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薇甘菊提取物抑菌作用的初步研究



全 文 :   收稿日期:2006-02-20
基金项目:湖南省科技厅基金项目(04FJ3019)
作者简介:梁 斌(1978-)男 , 山西太原人 ,南华大学生命科学院硕士研究生.主要研究方向:生物有机化学.*通
讯作者.
第 20卷第 2期 南华大学学报(自然科学版) Vol.20 No.2
2006年 6月 JournalofNanhuaUniversity(ScienceandTechnology) Jun.2006
文章编号:1673-0062(2006)02-0109-03
薇甘菊提取物抑菌作用的初步研究
梁 斌 ,袁亚莉* ,刘传香
(南华大学 生命科学院 ,湖南 衡阳 421001)
摘 要:以薇甘菊(Mikaniamicrantha)提取物乙酸乙酯部分对大肠杆菌和金黄色葡
萄球菌进行抑菌试验.结果表明 ,薇甘菊提取物乙酸乙酯部分能有效地抑制细菌的生
长 ,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为 5%、10 %.
关键词:薇甘菊提取物;抑菌作用;最低抑菌浓度
中图分类号:Q949.783.5   文献标识码:A
PrimaryStudyofAntimicrobialActionof
ExtractsfromMikaniamicrantha
LIANGBin, YUANYa-li* , LIUChuan-Xiang
(SchoolofLifeSciences, NanhuaUniversity, Hengyang, Hunan421001, China)
Abstract:AntimicrobialactivitiesofEthylethersectionofextractsfromMikaniamicrantha
againstEscherichiacoliandStaphylococcusaureushavebeentested.Theresultsshowed
thatEthylethersectionofextractsfromMikaniamicranthacouldefectivelyinhibitthe
growthofbacteria.TheanticrobialminimumdosagesofEthylethersectionofextractsfrom
MikaniamicranthawereagainstEscherichiacoliandStaphylococcusaureus5%and10%
respectively.
Keywords:Mikaniamicranthaextracts;antimicrobialaction;MinimumInhibitoryConcen-
tration
  薇甘菊(Mikaniamicrantha)是菊科 、假泽兰
属的多年生藤本植物 ,原产于中南美洲 ,后传入东
南亚和香港 , 严重危害经济作物和森林植被 [ 1] .
特别对森林 、茶园 、柚木林 、橡胶林 、油棕林 、果园
等地的危害严重 ,其产生蔓生茎 ,攀缘并缠绕幼
树 、作物或其他植物 ,使其死亡 [ 2] .在我国大陆 ,
薇甘菊广泛地分布在珠江三角洲地区[ 3] .
对于外来入侵物种 ,将有力的控制和有效的
利用结合起来 ,是一种很好的生态控制手段.有学
者对薇甘菊的利用价值进行了研究 , Facey等对
牙买加传统药用植物所做的系统研究中发现 ,被
测试植物中有 1 /4种植物的提取物对链菌 、葡萄
球菌等 5种常见病菌具有抑制作用.其中 ,从薇甘
菊中分离出 2种倍半萜 , mikanolide和 dihydromi-
kanolide,可抑制 StreptococcusAureus和 C.albicans
的生长 [ 4] .薇甘菊具有广谱抗菌的功能 , 对细菌
和真菌均有活性 ,也可作为民间药用 ,用于治疗伤
口及其他用途[ 5] .冯惠玲等研究了薇甘菊提取物
对植物病原菌的生物活性 ,结果表明 ,在每毫升培
养基含 0.02 g植物干样的条件下 ,薇甘菊的丙
酮 、甲醇提取物对辣椒疫霉 、玉米大斑病菌菌丝的
抑制率均为 100%,说明薇甘菊提取物对辣椒疫
霉 、玉米大斑菌菌丝有较强抑制作用 [ 6] .为了进
一步开发利用薇甘菊 ,我们对薇甘菊的抑菌作用
进行了研究.
1 实验材料和方法
1.1 薇甘菊
供体植物薇甘菊采自深圳市龙岗华南农业大
学生态村 ,采样时为盛花期 ,成片生长.
1.2 实验菌菌种
大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球菌
(Staphylococcusaureus),以上菌种由南华大学微
生物教研室提供.
1.3 培养基
牛肉蛋白胨培养基 ,由南华大学微生物教研
室提供.
1.4 主要仪器
循环水真空泵 、旋转蒸发仪 、恒温培养箱 、电
热高压蒸汽灭菌锅 、超净工作台.
1.5 薇甘菊提取物的提取及溶液配置方法
取薇甘菊鲜茎叶 5 kg,切碎 ,然后在 50℃以
下烘干 ,用植物试样粉碎机粉碎 ,在自制的索氏提
取器中用体积浓度为 95 %的乙醇回流提取 14
天 ,浓缩后所得浸膏依次用石油醚 、乙酸乙酯 、乙
醇进行萃取 ,分别得到薇甘菊提取物的石油醚部
分 、乙酸乙酯部分 、乙醇部分和水部分.乙酸乙酯
部分浓缩后用无菌水定容至 1 g/mL(即 1mL水
中含有 1 g植物干物质),冷藏待用.
