全 文 ：第 41 卷第 4 期 东 北 师 大 学 报 (自 然 科 学 版 ) Vo l.41 No .4
2009 年 12 月 Journal o f No r theast Normal Unive rsity (Natural Science Edition) Decembe r 2009
[ 收稿日期] 　2009-05-23
[ 基金项目] 　长春市科技发展计划项目(2006318);吉林省科技发展计划项目(20060904);吉林省中医药局资助项目(08SYS -
093);吉林修正药业委托资助项目.
[ 作者简介] 　牛天增(1985—),男 ,硕士研究生 ,主要从事分子生物学和中药研究;通讯联系人:孟祥颖(1963—),女 ,博士 ,教授, 博
士研究生导师 ,主要从事中药研究;李玉新(1961—),男 ,博士 ,教授 ,博士研究生导师 ,主要从事基因工程药物和中药
研究.
[ 文章编号] 1000-1832(2009)04-0116-07
多指标综合研究返魂草提取物的提取工艺
牛天增1 ,孟月娟2 ,林　华2 ,张小平1 ,孟祥颖1 ,
鲍永利2 , 3 , 乌　垠2 , 3 ,于春雷2 , 3 ,孙　颖2 , 3 ,李玉新1
(1.东北师范大学遗传与细胞研究所 ,吉林 长春 130024;
2.东北师范大学药物基因和蛋白筛选国家工程实验室 ,吉林 长春 130024;
3.东北师范大学国家教育部农业与医药基因工程研究中心 ,吉林 长春 130024)
[摘　要] 　利用 L9(34)正交试验设计表 ,采用绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷三种单体为含量测定
指标 ,同时考虑总固体物得率 ,探讨了返魂草提取工艺中的几个影响因素 ,并对实验结果进行
极差和方差分析.实验结果表明 ,提取次数为 3次 、90℃条件下 、乙醇质量分数为 60%、每次提
取 6 h 为最佳提取工艺.该工艺操作简便 、稳定可靠 ,为返魂草新制剂的研究提供了参考.
[关键词] 　返魂草;正交设计;绿原酸;咖啡酸;异槲皮苷
[中图分类号] 　R 284.2　　　[学科代码] 　360·4010　　　　[文献标识码] 　A
　　返魂草 ,又名麻叶千里光 、宽叶返魂草 ,系菊科(composi tae)千里光属(Senecioneae)植物返魂草
(Senecio cannabi folius Less.)及其变种单叶返魂草(Senecio cannabi f olius Less.var.integri f ol ius
(Koidz .)Kitam .)的全草或带根全草.返魂草喜生于山沟 、林缘路旁和湿草甸处 ,分布于我国东北 、华北
部分省区 ,主产于吉林省的通化 、白山等地 ,味苦性凉 ,主入肺经 ,有清热袪痰 、镇咳平喘 、治疗肺病 、活血
消肿之功效.临床用于治疗肺内感染 、慢性支气管炎 、喘息性支气管炎 、急性呼吸道感染等病症.
现代药理研究和临床应用表明 ,以返魂草为原料的制剂具有抗菌 、抗炎 、抗病毒 、袪痰 、平喘 、镇咳等
功效[ 1-6] .本研究组人员从返魂草中提取分离得到异槲皮苷[ 7] ,并经研究分析认为异槲皮苷是返魂草的
有效成分之一.有关绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的抗氧化作用已有较为广泛的报道 ,它们均具有抗
菌[ 8 , 11] 、抗炎[ 9 , 12] 、抗病毒[ 10 , 13] 等功效;此外 ,绿原酸还有降血脂[ 14] 、降血糖[ 15] 、免疫调节[ 16] 作用 ,咖啡
酸亦有降血脂[ 17] 的作用 ,异槲皮苷还有解痉[ 18] 、平喘[ 1 9] 等功效.绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷是返魂草中
部分主要的药效成分 ,因此我们以三个单体的含量及浸膏得率为考察指标 ,对返魂草的提取工艺进行了
深入研究 ,以为开发新一代返魂草制剂 、优化制剂提取工艺提供科学依据.
1　实验材料
1.1　仪器
Agilent 1100型高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司), DAD 检测器;ZORBAX Eclipse
XDB-C18(4.6 mm ×150 mm ,5 μm)色谱柱;浓缩用旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);SHZ-D 型循
环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);ZK072B真空干燥箱(上海市实验仪器总厂);KQ-250B
DOI :10.16163/j.cnki .22-1123/n.2009.04.027
第 4 期 牛天增 , 等:多指标综合研究返魂草提取物的提取工艺
型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司).
