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夜交藤提取物对小鼠中枢神经系统作用的实验研究



全 文 :体,从而引起重度哮喘[4,5]。由于确切机制尚未清楚,在
治疗上目前主要是针对患者的症状进行改善,故患者有
反复发作的可能性。
研究发现,嗜酸粒细胞是变应性疾病中最活跃的一
类细胞,嗜酸粒细胞的浸润是哮喘的重要特征,嗜酸粒
细胞和支气管哮喘的密切关系已得到公认。成为变应
性疾病发作的一个重要指标[6]。且已有研究发现[7],许
多的免疫细胞参与支气管哮喘的发病过程,其中白介素
- 5(IL - 5)与支气管哮喘发作时嗜酸粒细胞反应有显
著的相关性。早期进行炎症因子的控制可能成为治疗
气道炎症反应的主要手段[8]。
雷帕霉素属大环内酯类抗生素,通过不同的细胞因
子受体阻断信号传导,阻断 T淋巴细胞及其他细胞由 G1
期至 S期的进程,从而发挥免疫抑制效应[9,10]。Levine
等[11]发现雷帕霉素可抑制特应性哮喘患者外周血单个核
细胞中变应原诱导的 T细胞增殖和 IL - 5 产生。本研究
对采用 OVA致敏哮喘小鼠在给药予雷帕霉素进行干预,
结果发现雷帕霉素干预后显著缓解小鼠气道过敏性炎症
反应,观察组外周血嗜酸性粒细胞数显著减少,且给药后
观察组 IL -5水平显著下降,与对照组及给药前相比,差
异均有统计学意义(P < 0. 05)。这一结果充分说明,雷
帕霉素可以保护哮喘过敏性气道炎症,并且显著降低血
清 IL -5水平,这为临床治疗提供了新的靶点。
4 结论
雷帕霉素可缓解哮喘小鼠气道过敏性炎症,从而改
善哮喘的症状,对哮喘的治疗起着较好的作用。
参考文献
[1] 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组. 支气管哮喘防治指南(支气管
哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案)[J]. 中华结核和呼吸
杂志,2003,26(3):132 - 138.
[2] Jacobsen EA,Ochkur SI,Lee NA,et al. Eosinophils and asthma[J].
Curr Allergy Asthma Rep,2007,7(1) :18 - 26.
[3] 金岩,张丽颖. 国内儿童哮喘流行病学调查的回归分析[J].中华
中医药学刊,2012,30(6):1399 - 1401.
[4] 廖翠芳,王静. 儿童过敏性哮喘的舌下特异性免疫治疗的疗效与
安全性分析[J].现代预防医学,2011,38(1):47 - 48.
[5] Thomson AW,Tumquist HR,Raimondi G. Immunoregulatory functions
of Mtor inhibition[J]. Nat Rev Immunol,2009,9(5) :324 - 337.
[6] Mizushima N,Yoshimori T,Levine B. Methods in mammalian autoph-
agy research[J]. Cell,2010,140(3) :313 - 326.
[7] Powell JD,Delgoffe GM. The mammalian target of rapamycin:linking T
cell differentiation,function,and metabolism[J]. Immunity,2010,33
(4) :301 - 311.
[8] Mushaben EM,Kramer EL,Brandt EB,et al. Rapamycin attenuates
airway hyperreactivity,goblet cells,and IgE in experimental allergic
asthma[J]. J Immunol,2011,187(11) :5756 - 1563.
[9] Yamaki K,Yoshino S. Preventive and therapeutic effects of rapamycin,
a mammalian target of rapamycin inhibitor,on food allergy in mice[J].
Allergy,2012,67(10) :1259 - 1270.
[10] Klionsky DJ,Abdalla FC,Abeliovich H,et al. Guidelines for the use
and interpretation of assays for monitoring autophagy[J]. Autophagy,
2012,8(4) :445 - 544.
