全 文 ：收稿日期:2008-03-13;　修订日期:2008-05-12
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目(No.黔科合中
药专字 [ 2007] 5011号)
作者简介:张泽楷(1981-),男(汉族),广东潮州人 ,现为贵州师范大学在
读硕士研究生 ,硕士学位 ,主要从事分析化学研究工作.
＊通讯作者简介:张明时(1951-), 男(汉族),吉林农安人 , 现为贵州师范
大学教授 ,硕士学位 ,主要从事分析化学研究工作.
恒温 -气相色谱法快速测定
头花蓼中有机氯农药残留量
张泽楷 1, 2 , 陈建荣3 ,张明时 1, 2＊ ,康福星1 , 陈文生 1
(1.贵州师范大学 ,贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室 ,贵州 贵阳　550001;
2.贵州师范大学分析测试中心 ,贵州 贵阳　550001;
3.河北科技大学化学与制药工程学院 ,河北 石家庄　050018)
摘要:目的 建立毛细管气相色谱法测定头花蓼中 8种有机氯农药残留量的方法。方法 样品经有机溶剂超声提取 , 硫酸
净化;采用 OV-1701(30m×0.32 mm×0.32 μm)毛细管柱 , 恒定温度 ,电子捕获检测器 ,外标法计算含量。结果 样品的
平均回收率为 81.1% ～ 105.8% , RSD为 1.75% ～ 5.12%;所测定样品中有机氯农药残留量均低于相关标准。结论 该
方法快速 、简便 、准确 , 可快速测定头花蓼中有机氯农药残留量。
关键词:恒温;　气相色谱法;　头花蓼;　有机氯农药残留
中图分类号:R288　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2009)02-0279-02
RapidDeterminationofOrganochlorinePesticideResiduesinPolygonumcapitatumby
ConstantTemperature-GasChromatography
ZHANGZe-kai1, 2 , CHENJian-rong3 ,ZHANGMing-shi1, 2＊ ,KANGFu-xing1 , CHENWen-sheng1
(1.KeyLaboratoryforInformationSystemofMountainousAreaandProtectionofEcologicalEnvironmentof
GuizhouProvince, GuizhouNormalUniversity, Guiyang550001, China;2.CenterofAnalysisandTest, Guizhou
NormalUniversity, Guiyang550001 , China;3.ColegeofChemicalandPharmaceuticalEngineering, HebeiU-niversityofScienceandTechnology, Shijiazhuang050018, China;)
Abstract:ObjectiveTodetermine8organochlorinepesticides(OCPs)inPolygonumcapitatumbycapillarygaschromatogra-
phywithelectroniccapturedetector(CGC-ECD).MethodsSampleswereextractedwithorganicsolventusingsupersonicfluid
extraction.TheextractswereclearedupbyconcentratedH2SO4 , thecolumnwasOV-1701(30m×0.32 mm×0.32 μm)withconstanttemperature.Thepesticideresidueswerecalculatedbyexternalstandardmethod.ResultsTheaveragerecoveriesand
RSDrangedfrom81.1% ～ 105.8% and1.75% ～ 5.12% respectively.TheOCPsofthePolygonumcapitatumwerelowerthan
thecorrespondingstandards.ConclusionThismethodisrapid, simpleandaccurate.Itcanbeusedtodetermineorganochlorine
pesticidesinPolygonumcapitatumrapidly.
