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碳源和氮源对裂褶菌菌丝生长影响的研究



全 文 :碳源和氮源对裂褶菌菌丝生长影响的研究
陈文强 , 邓百万 , 彭 浩
(陕西理工学院 陕西省资源生物重点实验室 , 陕西 汉中 723000)
  摘要:研究了影响裂褶菌丝生长的碳源 、 氮源和碳
氮比。结果表明 , 裂褶菌丝生长的最适碳源是葡萄糖 ,
最适氮源是蛋白胨 , 最适碳氮比是 40∶1。
关键词:裂褶菌;碳源;氮源
中图分类号:S646.1   文献标识码:A
文章编号:1003-8310 (2004) 06-0016-03
裂褶菌 (Schizophyllum commune Fr.)属真菌门 ,
担子菌亚门 , 层菌纲 , 非褶菌目 , 裂褶菌科 , 裂褶
菌属。裂褶菌又名白参 (云南)、 树花 (陕西)。裂
褶菌分布非常广泛 , 春至秋季生于阔叶树及针叶树
的枯枝及腐木上 , 被视为 “杂菌” [ 1] 。据报道 , 该
菌含纤维素酶 , 并能产生苹果酸 (L-malic acid ,
C2H2O4)[ 2] , 菌丝深层发酵时大量产生有机酸 , 广
泛应用于食品 , 医药工业及生物化学等方面。民间
药用治疗妇科病 , 有滋补强身的作用[ 3] 。另外还含
裂褶菌多糖 , 该多糖对小白鼠肉瘤 180 和艾氏癌的
抑制率达 70%以上[ 4] 。碳源 、 氮源是食药用菌生
长发育的重要营养需求 , 是制定高产栽培技术的重
要参数。为此 , 我们研究了七种碳源 、 六种氮源和
不同碳氮比对裂褶菌丝生长的影响 , 筛选出适宜裂
褶菌丝生长的最适碳源 、 氮源和碳氮比 , 为确立裂
褶菌高产栽培技术提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌种:裂褶菌 (Schizophyllum commune)
由陕西省资源生物重点实验室食药用菌菌种保藏中
心提供。
1.1.2 供试培养基:基础培养基 1 (葡萄糖20.0 g ,
麸皮 50.0 g , KH2PO4 3.0 g , VB1 10 mg , MgSO4 ·
7H2O 1.5 g , 琼脂18.0 g , 水1 000 mL , pH 自然)。
基础培养基 2 (葡萄糖 20.0 g , 黄豆粉 25.0 g ,
KH2PO4 3.0 g , MgSO4·7H2O 1.5 g , VB1 10 mg , 琼脂
18.0 g , 水1 000 mL , pH 自然)。菌种活化培养基
CPDA (马铃薯 200 g , 葡萄糖 20 g , KH2PO4 5 g ,
MgSO4·7H2O 3 g , VB1 10 mg)
1.2 方法
1.2.1 菌种活化培养:将裂褶菌母种接入 CPDA培
养基中 , 25℃下活化培养7 d , 待用。
1.2.2 碳源实验:以供试基础培养基 1 中的20.0 g
葡萄糖的含碳量为基准 , 分别选用不同的碳代替供
试培养基 1 中的碳源 , 每一处理重复 6 次 , 观察不
同碳源对裂褶菌丝生长的影响。
1.2.3 氮源实验:以供试基础培养基 2 中的25.0 g
黄豆粉的含氮量为基准 , 分别选用不同的氮源代替
供试培养基 2 中的氮源 , 每一处理重复 6次 , 观察
不同氮源对裂褶菌丝生长的影响 。
1.2.4 碳氮比实验:在供试培养基 2 中添加不同
的酵母膏配制成培养基其碳氮比为 10∶1、 20∶1、
30∶1 、 40∶1、 50∶1、 60∶1、 70∶1、 80∶1、 90∶1 、 100∶
1 , 观察不同碳氮比对裂褶菌菌丝生长速度和菌丝
长势的影响。
1.2.5 接种培养:常规方法灭菌 , 制平皿。冷却
后在无菌条件下接种一块0.5 cm2 的活化菌丝块 ,
放置于 (28±1)℃恒温培养箱培养 , 定期测量菌落
直径 (对角线测量)和菌丝长势。
2 结果与分析
2.1 不同碳源对菌丝生长的影响 见表1 、 表 2
  表 1 不同碳源对裂褶菌丝生长速度的影响 mm/ d
培养基编号 重复Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ ∑X Xi
A 果 糖 20.333 19.000 19.000 23.000 20.333 23.000 124.666 20.778
B 蔗 糖 21.667 22.333 22.333 23.000 22.333 22.333 133.999 22.333
C 麦芽糖 21.667 20.750 19.333 21.667 20.333 20.750 124.500 20.750
D 乳 糖 10.000 9.667 12.667 12.667 19.000 12.800 76.801 12.800
E 甘露醇 20.000 20.000 23.000 21.000 21.000 23.000 128.000 21.333