[11] Levine B,Mizushima N,Virgin HW. Autophagy in immunity and in-
flammation[J]. Nature,2011,469(7330) :323 - 335.
(收稿日期:2014 - 05 - 12)
DOI:10. 3969 / j. issn. 1671 - 4695. 2014. 17. 005 文章编号:1671 - 4695( 2014) 17 - 1404 - 03
夜交藤提取物对小鼠中枢神经系统作用的实验研究
刘琼丽1 易继涛1* 李玉山2 黄兴全1
( 1 湖北恩施土家族苗族自治州中心医院神经内科; 2 湖北民族学院 湖北 恩施 445000)
基金项目: 2013 年恩施土家族苗族自治州科研项目
课题名称:夜交藤提取物对大白鼠完全性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究;课题编号:“( 恩州科业【2013】9 号) ”
* 通讯作者:易继涛,硕士,主任医师,E - mail: yjt19760516@ 163. com
【摘要】 目的 观察夜交藤提取物对小鼠中枢神经系统的作用。方法 清洁级小鼠 80 只,随机分为 4 组。其中
每组各设夜交藤组( 灌服夜交藤提取物) 和对照组( 灌服等体积生理盐水) ,每组 10 只。4 组分别观察夜交藤提取物对
小鼠自主活动的影响、对延长异戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间、对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠率的影响以及对士的宁
中枢兴奋作用的影响。结果 夜交藤提取物对小鼠自主活动呈明显抑制作用,可延长异戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时
间,对阈下催眠剂量的异戊巴比妥钠有协同作用,能显著降低士的宁引起的惊厥率。结论 夜交藤提取物对小鼠有明
显的镇静、催眠作用。
【关键词】 小鼠 夜交藤提取物 中枢神经系统 镇静 催眠
The experimental study of the effect of Caulis Polygoni Multiflori extract on the central nervous system of mice. LIU Qiong - li1,YI Ji -
tao1,LI Yu - shan2,et al. 1 Department of Neurology,Central Hospital of Enshi Autonomous Prefecture of Hubei Province,Enshi Hubei 445000,
China; 2 Hubei Institute for Nationalities,Enshi Hubei 445000,China.
【Abstract】 Objective To study the pharmacological effects of the Caulis Polygoni Multiflori extraction on central nervous system. Meth-
ods The pharmacological effects of the Caulis Polygoni Multiflori extracting was observed on the autonomic activities of mice,the time of sleep in-
·4041· Journal of Clinical and Experimental Medicine Vol. 13,No. 17 Sep. 2014
duced by Sodium Amo Barbital,the sleeping synergistic action of mice with Sodium Amo Barbital at sub - threshold and the central inhibitory
effects in mice induced by Strychnine. Results The Caulis Polygoni Multiflori extraction could inhibit autonomic activities of the mice,prolong
the sleep time induced by Sodium Amo Barbital,enhance the rate of falling asleep induced by Sodium Amo Barbital and inhibit the central stimula-
ting effects induced by Strychnine. Conclusion The Caulis Polygoni Multiflori extraction has significant sedative and hypnosis effects.