Keywords:Constanttemperature;　Gaschromatography;　Polygonumcapitatum;　Organochlorinepesticidesresidue
　　有机氯类农药是杀虫剂中使用最广泛的一大类。其代表是
六六六(BHC)和滴滴涕(DDT), 这类农药化学性质稳定 , 脂溶
性大 , 长期存在于水 、土壤之中 , 并通过生物链富集在动植物体
内 , 对自然环境和人体健康造成极大危害 。世界各国已于 20世
纪 80年代初禁止使用此类农药 , 但目前仍然能在中药材中检出
该类农药成分 [ 1, 2] , 中药材普遍存在有机氯农药残留问题。苗药
头花蓼是贵州省根据地方优势资源开发的新品种 ,在治疗妇科疑
难杂症 、中老年人肠胃疾病 、泌尿系统感染等方面具有显著疗效。
近年来 , 有关有机氯农药残留的测定都采用气相色谱法 -程序升
温 [ 3～ 5] ,出峰时间大都在 17 ～ 30 min左右。本文首次采用恒温
-气相色谱法对头花蓼中有机氯农药残留量进行测定 , 8种有机
氯农药在 9 min内全部出峰 , 相邻色谱峰之间分离度均大于 1.5 ,
大大缩短了分析测试时间 ,建立了中药材有机氯农药残留测定的
新方法 , 且方法回收率 、精密度及重复性实验结果均符合农药分
析的要求 [ 6] , 为中药材达到安全 , 可控之质量标准提供了科学
依据。
1　器材与试剂
Agilent6890N气相色谱仪 , 配备电子捕获检测器(μ—
ECD), 安捷伦 GC工作站;OV-1701毛细管柱(30m×0.32 mm
×0.32μm);旋转蒸发仪 R210(瑞士 BUCHI公司);SHZ—III型
循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂);H66MC超声波发生器
(无锡市超声电子设备厂);8000型离心机(金坛市大地自动化仪
器厂)。
试剂:丙酮 、正己烷为色谱纯(天津科密欧);二氯甲烷为分
析纯(天津科密欧);石油醚(60 ～ 90℃, 天津科密欧 分析纯);无
水硫酸钠(分析纯 ,研细 350℃烘 4h,北京化工厂);浓硫酸(分析
纯);水为重蒸馏水。
农药标准品:α-六六六(α-BHC)、β -六六六(β -BHC)、
γ-六六六(γ-BHC)、δ-六六六(δ-BHC)、PP -滴滴伊
(PP -DDE)、OP-滴滴涕(OP -DDT)、PP -滴滴滴(PP
-DDD)、PP -滴滴涕(PP -DDT)(以上标准品均由农业部环
境保护科研监测所研制 ,浓度均为 100 μg· ml-1)。
头花蓼样品共 6个 , 采集于贵州省黔东南苗族侗族自治州的
头花蓼药材种植基地 , 样品编号 (070801, 070802, 070803,
070804, 070805, 070806)。
2　方法
2.1　色谱条件 采用 Agilent6890N气相色谱仪 , 配备捕获检测
器(μ-ECD),安捷伦 GC工作站;自制 OV-1701毛细管柱(30
m×0.32 mm×0.32 μm),进样口温度:280℃柱温:240℃恒定温
度 , 检测器温度 320℃, 压力 11.45psi, 流速 1.5ml/min, 载气为高
纯氮气(>99.99%);进样量 1 μl, 不分流进样。以保留时间定
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2 时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期
性 , 外标法峰面积定量。混合标准对照品和样品色谱图见图 1。
2.2　标准曲线绘制
2.2.1　混合对照品储备液的制备 分别精密吸取 α-BHC、β -
BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP -DDE、OP -DDT、 PP -DDD、
PP -DDT(均为 100 μg· ml-1)0.5 ml, 置于 10 ml量瓶中 ,石
油醚定容至刻度 , 使混合农药对照品浓度为 5 μg· ml-1。
2.2.2　混合对照品溶液的制备 分别精密吸取一定体积的上述
混合对照品储备液于 50 ml量瓶中 , 用石油醚稀释 , 得到 0.01,
0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0μg· ml-1的一系列不同浓度的混合
对照品溶液。按 “ 2.1”项条件下测定。以峰面积为纵坐标(Y),
浓度为横坐标(X), 计算线性方程 , 结果见表 1。结果表明在 10
～ 1 000 μg· L-1内呈良好线性关系。
a-8种有机氯农药对照品　b-头花蓼
　　1:α-BHC　2:γ-BHC　 3:β -BHC　 4:δ-BHC
5:PP -DDE　6:OP -DDT　7:PP -DDD　8:PP -DDT
图 1　8种有机氯农药对照品和头花蓼色谱图
表 1　有机氯农药的线性方程和相关系数
农药 保留时间 t/ min 线性方程 相关系数
α-BHC 2.47 Y=62 748.006 28X-223.700 19 0.999 8
γ-BHC 2.84 Y=52 946.004 4X-184.341 1 0.999 7β -BHC 3.60 Y=23 111.395 6X-6.539 7 0.999 7
δ-BHC 4.09 Y=50 314.915 7X-201.064 2 0.999 7
