全 文 ：中　国　药　科　大　学　学　报
Journa l of China Pharmaceutical Universi ty　 1999, 30( 2): 103～ 107
中药元胡、丹参、芍药中有机氯残留量的测定
⒇
丛晓东　李　颖　方　卫 1　陈碧莲 2　俞剑平 2
(中国药科大学中药分析教研室 ,南京 210009)
摘　要　以对 -硝基甲苯为内标 ,采用 3 m× 3 mm ID OV-17填充柱 , 195～ 290℃柱温 , 320℃进样器和检测
器温度 ,以 ECD为检测器 ,高纯氮气为载气 ,测定了 16件元胡 , 10种丹参及 6个不同等级的芍药药材中有机氯 (六
六六、 DDT)农药的残留量。样品净化处理较彻底 ,各异构体回收率从 85. 21%到 103. 0% ,线性范围为 5～ 900 ng。
样品中各异构体检出结果为 1. 389× 10- 3～ 0. 8023μg /g。
关键词　对 -硝基甲苯 ; 有机氯 ; 六六六 ; 氯苯乙烷 ; 残留量 ; 气相色谱法 ; 元胡 ; 丹参 ; 芍药
　　中药的农药残留问题主要为有机氯污染 ,被污
染的中药严重影响了用药安全性。目前 ,中国药典 ,
地方标准及出口标准中尚未见中药农药残留量的
标准 ,因此 ,研究中药农药残留量 ,制订其残留标准
显得非常重要。资料表明 [ 1]有机氯半衰期达 20～ 30
年之久 ,栽培中药 (药用部位为地下部分 )受污染的
机会最大 ,因此本研究选择了不同产地、不同等级
的常用栽培中药 ,元胡、丹参及芍药为研究对象 ,建
立了这三类中药有机氯残留量的测定方法 ,目前尚
无关于它们中有机氯残留量的报道。本文报道了样
品的提取 ,净化及 EC-GLC(对 -硝基甲苯为内标 )
色谱条件。结果表明净化方法简便 ,色谱条件较佳 ,
32件中药均受到不同程度的污染。
1　实验部分
1. 1　仪器与试剂
Shimadzu GC-9A气相色谱仪 ; C-R 3A微处
理机 ; 3% OV -17; Ch romosorb W AW-DMCS, 80
～ 100粒度 ;柱 3 m× 3 mm ID;电子捕获检测器 ; 1
μl、 100μl微量注射器 ;小型粉碎机。
有机氯标准品: α-HCH、γ-HCH、 β -HCH、δ-
HCH、 pp′-DDE、 op′-DDT、 pp′-DDD、 pp′-DDT
(色谱纯 )均购自 Sigma公司 ,含量为 99% ;石油醚
( bp 30～ 60℃ , AR) ;正己烷 ( AR) ;无水硫酸钠
( AR) ;对 -硝基甲苯 (中国药科大学物理化学教研
室提供 ,精制后含量为 99. 6% )。
1. 2　样品来源
中国药科大学生药学教研室标本室 ,均经复核
查对 ,来源见表 1。
1. 3　色谱条件
色谱条件参考文献 [1, 2, 4 ]并加以改进 ,增加合
适的内标对 -硝基甲苯 ,最后条件确定为三阶程序
升温 ,起始柱温 195℃ ,维持 7. 5 min,一阶终温
220℃ ,升温速率 7℃ /min,维持 16 min;二阶终温
245℃ ,升温速率 35℃ /min,维持 7 min;三阶终温
290℃ ,升温速率 35℃ /min,维持 5 min; ECD检测
器 ;进样室温度 320℃ ;高纯氮载气 ;流速 30 m l /
min; ECD微电流 0. 5 nA; RANGE 1;进样量 1μl。
1. 4　样品处理
样品处理方法参考文献 [2, 3 ]并加以改进:取药
材粉末 ,过 40目筛 ,准确称取 5 g ,置于 100 m l锥形
瓶中 ,加石油醚 50 m l,超声振荡 20 min,抽滤 ,以石
油醚 10 ml分次洗涤残渣 ,滤液转移置 125 ml分液
漏斗中 ,其中加入浓 H2 SO410 m l,振摇 ,将下层混
浊液弃去 ,在上清液中加入 2% Na2 SO4溶液 25 m l,
振摇 ,静置分层后 ,弃去下层 ,令上层通过底部装有
无水 Na2 SO4 10 g的漏斗 , 滤液接置 100 ml茄形瓶
中 ,减压抽干 ,备用。
1. 5　标准曲线及线性范围
1. 5. 1　标准贮备液的配制
精密称取 α-HCH、γ-HCH、 β-HCH、δ-HCH、
pp′-DDE、op′-DDT、 pp′-DDD、 pp′-DDT各 1 mg,
103
⒇ 收稿日期　 1998-08-26　 1西安市药材公司 ; 2浙江省药品检验所　中国药科大学基金资助课题
Tab 1. Specimen original
Serial
No.
