全 文 ：2013 年 3 月 第 15 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2013 Vol. 15 No. 3
中药科技
* ［通讯作者］ 王金辉，E-mail:wjh. 1972@ yahoo. com. cn
伊贝母中非生物碱类化学成分的分离与鉴定
李文玲1，布仁1，陈朝军1，俞腾飞1，王金辉1，2*
(1. 内蒙古医科大学 药学院，内蒙古 呼和浩特 010059;
2. 沈阳药科大学 中药学院，辽宁 沈阳 110016)
［摘要］ 目的:研究伊贝母中非生物碱类化学成分。方法:采用反复硅胶柱色谱、开放 ODS柱色谱和 HPLC
等方法进行分离纯化，并通过 NMR技术鉴定其化学结构。结果:从伊贝母乙醇提取物的三氯甲烷萃取部分分离鉴
定了 7 个化合物，分别为(25R)-△5(6)-异螺甾-17α，3β-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-［α-L-吡喃鼠李糖基-
(1→2)］-β-D-吡喃葡萄糖苷(1) ，β-谷甾醇(2) ，月桂酸(3) ，反式桂皮酸(4) ，月桂酸甘油酯(5) ，胡萝卜苷(6) ，
β-谷甾醇棕榈酸酯(7)。结论:化合物 1、7 为首次从贝母属中分离得到，4、5 为首次从伊贝母植物中分离得到。
［关键词］ 伊贝母;非生物碱;化学成分;结构鉴定
伊贝母为百合科植物新疆贝母 Fritillaria
walujewii Regel 或伊犁贝母 F. pallidiflora Schrenk 的
干燥鳞茎，其味苦、甘，微寒。归肺，心经［1］。鳞
茎即伊贝，是治疗呼吸系统的良药。现代药理学研
究表明，伊贝母具有止咳祛痰、抑菌、抗炎等作
用［2］。作者利用反复硅胶柱色谱、开放 ODS 柱色谱
和制备液相色谱手段，从伊贝母的 95%醇提物的三
氯甲烷萃取层分离得到 7 个化合物，通过理化性质
和波谱(NMR)数据鉴定其结构，分别是(25R)-
△5(6)-异螺甾-17α，3β-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-
(1→3)-［α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2) ］-β-D-吡喃
葡萄糖苷、β-谷甾醇、月桂酸、反式桂皮酸、月桂
酸甘油酯、胡萝卜苷、β-谷甾醇棕榈酸酯。以期为
进一步了解其药理作用和合理开发利用伊贝母这一
药用资源提供参考。
1 仪器与材料
ARX-300、AV-600，500 型核磁共振波谱仪(瑞
士 Bruker 公司) ，PERKIN ELMER-series200ic 型泵
(美国 perkin elmer 公司) ，Agilent Technologies-1200
型检测器，YMC-pack-ODS-A 型制备柱(150 mm ×
6. 0 mm，5 μm，12 nm，日本 YMC 公司) ，ESI-MS
利 用 LCQ-Advantage. Max 质 谱 仪 (美 国
Thermofinnigan公司) ，X-4 数字显微熔点测定仪(北
京福凯仪器有限公司，温度未校正)。
柱色谱硅胶(200 ～ 300 目，青岛海洋化工厂) ，
薄层色谱硅胶为 GF254(青岛海洋化工厂) ，ODS
(10 ～ 30 μm，天津化学试剂二厂) ，试剂(色谱纯，
J. T. Baker) ，其余试剂(分析纯，天津市科盟化工工
贸有限公司)。
伊贝母药材购自新疆，经石河子大学药学院谭
勇教授鉴定为百合科贝母属植物伊犁贝母 Fritillaria
pallidiflora Schrenk的干燥鳞茎。
2 提取与分离
伊贝母药材 2. 0 kg，粉碎后依次用 10 倍、10
倍、8 倍量体积分数为 95%乙醇回流提取 2 h。合并
滤液，回收溶剂，浸膏用 2%盐酸溶液捏溶出生物
碱部分，酸不溶部分用水饱和的三氯甲烷萃取 3 次，
回收三氯甲烷得到 9 g 浸膏。以极性递增的石油
醚 －丙酮系统和丙酮 －甲醇系统进行初步分离。再
利用硅胶柱色谱、开放 ODS 柱色谱、制备 HPLC 等
手段进行分离纯化，从中得到 1(6. 9 mg)、2(15. 9
mg)、3(7. 1 mg)、4(9. 0 mg)、5(11. 0 mg)、6
(14. 7 mg)、7(9. 3 mg)。化合物 1 结构式见图 1。
3 结构鉴定
3. 1 化合物 1
白色无定型粉末(吡啶)。1H-NMR(300 MHz，