1.2　材料
1.2.1　药材与药品
返魂草生药由吉林修正药业股份有限公司提供 ,经鉴定为 Senecio cannabi folius Less .的干燥全
草.绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷标准品为本实验室自制 ,其纯度均大于 98 %.
1.2.2　试剂
乙腈 、甲醇为美国 Fisher 公司色谱纯试剂 ,其余试剂均为北京化工厂分析纯产品.
2　实验方法
2.1　提取方法
取返魂草干粉 150 g ,以溶剂浓度 、提取温度 、提取时间 、提取次数为考察因素 ,每个因素设计 3个水
平(见表 1),按 L9(34)正交表来安排实验 ,每实验组均加 10倍量的提取溶剂.制备 9组实验条件下的样
品溶液 ,以所得干浸膏及绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷量为指标进行考察.
表 1　因素水平表
水平
因素
A B C D
乙醇质量分数/ % 提取温度/ ℃ 提取时间/ h 提取次数/次
1 80 60 4 2
2 70 75 6 3
3 60 90 8 4
2.2　测定方法
2.2.1　出膏率的测定
分别将上述 9份样品的提取液合并 ,回收乙醇 ,置于干燥至恒重的蒸发皿中 ,水浴挥干 ,制成干燥细
颗粒 ,称定重量 ,计算出膏率 ,结果见表 2.
2.2.2　绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷的含量测定
(1)色谱条件
Agilent 1100液相色谱仪 ,ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm ×150 mm , 5 μm)色谱柱.
流动相:A ———乙腈;B ———甲醇;C ———0.4 %磷酸.
0 ～ 10 min ,A :11%※17%,B :3%※3%,C :86 %※80%;10 ～ 20 min , A ,B ,C不变.
流速:1 mL/min ;检测波长:绿原酸 327 nm ,咖啡酸 316 nm ,异槲皮苷 360 nm .
柱温:室温;进样量:20 μL.
(2)对照品溶液的制备
精密称取绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷对照品各 1 .0 mg ,置于 1 mL 容量瓶中 ,以乙腈-0.4%磷酸混合
溶液(1∶9 ,体积比)使其溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,作为对照品.
(3)供试样品溶液的制备
将上述 9份已测定出膏率的干膏分别粉碎 ,各精密称取 1 g ,加入乙腈-0.4%磷酸混合溶液(1∶9 ,
体积比)20 mL 进行超声提取 40 min ,过滤;残渣再用 10 mL 相同溶液超声提取 30 min ,过滤 ,滤液合
并 ,定容至 30 mL ,摇匀 ,用 0.45 μm 微孔滤膜过滤 ,弃去初滤液 ,取续滤液 ,作为供试样品溶液.
(4)含量测定
以反相高效液相色谱法测定 ,结果以 1.0 g 药材所含有绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷的量来表示.
(5)质量标准考察
线性关系的考察:分别吸取上述绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷等对照品溶液 ,各自进样 20 μL ,按最优
色谱条件测量各色谱峰峰面积 ,以峰面积Y 为纵坐标 ,浓度 X 为横坐标 ,求取 3条标准曲线.
精密度考察:分别精密吸取绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷对照品原溶液 20 μL ,重复进样 6次 ,记录峰
面积 ,计算 RSD值(相对标准偏差).
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东 北 师 大 学 报(自 然 科 学 版) 第 41卷
稳定性考察:取最优方案所得的浸膏 ,制备供试样品.方法同前.取同一样品溶液于室温放置不同
的时间 ,分别在 0 ,1 ,2 ,4 ,8 , 12 ,24 ,48 h时精密吸取 20 μL 进样 ,测定绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的峰面
积 ,计算 RSD值.
重现性考察:取最优方案所得的浸膏 ,制备供试样品 ,方法同前.精密吸取同一样品溶液 20 μL 进
样 ,重复进样 6次 ,测定绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的峰面积 ,计算 RSD值.
加样回收率考察:精密称取 5份由最优方案所得的浸膏 ,按照之前供试样品溶液的处理方法制备各
供试样品.精密吸取各供试样品溶液 20 μL 分别进样 ,测定绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的峰面积 ,再分
别往各供试品溶液中加入一定量绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷对照品 ,混匀 ,再精密吸取该供试样品溶液
20 μL 进样 ,再次测定绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的峰面积.将加标前后的峰面积代入相应的标准曲线
中 ,计算加标前后各样品中 3种物质的含量 ,按照下列公式计算各物质加样回收率:
加样回收率=((实测量-样品量)/加标量)×100%.
