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DNA分子标记检测技术鉴定向日葵品种纯度的研究



全 文 :收稿日期:2008-04-28
基金项目:国家向日葵品种纯度分子检测技术项目。
作者简介:高 飞(1980-), 男 ,硕士 , 主要从事种子质量检测工作;
E-mail:gaofeiak@yahoo.com.cn。
DNA分子标记检测技术鉴定向日葵品种纯度的研究
高 飞 1 ,  张 英 1 ,  林 展2 ,  赵建宗 2
(1.陕西省种子管理站 ,  西安 710021; 2.全国农业技术推广服务中心 ,  北京 100026)
摘要:通过对来自国内外的 11个杂交向日葵品种的引物筛选 ,发现在 83对引物中有 8对引物能较好的区分当中的 8个
向日葵品种的父母本及其杂交种 ,其中 ORS10#、ORS78#、ORS340#引物能区分多个向日葵品种。这表明 SSR方法所含
信息量大 、灵敏度高 , 可用于向日葵品种纯度鉴定。此外还有 3个品种未找到特异引物 , 需要加大引物的筛选 ,因此该亲
本材料的收集和扩大引物的筛选是制约该方法应用与推广的重要因素。
关键词: 向日葵;品种纯度;SSR
中图分类号: S565.5   文献标志码: A   文章编号: 1001-4705(2008)09-0046-06
StduyontheVarietalPurityofSunflowerbySSR
GAOFei, ZHANGYing, LINZhan, ZHAOJian-zong
(1.ShaanxiSeedAdministrationStationXi an710021, China;
2.ChinaAgriculturalTechnonlogyExtensionCenterBeijing100026 , China)
Abstract:83 SSRprimerswerescreenedon11sunflowersamplesand8primerswerefoundtobeabletodis-
tinguish8sunflowersamplesanditsparentsaswelashybridswel, PrimersORS10#, ORS78#andORS340#
coulddiferentiatemorethanonesamples.TheresultshowedthatSSRwaspowerfultoidentifysunflowervarie-
talpuritywithabundantgeneticinformationandhighsensitivity.However, 3sunflowervarietieshadnospecial
peimerandtocolecttheirparentssamplesandmoreprimersscreeningwerethekeyfacters.
Keywords: sun-flower;varietalpurity;SSR
  随着遗传距离估测技术的发展 ,分子标记技术已
经成功应用于品种的注册与保护 [ 1] ,成为品种研究与
保护的重要方法。 SSR(simplesequencerepeats)就是
一种分子标记技术 ,其最大的优点在于扩增产物在进
行测序胶电泳分离时具有单碱基的高分辨率 ,能检测
到很高的多态性 ,遗传信息量较大 ,并具有较好的稳定
性和重演性 ,已广泛应用于玉米 、水稻等作物的品种纯
度鉴定 [ 2, 3] 。
向日葵 (HelianthusannuusL.)菊科 (Composi-
tae),一年生草木 ,是世界第二大油料作物 。据不完全
统计 , 2005年向日葵种植面积在我国已达 117万 hm2 ,
总产 174万 t,栽培面积仅次于大豆和油菜 [ 4] , 其经济
价值超过玉米和大豆。近几年来 ,随着我国人民生活
水平的提高 ,我国用于榨油的向日葵生产有了长足发
展 。通过不同的方式从国外不断引进优良杂交品种 ,
目前我国已育成 40多个油用杂交向日葵品种 ,市场上
推广的杂交向日葵品种已有 100余种[ 5] 。分子检测技
术也已成功地应用于许多作物品种纯度鉴定 [ 6 ~ 9] ,而
向日葵品种纯度检验技术在我国还主要依赖从形态学
观察。本实验根据纯度检测技术的特殊性 ,应用分子
标记技术 SSR方法对向日葵品种纯度的鉴定技术进
行探讨 。
1 材料与方法
1.1 材 料
向日葵材料由全国农技中心种子检验处提供 ,为
了使实验结果具有代表性 ,选取了国内及国外有父母
亲本的材料(榆 93-1、新葵杂 4号 、新葵杂 5号 、新葵杂
8号 、瑞特姆 、S31、S47、TK1、TK2、TK3及 DK1 033
共 11份)。SSR引物由北京优博基因科技有限公司合
成 ,共 83对 ,序列见表 1。
1.2 实验方法
1.2.1 DNA提取
每份材料随机选取父本 、母本及其杂交种子各 10
粒 ,温箱发芽 , 取其新鲜的子叶 , 参照国家标准的
CTAB法 ,分单株提取基因组 DNA。
1.2.2 PCR扩增
