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浙贝母种胚的离体培养



全 文 :浙 贝 母 种 胚 的 离 体 培 养
浙江省中药研究所 (杭州 1 30 0 23)苏 新
摘要 本文报道了浙贝母 F r汀 il l a r` at h u” be g了 i种胚 , 经 M S + 2 , 哎一 D l . c rn g / L + 6一 B A o . sm g / I·
十水解酪蛋白 30 0m g / L和M S + I B A O . s m g / L + 6一 B A I . Om g / L 等 培养基分化和脱分化后 , 形成小鳞茎
和正常植株 。
关键词 浙贝母 胚 离体培养
浙贝母为百合科多年生草本植物 , 具有清
热润肺 、 燥湿化痰的作用 , 是一味常用中药。
因浙贝母种子有休眠 , 自然条件下从播种到出
苗长达五个月 。 生产上常用鳞茎繁殖 。 本试验
利用胚培养技术 , 以打破种子的休眠 , 使之提
前萌发出苗 , 并有可能使很多发育不 良的胚成
为正常植株。
1 材料与方法
浙贝母 F r ` t艺不不a r 名a t h u n be g乞£M iq . 的果实
在五月中旬成熟 , 其种子由种皮 、 胚乳及未分
化的球形胚所组成 。 未分化的球形胚位于胚乳
的基端。 供试种子采于本所试验地 。 种子先用
清水浸泡三天 , 使种胚吸水膨胀 , 易于分离 ,
然后置于解剖镜下分离出种胚 。 分离前种子用
70 %酒精浸半分钟 , 再放 入 0 . 1%升汞中消毒
10 分钟 , 用无菌水冲洗 2 一 3 次 , 在无菌条件
下剥出种胚接种至琼脂培养基上 。 培养基基本
成分为琼脂 。 . 6% , 蔗糖 6 % 。 接种后置于不
同光照及不同温度下培养。
2 结果与分析
2
.
1 不同光暗条件的影响
将浙母 种 胚 接 种在 M S + 2 , 4一 D l . om g /
L + 6一 B A 。· sm g / L + 水解酪蛋白 3 o om g / L培养
基上 , 置于不同光暗条件下培养 , 温度巧℃ 士
1 ℃ 。 结果见表 1 。
从表 1 可以看出 , 浙贝母种胚 以先暗培养
一段时期转弱光培养为好 , 暗培养 3。天比 15 天
好 , 在连续弱光和强光下培养的浙贝母种胚萌
发率比先经暗培养的萌发率低 , 但二者差异不
大 。
2
.
2 不同温度的影响
将浙贝母种胚置于不 同温度中培养 , 培养
基同上 , 结果见表 2 。
浙贝母种胚以 15 ℃萌发和生长最好 , 萌发
率达 6 9 . 3% , 5 ℃萌发率最差 。
表 1 不同光暗条件对浙贝母种胚发芽的影晌
种胚数 萌发数 ( %
暗培养 1 5天后转弱光 ( 5 0 0 L x ) 9 2 5 4培养 4 5天 (
5 8
.
6 )
暗培养 3 0天后转弱光 ( 5 0 0L x ) 8 7 5 5培养30 天 ( 6
3

2 、
弱光下培养 ( 5 0 0 L x ) 6 0天
强光下培养 ( 3 00 0L x ) 6 0天
8 3
8 8
4 3
4 2
( 5 1

8 )
( 4 7

7 )
表 2 不同温度对浙贝母种胚萌发的影响
温度 种胚数 萌发数 ( % )
5 ℃ 7 8 0 ( 0 )
1 0℃
1 5 oC
9 3
8 8
4 2 ( 4 5