3　实验结果与分析
3.1　绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷的含量测定
绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷的含量测定结果见表 2.
表 2　L9(34)正交表及结果
实验号 因素
A B C D
结果
浸膏得率/(g/ g) 绿原酸含量/(μg/ g) 咖啡酸含量/(μg/ g) 异槲皮苷含量/(μg/ g)
1 1 1 1 1 0.069 2 474.212 518.361 104.117
2 1 2 2 2 0.097 4 279.413 661.457 232.060
3 1 3 3 3 0.110 3 893.456 564.472 144.988
4 2 1 2 3 0.091 2 053.790 526.555 73.908
5 2 2 3 1 0.089 2 715.462 478.920 97.720
6 2 3 1 2 0.103 3 217.014 654.216 136.103
7 3 1 3 2 0.099 2 705.187 657.265 99.497
8 3 2 1 3 0.116 2 641.610 522.744 108.915
9 3 3 2 1 0.102 3 969.235 542.750 200.430
3.2　方差分析
浸膏得率 ,绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷含量的直观及方差分析表分别见表 3 ～ 6 ,直观分析图见图 1.
图 1　绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷含量及浸膏得率直观分析图
表 3　浸膏得率直观及方差分析表
统计项 A B C D 方差来源 离差平方和 自由度 均差 F值 P值
Ⅰ 0.276 0.259 0.288 0.260 SA 0.000 3 2 0.000 2 17.179 <0.1
Ⅱ 0.283 0.302 0.290 0.299 S B 0.000 6 2 0.000 3 30.679 <0.05
Ⅲ 0.317 0.315 0.298 0.317 S D 0.000 6 2 0.000 3 30.321 <0.05
Ⅰ— 0.092 0.086 0.096 0.087 S C 0.000 02 2 0.000 01
Ⅱ— 0.094 0.101 0.097 0.100
Ⅲ— 0.106 0.105 0.099 0.106
R1 0.014 0.019 0.003 0.019
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第 4 期 牛天增 , 等:多指标综合研究返魂草提取物的提取工艺
表 4　绿原酸含量直观及方差分析表
统计项 A B C D 方差来源 离差平方和 自由度 均差 F值 P值
Ⅰ 10 647.080　 7 233.188 8 332.835 9 158.908 S A 1 179 990.5 2 589 995.0 2.646 >0.1
Ⅱ 7 986.266 9 636.485 10 302.440　 10 201.610　 S B 2 517 156.0 2 1 258 578.3　 5.645 >0.1
Ⅲ 9 316.031 11 079.700　 9 314.105 8 588.856 SC 646 558.7 2 323 279.4 1.450 >0.1
Ⅰ— 3 549.027 2 411.063 2 777.612 3 052.969 SD 445 909.4 2 222 954.7
Ⅱ— 2 662.089 3 212.162 3 434.146 3 400.538
Ⅲ— 3 105.344 3 693.235 3 104.702 2 862.952
R2 886.939 1 282.172 656.534 537.586
表 5　咖啡酸含量直观及方差分析表
统计项 A B C D 方差来源 离差平方和 自由度 均差 F值 P值
Ⅰ 1 744.290 1 702.181 1 695.321 1 540.031 S A 1 888.704 2 944.352 9.285 <0.1
Ⅱ 1 659.690 1 663.120 1 730.762 1 972.938 SC 1 983.750 2 991.875 9.752 <0.1
Ⅲ 1 722.759 1 761.439 1 700.656 1 613.770 SD 35 760.710 2 17 880.350 146.907 <0.01
Ⅰ— 581.430 567.394 565.107 513.344 S B 203.424 2 101.712
Ⅱ— 553.230 554.373 576.921 657.646
Ⅲ— 574.253 587.146 566.886 537.923
R3 28.200 32.773 11.814 144.302
表 6　异槲皮苷含量直观及方差分析表
统计项 A B C D 方差来源 离差平方和 自由度 均差 F值 P值
Ⅰ 481.166 277.523 349.136 402.267 S A 5 059.266 2 2 529.633 1.550 >0.1
Ⅱ 307.732 438.696 506.399 467.661 S B 7 713.996 2 3 856.998 2.363 >0.1
Ⅲ 408.842 481.521 342.205 327.812 SC 5 748.821 2 2 874.410 1.761 >0.1
Ⅰ— 160.389 92.508 116.379 134.089 SD 3 264.185 2 1 632.092
Ⅱ— 102.577 146.232 168.800 155.887
Ⅲ— 136.281 160.507 114.068 109.271
R4 57.811 67.999 54.731 46.616
　　在方差分析中 ,我们选取方差值最小的因素作为空白对照组 ,由以上各表 ,通过对极差的分析我们
得出绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷和干浸膏提取的最优方案分别为:B3A 1C2D2 , D 2B3A 1 C2 , B3A 1C2D 2 和
D3B3A 3C3.