扩增与电泳检测 PCR反应体系为 20ml,其中包
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第 27卷 第 9期 2008年 9月            种 子 (Seed)            Vol.27 No.9 Sep. 2008
DOI :10.16590/j.cnki.1001-4705.2008.09.058
括:1×Bufer, 2.5×mmol/LMgCl2 , 0.2mmol· dNTPs,
250nmol/L引物 , 1 UTaq酶 , 50 ngDNA模板。 PCR
反应程序为:94℃预变性 5min;94℃变性 40s,复性
40s(依引物退火温度而定), 72 ℃延伸 40s, 35个循
环;70℃延伸 7min。采用 Bio-Rad测序胶板装置 ,在
6%变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离 ,银染后检测其等
位变异 。
表 1 ORS引物信息一览表
Marker ForwardPrimer ReversePrimer Tm
ORS1 CACTTCTCACACTTTGGGCA CCAAATAATTACCATCATGCCA 56.0
ORS4 ACAAGTCGGCTGGTGAGC ACATGAAACACGAGCTAAACC 58.0
ORS8 TTGGATCGATTGATGATTGTTG GAATCCGTCATGTATAAAACGA 54.0
ORS10 CTCCACCACACAATCTCCG TGTGGAGTTTGCCAGAACTG 59.0
ORS12 GCTTTGAGAAACCGCTTCAC TTGATATGGTAACTAACGAACACAA 56.5
ORS13 GAATAACCTTGTGGAGTTTGCC CCTCATTCTCATTCTCTCCACC 59.0
ORS14 GCACGACTCATTTGGAGGTATG AAATCGTCGAACATTGGGAC 58.0
ORS16 GAGGAAATAAATCTCCGATTCA GCAAGGACTGCAATTTAGGG 56.0
ORS31 AATTCATGCCCCAAGAGATG CACAATTCATGCATTTCTCTGG 56.0
ORS37 CACAATGCAAAAAAACCCAG CAAGGCACATCGACCTTTC 56.0
ORS47 TGAGATTCCTCGTACTTCATCTG CCATAGGATGCATAGGAAGAGG 59.0
ORS53 GCTGGCAATTTCTGATACACGAT CATCTAGACAACGACAGAAGATG 58.0
ORS57 TTCCATTTCCACCATTTTGGC CATTCATGGCCTAAAAGGTTC 56.0
ORS66 TCAAAGGAAAAAGAAGGCGA GTCATCTTCACCACCTTCTGG 57.0
ORS70 GACCCTGGTCACCGAAGTTA ATCTGAAATCGGACAAGATTCA 57.0
ORS78 GTTCGTCGAGTACATGTTCTGC TTTCCCTCTGGAAAGTTGTCA 58.0
ORS295F TTAAAAACGGCGAACATTGC GCCACCTATGAGCCAGAAAC 56.8
ORS321F TGTCGAAGAGTTGTCGGAAC GGGAAGGTGAAACCCTAACC 58.8
ORS323F CGGGAAACTAGGATCAGAGG GCCGGAGGATTAGAGGAGTT 59.9
ORS328F GACCTGTAGGCCAATATGAGACTT TTATACCGGTGTTGTATCGTATCC 59.4
ORS333F CGGTTAAGATGGTTCAGTTGG ATATTAAGTTTTGGTTTTAGCCAGAA 56.1
ORS334F TTGGCACAATCTGAAACAAGA AATCAAACCGAAAGCCAAACT 54.1
ORS340F GGGCATAGTTTCCTCCGTTT AAGTTCTCACGGTTCTTACAACTC 58.2
ORS351F TGAAACGTAGTAACCTGCCAAA TTGGACGACCTCGGTATCTT 57.1
ORS364F ACGGAAAGCTCTTGAAAGCA GCGGGCATTCCAACTAGTAA 56.8
ORS385F TGAGGGACCAAAGTGGGATA GGGTGATCGCTAATTCATGTT 56.9
ORS386F TCCAGTTATCCAAAGGTGTGC GTGCTAGAAGAACCTGTAACCATT 58.3
ORS399F CGTACGGTGTAGTTCTCATGGT GGATCACGTGGCGTTCTATT 58.9
ORS400F CGAACCCGTCTGTACCGTTT ACTTCGTTCACAAGGCACAA 57.8
ORS409F TCCCAGACTAGAGATCGACCA AAACTCAAGGGACTAAGGTTGC 59.1