1 )
6 1 ( 6 9
.
3 )
2 0℃ 1 6 ( 1 9 。 7 )
2
.
3 不同培养基的影响
在浙贝母种胚培养中试用了 M S 、 w ih et 、
L S 三 种培养基 , 结果证明种胚在三种培养基
上都能够很好地萌发和生长 , 不 同 的是 , M S
培养基对浙贝母种胚成苗的高生长促进效果优
于其它二种培养基 。
2
.
4 生长分化情况
浙贝母种 胚 在 M S 十 2 , 4一 D l . Om g / L + 6-
B A 0
.
s m g / L + 水 解酪蛋 白 30 Om g / L 的培养基
上培养50 一 70 天后产生胚性愈伤组织 , 但生产
极为缓慢 。 为了使其尽快地成苗 , 转入 M S +
币药材第i感卷穿亏忍期 i丁 g 石不乞月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1995. 02. 004
I BA O
.
s mg /L十 6一 BA I
.
m Og /L的 分 化培养基
后 , 愈伤组织开始增值 , 并在其表面有 “ 叶状
物” 的分化 , 而且开始有小鳞茎形成的迹象 。
将这些有分化物的愈伤组织 转 到 不 加激素的
1八 M S培养基上 , 最终形成小鳞茎 。 继代培养
后分化出芽 , 长成苗 , 并于其鳞茎基部分化出
根 , 形成完整的植株 。
3 结 论
试验证明 , 浙贝母种胚通过组织培养的方
法可使其萌发 , 并经脱分化培养诱导形成愈伤
组织 , 再经分化培养 , 可形成大量的小鳞茎 ,
然后形成正常的植株 。 这一结果达到本试验的
预期目的 , 为贝母的 一育种 , 尤其是杂交育种提
供了前景 。
( 1 9 9 4一 0毯一 2 5收稿 )
三 叶 木 通 育 苗 研 究
河南省西峡县农业 区划办公室 ( 西峡县 4 74 5 0 0 ) 魏训成
西峡县人民医院 封银海 郭少杰 陈洪涛 封延峰
西峡县农业科学研究所 崔国林
摘要 三叶木通不同育苗方法的试验结果 : 1) 压条育苗成活率高于种子和扦插育苗 , 但大量育苗
难以使用 ; 2) 种子风干易丧失发芽力 , 宜用湿沙贮藏越冬 ; 3) 冬 季 采剪的插条 , 用湿沙贮藏 , 翌年
春季扦插 , 其成活率高过春季即采即扦擂 ; 封 10 p pm A B T 生根粉和蔡 乙酸可促进插条生很 。
关键词 三叶木通 种子 压条 扦插 育苗 比较
三叶木通 A瓦e b艺a 艺r云f o Z艺a t a 是常用理气中
药八月炸的基源之一 , 其根 、 茎 、 叶 、 果和种
子也是人和畜常用的药材 。 有关三叶木通育苗
技术在药用植物栽培中 未 见 报 导 。 笔者等自
19 8 9年开展三 叶木通育苗试验 , 旨在提高三叶
木通的繁殖系数 , 并尽快变野生为栽培 , 增加
药源和引入庭院作美化植物。
1 材料和方法
材针 种子 , 选用三 叶木通成熟种子 , 于
八月上旬至九月下旬采摘 , 去 掉 果 皮 果肉 ,
湿砂埋藏。 藤条 , 选用一 、 二年生健壮嫩条 ,
每三节为一段 , 上 端于 节 上 1一 2 厘米处剪
平 , 下端于节下 1一 , m 处斜剪为马蹄形 , 并
用湿沙 埋 藏 越 冬 。 压条 , 选用二 、 三年生健
壮 , 并易拉葡于地面的藤条。
方法 种子于播前 15 一 20 天将冬贮种子清
除砂粒后 , 用布袋或瓦盆装盛 , 上盖湿纱布 ,
放于室温 8 一 10 ℃内 , 每天用温水冲洗一次 ;
或将冬贮种子用湿砂埋子地沟内 , 上盖塑料薄
膜 ; 或在大棚内挖畦埋种 , 经常洒水以保持湿
润 。各处理均待种子有 30 %萌动时播种 。苗床宽
l m
, 开沟条播 , 沟间距 I C c m , 沟宽 s c m , 沟深
4一 sc m , 种子复土 2 一 4c m , 播后轻轻镇压 ,
上盖稻草或麦秸 5 一 Cc m , 或用塑料薄膜架小
拱棚 , 待出苗后撤去稻草或拱棚 。 扦插育苗于
四月中旬将冬贮插条和春 季 采 的 插条 , 或用
A B T 生根粉溶液和蔡乙酸处理 , 以 1 0 x ZCc m
株距垅栽。 插 条 斜 插 入二节 , 浇水复土后踏
实 , 地面只露出一节 。 压条育苗 , 因三叶木通
的藤条有落地生根的能力 , 在四月下旬将二 、
三年生健壮藤条拉韧于地面 , 每隔 1 一 2 节 ,
在被压节的着地处挖宽 10 一 1c6 m 、 深 1 5c m 的
坑 , 再顺藤条走向在坑内挖一条深 , m小沟 ,
把藤条压下 , 复土 10 Cm 踏实 , 待 节上生魂热 、
长 3一邪m 时 , 切断藤条即为一株新生苗 。
2 结果与分析
2
.
1 湿砂贮 藏种子与 风 千种 子对 出苗率的影
响 1 9 9 1一 1 9 9 3年所作的试验 , 结果见丧 1 。
中钓刊第 1 8卷第 2 期 1 0 9 5 年 2 月