Pyr-d5)谱中，给出 4 个甲基质子信号 δ 0. 69(3H，
d，J = 5. 2 Hz，CH3-27) ，0. 96(3H，s，CH3-18) ，
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DOI:10.13313/j.issn.1673-4890.2013.03.013
2013 年 3 月 第 15 卷 第 3 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Mar. 2013 Vol. 15 No. 3
图 1 化合物 1 的结构式
1. 09(3H， s，CH3-19)和 1. 23(3H，d，J = 7. 0
Hz，CH3-21) ;3 个糖端基质子信号 δ 4. 97(1H，o，
H-1) ，6. 35(1H，s，Rha H-1″) ，5. 10(1H，d，J
= 7. 2 Hz，H-1″)和 1 个六碳五氧糖六位甲基质子
信号 1. 74(3H，o，Rha H-6″) ;一个烯烃质子信号 δ
5. 30(1H，o，H-6)。13C-NMR(150 MHz，Pyr-d5)谱
给出两个葡萄糖的端基碳信号 δ 100. 3(C-1) ，
105. 8(C-1″) ;1 个鼠李糖端基碳信号 δ 102. 1(C-
1″) ;1 个鼠李糖甲基碳信号 δ 18. 7(C-6″) ;4 个角
甲基碳信号 δ 17. 2(C-18) ，19. 5(C-19) ，9. 8(C-
21) ，17. 3(C-27) ;1 组环内双键碳信号 140. 9(C-
5) ，121. 8(C-6) ;5 个连氧碳信号 δ 77. 9(C-3) ，
90. 0(C-16) ，90. 2(C-17) ，109. 9(C-22) ，66. 7(C-
26) ;上述波谱数据提示该化合物为一个 C27 异螺
甾皂苷类化合物，其中碳信号 δ 109. 9(C-22)和
17. 3(C-27)表明该化合物苷元的 25 位为 R 构型;
具体碳谱归属如下:δ 37. 6(C-1) ，30. 2(C-2) ，
77. 9(C-3) ，39. 0(C-4) ，140. 9(C-5) ，121. 8(C-
6) ，32. 5(C-7) ，31. 8(C-8) ，50. 2(C-9) ，37. 2(C-
10) ，21. 0 (C-11) ，32. 1 (C-12) ，45. 2 (C-13) ，
53. 1(C-14) ，32. 4(C-15) ，90. 0(C-16) ，90. 2(C-
17) ，17. 2(C-18) ，19. 5(C-19) ，44. 8(C-20) ，9. 8
(C-21) ，109. 9(C-22) ，32. 1(C-23) ，28. 8(C-24) ，
30. 5(C-25) ，66. 7(C-26) ，17. 3(C-27) ;Glc(C-1
～ C-6) :100. 3，77. 9，77. 9，81. 5，76. 3，61. 7;
Rha(C-1″ ～ 6″)102. 1，72. 9，72. 7，75. 0，70. 8，
18. 7; Glc (C-1″ ～ 6″) :105. 8， 76. 2， 79. 7，
72. 5，78. 4，62. 7。以上数据与文献［3］报道的基本
一致，故鉴定化合物 1 为(25R)-△5(6)-异螺甾-
17α，3β-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-［α-
L-吡喃 鼠 李 糖-(1 → 2) ］-β-D-吡 喃 葡 萄 糖 苷
{(25R )-△5(6)-isospirost-17α， 3β-diol-3-O-β-D-
glucopyranosyl-(1→3)-［α-L-rhamnopyranosyl-(1→
2) ］-β-D-glucopyranoside}，为首次从贝母属中分离
得到，也是首次从该植物中分离得到。
3. 2 化合物 2
无色针晶(石油醚 － 丙酮) ，mp 136 ～ 138 ℃，
10%硫酸乙醇显紫色，紫外 254 nm 下无暗斑，365
nm下无荧光。与已知标准品 β-谷甾醇共薄层色谱，
3 种不同溶剂系统展开，Rf 值一致并呈 1 个斑点，
故鉴定化合物 2 为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
3. 3 化合物 3
白色粉末(石油醚 －丙酮)。1H-NMR(300 MHz，
