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雪莲果乙醇提取液清除超氧自由基的抗氧化性能研究



全 文 : 作者简介:王如阳(1954~ ),云南昆明人 ,教授 ,研究方向:主要从事有机化学和食品化学的教学与研究。
雪莲果乙醇提取液清除超氧自由基的抗氧化性能研究
王如阳1 , 段利萍1 , 刘满红1 , 王 泓1 , 杨胜军2
(1.云南民族大学化学与生物技术学院 , 云南 昆明 650031;
2.云南昆明大学化学与生物技术学院 2008届毕业生 , 云南 昆明 650031)
  摘 要:以乙醇为溶剂 , 分别研究了温度 、时间 、酸度对雪
莲果果肉与果皮提取液清除超氧自由基(O ·一2 )的抗氧化活性
的影响 ,得到雪莲果果肉清除 O ·一2 的抗氧化活性成分提取的
最佳条件为:工业乙醇做溶剂 ,原料与溶剂用量比为 1∶4 , 温
度 50℃,时间 2h , pH 值=5;雪莲果果皮的最佳条件为:原料
与溶剂用量比为 1∶20 , 温度 40℃, 时间 2h , pH 值≤3。经过
比较雪莲果果皮乙醇提取液清除 O ·一2 的抗氧化活性比果肉提
取液的活性要高得多。
关键词:雪莲果;抗氧化;超氧自由基;提取物
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2009)04-0055-02
雪莲果(俗名:Yacon ,学名:Smallanthus Sonchifolius)是
一种多年生植物 , 果实为块根 , 形状如甘薯 , 被称为地下水果 ,
原产于安第斯山脉 , 在当地是一种常见的水果。 经研究发现
雪莲果含有二十多种人体必需的氨基酸和丰富的矿物质及大
量可溶性膳食纤维 ,属低热食品 , 能有效降低血糖和血脂 , 清
理肠胃并治疗高血压 , 特别适合糖尿病人和减肥者食用[ 1] 。
随着对雪莲果研究的深入 ,发现雪莲果全身都是宝 , 是一种极
具市场潜力的植物 ,不仅可以应用于食品行业 , 在医药行业也
有着广阔的前景[ 2] 。
我国云南省嵩明县的地理条件非常适合栽种雪莲果 , 现
已大面积载种并获得丰收。关于雪莲果的研究 , 国内相关文
献报道很少 ,为此笔者参考有关文献[ 3 ~ 6] , 对雪莲果进行了抗
氧化活性成分提取与抗氧化性能研究。在初步得出乙醇为较
佳提取溶剂和清除羟自由基能力研究的基础上[ 7] , 以乙醇为
溶剂 ,采用光照核黄素产生超氧自由基(O ·一2 )、NBT 显色分光
光度法 ,考察了温度 、时间 、酸度对雪莲果清除 O ·一2 的抗氧化活
性成分提取效果的影响 ,同时对比了雪莲果果肉和果皮的乙
醇提取液清除 O ·一2 的抗氧化性能 , 以期为雪莲果保健功能和
药用价值的研究提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料 、试剂与仪器 材料:昆明嵩明县新鲜雪莲果 ,(约
室温 10 ~ 25℃保存 2~ 4 月)试剂:工业乙醇 , 无水乙醇 、核黄
素 、氯化硝基四氮唑兰(NBT)、蛋氨酸 、氢氧化钠 、磷酸氢二钾
均为分析纯。仪器:7200 分光光度计(上海龙尼柯仪器有限公
司)、数显电子恒温水浴锅(金坛市环保仪器厂)、精密 pH 计
(上海精明科学仪器有限公司)、电子天平(奥豪斯国际贸易
(上海)有限公司)、S HZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英山
谷予仪器厂)、光照箱(自制)。
1.2 实验方法
1.2.1 雪莲果抗氧化活性成分的提取流程
1.2.2 雪莲果乙醇提取液清除 O ·一2 的抗氧化能力测定 参
照文献[ 8 ~ 9] 的方法 ,用 pH 值为 7.4的混合磷酸盐缓冲溶液
作溶剂 ,配制含 3.3×10 -6mo l/ L 核黄素 , 0.01mol/ L 蛋氨酸 ,
4.6×10-5mo l/ L NBT 的自由基体系注:自由基体系需现用现
配且避光保存 ,光照灯为40W 白炽灯 , 烧杯距灯10~ 12cm , 用
50mL 烧杯各取 10m L 自由基体系和不同条件下提取的雪莲
果乙醇提取液 , 在 25℃下 , 置于光照箱中光照 30min , 以蒸馏