Habi tat [ Specimen num ber ] ( Grade) Scient ifi c name( Chines e name)
1 Shanghai [365( 5) , 128-2 ]
2 Hubei Lichuan [392, 128-28-1 ]
3 Jiangsu Nantong *[376, 128-12 ]
4 Jiangsu Nantong * *[375, 128-12 ]
5 Hunan [382, 128-19 ]
6 Hubei Lichuan [391, 128-28 ]
7 Zh ejiang Dongyang [352, 128 ]
8 Zh ejiang Dongyang [364, 128-1-2 ]
Corydal is yanhusuo W. T. Wang (元胡 )
*Nantong plan ted f rom Zh ejiang Dong yang, w ater proces sing;
* *Nantong plan ted f rom Zh ejiang Dong yang
9 Sh enyang [394, 136-1 ] C . tu rtschaninovii Bes s. (齿瓣元胡 )
10 Zh ejiang [55, 25-1 ] Corydal is yanhusuo W. T. Wang (元胡 )
11 Zh ejiang Dongyang [363, 128-1-1 ]
12 Sh enyang [393, 136 ] C . ambigua Cham. et Schl td. (东北元胡 )
13 Zh ejiang Dongyang
14 Jiangsu Nantong * *[377, 128-14 ]
Corydal is yanhusuo W. T. Wang (元胡 )
* *Nantong plan ted f rom Zh ejiang Dong yang
15 Jilin [395, 131 ] C . ambigua Cham. et Schl td. (东北元胡 )
16 Hunan [318, 128-18 ] Corydal is yanhusuo W. T. Wang (元胡 )
17 Anhui Salvia sin ica Mig o f . pu rpurea H. W. Li (紫花浙皖丹参 )
18 Anhui S. pa ram il tiorrhiza H. W . Li et X. L. Huang f . purpureorubra; (紫花
拟丹参 )19 Shanghai S. m il tiorrhiza Bunge (丹参 )
20 Sich uan S. p rzewalskii Maxim var . manda rinorum Stib. (褐毛甘西鼠尾 )
21 Yunnan S. digi taloides Diels (大紫丹参 )
22 Shandong S. m il tiorrhiza Bunge (丹参 )
23 Anhui S. pa ramil tiorrh iza H. W. Li et X. L. Huang (拟丹参 )
24 Jianxi S. bowleyana Dunn (南丹参 )
25 Yuanna S. tr ijuga Diels (三叶鼠尾 )
26 Yunna S. yunnanensis C. H. W right (云南鼠尾 )
27 Zh ejiang( Grad e 6)
28 Zh ejiang( Grad e 4)
29 Zh ejiang( Grad e 3)
30 Anhui ( Grade 3)
31 Anhui ( Grade 4)
32 Anhui ( Grade 1)
Peaonia lacti f lora Pal l. var. trichocarpa ( Bung e) Stern (毛果芍药 )
分别于 10 ml的容量瓶中 ,加正己烷溶解 ,定容。再分
别精密吸取α-HCH、γ-HCH各 0. 1 ml ,β -HCH 0.