CDCl3)谱中 δ 0. 88(3H， t，J = 6. 3 Hz，12-H) ，
1. 25 ～ 1. 30(8 × CH2，16H，o) ，1. 63(2H，m，3-
H) ，2. 35(2H， t，J = 7. 5Hz，2-H) ;13 C-NMR(75
MHz，CDCl3)谱 δ 179. 4(C-1) ，33. 8(C-2) ，31. 8
(C-3) ，29. 6(C-4) ，29. 5(C-5) ，29. 3(C-6) ，29. 3
(C-7) ，29. 1(C-8) ，29. 0(C-9) ，24. 6(C-10) ，22. 6
(C-11) ，14. 0(C-12) ，与文献［4］报道的波谱数据比较
分析，鉴定化合物 3为月桂酸(laurostearic acid)。
3. 4 化合物 4
白色粉末(三氯甲烷)。ESI-MS给出准分子离子
峰 m/z 147. 1 ［M-H］－，其相对分子质量为 148. 2。
由碳氢谱可以推测其分子式为 C9H8O2。
1H-NMR(500
MHz，CDCl3)谱中 δ 7. 81(1H，d，J = 16. 0 Hz，7-
H) ，7. 56(2H，m，3，5-H) ，7. 42(3H，m，2，4，
6-H) ，6. 48(1H，d，J = 16. 0 Hz，8-H) ;13 C-NMR
(125 MHz，CDCl3)谱给出 δ 171. 3(C = O) ，117. 1
(C-2) ，147. 0(C-3) ，134. 1(C-1) ，129. 0(C-2，
C-6) ，128. 4(C-3，C-5) ，130. 7(C-4)碳信号。
与文献［5］报道的波谱数据比较，鉴定化合物 4 为反
式桂皮酸(trans-cinnamic acid) ，为首次从该植物中
分离得到。
3. 5 化合物 5
白色无定形粉末(乙酸乙酯)。ESI-MS:m/z
274. 6 ［M + H］+。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)谱给
出 δ 4. 16(1H，m，H-1a) ，3. 92(1H，m，H-2) ，
3. 66(2H，m，H-1b，3b) ，2. 34(2H， t，J = 7. 5
Hz，H-2) ，1. 11 ～ 1. 25 ［o，-(CH2)n-］， 0. 89
(3H，t，J = 6. 3 Hz，-CH3)的质子信号。
13 C-NMR
(75 MHz，CDCl3)谱给出 δ 174. 3(C-1) ，70. 2(C-
2) ，65. 0(C-1) ，63. 2(C-3) ，34. 0(C-2) ，24. 8
(C-3) ，22. 6 ～ 31. 8(C-2 ～ C-13) ，14. 0(C-14)
的碳信号，上述光谱数据提示该化合物为单脂肪酸
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单甘油酯类化合物;经与文献［6-7］报道的光谱数据比
较，鉴定化合物 5 为月桂酸甘油酯(lauric acid 1-
monoglyceride) ，为首次从该植物中分离得到。
3. 6 化合物 6
白色粉末(三氯甲烷 －甲醇) ，mp 280 ～ 283 ℃，
10%硫酸乙醇显紫色，与已知标准品胡萝卜苷共薄
层，用 3 种不同溶剂展开，Rf 值和显色行为均一
致，故鉴定化合物 6 为胡萝卜苷(daucosterol)。
3. 7 化合物 7
白色无定形粉末(乙酸乙酯) ，ESI-MS给出准分
子离子峰 m/z 653 ［M + H］+，其相对分子质量为
652。结合碳氢谱可以推测其分子式为 C45H80O2。
1H-
NMR(300 MHz，CDCl3)谱给出 δ 0. 69(3H，s，H-
18) ，0. 81(3H，d，J = 6. 9 Hz，H-27) ，0. 84(3H，
d，J = 3. 3 Hz，H-26) ，0. 91(3H，d，J = 6. 3 Hz，
H-21) ，1. 03 (3H， s，H-19) ，2. 27 (2H， o，H-
2) ，2. 32(2H，d，J = 7. 5 Hz，H-4) ，5. 36(1H，
d，J = 5. 4 Hz，H-6)的质子信号;13 C-NMR(75
MHz，CDCl3)谱给出 δ:37. 1(C-1) ，27. 1(C-2) ，
71. 7(C-3) ，42. 1(C-4) ，140. 6(C-5) ，121. 6(C-
