全 文 ：第 28卷第 5期 　　　西　南　农　业　大　学　学　报 (自然科学版 ) Vol.28, No.5
2006年 10月 JournalofSouthwestAgriculturalUniversity(NaturalScience) Oct.2006
文章编号:1000-2642(2006)05-0798-04
不同倍性阳桃离体快繁条件比较试验
王力超 1 ,梁国鲁 1, 2
(1.西南大学 园林园艺学院 ,重庆　400716, 2.重庆市农业综合开发研究室 , 重庆　400715)
摘要:以二倍体 、三倍体和四倍体阳桃无菌组培苗为材料 ,研究了不同倍性阳桃增殖 、生根和移栽的条件与方法。
结果表明 , MS+BA1.0 mg/L+NAA0.2mg/L的培养基最有利二倍体阳桃的增殖 , 三倍体和四倍体阳桃的最佳增殖
培养基是 MS+ZT2.0 mg/L+NAA0.1 ～ 0.2 mg/L;通过两步法诱根培养(即先在 1/2 MS+IBA20 mg/L培养基中培
养 48 h,然后转入到无激素的培养基中培养)生根率分别能达到 81.5%, 90.6%和 63.6%;移栽成活率各有 86.7%,
75.0%和 77.8%。
关　键　词:阳桃;倍性;离体繁殖
中图分类号:S662.1;Q945.5　　　　　　　　　　　文献标识码:A
ACOMPARATIVEEXPERIMENTSONTHECONDITIONSFORRAPID
PROPAGATIONOFDIFFERENTPLOIDYCARAMBOLA
WANGLi-chao1 , LIANGGuo-lu1 , 2
(1.ColegeofHorticultureandLandscape, SouthwestUniversity, Chongqing400716, China;2.LaboratoryofComprehensiveAgricultur-
alDevelopment, Chongqing400715, China)
Abstract:Sterilizedplantletsofdiploid, triploidandtetraploidcarambola(Averrhoacarambola)wereusedasexperimentmaterialsto
studytheoptimumcultureconditionsforthemultiplication, rootingandtransplantingoftheplant.Thebestmediumforthemultiplication
wasMS+BA1.0 mg/L+NAA2.0 mg/LforthediploidsandMS+ZT2.0 mg/L+NAA0.1 ～ 0.2 mg/Lforthetriploidsand
tetraploids.Intwo-steprootageculture, i.e.culturein1/2 MS+IBA20 mg/Lfor48 h, folowedbycultureinahormonelessmedi-
um), therootingratewas81.5%, 90.6%and63.6%, respectively, forthediploid, triploidandtetraploidplantlets, andtheirsurvival
rateaftertransplantingwas86.7%, 75.0% and77.8%, respectively.
Keywords:carambola;ploidy;invitropropagation
　　阳桃 (AverrhoacarambolaL.)亦名杨桃 ,系酢浆
草科阳桃属常绿乔木 。其果形美味甜 ,营养价值高 ,
是著名的热带水果和观赏植物 ,在我国南方有较多的
栽培[ 1] 。一般的栽培阳桃为二倍体植株 ,果实不大 ,
种子较多 ,现已陆续培育出了三倍体和四倍体等多倍
体新类型[ 2 ～ 3] ,为选育大果 、无籽杨桃新品种奠定了
重要基础。