4ml, δ-HCH 0. 15 m l, pp′-DDE 0. 25 ml, op′-
DDT 0. 7 ml, pp′-DDD 1 m l, pp′-DDT 0. 5 ml置
于 100 m l容量瓶中 ,加正己烷定容 ,得 8个有机氯化
合物的混合标准贮备液 ,简称 A溶液 ,其浓度见表 2。
1. 5. 2　内标溶液的配制
精密称取对 -硝基甲苯 90. 50 mg置 25 ml的容
量瓶中 ,加正己烷溶解 ,定容 ,得 B溶液 ,其内标浓
度为 3. 62 mg /ml;精密吸取 0. 1 m l的 B溶液 ,置 25
m l容量瓶中以正己烷定容得 C溶液 ,其内标浓度
为 14. 48μg /ml;精密吸取 C溶液 5. 0 m l,置 1000
m l容量瓶中 ,以正己烷定容得 D溶液 ,即所配内标
溶液 ,其内标浓度为 72. 40 ng /ml。
Tab 2. Isomer concent rations of HCH and DDT
HCH
isom ers
Conc.
( ng /ml)
DDT
isomers
Conc.
( ng /ml )
α-HCH 100 pp′-DDE 250
γ-HCH 100 op′-DD T 700
β-HCH 400 pp′-DDD 1000
δ-HCH 150 pp′-DDT 500
1. 5. 3　标准溶液的配制
分别精密吸取 A溶液 0. 5, 1, 2, 5 m l各置 10
ml容量瓶中 ,分别加入 C溶液 50μl,以正己烷定
容后 , 4份标准溶液中有机氯的浓度分别为 A液的
1 /20、 1 /10、 1 /5、 1 /2倍 ,内标浓度为 72. 40 ng /m l;
设此 4份溶液代号分别为 1、 2、 3、 4号 ;分别精密吸取
A溶液 2 ml、 5 m l置 5 ml容量瓶中 ,并加入 C溶液
104 　 　 中 国 药 科 大 学 学 报 　 　 30卷
25. 0μl ,以正己烷定容 ,则此 2份标准溶液中有机
氯的浓度为 2 /5、 1倍 ,设此 2份溶液号为 5、 6号、则 1、
2、 3、 4、 5、 6号为所配制的标准溶液 ,其中各份溶液
中有机氯的浓度分别为 A液的 1 /20、 1 /10、 1 /5、 1 /
2、 2 /5、 1倍 ,内标浓度均为 72. 40 ng /ml。
分别精密吸取上述 6份标准溶液各 1μl,进样 ,
每份进样 4次 ,以样品峰面积对内标峰面积比为纵
坐标、样品浓度对内标浓度之比为横坐标、绘制标
准曲线 ,其回归方程、线性范围、相关系数见表 3。
Tab 3. Calibration curv es of 8 is omers of HCH and DDT
Isomer nam e Equation
Linear rang e
( ng)
r
α-HCH Y= 1. 967X+ 0. 1278 5～ 90 0. 9998
γ-HCH Y= 1. 868X+ 0. 5027 5～ 70 0. 9984
β-HCH Y= 0. 7126X+ 0. 4907 20～ 360 0. 9934
δ-HCH Y= 5. 7803X - 0. 1914 7. 5～ 135 0. 9989
pp′-DDE Y= 1. 368X+ 0. 056 12. 5～ 225 0. 9984
op′-DDT Y= 0. 2681X - 0. 05124 35～ 630 0. 9982
pp′-DDD Y= 0. 3830X - 0. 02216 50～ 900 0. 9972
pp′-DDT Y= 0. 9756X+ 1. 791 25～ 450 0. 9995
1. 6　回收率试验
精密吸取 A溶液 (混合标准贮备液 ) 0. 5 ml置
100 ml茄形瓶中 ,减压抽干溶剂后加入内标液 D 2
ml,充分荡匀后吸取 1μl进样 ;于 6只锥形瓶中分别
精密加入 A溶液 0. 5 m l,同 1. 4样品处理项下 ,至
减压抽干后 ,分别加入内标 D溶液 2 m l,充分荡匀
后吸取 1. 00μl进样。将经提取过程的样品峰面积