【Key words】 Mice; Caulis Polygoni Multiflori extraction; Central nervous system; Sedative; Hypnosis
夜交藤又名首乌藤,始载于《本经逢原》,为蓼科植
物何首乌的藤茎或带叶藤茎。《中药大辞典》记载,夜交
藤具有养心安神、通络、祛风等作用,治失眠、劳伤、多
汗、血虚身痛、痈疽,用于治疗失眠多梦、血虚身痛、风湿
痹痛;外治皮肤瘙痒[1,2]。本实验研究中,我们观察了夜
交藤提取物对小鼠自发活动,异巴比妥钠诱导小鼠的睡
眠时间和睡眠率,以及对小鼠由士的宁引起的中枢兴奋
作用的影响,对夜交藤提取物在镇静催眠方面的作用进
行探讨,现报道如下。
1 材料与方法
1. 1 动物 昆明种小鼠80只,清洁级,体重(20. 0 ±2. 0)
g,由湖北省实验动物中心提供。随机分为 4 组。其中每
组各设夜交藤组和对照组。
1. 2 夜交藤提取物制备 夜交藤药材由湖北民族学院
中医药研究所提供。取适量干燥药材粉碎后用 10 倍
量,80%乙醇浸泡过夜,回流提取 2 h,过滤;滤渣再加 5
倍量 80%乙醇回流提取 2 h,过滤,合并滤液并浓缩至 2
g /ml备用。
1. 3 试剂 异戊巴比妥片购自广州白云山光华制药股
份有限公司(批号 2005032);士的宁购自中国药品生物
制品检定所(批号 0705 - 200005)。
1. 4 方法
1. 4. 1 对小鼠自主活动的影响 小鼠 20 只,雌雄各
半,随机分为两组,即对照组,夜交藤组。夜交藤组灌服
夜交藤提取液 1 ml /100 g体重,对照组灌服等体积生理
盐水。各组小鼠灌胃给药 1 次 /d,连续 6 d,最后 1 次用
药后 1 h记录各组小鼠 2 min内的走动时间及双前肢向
上抬举的次数。
1. 4. 2 对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响 小鼠
20 只,雌雄各半,随机分为两组,即对照组,夜交藤组。
夜交藤组灌服夜交藤提取液 1 ml /100 g体重,对照组灌
服等体积生理盐水。各组小鼠灌胃给药 1 次 /d,连续 6
d,最后 1 次用药后 1 h,各组均腹腔注射异戊巴比妥钠
50 mg /kg体重,记录小鼠翻正反射消失时间(即入睡潜
伏期)及恢复时间(即睡眠维持时间)。
1. 4. 3 对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠率的影响 小鼠 20
只,雌雄各半,随机分为两组,即对照组,夜交藤组。夜
交藤组灌服夜交藤提取液 1 ml /100 g体重,对照组灌服
等体积生理盐水。各组小鼠灌胃给药 1 次 /d,连续 6 d,
最后 1 次用药后 1 h ,各组均腹腔注射异戊巴比妥钠 35
mg /kg体重,记录 30 min 内小鼠翻正反射消失的只数
(即睡眠小鼠数),计算小鼠入睡率。小鼠入睡率 =入睡
小鼠个数 /每组小鼠总数 × 100%。
1. 4. 4 对士的宁作用的影响 小鼠 20 只,雌雄各半,
随机分为两组,即对照组,夜交藤组。夜交藤组灌服夜
交藤提取液 1 ml /100 g体重,对照组灌服等体积生理盐
水。各组小鼠灌胃给药 1 次 /d,连续 6 d,末次给药 30
min后,腹腔注射士的宁 1. 2 mg /kg体重,观察并记录惊
厥小鼠个数以及出现惊厥时间。
1. 5 统计学分析 实验数据采用 SPSS FOR WIN-
DOWS 11. 5 软件进行 t检验和卡方检验,计量资料以均
数 ±标准差(珋x ± s)表示。以 P < 0. 05 为差异具有显
著性,P < 0. 01 为差异具有非常显著性。
2 结果
2. 1 夜交藤对小鼠自主活动的影响 由表 1 可见,与
对照组比较,夜交藤组小鼠 2 min 内走动的时间明显减
少,举双前肢次数也显著减少,差异均有非常显著性(P
< 0. 01)。
表 1 夜交藤对小鼠自发活动比较 (珋x ± s)
组别 动物数(只) 走动时间(s) 举双前肢次数
对照组 10 78. 3 ± 19. 8 18. 2 ± 7. 6
夜交藤组 10 34. 8 ± 17. 5 8. 9 ± 5. 7
t值 8. 961 6. 096
P值 < 0. 01 < 0. 01
2. 2 夜交藤对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响