离体无菌培养是提高苗木繁殖率 、培育优质种苗
的有效方法 ,在很多果树 、花卉等园艺植物上得到了
广泛采用 [ 4 ～ 5] 。但目前国内外有关阳桃离体繁殖的
研究较少 [ 6 ～ 8] ,更未见多倍体植株快繁技术的报道 。
本试验旨在通过对二倍体 、三倍体和四倍体阳桃离体
繁殖条件的比较 ,研究不同倍性阳桃适宜的增殖 、生
根和炼苗移栽技术与方法 ,为将来能快速培育出多倍
体阳桃品种的优质种苗 ,建立多倍体阳桃工厂化快速
繁殖技术体系提供参考依据 。
收稿日期:2006-06-20
基金项目:广东省科委农业攻关资助项目(2003c201077)
作者简介:王力超(1959-),男 ,重庆合川人 ,西南大学副研究员 ,从事园艺 、园林植物育种及组织培养的教学与科研。
DOI :10.13718/j.cnki.xdzk.2006.05.024
1　材料与方法
1.1　试验材料
供试材料为本研究室保存的阳桃二倍体 (2n=
2x=22)、三倍体(2n=3x=33)和四倍体(2n=4x=
44)植株的无菌组培苗 。
1.2　培养基基本组成
培养基为 MS配方 ,增殖培养基由 MS附加不同
浓度的 BA, ZT与 NAA等激素配合组成;以含不同浓
度 IBA的 1 /2 MS培养基作生根试验 。各种培养基
还加蔗糖 30 g/L(生根培养基 20 g/L),凝固剂卡拉
胶 6 g/L, pH调至 5.8。
1.3　试验方法
1.3.1　增殖培养
取 1.0 ～ 1.5 cm长的无根嫩茎转入各增殖培养
(表 1)中 ,每处理 10瓶 ,每瓶 3 ～ 4苗。 30 d后统计
增殖效果。
1.3.2　生根培养
取 1.5 ～ 2.0 cm长的无根嫩茎转入生根培养进
行诱根培养 ,每处理 10瓶 ,每瓶 3苗 , 40 d后统计生
根率 。包括一步法和两步法 。一步法诱根培养是将
嫩茎直接接种到添加有低浓度 NAA或 IBA生根培养
基(表 2)中 ,直至生根;两步法是将嫩茎先在含 IBA
20 mg/L培养基中培养一定时间(表 3),然后再转入
到无激素的培养基中 ,直至生根 。
1.3.3　组培苗的移栽
将生根的小苗从瓶内取出 ,用水洗去根部的培养
基后 ,然后移栽到不同的混合基质里(移栽法 1:直接
定植在由珍珠岩 、椰糠和河沙按 1 ∶1 ∶1的比例混
合的基质中;移栽法 2:直接定植在由园土 、腐叶土和
河沙按 2 ∶2 ∶1的比例混合的基质中;移栽法 3:先
栽培第 1种基质中 , 30d后再移栽到第 2种基质中)。
前 10 d罩上塑料薄膜 ,保湿遮荫 ,以后逐步透气 、透
光 , 20 d后开始常规管理 , 60 d时统计移栽成活率 。
1.4　培养环境条件
将接种好的材料置于约 1 500 lx的光照条件下
培养 ,日光灯照明 14 h/d,培养温度为 22±3℃。
表 1　激素组合对嫩茎增殖率的影响
Table1　Theefectofdiferenthormonecompoundingonshoot smultiplication
植株类型 激素 /(mg· L-1) 接种数 增殖数 增殖率 生长状况
二倍体
BA1.0+NAA0.1
BA1.0+NAA0.2
BA2.0+NAA0.1
BA2.0+NAA0.2
ZT1.0+NAA0.1
ZT1.0+NAA0.2
ZT2.0+NAA0.1
ZT2.0+NAA0.2
28
27
30
31
29
33
26
34
81
94
100
93
64
69
73
97
2.9
3.5
3.3
3.0
2.2
2.1
2.8
2.9
褐化轻 、淡绿
褐化轻 、愈伤化 、淡绿
褐化轻 、绿色
褐化轻 、愈伤化 、淡绿
愈伤少 、绿色
伤化 、绿色
愈伤少 、绿色
愈伤化 、绿色
三倍体
BA1.0+NAA0.1
BA1.0+NAA0.2
BA2.0+NAA0.1
BA2.0+NAA0.2
ZT1.0+NAA0.1
ZT1.0+NAA0.2
ZT2.0+NAA0.1
ZT2.0+NAA0.2
29
32
26
33
28
