全 文 ：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2011年 第 36卷 第 4期
Preliminary on antibacterial of etracts from leaves in
Flaveria bidentis in different solvents
LU Zhan-gen, WANG Qian, ZHAO Juan-juan, ZHAO Hong-yu, LI Guang-xiang, JIA Dong-dong
(Department of Biology , Hengshui University, Hengshui 053000)
Abstract: The water extracts, the alcohol extracts(50%, 70% and 95%), acetone and ethylacetate from leaves
in Flaveria bidentis in Hengshui Lake were examinated for antibacterial activity on three kinds of bacteria. It is
shown that extracts of Flaveria bidentis had different inhibiting activities on Escherichia coli, Bacillus subtilis
and Clostridium perfringens. The 80% alcohol extracts had the strongest inhibitory effect on the three kinds of
bacteria. The inhibitory effects of the alcohol extracts from leaves in Flaveria bidentis on Escherichia coli were
better than others, but acetone and ethylacetate had lowest antibacterial action. The three kinds bacterium had
different sensitivity of extracts from Flavera bidentisleaves.
Key words: Flaveria bidentis; extract; bacteria; antibacterial activity
芦站根， 王 倩， 赵娟娟， 赵红玉， 李光祥， 贾东东
(衡水学院生命科学系，衡水 053000)
摘要： 实验用水、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇、乙酸乙酯和丙酮从黄顶菊叶片中提取活性成
分，探讨了其抑菌作用，结果表明，黄顶菊提取物对大肠杆菌、产气杆菌和枯草芽孢杆菌均有
不同程度的抑菌作用，其中醇提取液抑菌效果强于水，且 80%乙醇粗提物抑菌作用最强，丙酮
和乙酸乙酯抑菌效果最差；不同菌种对溶剂提取液敏感度不同。
关键词： 黄顶菊；提取物；细菌；抑菌活性
中图分类号： R 284.2 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2011)04-0167-03
衡水湖黄顶菊叶不同溶剂提取液
抑菌初步研究
收稿日期： 2010-05-09
基金项目： 河北省科技厅科技攻关项目(06220159)。
作者简介： 芦站根（1971—），女，河北武邑人，副教授，主要从事植物学教学与研究工作。
黄顶菊 (Flaveria bidentis)是近年来在衡水湖
最新发现的一种一年生外来入侵植物，隶属菊
科黄菊属 [1]。目前人们对其的研究主要是将其作
为田间杂草如何去除，但是黄顶菊具有很好的抗
虫、抗菌活性 [2]。黄菊属的近缘属植物万寿菊已
被列入杀虫性植物，其主要杀虫成分 α- 三连噻
吩是一种典型的光活化毒素，且杀虫活性和 a-
三连噻吩的含量成正相关 [3]，对植物病原菌具有
光活化毒杀增效作用。而 α- 三连噻吩在黄顶
菊中分布广泛，含量很高 [4]，黄菊属植物还能合
成酚类化合物中的硫酸盐类黄酮物质，也具有
强的抑菌效果[5]，因此,黄顶菊有望成为一新的天
然农药提取植物。
笔者研究了黄顶菊叶不同溶剂提取液对大肠
提取物与应用
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DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2011.04.007
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2011年 第 36卷 第 4期
杆菌、枯草芽孢杆菌和产气杆菌的抑菌作用，以
期为新农药和植物源抑菌剂开发提供理论基础和
科学依据。
1 材料和方法
1.1 材料与设备
1.1.1 实验材料 黄顶菊植株，2008年 10月 8日
采于衡水湖湖边。
1.1.2 实验菌种 大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草
芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)、产气杆菌 (Clostridium
perfringens)菌种：衡水学院生命科学系微生物实
验室。
1.1.3 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏 5.0
g、蛋白胨 10.0 g、琼脂 20.0 g、NaCl 5.0 g、水
1000 mL、pH 7.0。
1.1.4 主要仪器设备及试剂 S B - JS - 1超净工作