对内标峰面积比的平均值与未经提取过程的进行
比较 ,其回收率见表 4。
Tab 4. The recoveries of 8 is om ers of HCH and DDT
Name Recovery(% ) R SD(% )n= 6
α-HCH 90. 71 1. 31
γ-HCH 85. 21 1. 06
β-HCH 101. 5 2. 24
δ-HCH 90. 63 0. 97
pp′-DDE 87. 01 2. 02
op′-DDT 100. 5 1. 79
pp′-DDD 103. 0 2. 41
pp′-DDT 95. 26 1. 88
1. 7　样品测定
精密吸取内标 D液一定量 (当某些样品中有
机氯含量超出线性范围时 ,需增大内标 D液加入
量 ,使稀释后其含量在线性范围内 ) ,加入到 1. 4项
下处理过的样品中 ,充分摇匀 ,精确吸取 1μl进样。
将测得的样品中有机氯的峰面积与内标的峰面积
比值 ( Ai /As )代入回归方程中运算 ,求得溶液中各
有机氯的浓度 Ci ( ng /m l) ,再计算出各栽培药材中
有机氯农药的残留量 ,结果分别见表 5、表 6、表 7。
2　结果与讨论
1)为了排除测定干扰 ,本文关键是如何净化处
理样品。有机氯 HCH与 DDT化学性质稳定 ,为中
性脂溶性化合物 ,中药的样品处理可先用脂溶性溶
剂提取 ,用硫酸萃取碱性物质与能被磺化的干扰物
质 ;或用碱水萃取酸性干扰物质 ;或用碱性双氧水
氧化可被氧化的干扰物质 ;电子捕获检测器 ( ECD)
对有机氯有选择性响应 ,灵敏度很高 ,同样也可以
排除一些干扰。
2)分离结果见图 1。
Fig 1. Ch romatograms of resid ues of organo-ch lorin e pesticid e in
the samples ( A: Rhizoma Corydal is; B: standard ) , in w hich 1. α-
HCH ( 6. 88 min) 2.γ-HCH ( 8. 90 min) 3. β-HCH ( 10. 13 min) 4.
δ-HCH ( 11. 33 min) 5. pp′-DDE ( 19. 64 min) 6. op′-DDT ( 25. 02
min ) 7. pp-DDD ( 26. 17 min) 8. pp′-DD T ( 29. 04 min ) IS p-ni-
t rotoluen e ( 1. 90 min )
3)通过对农药残留量的初步实验结果 (见表 5～ 7)
表明: 不同产地或不同等级的栽培中药材都不同程
度的受到有机氯农药污染。
元胡　表 5表明: ( 1)元胡药材中 HCH总量为 2. 561×
10- 3μg /g ( 5号 ,见表 1,下同 )～ 0. 8534μg /g ( 1号 ) ,其中 1～
2号残留量超过国家标准 ( GB 2763-81)。占总检品的 12.
1052期　 丛晓东等: 中药元胡、丹参、芍药中有机氯残留量的测定
5% ; ( 2) DDT的总量为 0. 01400μg /g ( 6号 )～ 0. 5032μg /g
( 1号 ) ,其中 1号与 4号残留量超标 ,占总检品的 12. 5% ;而 2,
3, 7, 8, 14号残留量也超标 ,占总检品的 43. 7%。
丹参　表 6表明: ( 1)丹参药材中 HCH类的总量为 1.
389× 10- 3 μg /g ( 17号 )～ 0. 1679μg /g ( 24号 ) ,均未超标 ;
( 2) DDT类的总量为 0. 0265μg /g (安徽紫花浙皖丹参 )～
0. 4596μg /g (江西南丹参 ) ,其中仅江西南丹参超出标准 ,
而 19, 20, 22, 23号超标 ,占总检品的 44%
芍药　表 6显示: ( 1)芍药药材中 HCH类总量为 0.
02946μg /g ( 27号 )～ 0. 2603μg /g ( 29号 ) ,其中仅三等安徽
芍药超标 ; ( 2) DDT类总量为 0. 08796μg /g ( 27号 )～ 0.
