作 者 :韩政
期 刊 :中国农业科学院 2004年 04期 页码:56
关键词:美洲商陆抗病毒蛋白基因;巴斯德毕赤酵母;摇瓶培养;抗病毒活性检测;矮牵牛;农杆菌介导转化;PCR检测;
摘 要 :许多研究已经发现美洲商陆抗病毒蛋白(Pokeweed antiviral protein,PAP)可以抗多种植物病毒侵染,具有广谱的抗病毒特性,因此可以利用PAP来防治植物病毒的危害。在本实验室已有的研究基础上,探索了重组巴斯德毕赤酵母菌在摇瓶中发酵制备PAP抗病毒制剂的可行性,同时采用基因工程的方法,利用农杆菌介导转化缺失型PAP基因,获得了转基因矮牵牛植株。整个试验过程包括两个部分:第一部分筛选出表达外源PAP量较高的甲醇利用快速型重组巴斯德毕赤酵母菌(Mut~+)菌株。摸索了碳源、接种比例、甲醇诱导浓度、培养基pH值、生物素浓度、摇床转速、诱导时间等培养条件对重组巴斯德毕赤酵母菌表达PA...