台：上海博迅实业有限公司医疗设备厂；CX- 250
超声波清洗仪：北京医疗设备二厂；ZD- 85 气浴
恒 温 振 荡 器 ： 江 苏 金 坛 市 医 疗 仪 器 厂 ；
YXQ- LS- SH全自动立式电热压力蒸气灭菌锅：上
海博迅实业有限公司医疗设备厂；FA1004N电子
天平：上海；微调移液器：法国吉尔森；HH- 6数
显水浴锅、烘干箱、500 mL蒸馏瓶：天津产；研
钵；蒸馏水、50%乙醇、80%乙醇、95%乙醇：国
产试剂；6 mm滤纸片等。
1.2 实验方法
1.2.1 黄顶菊叶片浸提液制备 将黄顶菊叶片洗
净、60℃烘箱烘干，将叶片称取 6份，每份 10 g，
在干净的研钵内研碎，分别于蒸馏水、丙酮、乙
酸乙酯、50%乙醇、80%乙醇和 95%乙醇各 160
mL中浸泡，并放于超声波破碎仪中振荡 20 min后
移至气浴恒温振荡器 28℃振荡 2 d，残渣继续用
以上 4种不同浸提液 50 mL浸泡振荡器中振荡过
夜，次日将第 1次与第 2次的提取液混和，水浴
锅蒸馏，25 mL容量瓶定容，4℃冰箱冷藏待用。
1.2.2 培养基的制备 牛肉膏蛋白胨培养基分装到
三角瓶中，121℃高压灭菌 20 min。
1.2.3 菌悬液的制备 把供试的各种菌种进行斜面
活化，然后用 10 mL无菌生理盐水把已活化的供试
菌从试管中混匀，制成菌悬液，再用无菌吸管取 1
mL充分混合的菌悬液于试管中，加入 9 mL无菌生
理盐水，用显微镜直接计数法测菌体个数，调制浓
度为含菌体为 106～107 cfu /mL的菌悬液备用。
1.2.4 含菌平板的制备 将无菌培养基趁热倒于平
皿中，凝固后，将上述各菌悬液用移液抢取 100
μL滴到平皿，再用无菌的涂布棒迅速将菌液涂抹
均匀，制成含菌平板。
1.2.5 抗菌活性的测定 原提取液抑菌圈测定蒸馏
水、50%乙醇、80%乙醇、95%乙醇 4种不同的浸
提液中分别用直径为 6 mm的灭菌滤纸片，浸泡 3
h，37℃温箱干燥后，用紫外灯照射灭菌 10～15
min,用无菌镊子将浸透不同浓度溶液的滤纸片放在
含菌平板上 37℃培养 72 h，测量抑菌环直径；小
于或等于 6 mm判为抑菌，同一浓度所有滤纸片均
有抑制作用判为合格。根据抑菌圈的大小判断不
同提取液对供试菌的抑制效果。各提取液的每项
抑菌实验均平行重复 3次。抑菌圈直径大于 6 mm
小于 10 mm为低度敏感；大于 10 mm小于 15 mm
为中度敏感；大于 15 mm为高度敏感[6- 7]。
2 结果与分析
2.1 黄顶菊叶提取物对 3种细菌的抑制效果
从表 1可以看出，6种溶剂的提取液对大肠杆
菌，产气杆菌，枯草芽孢杆菌 3种菌种都有一定
抑制作用。其中 80%乙醇溶剂提取液对大肠抑菌
作用最为明显，50%乙醇次之，乙酸乙酯提取液的
抑菌作用最差，并且蒸馏水、乙酸乙酯和丙酮抑
菌效果差异不显著，其他 3种差异显著。而丙酮、
乙酸乙酯对产气杆菌无抑制作用，80%乙醇对产气
杆菌抑制效果最好，50%乙醇与 95%乙醇次之(二
者差异不显著)，蒸馏水最差，且与其他溶剂均差
异显著；丙酮对枯草杆菌无抑制作用，蒸馏水、
乙酸乙酯和 50%乙醇对枯草杆菌的抑菌效果差异
不显著，80%与 95%乙醇对枯草的抑菌效果差异
不显著。总之，80%乙醇溶剂提取液对 3种细菌的
抑菌效果均最好。
2.2 3种细菌对黄顶菊叶提取液敏感度分析
表 2 可知，大肠杆菌对 80%乙醇高度敏感，
表 1 黄顶菊叶提取物对 3种细菌的抑制效果
提取剂
抑菌圈直径/mm
大肠杆菌 产气杆菌 枯草芽孢杆菌
蒸馏水 9.5dC 7.3cC 9.6bB
50%乙醇 13.8bB 10.2bB 9.3bB
80%乙醇 16.3aA 16.4aA 11.9aA
95%乙醇 11.3cB 9.6bB 11.7aA
乙酸乙酯 9.25dC - 9.1 bB
丙酮 9.43dC - -
注：同列不同字母表示差异显著，相同字母表示差异不显著；小写字
母表示显著水平α=0.05，大小写字母表示显著水平α=0.01。
提取物与应用
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表 2 3种细菌对黄顶菊叶提取液敏感度分析
提取液 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 产气杆菌
95%乙醇 ++ ++ +
80%乙醇 +++ ++ +++
50%乙醇 ++ + ++
丙酮 + - -
乙酸乙酯 + + -
蒸馏水 + + +
注：+ + + 为高度敏感；+ + 为中度敏感；+ 为低度敏感；- 为无抑菌范围。
50%和 95%乙醇次之(中度)，最不敏感的是蒸馏
水、乙酸乙酯和丙酮(低度)；枯草芽孢杆菌对 80%
乙醇和 95%乙醇中度敏感，对乙酸乙酯、蒸馏水
和 50%乙醇低度敏感，对丙酮不敏感；产气杆菌
对 80%乙醇高度敏感，50%乙醇次之(中度)，蒸馏
水和 95%乙醇低度敏感，不敏感的是丙酮和乙酸
乙酯。
3 讨论
黄顶菊不同溶剂提取液都具有不同程度的抑
菌活性，其中醇提取液的抑菌效力强，而 80%的
抑菌效力又强于 50%和 95%，这说明 80%乙醇溶
剂使黄顶菊更容易将植物体内有效抑菌物质提取
出来，而丙酮和乙酸乙酯提取液对 3种细菌抑制
效果均较差，说明细菌对丙酮、乙酸乙酯不敏感，
尤其枯草杆菌和产气杆菌对丙酮最不敏感。
近年来，对黄顶菊的研究主要集中在其作为
外来入侵植物对本地植物及杂草的化感作用，而
对其是否具有抑菌作用缺乏研究。本研究表明，
黄顶菊提取物对细菌具有明显的抑制作用，可防
止本地病菌的入侵，这可能是该外来入侵植物大
面积扩散的一个重要原因。随着对黄顶菊的研究
的日益深入，使其在得到有效控制的情况下，能
够有望研发出植物源除草剂和杀菌剂，变害为益，
为人类生活服务。
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