4166μg /g ( 32号 ) ,其中浙江四等与安徽一等超标 ,占总检
品的 33% ,而 30号及 31号超标 ,占总检品的 33%。
4)有机氯捕获电子后生成离解型的负离子和
游离基 ,故升高检测器温度有利于提高对有机氯的
检测灵敏度。
5)由于 ECD的线性范围较小 ,被测样品中各
有机氯浓度的变化范围很大 ,故实验采用内标校正
曲线法。将药材粉提取处理后先以少量的内标溶液
稀释 ,当样品中某些有机氯的含量过高而超出线性
范围时 ,可酌情增加内标液的加入量。
6)实验采用的分析方法是气相色谱法 ,选用电
子捕获检测器 ( ECD) OV 17填充柱 ,使得有机氯各
异构体得到很好分离 ,曾用 FID检测器、毛细管
柱 ,效果很不理想。
总之 ,从表 5～ 7中看出 ,所测药材均受不同程
度污染 ,如何评价中药材中有机氯残留量 ,需进一
步研究 ,并制订这些药材的残留量标准。
Tab 5. Residu es of organo-ch lorine pest icid e Rh izoma Coryd ali s(μg /g )
No. αHCH γHCH β HCH δHCH Total pp′DDE op′DDT pp′DDD pp′DDT Total
1 0. 03438 0. 01669 0. 8023 - 0. 8534c 0. 5032 - - - 0. 5032c
2 0. 1341 0. 02078 0. 3249 9. 004a 0. 4888c - - - 0. 1290 0. 1290b
3 2. 816a 3. 637a - 5. 894a 0. 01235 0. 06468 0. 03734 0. 01214 - 0. 1142b
4 8. 577a 1. 576a 0. 02702 0. 01019 0. 04741 0. 1008 0. 2558 - - 0. 3566c
5 2. 561a - - - 2. 561a 0. 01542 0. 01036 - - 0. 02578
6 5. 437a 2. 129a - - 7. 566a 6. 744a 7. 252a - - 0. 01400
7 9. 121a 0. 03171 - 0. 1008 0. 1417 0. 1050 - - - 0. 1050b
8 0. 01550 5. 769a 0. 02688 0. 01736 0. 06551 0. 05976 0. 02114 0. 02144 0. 01432 0. 1167b
9 0. 02062 6. 056a 0. 06415 - 0. 09083 0. 04139 0. 01785 0. 01811 - 0. 07735
10 0. 02682 7. 037a 0. 05817 0. 01605 0. 1081 0. 05696 - - 0. 04264 0. 0996
11 5. 997a - 0. 0. 492 - 0. 02092 0. 06275 0. 01691 0. 01509 - 0. 09475
12 0. 02398 0. 1083 0. 04335 - 0. 1747 0. 02300 0. 01207 6. 369a - 0. 04144
13 7. 113a 0. 01805 - - 0. 02516 0. 03416 0. 01372 - - 0. 04833
14 7. 457a 0. 01260 1. 349a 0. 01519 0. 0366 0. 08907 0. 01510 - - 0. 1042b
15 - 7. 422a - - 7. 422a 0. 02427 0. 01161 - - 0. 03588
16 0. 01579 4. 595a - 5. 553a 0. 02594 0. 02816 9. 960a 0. 01174 - 0. 04986
　　 Annotations No. 1～ 16 are th e same of Tab 1. a: ng /g; b: th e residues of HCH are more th an 0. 2μg /g, th e residues of DDT
are more th an 0. 1μg /g; c: the residu es of HCH are more than 0. 3μg /g and th es e of DDT are more than 0. 2μg /g
Tab 6. Residues of organo-chlo rine pes ticide in Rad ix Salviae mi lt ior rhizae (μg /g)
No. αHCH γHCH β HCH δHCH Total pp′DDE op′DDT pp′DDD pp′DDT Total
17 1. 389a - - - 1. 389a 0. 01334 - 0. 01317 - 0. 02651
18 5. 106a 1. 994a 8. 504a 9. 260a 0. 02481 0. 03304 - 3. 344a - 0. 03638
19 6. 381a - 0. 03462 5. 270a 0. 04627 0. 05328 0. 04967 - 0. 01435 0. 1173b
20 0. 01289 3. 586a 0. 0670 0. 02750 0. 11098 - - 0. 04140 0. 1243 0. 1657b
21 0. 02714 0. 02380 0. 02778 0. 01706 0. 09578 0. 03942 - - - 0. 03942
22 0. 09907 8. 886a 0. 03019 0. 1125 0. 1494 0. 03855 0. 1087 - - 0. 1473b
23 0. 01313 0. 01554 0. 01948 5. 632a 0. 05378 0. 05939 0. 06058 - - 0. 1200b
24 7. 157a 0. 02178 0. 1341 4. 828a 0. 1679 0. 1737 0. 1142 0. 1717 - 0. 4596c
25 7. 055a 4. 227a 0. 01360 7. 966a 0. 03285 0. 03712 9. 771a 0. 02146 - 0. 06835
26 2. 381a - - 3. 498a 5. 879a - - - - -