26
30
27
49
61
81
109
70
73
96
97
1.7
1.9
3.1
3.3
2.5
2.8
3.2
3.6
易褐化 、偏黄
易褐化 、愈伤化 、偏黄
易褐化 、偏黄
易褐化 、愈伤化
愈伤少 、绿色
愈伤少 、绿色
愈伤少 、绿色
愈伤少 、绿色
四倍体
BA1.0+NAA0.1
BA1.0+NAA0.2
BA2.0+NAA0.1
BA2.0+NAA0.2
ZT1.0+NAA0.1
ZT1.0+NAA0.2
ZT2.0+NAA0.1
ZT2.0+NAA0.2
38
28
31
30
29
31
27
35
76
62
96
99
67
81
100
119
2.0
2.2
3.1
3.3
2.3
2.6
3.7
3.4
易褐化 、偏黄
易褐化 、愈伤化 、偏黄
易褐化 、偏黄
易褐化 、愈伤化 、偏黄
愈伤少 、绿色
愈伤少 、绿色
愈伤少 、绿色
愈伤少 、绿色
799第 28卷第 5期　　　　　　　王力超等　不同倍性阳桃离体快繁条件比较试验
2　试验结果
2.1　激素组合对嫩茎增殖率和苗高及长势的影响
取不同倍性阳桃无菌嫩茎培养在不同浓度 BA,
ZT与 NAA组成的增殖培养基(表 1)中培养 , 30 d后
发现:在 BA, ZT浓度相同的条件下 ,无论是二倍体 、
三倍体还是四倍体的嫩茎 ,在 NAA为 0.2mg/L培养
基上的增殖率一般比 NAA0.1 mg/L时有不同程度
的提高;二倍体阳桃在有 BA的培养基中增殖率高于
同浓度 ZT培养基的增殖率;而与之相反 ,三倍体和
四倍体阳桃在添加 BA的培养基中易发生褐变和黄
化 ,长时间培养还出现茎尖枯死现象 ,增殖率不及添
加有同浓度 ZT的培养基高 。
综合起来看 , 在供试的 8种增殖培养基中 , BA
1.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基最有利二倍体阳
桃的增殖 ,增殖率高达 3.5倍 ,苗生长好 ,褐化轻;三
倍体阳桃的最佳增殖培养基是 ZT2.0 mg/L+NAA
0.2 mg/L,增殖率有 3.6倍 ,苗绿色;而四倍体阳桃的
最佳增殖培养基是 ZT2.0mg/L+NAA0.1 mg/L,增
殖率可达 3.7倍 ,且苗绿色 、不落叶。
2.2　不同诱根培养法的诱根效果
将接种于生根培养基上的阳桃苗的生根情况加
以对照可以看出 ,在一步法诱根培养中 , NAA的诱根
效果均不及同浓度的 IBA(表 2),而且各类倍性的阳
桃都是在含 IBA0.2 mg/L诱根培养基中生根率最
高 。其中 , 二倍体生根相对容易一些 ,生根率可达
65.5%, 三倍体和四倍体的生根率仅有 43.3%和
37.0%。同时还发现 , IBA的浓度越高 ,小苗的黄化
率和枯死率也越高 ,三倍体和四倍体的枯死率均高达
30%左右 。
表 2　生长素浓度对嫩茎生根的影响./一步法诱根培养
Table2　Theefectonrootageofauxinconcentration./one-steprootageculture
植株类型 生长素 /(mg· L-1) 接种数 生根苗数 生根率 /% 枯死率 /% 初根期▲ /d
二倍体
NAA0.1
NAA0.2
IBA 0.1
IBA 0.2
30
28
30
29
1
3
8
19
3.3
10.7
26.7
65.5
3.3
7.1
6.7
10.3
25
22
23
21
三倍体
NAA0.1
NAA0.2
IBA 0.1
IBA 0.2
30
30
28
30
0
5
7
13
0
16.7
25.0
43.3
16.7
23.3
25.0
30.0
24
28
28
四倍体
NAA0.1
NAA0.2
IBA 0.1
IBA 0.2
26
30
29
27
2
6
7
10
7.7
20.0
24.1
37.0
19.2
30.0
20.7
29.6
30
27
23
26
　　注:▲第一次生根的时间(下同)。
Note:Timeofproducingroots.