ORS853 TTGTTAAGGCTCTTGCTAATGAA TGCTTATTGACGTTACCCATTG 55.5
ORS857 ACATCCGAACGAAGGACAATC CAAGAAAGTATGTCACCCAATAGCA 58.5
ORS864 ATTGTGGGAAAAGTGAGGGTTT CACGACAGTGGAATAATCGGTAA 57.0
ORS889 ATCAACTACGTCACGATACTCC GTTCTCATGGATTCTCACAACTC 58.0
ORS897 GTTCTCGCAATAAAGGTGGTTCT CAAAACCGGAAACTGAAGATGA 57.0
ORS908 GAAAGAATGACAGCGACAGGTAA CCGCTAGGGATATTTAAGACCAA 58.0
ORS913 TGGTGCTCAAAACTACACAGACA TTTTCATCCGTTCTCATGGTTCT 58.0
ORS925 ATGATTCTAAGTTGCGGTAGTGC GTTGGGTTTAAGTTGTTGCTTCC 57.5
ORS930 TTTGGGTCAAGAATAGGTCGAGA CCTTCTCACACACACACGTACATACA 60.0
ORS938 ACCAACTCCCATGCAACCTAA GCGTTCTCACCGTTCTAACACTT 59.0
ORS946 CAAAACCAGCCATCTATCTCTCTTC TTTGTGGGTCTCTCTCTACAAGGTT 60.0
ORS963 CCTCCTAGGGTGTGAGGATGAG TCGAACTCTGGCTCTTGTAGTTG 62.0
ORS966 TCAAAGATGTCACCATAGGAAAGA ATTTGCTGAGACCATGAGCATC 57.5
ORS974 GCATTTTCAATGGATCTGTTCTTT AAAATCACAACTGATTCTTAACCATT 54.5
ORS988 TTGATTTGGTGAAAGTGTGAAGC CGAACATTATTTACATCGCTTTGTC 57.0
ORS994 CCACCACTCATTTCTCACTCTCTT CGAACTACGTGCCCTGATTTAAC 60.0
ORS995 CATGCTTTCTAGGATGGTCAGTT TGTATGTGGAGGCCAACAAGTAT 58.0
ORS1 012F ATCTACAACCCAAGCAACACAAA CTCTCTTGCCTCCAAACTCACC 59.3
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研究报告  高 飞 等:DNA分子标记检测技术鉴定向日葵品种纯度的研究
ORS1 017F GCATGCATCTTTCCCATATCTCT GGTGTTGAATTCTCAAGAACAAGTTT 57.8
ORS1 021F AACCCTAATCCAACCAGATACGA TACCACCAGCTCATCCTTAACCT 59.3
ORS1 028F CTTATTCCAAGGACGCATAGTCG CGATGGTATGATTCTCGACGTTA 59.3
ORS1 035F CAACCCAACTTCTCCTCATAACC AGGGCTGATATTCACTTCACACA 59.3
ORS1 040F CTGCTGATCGTTTCTTGGATAGA TGCTAATCCTTCTAATCAACTTCCAC 58.6
ORS1 043F CCAAACCGTCATGTTCTATGTTC AGTGTGATTGCGAATTGTAGTGC 58.4
ORS1 045F GGTGACAAGAGGGGTGTTCAG GGACAAATGAGTGTTGGGAGTTT 60.2
ORS1 068F AATTTGTCGACGGTGACGATAG TTTTGTCATTTCATTACCCAAGG 56.5
ORS1 089F CCATTGTAGGTTGAGCGAGTTG ATGGTTACGAGGTGGACTGAAAT 59.2
ORS1 091F TCCTTTAGCCTCACACGAAATC ACCGTTTACCCATATTACACCTTT 57.5
ORS1 095F AAGTTGCACCATGTTATTTCACAG TGTTTGATTCTCATGCACATATTGA 56.1
ORS1 097F GACCAAGTGGACTGACACGAG CGGTGGTGGCTTAGATTGTATAGT 61.1
ORS1 112F CCCCATCAATCATATTTACCATGT CGCACACTTCATCTCTCGTTACA 58.5
ORS1 118F AGGCTTTGTATTCCGCTTCAG AAAACTCGTCGGATCACTTCAAT 57.3
ORS1 127F AAACTGAAACCGTACGAAAGAC CCTTTTATTTGAGTGTGTATAATCAG 56.0