　　 Annotations No. 1～ 16 are th e same of Tab 1. a: ng /g; b: th e residues of HCH are more th an 0. 2μg /g, the resid ues of DDT
are more th an 0. 1μg /g; c: the resid ues of HCH are more than 0. 3μg /g and th es e of DDT are mo re th an 0. 2μg /g
106 　 　 中 国 药 科 大 学 学 报 　 　 30卷
Tab 7. Residues of organo-chlo rine pes ticide Rad ix Paeoniae alba (μg /g)
No. αHCH γHCH β HCH δHCH Total pp′DDE op′DDT pp′DDD pp′DDT Total
27 0. 02946 - - - 0. 02946 0. 05590 0. 03206 - - 0. 08796
28 0. 02081 5. 807a 0. 02220 5. 270a 0. 05409 0. 08408 0. 09902 0. 1057 - 0. 2888c
29 0. 02084 0. 01415 0. 09226 0. 01517 0. 1424 0. 05802 0. 02314 0. 01346 - 0. 09462
30 0. 04436 0. 04339 0. 1593 0. 01320 0. 2603c 0. 08703 0. 02825 0. 1838 - 0. 1274b
31 0. 03316 0. 02000 0. 07019 8. 734a 0. 1321 0. 06229 0. 06042 0. 02454 - 0. 1473b
32 0. 02626 0. 02522 0. 06215 0. 01399 0. 1276 0. 1595 0. 1181 0. 1390 - 0. 4166c
　　 Annotations No. 1～ 16 are th e same of Tab 1. a: ng /g; b: th e residues of HCH are more th an 0. 2μg /g, the resid ues of DDT
are more th an 0. 1μg /g; c: the residu es of HCH are more than 0. 3μg /g and th es e of DDT are more than 0. 2μg /g
参 考 文 献
1　樊德方 . 农药残留量分析与检测 . 上海: 上海科技出版社 ,
1984. 1
2　牟淑群 ,沈嘉祥 ,周天雄等 .三七中 DDT的残留量分析研究
—— 薄层色谱法 .中药通报 , 1981, 6( 3): 3
3　陈瑞华 ,缪细泉 ,蒋德磬等 .中药中有机氯类农药残留量分析 .
药学通报 , 1981, 16( 3): 58
4　 Glotfel ty DE, Caro JH. Arti facts of dieldrin in gas ch ro-
matog raphic analysis of green plant material. Analytica l Chem -
ist ry , 1970, 42( 3): 282
Studies on the Residues of Organo -chlorine Pesti -
cide in
Rhizoma Corydalis , Radix Salviae miltiorrhizae
and Radix Paeoniae alba
Cong Xiaodong , Li Ying, Fang Wei, Chen Bilian, Yu Jianping
Department of Chinese Medicine Analysis , China Pharmaceutical University , Nanjing
210009
Abstract　 The residues of o rg ano-chlorine pesticide, 8 isomers of HCH and DDT, in the common tradi-
tional Chinese drug s w hich came from 16 pieces o f Rhizoma corydalis , 10 kinds of Radix Salviae m iltior-
rhizae and 6 g rades o f Radix Paeoniae alba , w ere determined by the EC-GLC method. Its determining
conditions w ere: the internal standard, p -ni t ro to luene; the column, 3 m× 3 mm id; the liquid phase,
OV-17; the column temperature, 195～ 290℃ ; the temperature of both injection po rt and detecto r,
320℃ ; the ca rrier gas, pure ni t ro gen; and wi th the ECD detector. The samples were well purified and
isolated. The recoveries of the 8 org anic chlorides ranged from 85. 21% to 103. 0% ; The 8 calibration
curv es w ere linear (r= 0. 9934～ 0. 9998) wi thin the ranges of 5～ 900 ng . The residues o f o rg ano-chlo-
rine pesticide w ere 1. 389× 10- 3～ 0. 8023μg /g.
Key words　 p -ni tro to luene; HCH-isomers; DDT-isomers; Determina tion; GC; Rhizoma Corydalis;
Radix Salviae m iltiorrhizae; Radix Paeoniae alba
1072期　 丛晓东等: 中药元胡、丹参、芍药中有机氯残留量的测定