　　通过两步法诱根培养(即先在 IBA20mg/L培养
基中培养若干 h,然后转入到无激素的培养基中培
养),一般仅 2周左右都能发根 ,初根期比一次诱根
培养早 ,生根率也大大提高(表 3)。虽然具体的生根
率因阳桃倍性而异 ,但都以激素处理 48 h的为最佳 ,
二倍体 、三倍体和四倍体的生根率分别达到了
81.5%, 90.6%和 63.6%。更长时间的处理枯死率
更高。
表 3　IBA处理时间对嫩茎生根的影响./两步法诱根培养
Table3　TheeffectonrootingofIBAfordiferentdisposaltime./two-steprootageculture
植株类型 IBA处理时间 /h 接种数 生根苗数 生根率 /% 枯死率 /% 初根期 /d
二倍体
24
48
72
30
27
25
16
22
7
53.3
81.5
28.0
8.6
12.4
31.7
14
10
12
三倍体
24
48
72
34
32
24
22
29
6
64.7
90.6
25.0
6.7
9.4
36.4
17
14
12
四倍体
24
48
72
28
22
26
12
14
5
42.8
63.6
19.2
12.6
22.7
51.3
15
13
11
800 西　南　农　业　大　学　学　报　(自然科学版)　　　　　　　　2006年 10月
2.3　不同移栽方法的成活率
从移栽 60 d后的统计(表 4)结果可以看到 ,无
论何种倍性的阳桃 ,直接定植到由园土 、腐叶土和河
沙按 2∶2∶1的比例混合的基质中(方法 1)的成活
率都很低 ,仅 10%左右:一直定植在由珍珠岩 、椰糠
和河沙按 1∶1∶1的比例混合的基质中(方法 1)的
阳桃组培苗成活率相对高一些 ,但也仅有 33.3% ～
51.7%,而且苗的长势较差;而先在第 1种基质中培
育 30 d后再移栽到第 2种基质中(方法 3)的阳桃成
活率显著高于前二者 ,且小苗生长健壮 ,二倍体 、三倍
体和四倍体的成活率分别达到了 86.7%, 75.0%和
77.8%。
表 4　不同移栽方法的效果比较
Taple4　Theefectcomparisonofdiferenttransplantmethod
植株类型 移栽方法 移栽苗数 成活苗数 成活率 /% 生长势
二倍体
方法 1
方法 2
方法 3
29
25
30
19
3
26
65.6
12.0
86.7
淡绿 、细弱
绿色
浓绿 、健壮
三倍体
方法 1
方法 2
方法 3
28
27
24
17
3
18
60.7
7.4
75.0
淡绿 、细弱
绿色
浓绿 、健壮
四倍体
方法 1
方法 2
方法 3
30
26
27
19
2
21
63.3
7.7
77.8
淡绿 、细弱
绿色
浓绿 、健壮
3　分析与讨论
3.1　染色体倍性与培养条件的关系
二倍体 、三倍体和四倍体阳桃的最佳增殖培养基
分别是 MS+BA1.0 mg/L+NAA0.2mg/L, MS+ZT
2.0mg/L+NAA0.2 mg/L和 MS+ZT2.0 mg/L+
NAA0.1 mg/L;先在 1 /2 MS+IBA20 mg/L培养基
中培养 48h,然后转入到无激素的培养基中培养 ,其
生根率分别为 81.5%, 90.6%和 63.6%。这表明 ,不
同倍性阳桃增殖和生根的条件各有不同。尤其在增
殖培养中 ,二倍体阳桃在含 BA的培养基中基本上能
正常生长和增殖 ,而三倍体和四倍体阳桃的增殖培养
却需要添加比 BA活性更强的 ZT。出现这种现象的
原因可能是属于多倍体的三倍体和四倍体 ,新陈代谢
旺盛 ,生理活性强于二倍体 [ 9] ,所以在离体培养中也
需要活性更强的细胞分列素。
3.2　两步生根法的效果
万蜀渊 [ 10]指出 , 对于生根困难的植物 ,两步生
根法比一步生根法效果好。对于难生根的阳桃 [ 7] ,
采用两步法不仅能大大提高其生根率 ,而且初根期可
比一步法提前 10d左右。于亚军 [ 11]等认为 ,出现这
种现象的原因 “可能是根原基的形成需要生长素的
存在 ,而根原基形成后的幼根生长并不需要高浓度的
生长素 ”,但这一说法还有待进一步的证明 。
3.3　基质对移栽效果的影响
阳桃是热带果树 ,喜湿怕干[ 1] ,在由珍珠岩 、椰
糠和河沙等组成的保湿性和透气性皆好的基质中的
成活率比由园土 、腐叶土组成的营养丰富 ,透气性不
足的基质高得多 ,但成活植株的长势欠佳。先在第 1
种基质中培育 30d后再移栽到第 2种基质中的第 3
种移栽方法 ,分阶段地利用了 2种基质的优点 ,故能
取得更好的移栽效果。
参考文献:
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责任编辑:陈绍兰
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