化率高达 93%,1/
2 MS+BA 1.0 mg/L +NAA 0.05 mg/L的玻璃化率
为76%。
2.2 激素组合对芽苗增殖率的影响
取无菌芽苗培养在不同浓度 BA 与 NAA组成的
增殖培养基中 ,40 d后发现芽苗的增殖率差异很大。
从单因子看(图 1),无 BA的几种培养基的平均增殖
率仅 166%,随 BA 浓度增高 ,增殖率也相应提高 ,在
BA浓度为 0.3 mg/L时增殖率达最高 ,平均为 335%。
但BA浓度增加到0.5 mg/L后 ,芽苗的增殖率反而下
降 ,并出现较严重的玻璃化现象。
另一方面 ,就 NAA的影响来说 ,当 NAA 浓度为 0
mg/L ,0.01 mg/L ,0.02 mg/L ,0.03 mg/L 时 ,其芽苗的
平均增殖率分别为 234%,245%,183%,172%(图 2),
表明NAA对芽苗的增殖并没有正面作用。
BA浓度 BA concentration/mg·L -1
图 1 BA 浓度对嫣红蔓芽苗增殖率的影响
Fig 1 Effect BA concentration on multiplication rate shoots
NAA浓度 NAA concent ration/mg·L-1
图 2 BAA浓度对嫣红蔓芽苗增殖率的影响
Fig 2 Effect NAA concentration on multiplication rate shoots
在 18种组合的增殖培养基中 ,以 BA 0.3 mg/L
及 BA 0.3mg/L +NAA 0.01 mg/L组合的芽苗增殖率
(306%)最高 ,其次为 BA 0.3 mg/L +NAA 0.02的组
合(285%),增殖率最低(119%)的为不含任何激素的
培养基 。所有组合的平均增殖率为 207%(表 1)。因
此 ,从增殖率看 ,嫣红蔓最佳的芽苗增殖培养基是 1/
2 MS+BA 0.3 mg/L +NAA 0 ~ 0.01 mg/L。
表 1 激素组合对芽苗增殖率的影响
Table 1 Effect of hormone composition on the multiplication of shoots
激素/mg·L -1
Hormone
BA NAA
接 种 数
No.of
inoculation
芽苗数
No.of
shoots
增殖率/ %
Multiplication
percent
激素/mg·L-1
Hormone
BA NAA
接种数
No.of
inoculat ion
芽苗数
No.of
shoots
增殖率/ %
Multiplication
percent
0 0 32 38 119 0.5 0.01 32 84 263
0.1 0 32 77 244 0 0.02 40 70 175
0.2 0 31 84 262 0.1 0.02 40 50 125
0.3 0 32 98 306 0.2 0.02 40 54 135
0.5 0 32 60 188 0.3 0.02 21 57 285
0 0.01 16 24 150 0.5 0.02 32 62 194
0.1 0.01 40 68 170 0 0.05 40 60 150
0.2 0.01 32 89 281 0.1 0.05 39 58 145
0.3 0.01 32 98 306 0.2 0.05 40 88 220
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2.3 激素组合对芽苗增高的影响
芽苗在不同浓度 BA与 NAA 组成的增殖培养基
中生长高度也各有不同(图 3)。从单因子看 ,无 BA
培养基的平均苗长最短 ,在BA浓度为0.2 mg/L时平
均苗长最长;从 NAA的影响来看 ,当 NAA 浓度为 0
mg/L ,0.01 mg/L ,0.02 mg/L ,0.05 mg/L时 ,其芽苗的
平均苗长分别为2.4 cm ,2.0 cm ,1.9 cm ,1.7 cm ,表明
NAA的存在不利于芽苗的增高。因此在所有 18个组
合中 ,在只含 BA 0.1 mg/L 的培养基上的芽苗最长
(平均 3.2 cm),其次为 BA 0.2 mg/L 的培养基(平均
3.1 cm)。即从有利于芽苗增高的角度看 ,最佳增殖
培养基当为1/2MS+BA 0.1 ~ 0.2 mg/L。
2.4 芽苗生根与瓶苗移栽
在 IBA浓度分别为 0.01 mg/L ,0.02 mg/L , 0.05
mg/L的几种生根培养基中 , 嫣红蔓的芽苗出根很
快 ,且生根率都很高 ,分别为 97.7%, 99.1%,100%与
100%。只是 IBA的浓度越高其根越粗短 ,愈伤化也
愈严重 ,生根苗的长势也较差 。从生根率 、根数 、根
长 、根粗及小苗长势综合比较 ,嫣红蔓的最佳生根培
养基是1/2MS+IBA 0.01 mg/L。
将生根的健壮小苗从瓶内取出 ,用水洗去根部的
培养基后 , 浸泡到 500 倍托布津水溶液中处理 10
min ,然后移栽到经 0.1%的高锰酸钾消毒的由珍珠
岩 ∶河沙∶腐殖土为 1∶1 ∶1的基质中。前 1周罩上
塑料薄膜 ,保湿遮荫 ,以后逐步透气透光 ,20 d开始常
规管理 ,成活率 82.4%。
3 讨论
嫣红蔓茎段及茎尖在初代培养中出现了玻璃化
现象 ,且培养愈久愈严重 。比较而言 ,在激素浓度相
同的情况下 ,MS 比 1/2 MS 培养基上的更严重 ,表明
嫣红蔓的离体培养适宜盐浓度相对较低的培养基 ,这
一点与丰 峰等[ 2]在芦荟上的试验结果较一致;此外
在 1/2 MS BA 0.5 mg/L +NAA 0 ~ 0.02 mg/L 的增殖
培养基中玻璃化也较严重 ,而 BA浓度低于 0.3 mg/L
时没有玻璃化现象发生 ,说明嫣红蔓与香石竹[ 3] 、重
瓣丝石竹[ 4]等一样 ,对 BA很敏感。
在继代培养中发现 ,芽苗增殖的最佳培养基是
1/2 MS+BA 0.3 mg/L +NAA 0 ~ 0.01 mg/L ,而最有
利于芽苗增高的培养基却为 1/2 MS +BA 0.1 ~
0.2 mg/L ,两者不一致 。因此 ,建议在实际应用中 ,将
2种培养基交替使用 ,这样便能保证既有较高的增殖
率 ,繁殖的芽苗又比较长。相对说来 ,1/2MS+BA 0.
2 mg/L +NAA 0.01是一个两者均能兼顾的比较好的
配方。
在本试验中 ,瓶苗的移栽成活率不高 ,今后在基
质的选配与管理方法方面需要改进 。
参考文献:
[ 1]  卢思聪 , 卢 炜 ,朱崇胜 ,等.室内观赏植物[ M] .北京:
中国林业出版社 , 2000.99.
[ 2]  丰 峰 , 李洪波.芦荟组织培养中试管苗玻璃化的发生
与防止[ J] .西南农业大学学报 , 2001 , 23(5):449-451.
[ 3]  高疆生 , 张卫芳 , 段黄金 , 等.克服香石竹试管苗玻璃化
研究[ J] .北方园艺 , 2001 ,(3):34-36.
[ 4]  刘非燕 , 郭达初.重瓣丝石竹试管苗玻璃化发生原因初
探[ J] .杭州大学学报(自然版), 1996 , 23(4):382-387.
63第 26卷第 1期          王力超等 嫣红蔓离体繁殖技术研究