ORS1 128F TCTGTGCCATACCACTTTATTCG GGCGATAATAGATGCGACACTC 59.2
ORS1 130F AGCAACAACATCAACAATCAAGC CCCACTCGGGATCCTATATAAAC 58.4
ORS1 147F TCTGAGTAGCCGCCGTATCAC AAACATCACTTTCCACTTATACCCTTC 60.4
ORS1 159F TTTCGTGATGGTGATTGATGATT CAGCAACTCTGACCGTTTCATTA 56.6
ORS1 196F AACGATCCTCTCTCCTAAACCCTA CGTCCAGTTGCTTCCAAAGAG 60.1
ORS1 197F CCCAGTACGTTACAGTCGTGTGTT CAAACAATCACGCAAGGGTTTA 59.2
ORS1 203F CTACACACGCATACACACCTGAA TCACTAATCTGTTGTACCGGCAT 59.3
ORS1 209F AACAAGCAAGCAAATCAACCATA AGAATTAAACCCAACCCGGAAC 56.5
ORS1 212F TTAAACCCTAGAAGGCCATACACT GATTGTTGCTATCACTCTCAAATGTT 57.9
ORS1 217F GCTGGTAGTTCTAGGGTTCCAAT GTTTGGTCAGTTTTGCCACTTTA 58.4
ORS1 219F CAAACTCTTGCATGTTATGTCCTTT GATCTATCTCAACCACCACTGATCT 58.7
ORS1 241F ACGACCTGAGTCCCTATAAGCAT TGATGGTTGAAAGATGAATTTGTG 57.7
ORS1 256F GATGTTGATGTTGGTGAAGTTGC CTCCGTCACCTTAAGCACTTGTA 59.3
ORS1 259F ACCCATGTTGATAGCCAACCTT TAGATTCCGAGGTGTGAGGGTAT 59.2
ORS1 262F CTCCACCATCAACATTAGACCAC GCTTAAACCATTACTTGCCACAT 58.4
ORS1 267F AGATCGAGCAACAACCACCAC CGAACCAAGAACCAACTGGAAT 59.1
ORS1 269F AGACTTCTCAAACATCACGGGC GCATCATCGCACTTAGGGTTAAAT 59.3
ORS1 284F TCCTTGTTTTAGGGAAAGTAGATACG AAGGCACAACATTATTATCGTCAA 57.0
ORS1 285F ATAAGTAAGACCTTGAGTCCACAGC GATGATCTTGGGCTGATGATG 59.2
ORS1 287F TGATTCAACATGGCGTAGCTAAT AGCGATTTAGGGTTTCGGAGTAT 57.5
2 结果与分析
2.1 DNA分离纯化方案的优化
根据种子纯度检测要求准确 、简便 、快速 、经济的
特点 ,对向日葵 DNA提取的方法 、提取的部位及研磨
的方法进行了优化。高质量植物基因组 DNA提法主
要分为 SDS法和 CTAB法 ,首先我们对 CTAB法和 S
法进行比较 ,发现 CTAB法比 S法提取便捷 , 提取的
DNA质量较好 ,纯度较高 ,只是 DNA产量比 S法少 ,
但足以进行 PCR扩增 ,最后选择了 CTAB法 。其次 ,
我们对向日葵提取的部位进行比较 ,发现叶片提取的
DNA产量高于籽粒提取的 DNA,虽然叶片需要 5 ~ 7d
的发芽时间 ,不如籽粒直接提取省时快速 ,但是对于品
种纯度检测来说 ,更切合实际。最后 ,我们对研磨样品
的方式进行了改进。工作中发现 ,如果所提取的材料
较多 ,用研钵研磨耗时太长 ,还容易污染。改为使用液
氮在离心管中掏碎的方法 ,不但快速而且干净 。
2.2 引物筛选
2.2.1 筛选结果
按照全国农技中心种子检验处提供的 ORS系列
引物 83对及实验材料 ,在 11份材料中找到了适用于
8份材料的特异性引物。第一批引物 ORS(1 ~ 78, 857
~ 995)共 34对 ,在 11份材料中有 122条扩增条带 ,扩
增效果较好;第二批引物 ORS(321 ~ 409 , 1012 ~
1287)共 50对 ,在 11份材料中仅有 135对扩增 。具体
的筛选结果见表 2。
2.2.2 结果分析
目前仅用 83对引物就能在 8份材料中筛选出特
异引物 ,而且有较好的扩增效果 ,说明该方法灵敏度
高 ,适用于鉴定向日葵品种纯度 。其次仍有 3份材料
未找到合适引物 ,说明该方法若应用推广 ,引物的筛选
将是其重要的限制因素。
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表 2 OSR引物(1 ~ 1 287)筛选结果
品种名称 扩增较好的引物 扩增效果较差的引物
榆葵杂 1号 57# 340#
新葵杂 4号 10#
新葵杂 8号 12#
瑞特姆 78# 946#, 340#
S31 10#, 13#
