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第 29 卷 第 3 期 玉林师范学院学报（自然科学） Vol.29 No.3
2008 年 JOURNAL OF YULIN NORMAL UNIVERSITY (Natural Science)
v¬åB
红花羊蹄甲抑菌活性的研究
□卢海啸1 陈永红2
（1. 玉林师范学院 化学与生物系 讲师，广西 玉林 537000）
（2. 玉林师范学院 化学与生物系 本科生，广西 玉林 537000）
【摘   要】红花羊蹄甲花提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和土壤中的一些
细菌均有抑菌效果，随着羊蹄甲花提取物浓度的增加，其对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄
球菌的抑菌作用增强，呈一定的剂量依赖性. 在同等浓度下羊蹄甲花提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌
效果最好，抑菌圈可达13.0mm，其次是枯草芽孢杆菌，抑菌圈可达到9.0mm，然后是大肠杆菌，抑
菌圈为7.4mm. 最后找出羊蹄甲花对这些细菌的最低抑菌浓度. 红花羊蹄甲花提取物对米曲霉、黑曲霉
无抑菌效果.
   【关键词】羊蹄甲花提取物；抑菌作用；最低抑菌浓度
【中图分类号】Q949.96【文献标识码】 A 【文章编号】1004-4671(2008)03-0087-04
Antimicrobial Effect of Ethanol Extract
from Bauhinia Variegata
LU Hai-xiao1，CHEN Yong-hong2
（1. Lecturer，Chemistry and Biology Department，Yulin Normal University，
Yuling，Guangxi 53700）
（2. Undergraduate，Chemistry and Biology Department，Yulin Normal
University，Yuling，Guangxi 537000）
Abstract: Bauhinia flower extracts to E. coli, Bacillus subtilis, Staphy- lococcus
aureus and some soil bacteria have some antibacterial effect, with the increase of Bauhinia
flower extract concentration, the antimicrobial effect to E. coli, Bacillus subtilis and
Staphylococcus aureus enhanced, and was in dose-dependent manner. The same
concentration Bauhinia flower extracts to Staphylococcus aureus inhibitory effectis is the
best inhibition zone up to 13.0mm,followed by the Bacillus subtilis, inhibition zone could
reach 9.0 mm; the E. coli bacteria to 7.4mm. The final identify the minimum inhibitory
concent- ration of these bacteria, Bauhinia flower extracts no inhibitory effect on
Aspergillus oryzae, Aspergillus niger.
Key words: extract of Bauhinia flower; inhibition; the minimum inhibitory
concentration
DOI:10.13792/j.cnki.cn45-1300/z.2008.03.018

玉林师范学院学报2008 年 第 3 期
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红
花羊蹄甲（Bauhinia purpurea）别名：红
花紫荆、洋紫荆，为苏木科羊蹄甲属植
物，其树皮、根、叶可做药用[1]. 黄酮类
化合物在该属植物中普遍存在，Bhartiya等[2]于1978
年首次分离得到1个查尔酮苷；Gupta等分离得到
1个二氢黄酮苷[3]. Laux等首次分离得到1个含有亚
甲二氧基的黄酮类化合物，并研究了它的合成路
线，同时合成得到了9个含有亚甲二氧基的化合物
[4]. Anjaneyulu等从Bauhinia racemosaLamk•中分离
得到白藜芦醇等. Prabhakar又从该植物中分离到de-
O-methylracemosol(33)，而Maillard等从另一个种
Bauhinia rufescens中分到另外3个四环化合物[5]，分
别是: 1，7，8，12b-四氢-2，2，4-三甲基-2氢-
苯唑[6, 7]环庚三烯并[1,2,3-反]苯唑吡喃-5，10，
11-三醇(34)、5，6-二氢-11-甲氧基-2，2，12-
三甲基-2氢-萘亚甲基[1,2,f]苯唑吡喃-8，9-二醇
(35)、11-甲氧基-2, 2, 12-三甲基-萘亚甲基[1, 2, f]
苯唑吡喃-8，9-二醇(36).
    1  材料与方法
    1.1  材料与设备
1.1.1 菌种和植物材料
大肠杆菌(Escherichia coil）、枯草芽孢杆菌
(Bacillus subtilis) 、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus
aureus )、米曲霉(Aspergil lus oryzae)、黑曲霉
(Aspergillus niger)由玉林师范学院化学与生物系微
生物实验室提供，其他菌种从土壤中筛选得到，备
用. 羊蹄甲花采于广西玉林师范学院东校区附近，
经风干，粉碎，以乙醇为溶剂，采用冷浸法进行提
取. 将所得的提取物放到4℃冰箱中进行保存，备
用.
1.1.2 主要仪器设备
PYX-DHS-HOXSO-B型隔水式电热恒温培
养箱（上海跃进医疗器械厂）、ESJ60-4型电子天
平（沈阳龙腾电子有限公司）、101-3A型数显示
电热恒温干燥箱（上海泸越实验仪器有限公司）、
S．SW-CJ-IBU型净化工作台（苏州安泰空气技术
有限公司）.