由表 2 可见,与对照组比较,夜交藤组小鼠入睡潜伏期
显著减少(P < 0. 05),睡眠维持时间也显著延长(P <
0. 01),差异均有统计学意义。
表 2 夜交藤对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响 (珋x ± s)
组别 动物数(只) 入睡潜伏期(min) 睡眠维持时间(min)
对照组 10 5. 3 ± 3. 7 28. 5 ± 17. 6
夜交藤组 10 3. 4 ± 1. 6 51. 7 ± 23. 4
t值 3. 490 7. 506
P值 < 0. 05 < 0. 01
2. 3 夜交藤对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠率的影响 由
表 3可见,与对照组比较,夜交藤组小鼠的睡眠个数明显
增多,睡眠率显著提高,差异有非常显著性(χ2 = 11. 180,
P <0. 01)。
表 3 夜交藤对异戊巴比妥钠致小鼠睡眠率的影响 (珋x ± s)
组别 动物数(只) 入睡小鼠数(只) 睡眠率(%)
对照组 10 2 20. 0
夜交藤组 10 7 70. 0
2. 4 夜交藤对士的宁作用的影响 由表 4 可见,与对
照组比较,夜交藤组惊厥小鼠数明显降低(P < 0. 05),
出现惊厥时间也明显延长(P < 0. 01) ,差异有显著性。
·5041·临床和实验医学杂志 2014 年 9 月 第 13 卷 第 17 期
表 4 夜交藤对士的宁作用的影响 (珋x ± s)
组别 动物数(只) 惊厥小鼠数(个) 出现惊厥时间(min)
对照组 10 8 13. 9 ± 6. 7
夜交藤组 10 5 26. 4 ± 9. 6
t值 3. 176 5. 377
P值 < 0. 05 < 0. 01
3 讨论
中医认为夜交藤性平无毒,味甘微苦,入心、肝经,
有安神养血、祛风通络的功效[3],主治阴虚血少,虚烦不
眠,风湿痹痛,皮肤痒疹等症。现代分析发现,夜交藤茎
含蒽醌类、黄酮类及其相应的甙[4 - 6],主要为大黄素、大
黄酚。本实验采用醇提法,所得滤液中甙类成分较多。
异戊巴比妥钠对中枢神经系统有抑制作用,因剂量
不同而表现出镇静、催眠、抗惊厥等不同作用。其作用
机制可能是由于阻断脑干网状结构上行激活系统使大
脑皮层转入抑制,为中效催眠药[7,8]。本实验表明,夜交
藤能加快小鼠睡眠,延长睡眠时间,提高睡眠率,说明其
具有明显的协同异戊巴比妥钠镇静催眠作用。孙洲亮
等[9]报道戊巴比妥钠阈下剂量与夜交藤提取物合用,结
果发现夜交藤提取物能使小白鼠入睡个数、入睡时间均
增加。本文研究结果与之报道一致。
士的宁是脊髓抑制性神经元甘氨酸受体的拮抗剂,
对脊髓有选择性兴奋作用[10],大剂量的士的宁导致强
直性惊厥,而士的宁在小剂量时即可明显地兴奋脊髓,
导致惊厥,其脊髓兴奋作用可能是阻断脊髓闰绍细胞对
运动神经元的抑制作用,也可能是阻断运动神经元与中
间神经元的突触后抑制所致。从本文实验结果来看,夜
交藤能显著降低士的宁引起的惊厥率,说明其具有拮抗
士的宁中枢兴奋的作用。夜交藤具有养血安神作用,用
于阴虚血少所致的失眠,常与合欢皮、酸枣仁、柏子仁、
远志等药配合应用。有报道称中药安适合剂 4 号(由夜
交藤、柏子仁、酸枣仁、麦冬、朱砂等中药组成)能使小鼠
自主活动次数减少;对硝酸士的宁所致的小鼠惊厥有抗
惊厥作用;对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠,能使翻正反射
消失时间缩短,睡眠时间延长,且与剂量成正比[11]。本
实验结果表明,夜交藤能减少小鼠的自发活动,明显延
长异戊巴比妥钠的睡眠时间,与异戊巴比妥钠阈下催眠
剂量合用,具有明显的协同镇静催眠作用,显著降低士
的宁引起的惊厥率。与文献[11]报道相一致。这些都证
明夜交藤对中枢神经系统的镇静作用。至于夜交藤镇
静催眠作用的机制及其有效成分,正进一步进行研究。
4 结论
综上所述,夜交藤提取物能减少小鼠的自发活动,
明显延长异戊巴比妥钠的睡眠时间,与异戊巴比妥钠阈
下催眠剂量合用,具有明显的协同镇静催眠作用,对士
的宁所致的小鼠惊厥有抗惊厥作用,为夜交藤改善睡眠
功效的作用提供了佐证。
参考文献
[1] 南京中医药大学. 中药大辞典[M]. 上海:上海科学技术出版社,
2006:1984.