本实验考察指标以绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷含量为主 ,以干膏得率为辅.
在绿原酸和异槲皮苷方差分析表中 ,可看出 A ,B ,C因素与 D 因素之间没有显著性差异 ,所以在主
次关系中的顺序也不会引起显著性的差异变化.在咖啡酸方差分析表中可以看出 ,因素 B和 A , C ,D之
间有显著的差异 ,结合考虑绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷提取工艺 ,对于这三者提取工艺的最优方案确定
为 D2B3A 1C2.对于干膏得率 ,考虑绿原酸结构的特殊性 ,其在提取过程中会发生化学变化 ,提取时间不
宜太长 ,并且溶剂浓度因素 A和提取时间因素 C 不为最主要因素 ,综合考虑以上 4个因素 ,认为影响因
素的主次顺序为 DBAC ,最优方案为 D 2B3A1 C2 ,即提取次数为 3 次 , 90℃条件下 ,乙醇质量分数为
60%,提取时间为每次 6 h.
3.3　质量标准考察
综合绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷最优提取方案 ,发现 9个实验组中未出现最优方案 ,故以 D 2B3A1 C2
方案重新提取.
绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷三者同时测定的结果见图 2 ～ 5.
λ=360 nm　 　　λ=360 nm
　　图 2　返魂草最优提取流程样品的液相色谱图　　　　　　　图 3　绿原酸标准品液相色谱图
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东 北 师 大 学 报(自 然 科 学 版) 第 41卷
λ=360 nm 　 　λ=360 nm
　　　　　图 4　咖啡酸标准品液相色谱图　　　　　　　　　图 5　异槲皮苷标准品液相色谱图
(1)绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷标准曲线:以测得的峰面积为纵坐标 ,浓度为横坐标 ,计算得到 3条标
准曲线 ,结果见表 7.
表 7　绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷标准曲线
化合物 保留时间/min 标准曲线 相关系数 r 线性范围/(μg/mL)
绿原酸 4.78 Y =18.686 X +56.972 0.999 9 15.63～ 500
咖啡酸 6.67 Y =20.993 X +26.051 0.999 8 7.80～ 250
异槲皮苷 13.61 Y =22.510 X +11.908 0.999 8 3.91～ 125
　　(2)精密度考察:绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷对照品原溶液分别重复进校 6 次 ,其 RSD 值均小于
3%,符合要求 ,表明仪器精密度良好(见表 8).
表 8　绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷精密度考察
化合物 考察项 1 2 3 4 5 6 均值 RSD 值/ %
绿原酸 峰面积 2 445.7 2 353.4 2 376.4 2 374.6 2 392.5 2 380.0 2 387.1 1.31
咖啡酸 峰面积 2 699.7 2 663.2 2 654.4 2 672.4 2 690.9 2 620.2 2 666.8 1.06
异槲皮苷 峰面积 2 754.6 2 759.7 2 735.4 2 808.8 2 879.8 2 742.2 2 780.1 1.99
　　(3)稳定性考察:返魂草样品分别于 0 ,1 ,2 , 4 ,8 , 12 ,24 ,48 h测定绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的峰面
积 , RSD值均小于 3%,表明样品在 48 h内稳定 ,详见表 9.
表 9　样品中绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷稳定性考察
化合物 考察项 0h 1h 2h 4h 8h 12h 24h 48h 日内均值 RSD值/ % 日间均值
RSD
值/ %
绿原酸 峰面积 3 682.6 3 679.2 3 691.7 3 665.0 3 674.1 3 680.9 3 667.0 3 678.5 3 676.9 0.24 3 676.98 0.23
咖啡酸 峰面积 888.4 893.0 895.2 853.4 859.9 885.5 871.5 835.7 878.1 1.89 872.83 1.96
异槲皮苷峰面积 410.8 415.1 419.8 411.9 414.9 410.9 418.0 410.8 414.5 0.85 414.03 0.85
　　(4)重复性考察:返魂草样品重复进样 6次 ,RSD值均小于 3%,详见表 10 ,表明该方法重现性良好.