    1.2  实验方法
1.2.1 稀释涂布平板法从土壤中分离与纯化微生
物
参照杨革等的方法[6]. 从土壤中共分离与纯化得
6种细菌. 分别命名为菌种1、菌种2、菌种3、菌种
4、菌种5、菌种6，其中菌种1~4为革兰阴性菌、菌
种5~6为革兰阳性菌.
1.2.2 羊蹄甲花提取物初步抑菌实验
1.2.2.1 菌悬液的制备 把大肠杆菌、金黄色葡
萄球菌、枯草芽胞杆菌原菌种和从土壤中分离纯化
得到的6种细菌分别接种于牛肉膏琼脂培养基平板
上，把黑曲霉、米曲霉原菌种分别接种于查氏琼脂
培养基平板上，参照刘春棋等的方法进行制备[7].
1.2.2.2 含菌平板的制备 将培养基灭菌后倒于
平皿内，每个平皿约15ml，待培养基凝固后，用灭
菌吸管吸取上述各种菌液100ul注人平皿内，再用灭
菌的涂布棒迅速将菌液涂抹均匀，制成含菌平板，
以上操作均在无菌室进行.
1.2.2.3 抑菌活性的测定 用丙酮把羊蹄甲花提
取物配制成溶液，在上述的羊蹄甲花提取物中，
分别放入直径为5mm的灭菌滤纸片(3片为一组)，
浸泡2h，待其自然干燥后，用紫外线照射灭菌
10～15min，用无菌镊子将浸透羊蹄甲花提取物的
滤纸片放在含菌平板上，每块平板上都放有一张浸
有丙酮并自然风干的滤纸片作为对照，把各培养皿
置于37℃温箱中培养24小时.
1.2.3 羊蹄甲花提取物最低抑菌浓度测定实验
1.2.3.1 菌悬液的制备 同1.2.2.1.
1.2.3.2 含菌平板的制备 同1.2.2.2.
1.2.3.3 最低抑菌浓度的测定 用丙酮把羊蹄甲
花提取物配制成0.125g/ml，0.1g/ml，0.075g/ml，
0.05g/ml，0.025g/ml，0.0125g/ml的溶液，在上述
6种不同浓度的羊蹄甲花提取物中，分别放入直径
为5mm的灭菌滤纸片(3片为一组)，浸泡2h，待其自
然干燥后，用紫外线照射灭菌10～15min，用无菌
镊子将浸透羊蹄甲花提取物的滤纸片放在含菌平板
上，每块平板上都放有一张浸有丙酮并自然风干的
滤纸片作为对照，把各培养皿置于37℃温箱中培养
24h.
    2   结果及分析
根据初步抑菌实验结果，发现羊蹄甲花的提取
物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌原
菌种有一定的抑菌效果，对土壤中的菌种2、菌种
4、菌种6有抑菌效果，但羊蹄甲花的提取物对黑曲
霉、米曲霉原菌种的抑菌效果很不明显，几乎没有
抑菌效果.
从表2.1可以看到：羊蹄甲花提取物对各菌均有

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抑菌活性，当羊蹄甲花提取物质量分数为0.125g/ml
时对各菌的抑菌圈最大，随着质量分数的减小，抑
菌圈也逐渐减小，在抑菌质量分数为0.0125g/ml只
有金黄色葡萄球菌还有抑菌圈，其他的都没有；当
抑菌质量分数为0.01g/ml的时候各供试菌种都没有
抑菌圈(滤纸片d=5mm).
羊蹄甲花提取物对大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、
金黄色葡萄球菌和土壤中的一些细菌有一定的抑菌
效果，并且随羊蹄甲花提取物浓度的增加，其对大
肠杆菌、枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作
用也增强，呈一定的剂量依赖性. 枯草芽孢杆菌和
大肠杆菌的最低抑菌浓度都是0.0125g/ml，但从抑
菌直径来看羊蹄甲花提取物对枯草芽孢杆菌的抑菌
直径在最大浓度时可达9.0mm比大肠杆菌的7.4mm
大，提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度是
0.01g/ml且在三种细菌中抑菌效果是最好，抑菌圈
直径可达到13.0mm.
在不同浓度的羊蹄甲花提取物的作用下，其对
金黄色葡萄球菌的抑菌效果比对枯草芽孢杆菌和大
肠杆菌的都要好得多，而对枯草芽孢杆菌的抑菌
效果整体来说又比对大肠杆菌的好. 根据抑菌环直
径，≥20mm为极度敏感，15~19mm为高度敏感，
10~15mm为中度敏感，≤10mm为低度敏感[8]. 羊蹄
甲花提取物对金黄色葡萄球菌的最大抑菌直径接近
14mm，为中度敏感接近为高度敏感，对枯草芽孢
杆菌最大抑菌直径接近10 mm，为低度敏感接近为
中度敏感，对大肠杆菌最大抑菌直径接近8.0mm，
为低度敏感.