1.6 菌种活化及菌悬液制备
供试菌种原种经培养基平板活化 ,扩大培养 ,
用无菌生理盐水配制成 107 ~ 108 CFU/mL的菌
液 ,备用.
1.7 抑菌活性测定
1.7.1 滤纸片法测定抑菌作用
取直径 6 mm的滤纸片 ,置于 1 g/mL的薇甘
菊提取物乙酸乙酯部分的溶液中 12 h,对照用无
菌水 , 110℃下高压灭菌备用.将上述供试菌液各
取 0.5 mL与相应固体培养基 ,在超净工作台内制
成含菌平板 ,取含浸出液的滤纸片贴在含菌平板
上 ,每皿贴 5片 ,每菌做 3次重复 ,细菌置 37℃的
生化培养箱内培养 48h,测定 48 h后滤纸片的抑
菌圈大小 ,比较抑菌效果.
1.7.2 最低抑菌浓度(MIC)测定
根据肉汤连续稀释法 [ 7] ,将 100 %(即 1 mL
水中含有 1 g植物干物质)的薇甘菊提取物乙酸
乙酯部分溶液与各菌种的液体培养基配成 20 %、
10%、5%、2.5%、1.25 %、0.625 %六个梯度的
薇甘菊提取物乙酸乙酯部分稀释液各 5mL.把制
备好的菌悬液分别吸取 0.1 mL,对应加入到薇甘
菊提取物乙酸乙酯部分不同浓度的稀释液中 ,对
照用无菌水 ,充分摇匀 ,放入培养箱 ,细菌 37℃培
养 24h,取出观察结果 ,如管底有膜状 、片状或粒
状生长物 ,振荡后液体混浊者为阳性管;管内液体
澄清 ,肉眼未见有菌生长者为阴性管 ,找出最低抑
菌物浓度的阴性管 ,则为薇甘菊提取物乙酸乙酯
部分的最低抑菌浓度.
2 结果与分析
2.1 薇甘菊提取物乙酸乙酯部分的抑菌效果
滤纸片法测定抑菌作用 ,取每菌 3次重复结
果均值见表 1.
表 1 薇甘菊提取物乙酸乙酯部分对供试菌种的抑菌效果
Table1 AnticrobialeffectofEthylethersection
ofextractsfromMikaniamicrantha
供试菌种 抑菌圈直径无菌水 1 g/mL(提取物浓度)
金黄色葡萄球菌 0 7.4
大肠杆菌 0 8.3
由表 1可知:1g/mL的薇甘菊提取物乙酸乙
酯部分溶液对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌均有一
定的抑制作用.
2.2 薇甘菊提取物乙酸乙酯部分对供试菌种的
MIC
上述各供试菌种 ,每系列浓度 3次重复观察
结果均值见表 2.
由表 2可知 ,薇甘菊提取物乙酸乙酯部分对
金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌的 MIC分别为 10 %、
5 %.
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3 结果与讨论
1)植物体内含有多种活性成分 ,具有抗癌 、
抗炎 、抗菌 、抗病毒等效果 ,这已成为目前研究的
热点[ 8-10] .本实验结果说明 ,薇甘菊提取物乙酸
乙酯部分溶液对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都
有一定的抑制生长作用.
表 2 薇甘菊提取物乙酸乙酯部分对
供试菌种的最低抑制浓度(MIC)
Table2 AnticrobialminimumconsistencyofEthylether
sectionofextractsfromMikaniamicrantha
供试菌种 最低抑菌浓度(MIC)
金黄色葡萄球菌 10
大肠杆菌 5
2)据有关文献报道 ,黄酮类化合物是药用植
物的一大类有效成分 ,具有多种生物活性 ,其主要
作用之一是抑菌或杀菌 ,低浓度能抑菌 ,高浓度能
杀菌[ 11] .本实验已初步证明薇甘菊提取物乙酸乙
酯部分具有一定的抑菌作用 ,为下一步从薇甘菊
中可能分离出黄酮类化合物或其他的抑菌活性成
分提供了理论依据.
3)薇甘菊提取物石油醚部分 、乙醇部分和水
部分还有待进行进一步的活性研究 ,在活性监测
下 ,对其中的生物活性成分进行提取分离.
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93.
(上接第 108页)
进行了更细粒度的划分 ,通过我们实际的基于
J2EE技术规范的关于电子商务系统开发过程中
发现 ,这种体系结构的划分在一定程度上对系统
的设计与开发有一定的帮助.当然 ,基于构件的电
子商务系统的体系结构研究还有些问题有待解
决 ,如构件层次依赖问题 、构件粒度问题 、构件管
理问题等等 ,这些都需要进一步的研究探讨.
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111第 20卷第 2期            梁 斌等:薇甘菊提取物抑菌作用的初步研究