PP -DDE 5.52 Y=42 932.263 4X-23.643 8 0.999 3
OP -DDT 6.97 Y=18 873.598 7X-151.183 9 0.999 0PP -DDD 8.16 Y=37 313.640 6X-3.989 6 0.998 4
PP -DDT 8.94 Y=17 044.38X-288.822 7 0.997 2
2.3　供试品溶液制备 样品于 60℃干燥 4 h, 粉碎 , 过 40目筛。
精密称取 2.0 g置于 100ml具塞锥形瓶中 , 加入 20ml蒸馏水浸
泡过夜 ,精密加入 40 ml丙酮 ,超声 30 min, 再加入约 6 g氯化钠
并精密加入 30ml二氯甲烷 , 超声 15min, 静置使其分层 ,将有机
相移入装有无水硫酸钠(适量)的 100 ml具塞锥形瓶中 , 脱水 4
h。精密量取 35ml有机相置于旋转蒸发瓶中 , 于 40℃水浴减压
浓缩至近干 , 用适量正己烷多次溶解并转移至 10 ml具塞刻度离
心管中 , 精密定容至 5.0 ml。 加入 1.0 ml浓硫酸 , 振摇 1 min,
离心(3 000 r· min-1)10min。精密量取 2.0ml上清液至 K-D
瓶中 , 40℃下浓缩并定容置 1.0 ml, 备用。
3　结果
3.1　精密度实验 吸取同一浓度的有机氯对照品溶液 , 进样量
1ul,重复进样 5次 ,按 “ 2.1”条件操作得:α-BHC、β -BHC、γ-
BHC、δ-BHC、PP -DDE、OP -DDT、PP -DDD、PP -DDT
的 RSD(%)分别为 2.45, 4.15, 4.79, 3.95, 2.57, 3.10, 3.19,
4.38。
3.2　重复性实验 准确称取样品 5份(每份 2g), 按 “ 2.3”项方
法处理 , 按 “ 2.1”项条件测定 , 各农药的 RSD(%)分别为 2.85,
3.36, 3.19, 2.98, 5.02, 4.51, 4.07, 4.74。
3.3　回收率实验及检出限测定 称取样品 9份 ,分 3个水平添加
混合标准品 , 每水平 3份 , 按 “ 2.3”项方法处理 , 按 “ 2.1”项条件
测定 , 回收率和相对标准偏差结果见表 2。以 2倍噪音计算方法
的检出限 , 8种有机氯农药检出限分别为 (按出峰顺序):
0.000 07, 0.000 09, 0.000 18, 0.000 12, 0.000 18, 0.000 67,
0.000 28, 0.001 31(mg· kg-1)。
3.4　样品的测定 按照上述方法操作 , 计算得 6个样品中有机氯
农药的含量见表 3。
4　讨论
本实验采用 Agilent6890N气相色谱仪 , OV-1701石英毛细
管柱(30 m×0.32 mm×0.32 μm), 240℃恒定温度。 8种有机氯
农药残留在 9 min内全部出峰 ,峰分离度好 , 且回收率 、精密度及
重现性实验结果均符合农药分析的要求。节省了样品的检测时
间 , 建立了中药材有机氯农药残留快速测定的新方法。
表 2　有机氯农药的回收率和相对标准偏差
农药 添加水平 m/μg 平均回收率(%) RSD(%)
0.1 85.6 3.05α-BHC 0.2 89.4 1.93
0.4 90.38 2.14
0.1 83.7 4.06
γ-BHC 0.2 88.3 2.39
0.4 89.4 4.76
0.1 94.5 3.42β -BHC 0.2 97.8 4.47
0.4 96.7 3.89
0.1 98.1 5.12
δ-BHC 0.2 105.8 3.23
0.4 103.9 3.04
0.1 99.3 2.95PP -DDE 0.2 92.3 4.19
0.4 94.6 4.13
0.1 84.5 2.08
OP -DDT 0.2 93.9 2.77
0.4 91.7 4.62
0.1 95.7 2.46PP -DDD 0.2 101.2 4.74
0.4 98.4 4.98
0.1 81.1 1.81
PP -DDT 0.2 86.2 4.69
0.4 88.9 3.64
　　n=3
表 3　样品中有机氯农药的含量 mg· kg-1
样品编号 α-BHCγ-BHC β -BHCδ-BHCPP -DDEOP -DDTPP -DDDPP -DDT
070801 0.031 - - - - - - -
070802 - - 0.005 - - - - -
070803 - 0.018 - - 0.023 - - -
070804 - - - - - - - -
070805 - - - - - - - -
070806 0.043 - 0.007 - - - - -
　　“ -”表示未检出或低于方法检出限
本实验测定了 6个批号的头花蓼 ,发现其机氯农药的残留量含
量均较低 ,均未超过《药用植物绿色行业标准》,同时说明贵州省实行
中药材GAP生产基地后 ,药材中有机氯农药残留量在逐步下降。
国家把 “中药现代化”列为 “十五”国民经济发展中的高新技
术产业之一 ,并制定了与中药生产和管理有关的法规 、标准。 因
此 , 实行中药现代化 , 建立绿色中药材 GAP生产基地 , 同时必须
建立符合科学技术发展水平的中药标准规范体系。农药残留问
题需要有关部门和专家学者们的重视 ,加大研究力度 , 使中药为
人类防病 、治病发挥更大的作用。
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2