S47 78# 340#
TK2 1205# 78#
TK3 10#
  注:1.未能在新葵杂 5号 , DK1033, TK1父母本及杂交种中筛选出
具有特异扩增差异的引物;2.扩增效果较好:扩增差异明显 ,能清晰的
区分父母本;3.扩增效果一般:扩增效果较差 ,或者产物条带较多。
从表 3可以看出 ,筛选出的特异引物都集中在多
个品种中均有扩增的引物中 ,其次本次筛选出的引物
多数集中在第一批引物中 (ORS1 ~ 78, ORS853 ~
995),该批引物在国外扩增效果较好 ,其中筛选出的
10
#, 78#, 340#引物就可区分多份材料 ,说明扩增效果
普遍较好的向日葵引物较为容易筛选出特异引物 ,这
3对引物可以作为向日葵种子纯度鉴定的重点引物。
再次很多引物在不同品种中均有扩增 ,也有些引物在
所有品种中均无扩增 ,如果能加大引物筛选量和品种
筛选范围 ,必将可以建立一个向日葵引物等级资料库 ,
可以方便使用者首先选用扩增效果好的引物 ,节约劳
动成本 ,使该方法更为快速 、简便 、经济。
表 3 向日葵引物筛选结果一览表
序号 品种引物 榆杂 1号
新葵杂
4号
新葵杂
5号
新葵杂
8号 瑞特姆 S31 S47 TK1 TK2 TK3 DK1033
1 ORS1 / / / / / / / / / / /
2 ORS4 + / + / / + / / / + /
3 ORS8 + + + + / + + / + + /
4 ORS10 + +√ + + / +√ + + + +√ /
5 ORS12 + + + +√ / + + + + + /
6 ORS13 + + + + / +√ / + + / /
7 ORS14 / / / / / / / / / / /
8 ORS16 / / / / / / / + / / /
9 ORS31 / / + / / / / / / / /
10 ORS37 / / / / / / / + / / /
11 ORS47 / / / / / / / / / / /
12 ORS53 / / / / / / / / / / /
13 ORS57 +√ / / / + + / + / / /
14 ORS66 + + / + + + + + + + /
15 ORS70 / / / + / / / + / / +
16 ORS78 + + / + +√ + +√ + +√ + +
17 ORS295 / / / / / / / + + / /
18 ORS321 + / / + + / + / / + +
19 ORS323 / / / / + / + / / / +
20 ORS328 / + / / / / / / / / /
21 ORS333 / / + / / / / / / / /
22 ORS334 / / / / / / / / / / /
23 ORS340 +√ / + + +√ + + / + + +
24 ORS351 / / / / / / / + / / /
25 ORS364 + / / + + + + / / / +
26 ORS385 / / / / / / / + + + /
27 ORS386 / + / / / / / / / / /
28 ORS399 / / / / / / / / / / /
29 ORS400 / + / / / / / / / + /
30 ORS409 / / + + + / + + / / +
31 ORS853 / + / + + + + + + + /
32 ORS857 + + + + + + + + + + +
33 ORS864 + + + + + + + + + + /
34 ORS889 + / / / / + / / + / /
35 ORS897 + + + / / + / / / + /
36 ORS908 / / / / / + / / / + +
37 ORS913 / / / / / / / / / / /
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研究报告  高 飞 等:DNA分子标记检测技术鉴定向日葵品种纯度的研究
38 ORS925 / / / / / / + / / / /
39 ORS930 / / + / + / / / + + +
40 ORS938 / + + + + / / + + + +
41 ORS946 / / + + +√ + + + / + +
42 ORS963 / + / + + + / / + + /
43 ORS966 / + / / / + / / / / /
44 ORS974 / + + + + + + + + + +
45 ORS988 / / + / / + / / / / /
46 ORS994 / / / + / + + + / / /
47 ORS995 / / / / / / / + / + /
48 ORS1 012 / / / / / / / / / / /
49 ORS1 017 / / / / / / / / / / /