6) ，31. 8(C-7) ，31. 5(C-8) ，50. 0(C-9) ，36. 4(C-
10) ，21. 0 (C-11) ，39. 6 (C-12) ，31. 8 (C-13) ，
56. 6(C-14) ，24. 2(C-15) ，28. 1(C-16) ，55. 9(C-
17) ，11. 9 (C-18) ，19. 3 (C-19) ，36. 4 (C-20) ，
18. 9(C-21) ，33. 8(C-22) ，25. 9(C-23) ，45. 7(C-
24) ，29. 1 (C-25) ，19. 7 (C-26) ，19. 3 (C-27) ，
22. 9(C-28) ，11. 9(C-29) ，179. 2(C-1) ，33. 8(C-
2) ，28. 1 (C-3) ，29. 5 (C-4) ，29. 6 (C-5 ～ C-
12) ，29. 5 (C-13) ，31. 8 (C-14) ，22. 9 (C-15)
和 14. 0(C-16)的碳信号。上述数据与文献［8］报道
的波谱数据基本一致，故鉴定化合物 7 为 β-谷甾醇
棕榈酸酯(β-sitosterol palmitate) ，为首次从贝母属中
分离得到，也是首次从该植物中分离得到。
参考文献
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Isolation and Identification of Non-alkaloid Constituents from Fritillaria pallidiflora Schrenk
Li Wen-ling1，Bu Ren1，Chen Chao-jun1，Yu Teng- fei1，Wang Jin-hui1，2*
(1. School of Pharmacy，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010110，China;
2. School of Traditional Chinese Materia Medica，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China)
［Abstract］ Objective: To study the non-alkaloid constituents from Fritillaria pallidiflora Schrenk.
Methods:Solvent extraction and column chromatography were used to isolate the non-alkaloid constituents，
physicochemical properties and spectroscopic analysis were employed for determination of the structures. Results:
Seven compounds were isolated，and their structures were identified as (25R)-△5(6)-isospirost-17α，3β-diol-3-O-β-
D-glucopyranosyl-(1→ 3)-［α-L-rhamnopyranosyl-(1 → 2) ］-β-D- glucopyranoside (1) ，β -sitosterol (2) ，
laurostearic acid (3) ，trans-cinnamic acid (4) ，lauric acid 1-monoglyceride (5) ，daucosterol (6) ，β-sitosterol
palmitate (7). Conclusion:Compounds 1，7 were obtained from the Fritillaria genus for the first time and 4，5
were isolated from this plant for the first time.
［Key words］ Fritillaria pallidiflora Schrenk;Non-alkaloids;Chemical constituent;Structure identification
( 收稿日期 2012-10-29)
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