F 葡萄糖 22.000 27.333 22.333 20.000 22.467 20.667 134.800 22.467
G 玉米粉 18.333 21.490 24.667 24.667 18.333 21.490 128.980 21.497
∑X 851.746
X 20.279
收稿日期:2004-03-16
基金项目:陕西省教育厅专项科研基金资助项目 (99JK109):食用菌优势栽培技术研究
16 中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA       Vol.23 , No.6
DOI :10.13629/j.cnki.53-1054.2004.06.007
  以蔗糖和玉米粉为碳源的培养基菌落不完整 ,
菌丝细弱 , 生长不良。这是因为食药用菌利用单糖
的能力要高于双糖和多糖 , 以蔗糖和果糖为碳源的
培养基 , 菌丝生长速度和长势要差于葡萄糖 , 这可
能是含蔗糖和果糖的培养基中菌丝在开始生长之前
有一段适应期的缘故。因此 , 裂褶菌丝生长的最适
碳源是葡萄糖。
2.2 不同氮源对菌丝生长的影响 见表 3 、 表 4
  表 2 裂褶菌丝在不同碳源中的生长状况
培养基编号 菌丝密度 菌丝边缘整齐度 菌丝生长势
A 果 糖 较密 整齐 粗壮
B 蔗 糖 较稀 整齐 粗壮
C 麦芽糖 较密 整齐 粗壮
D 乳 糖 稠密 整齐 粗壮
E 甘露醇 较密 整齐 粗壮
F 葡萄糖 稠密 整齐 粗壮
G 玉米粉 较稀 整齐 粗壮
  因此 , 综合裂褶菌菌丝生长速度和菌丝长势 ,
表 4 中 6种碳源中 , 裂褶菌丝生长的最适氮源是蛋
白胨。
2.3 碳氮比对裂褶菌丝的影响
不同碳氮比的培养基对裂褶菌菌丝生长有明显
的影响 (图 1)。裂褶菌丝在培养基的碳氮比10∶1~
100∶1均可生长 , 以碳氮比 40∶1 ~ 60∶1 为最适 (见
表 5), 在这个范围 , 菌丝生长最快 , 菌落完整 ,
菌丝洁白 、 浓密 , 其中最佳碳氮比为 40∶1。
图 1 不同碳氮比培养基中菌丝的生长速度
  表 3 不同氮源对裂褶菌丝生长速度的影响 mm/ d
培养基编号 重复Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ ∑X Xi
A 黄豆粉 20.333 17.000 18.000 15.667 16.333 15.667 103.000 17.166
B 蛋白胨 20.000 20.333 19.333 20.333 20.667 20.000 120.666 20.111
C 酵母膏 14.667 13.000 13.667 18.667 16.000 17.667 93.668 15.611
D 硫酸铵 4.000 7.000 5.667 4.000 10.000 7.667 38.334 6.389
E 硝酸钾 16.667 12.667 14.667 14.667 17.000 15.667 91.335 15.222
F 麸皮粉 21.667 19.333 20.000 19.333 20.000 19.333 119.666 19.944
∑X 566.669
X 15.740
  表 4 裂褶菌丝在不同碳源中的生长状况
培养基编号 菌丝密度 菌丝边缘整齐度 菌丝生长势
A 黄豆粉 稠 密 整 齐 粗 壮
B 蛋白胨 较稠密 整 齐 粗 壮
C 酵母膏 稠 密 整 齐 粗 壮
D 硫酸铵 较 稀 不整齐 较粗壮
E 硝酸钾 较 稀 整 齐 矮 小
F 麸皮粉 较 稀 整 齐 较粗壮
3 讨论
3.1 任何一个优良菌种, 只有在适宜的生长条件下,
生理代谢活动才能正常进行 , 优良性状才能得以表
现。生长条件中最基本的是培养基质 , 而营养基质中
最基本的又是碳源和氮源[ 5] 。因此 , 必须首先筛选出
菌丝生长的最适碳源和氮源, 以保证菌种的质量。实
验结果表明, 裂褶菌丝生长的最适碳源和氮源分别是
葡萄糖和蛋白胨, 最适碳氮比是40∶1。
3.2 任何科学研究都是为了应用于生产实践。 裂
褶菌丝在所筛选出的最适碳源和氮源组成的培养基上
表现出了较强的生长优势 , 由此制成的栽培种在栽培
过程中是否获得较高的产量, 尚有待进一步研究。
  表 5 不同碳氮比培养基中裂褶菌丝的长势
碳氮比 菌丝形态 菌丝色泽 菌丝密度
10∶1 完整 白色 较浓密
20∶1 完整 洁白 浓密
30∶1 完整 洁白 浓密
40∶1 完整 洁白 浓密
50∶1 完整 洁白 较浓密
60∶1 完整 洁白 浓密
70∶1 完整 白色 较浓密
80∶1 完整 洁白 较浓密
90∶1 完整 白色 较浓密
100∶1 完整 白色 较浓密
[参 考 文献]
[ 1] 应建浙, 卯晓岚 , 马启明.中国药用真菌图谱 [M] .