水作为参比液 ,在确定的最大吸收波长 560nm 处测定提取液
的吸光度 A , 同时以水代替雪莲果提取物测定空白吸光度
A0 , 按下式计算雪莲果乙醇提取液清除 O ·一2 的抗氧化能力。
清除率% =A0 -A
A 0
×100
2 结果与讨论
2.1 浸提时间对雪莲果清除 O ·一2 抗氧化活性的影响 以新
鲜雪莲果肉 10g 、果皮 2g 各加工业乙醇 40mL , 提取温度为
50℃,考察了不同的浸提时间对雪莲果提取液清除 O ·一2 能力
的影响 ,取雪莲果肉(皮)浸提液 2mL , 按 1.2.2 的方法测定 ,
结果雪莲果肉和果皮清除 O ·一2 抗氧化活性物质的最佳提取时
间均为 2h。随提取时间增加雪莲果清除 O ·一2 的抗氧化活性迅
速下降 ,表明雪莲果清除 O ·一2 的抗氧化活性物质加热时间过
长会被破坏。另外可知果皮清除 O ·一2 的抗氧化活性远大于果
肉的。见图 1。
图1 浸提时间对雪莲果抗氧化活性的影响
552009 年第 30 卷第 4 期          云 南 中 医 中 药 杂志
2.2 浸提温度对雪莲果清除 O ·一2 抗氧化活性的影响 提取
时间为 2h , 料液比与测试条件同 2.1 ,考察不同的浸提温度对
雪莲果果肉和果皮提取液清除 O ·一2 能力的影响 , 结果:雪莲果
肉清除 O ·一2 抗氧化活性物质的最佳提取温度为 50℃,雪莲果
皮为 40℃。当温度高于 50℃后雪莲果肉的抗氧化能力迅速
下降 ,果皮的抗氧化能力随温度升高下降趋势较平缓 , 说明雪
莲果肉中的抗氧化活性物质对热敏感 ,超过 50℃的温度加热
易被破坏 ,见图 2。
图 2 浸提温度对雪莲果抗氧化活性的影响
2.3 浸提液酸度对雪莲果清除 O ·一2 抗氧化活性的影响的影
响 料液比与测试条件同 2.1 , 提取时间为 2h 提取温度为
50℃,考察不同酸度条件对雪莲果清除 O ·一2 抗氧化活性的影
响 ,结果:雪莲果果肉清除 O ·一2 抗氧化活性物质的最佳浸提酸
度为 pH=5 ,果皮则是酸度高浸提效果好 , 随 pH 值升高抗氧
化能力下降 , 在 pH =5 以前影响不大 , pH 值超过 5 , 在 5 ~ 6
之间果皮和果肉的抗氧化活性均迅速下降 ,见图 3。
图 3 酸度对雪莲果抗氧化活性的影响
2.4 不同用量的雪莲果浸提液清除 O ·一2 的抗氧化能力 当
pH=6(未调酸度的原溶剂), 浸提温度 50℃, 浸提时间 2h 雪
莲果肉和果皮的乙醇浸提液对 O ·一2 的抗氧化能力起初随用量
增大而增大 , 当加入量超过 3m L 后 , 清除率几乎不再增大。
雪莲果肉和果皮均存在着一个最佳的用量范围 , 在该实验条
件下最佳加入量为 3~ 4 mL ,见图 4。
图4 提取液加入量对雪莲果抗氧化活性的影响
3 结论
3.1 最佳提取条件 工业乙醇做浸提溶剂 ,雪莲果肉对 O ·一2
的抗氧化活性成分的最佳提取条件是:提取时间 2h , 提取温度
50℃,提取液 pH 值等于 5;雪莲果皮的最佳提取条件是提取
时间 2h 取温度 40℃,提取液 pH 值等于 3 或更低效果好。
3.2 果肉与果皮活性比较 果皮清除 O ·一2 的抗氧化活性比
果肉高得多。 1 份果皮所得的浸提液比 5 份果肉的浸提液对
O ·

2 的清除率还要高。在时间和温度的优化条件下果肉对
O ·

2 的清除率为 46.69%,果皮为 63.34%。
3.3 提取液最佳用量范围 雪莲果肉和果皮的乙醇浸提液
对 O ·一2 的清除率有一个最佳的用量范围。该实验条件下为
3~ 4 mL 。当加入量 3~ 4 mL 时 ,果肉的清除率达 55.63%~
55.75%, 果皮的清除率可达 78.10%~ 78.87 %。
3.4 研究价值 雪莲果是一种具有较高抗氧化活性作用的
保健食物 ,具有广泛开发利用的价值。尤其可从保健酒的角
度进行开发研究。
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(收稿日期:2008-11-09)
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