[2] 薛咏梅,李智敏,孙赟,等.夜交藤的研究与开发进展[J].云南中医
学院学报,2008,31(1):64 - 67.
[3] 苏建. 何首乌、夜交藤药材质量控制研究[D].石家庄:河北医科大
学,2007.
[4] 闫立地,郭冷秋,刘颖,等. 夜交藤对自由活动大鼠睡眠时相的影
响[J].辽宁中医杂志,2008,35(3):466 - 467.
[5] 汲广全,杨娟,吴兰芳. 夜交藤改善睡眠成分大黄素葡萄糖苷的提
取纯化工艺研究[J].时珍国医国药,2011,22(9):2188 - 2190.
[6] 李智欣,杨中平,石宝霞,等. 夜交藤中改善睡眠成分的研究[J].
食品科学,2007,28(4):327.
[7] 汲广全,杨娟,杨小生.夜交藤改善睡眠活性成分研究[J].中成药,
2011,33(3):514 - 516.
[8] 赵桂英,于富贵,王连波,等. 异戊巴比妥钠在家兔麻醉上的应用
[J].中国兽医杂志,2005,41(4):63.
[9] 孙洲亮,文莉. 夜交藤不同提取物对抗焦虑作用的比较[J].中国
医院药学杂志,2008,28(2):164 - 165.
[10] 杨洋,周德生,Wolf - Dieter RAUSCH,等. 士的宁对多巴胺能神经
元的保护作用[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(24):223 - 227.
[11] 王文英,马凤英,詹宪法,等. 安适合剂 4 号对小鼠中枢神经系统
影响[J].时珍国医国药,1999,10(7):498.
(收稿日期:2014 - 04 - 28)
DOI:10. 3969 / j. issn. 1671 - 4695. 2014. 17. 006 文章编号:1671 - 4695( 2014) 17 - 1406 - 03
两种结核分枝杆菌抗原在结核病血清学诊断中应用价值的比较
阳幼荣 吴雪琼* 张俊仙 梁艳 王兰
( 解放军第 309 医院全军结核病研究所 全军结核病防治重点实验室 北京 100091)
基金项目:军队医学科技“十二五”重点项目( BWS11J050) ;国家重大传染病防治科技重大专项基金资助项目( 2008ZX10003 - 001)
* 通讯作者:吴雪琼,E - mail: wu - xueqiong@ 263. net
【摘要】 目的 研究结核分枝杆菌脂多糖抗原( LAM) 和结核分枝杆菌重组 38KD蛋白抗原( r38KD) 在结核病血清
学检测中的效果,探索更有价值的结核血清学诊断方法。方法 应用酶联免疫吸附试验对 100 例结核病患者血清、100
例健康人血清中的抗结核抗体进行检测,并对检测结果进行统计分析。结果 结核组中抗 LAM 抗体和抗 38KD抗体均
·6041· Journal of Clinical and Experimental Medicine Vol. 13,No. 17 Sep. 2014