将羊蹄甲花提取物经121℃、20 min 高温灭菌
后，在浓度最大为0.125g/ml时，滤纸片周围也只
是出现小于1mm的抑菌圈，也许经过高温灭菌处理
后，提取物中的黄酮类、生物碱、甾醇类及没食子
酸的衍生物、有机酸等多种抗菌或抑菌成分大量甚
至全部损失，以致使羊蹄甲花提取物失去杀菌作用.
通过实验发现羊蹄甲花的提取物对三种细菌的抑菌
存在差异. 大肠杆菌是革兰氏阴性菌，革兰氏阴性
细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高.
枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌都是革兰氏阳性
菌，革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成
的网状结构组成的,网状结构复杂,肽聚糖含量高, 脂
类物质含量低. 细胞壁可承受细胞内强大的渗透压
而不被破坏，其机械强度有赖于肽聚糖的存在[9]. 估
计羊蹄甲花提取物的抑菌机理不是破坏这些细菌的
细胞壁从而达到抑菌效果，应该是提取物通过渗透
进入细胞内，吸附细胞内带有阴离子的细胞质，并
发生絮凝作用，扰乱细胞正常的生理活动，从而杀
灭细菌[10]. 从实验结果还看出羊蹄甲花提取物对米
曲霉、黑曲霉等霉菌的抑菌效果不好，至于原因，
还需进一步研究.
    3   结 论
红花羊蹄甲花乙醇提取物对大肠杆菌、枯草芽
胞杆菌、金黄色葡萄球菌和土壤中的2、4、6号细
菌有一定的抑制作用，对金黄色葡萄球菌的抑制效
果尤其好，在浓度最大为0.125g/ml时，抑菌直径
为13.0mm，羊蹄甲花提取物对其为中度敏感接近
为高度敏感. 羊蹄甲花提取物对霉菌的抑菌效果较
差，对米曲霉、黑曲霉几乎没有抑菌作用. 羊蹄甲
花提取物的热稳定性不强，经高温灭菌后，其抑菌
效果大为降低. ■
不同浓度羊蹄甲花提取物抑菌直径/mm
对照组 0.125g/ml 0.1g/ml 0.075g/ml 0.05g/ml 0.025g/ml 0.0125g/ml
大肠杆菌 无 7.4 7.0 6.8 6.0 5.6 无
枯草芽胞杆菌 无 9.0 7.4 7.0 5.4 5.2 无
金黄葡萄球菌 无 13.0 10.2 10.0 9.2 7.0 5.8
表2.1：不同浓度的羊蹄甲花提取物的抑菌效果
Table2.1: the inhibitory effect of different concentrations from Bauhinia flower extracts
【参考文献】
[1] 陈定如.红花羊蹄甲(红花紫荆、香港紫荆、洋紫荆)苏木
科[J].广东园林,2006，（6）：17.
[2] Mare PM,Maria Carmen PI,Mahamane S,et al.Novel antifungal
卢海啸，陈永红　　　 红花羊蹄甲抑菌活性的研究
0
玉林师范学院学报2008 年 第 3 期
v¬åB
tetracyclic compounds from Bauhinia rufescens LAMK [J].
Helvetica Chimica Acta,1991,74:791~799.
[3] Gupta AK,Vidyapati TJ,Chauhan JS.Chemical examination of
the stem of Bauhinia variegate[J]. Planta Medica，1980，38:
174~176.
[4]
[5]
[6] 杨革.微生物学实验教程.北京：科学出版社,2004,114~114.
[7] 刘春棋，王小丽，曾靖.拳参提取物抑菌活性的初步研究
[J].赣南医学院学报，2006,（4）：489~489.
[8] 乌兰.金银花中绿原酸的提取及抗氧化性的研究[D].天津:
天津科技大学，2005.
[9] 韩淑琴，杨洋等. 仙人掌提取物的抑菌机理[J]. 食品科技,
2007，（3）：132~133.
[10]
【收稿日期    2008-03-07】
【责任编辑       谢文海】
Laux Delcio O,Guglir lmo stefani M,Otto Gott l ieb
R.Bausplendin,a dimet hy lenediox yflavone from Bauhinia
splendens[J].Phytochemistry,1985,24(5):1081~1084.
Mare PM, Maria Carmen PI, M ahamane S,et al.Novel
antifungal tetracyclic compounds from Bauhinia rufescens
LAMK [J].Helvetica Chimica Acta ,1991,74:791~799.
Galati E M, Mondel10 M R, Giufrida D, etal. Chemical
characterization and biological efects of Sicilian opuntia
ficusindica (L)mill.Fruit juice:antioxidant and Antiulcerogenic
activity [J]. J Aigric Food Chem ,2003,51(17):4903~4908.