50 ORS1 021 / / / / / / / / / / /
51 ORS1 028 / / / / / + / / / / /
52 ORS1 035 + + + + + / + + + / +
53 ORS1 040 + + + + + / + + + / +
54 ORS1 043 / / / / / / / / / / /
55 ORS1 045 / / / / / / / / / / /
56 ORS1 068 / / / / / / / / / / /
57 ORS1 089 / / / / / / / / / / /
58 ORS1 091 + + + + + / + + + / +
59 ORS1 095 / / / / / / / / / / /
60 ORS1 097 / / / / / / / / / / /
61 ORS1 112 / / / / / / / / / / /
62 ORS1 118 / / / / / / / / / / /
63 ORS1 127 / / / / / / / / / + /
64 ORS1 128 / / / / / / / / / / /
65 ORS1 130 + + + / + / / + + + +
66 ORS1 147 + + + + + + / + + + +
67 ORS1 159 / / / + / / / / / / /
68 ORS1 196 / / / / / / / / / + /
69 ORS1 197 / / / / / / / / / + /
70 ORS1 203 / / / / / / / / / / /
71 ORS1 209 + + + + + + + + + + +
72 ORS1 212 / / / / / / / / / + /
73 ORS1 217 / / / + / / / / / + /
74 ORS1 219 / + / + / + + / / + +
75 ORS1 241 / / / + + + + + + / +
76 ORS1 256 / / / / / / / / + / /
77 ORS1 259 + + / + / + + + / / +
78 ORS1 262 / / / / / / / / / + +
79 ORS1 267 / + / / / / / / / + +
80 ORS1 269 / / / / / / / / / / /
81 ORS1 284 / + / / / / / / / / /
82 ORS1 285 / / / / / / / / / + /
83 ORS1 287 / / / / / / / / / + /
  注:“ /”表示无扩增条带;“ +”表示有扩增条带;“ +√”表示可区别父母本 ,并可用于鉴定的条带。
3 讨 论
实验结果表明 ,该方法多态性好 、灵敏度高适用于
向日葵种子的纯度鉴定 ,但是仍有 3份材料未找到适
合的引物 ,说明能否筛选到合适的引物是该方法成功
应用的一个瓶颈因素 。建议在第一批引物设计的思路
下 ,增加引物数量 ,建立向日葵纯度鉴定 SSR核心引
物资料目录索引 ,作为该方法的参考资料(可以作为
资料性附录)。其次 ,向日葵亲本材料少 。由于品种
保护等原因的限制 ,要收集到亲本种子 ,这几年越来越
难 ,影响到该方法引物的筛选。所以建议收集更多的
父母本材料 ,进行更大范围的引物筛选 ,扩大适应范
围 ,节约鉴定时间 。
(下转第 56页)
·50·
第 27卷 第 9期 2008年 9月            种 子 (Seed)            Vol.27 No.9 Sep. 2008
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(上接第 50页)
自 19世纪中叶至今 ,向日葵田间栽培已经 500多
年 ,人们积累了丰富的田间鉴定经验 ,长期以来形态标
记是鉴定杂交向日葵品种的主要手段 。此法简单 、直
观 、易观测记载 ,但准确性较差 ,尤其是由二环系选育
来的姊妹系及细胞质不育系与同型保持系及其杂交种
很难从种子形态特征上鉴别。而分子检测技术检测的
信息含量大 、多态性高的特点 ,可以从本质上能反映生
物个体或种群间基因组中某种差异特征的 DNA片段。
但向日葵几个碱基的区别未必能影响与其产量相关的
性状 ,因此 ,为了确定 DNA分子标记检测技术方法的
可靠性 ,要对现有样品的田间小区种植鉴定结果与室
内检测结果进行对比。随着科学的发展 ,目前很多分
子标记技术应用于向日葵品种纯度的研究[ 9, 10] ,相信
生化技术和分子生物学技术不断深入研究而得到改进
和完善 ,人们终将获得一个完善的检验技术体系。
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第 27卷 第 9期 2008年 9月            种 子 (Seed)            Vol.27 No.9 Sep. 2008