北京:科学出版社 , 1987.283
[ 2] 钱秀萍, 杨庆尧.几种营养条件对裂褶菌生长及产 L-
苹果酸的影响 [ J] .食用菌学报, 1996 , 3 (3):18-24.
[ 3] 黄年来.中国食用菌百科 [ M] .北京:中国农业出
版社 , 1997.119.
[ 4] 林亲雄, 陈京元.碳源和氮源对松乳菇菌丝生长的影
响 [ J] .食用菌学报 , 2002, 9 (1):44-46.
[ 5] 陈文强, 周选围 , 邓百万.姬松茸母种培养基筛选研
究初报 [ J] .食用菌学报 , 2002, 9 (2):31-34.
17第 23 卷 第 6期       中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA
裂 褶 菌 母 种 培 养 基 筛 选 研 究
胥成浩1 , 陈文强2 , 邓百万2
(1.乐山师范学院 生物系 , 四川 乐山 614004;2.陕西理工学院 陕西省资源生物重点实验室, 陕西 汉中 723000)
  摘要:对裂褶菌 (Schizophyllum commune Fr.)进行了
母种培养基筛选试验 , 选出了裂褶菌母种的最适培养基
配方。
关键词:裂褶菌;母种培养基;筛选
中图分类号:S646.1   文献标识码:A
文章编号:1003-8310 (2004) 06-0018-03
裂褶菌 (Schizophyllum commune Fr.)含纤维素
酶 , 并能产生苹果酸 (L-malic acid , C2H2O4), 菌
丝深层发酵时大量产生有机酸 , 广泛应用于食品 ,
医药工业及生物化学等方面。民间药用治疗妇科
病 , 有滋补强身的作用。另外还含有裂褶多糖 , 该
多糖对小白鼠肉瘤 180和艾氏癌的抑制率达 70%以
上[ 1] , 我们从其基本营养条件进行研究 , 筛选出适
宜裂褶菌菌丝生长的母种培养基 , 旨在有效地开发
利用这一珍贵的真菌资源。
1 材料和方法
1.1 材料 
1.1.1 供试菌种:裂褶菌 (Schizophyllum commune)
由陕西省资源生物重点实验室食药用菌菌种保藏中
心提供。
1.1.2 培养基:将裂褶菌在马苓薯麦麸综合培养
基 (马铃薯200 g , 麸皮100 g , 葡萄糖20 g , KH2PO4
2 g , MgSO4·H2O 5 g , 琼脂20 g , 水1 000 mL。)上
扩大培养后 , 选用 6 种裂褶菌母种培养基进行实
验。培养基组成见表 1。
  表 1 6种 裂褶 菌培 养 基的 组成 成分[ 1] g
培养基编号 马铃薯 葡萄糖 蔗糖 麸皮 豆粉 硫酸铵 蛋白胨 磷酸二氢钾 硫酸镁 维生素 B1 琼脂
A 150 20 0 50 25 0 0 3 1.5 0.01 18
B 150 20 0 50 0 0 10 3 1.5 0.01 18
C 150 20 0 0 0 8 0 3 1.5 0.01 18
D 0 20 0 100 0 0 0 3 2 0.01 18
E 0 0 20 100 0 0 0 3 2 0.01 18
F 0 0 0 100 0 0 0 3 2 0.01 18
收稿日期:2004-04-05
基金项目:陕西省教育厅专项科研基金资助项目 (99JK109):食用菌优势栽培技术研究
Effect of C-sources and N-sources on
the Mycelia Growth of Shizophyllum commune
CHEN Wen-qiang, DENG Bai-wan , PENG Hao
(Shaanxi Key Laboratory of Bio-Resources , Shaanxi University of Technology , Hanzhong 723001 , China)
Abstract:The effect of C-sources , N-sources and C/ N ratio in the culture medium of mycelia growth of Schizo-
phyllum commune was studied in this paper.It showed that the optimum C-source was glucose and the optimum N-
source was peptone and the optimum C∶N ratio was 40∶1.
Key words:Schizophyllum commune;C-source;N-source;C/N ratio
18 中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA       Vol.23 , No.6