表 10　样品中绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷重现性考察
化合物 考察项 1 2 3 4 5 6 均值 RSD 值/ %
绿原酸 峰面积 3 656.4 3 639.3 3 654.3 3 641.6 3 641.6 3 629 3 643.7 0.28
咖啡酸 峰面积 859.0 849.0 851.1 846.6 852.2 846.2 850.7 0.55
异槲皮苷 峰面积 217.4 219.9 218.9 217.7 218.5 212.8 217.5 1.14
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第 4 期 牛天增 , 等:多指标综合研究返魂草提取物的提取工艺
　　(5)加样回收率考察:返魂草样品加样回收率实验结果详见表 11 ,绿原酸平均回收率为 98.56 %,咖
啡酸平均回收率为 98 .6%,异槲皮苷平均回收率为 99 .06%,它们的 RSD值均小于 3%.
表 11　绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷加样回收率考察
化合物 样品量/μg 加标量/ μg 实测量/μg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD 值/ %
绿原酸
203.30 50.00 253.43 100.27
196.16 50.00 245.39 98.45
194.80 50.00 243.94 98.30
192.45 50.00 241.11 97.33
201.85 50.00 251.07 98.45
98.56 1.08
咖啡酸
41.90 50.00 90.47 97.15
40.34 50.00 89.92 99.17
40.51 50.00 88.54 96.06
40.86 50.00 91.05 100.37
41.56 50.00 91.69 100.25
98.60 1.95
异槲皮苷
13.99 50.00 64.04 100.10
13.28 50.00 62.37 98.17
8.90 50.00 57.93 98.06
9.97 50.00 59.93 99.92
13.47 50.00 63.00 99.06
99.06 0.96
4　结论与分析
本研究从实际出发 ,采用正交实验设计 ,以 3个单体进行多指标综合评价的方法深入探讨了返魂草
中绿原酸 、咖啡酸和异槲皮苷的提取工艺 ,优选出最佳的提取条件 ,即提取次数为 3次 ,90℃条件下 ,乙
醇质量分数为 60 %,每次提取 6 h.该工艺为返魂草新制剂的研究提供了参考.
关于返魂草及其产品采用高效液相测定的方法中 ,有采用绿原酸[ 20] 、绿原酸和咖啡酸[ 21] 作标准品
的 ,尚无采用三种标准品来进行含量测定的.本研究首次采用绿原酸 、咖啡酸 、异槲皮苷三种单体为含量
测定考察指标 ,利用反相高效液相色谱法测定最佳提取工艺中三项指标的含量 ,操作简便 、稳定性好 ,在
较短的时间内样品中各成分峰形较对称 ,各主要成分之间分离度较好 ,基本上均能达到基线分离.该方
法可为返魂草质量标准的制定提供参考.
[参　考　文　献]
[ 1] 　任继学 ,于凯成 ,李守成 ,等.“返魂草”抑菌试验与急性 、亚急性毒性试验[ J] .吉林中医药 , 1979 , 35 (Z1):98-105.
[ 2] 　商明秀 ,陈秀兰 ,金韵 ,等.返魂草提取物抗炎的药效学研究[ J] .中国现代医生 , 2007 , 45(21):12-13.
[ 3] 　李丽静 ,王继彦 ,王岩 ,等.返魂草提取物及其有效成分抗病毒作用的研究[ J] .中国中医基础医学杂志 , 2005 , 11(8):585-587.
[ 4] 　孙云 ,王湖.返魂草冲剂治疗慢性气管炎 30例疗效观察[ J] .佳木斯医学院学报 , 1994 , 17(2):45-46.
[ 5] 　吴立军 ,高慧媛 ,刘传贵 ,等.一种返魂草提取物 ,它的提取方法及制剂:中国 , 200510115124.5[ P] .2006-05-17.
[ 6] 　刘万水.肺宁滴丸及其制备方法:中国 , 200710090759.3[ P] .2008-10-08.
[ 7] 　何忠梅.返魂草化学成分及其生物活性研究[ D] .长春:东北师范大学 ,2007.
[ 8] 　AIMIN WEN , PASCAL DELAQUIS , KAREEN ST ANICH , et al.An tili sterial act ivi ty of selected phenolic acids[ J] .Food
Microbiology , 2003 , 20(3):305-310
[ 9] 　M OREIRA A S , SPIT ZER V , SCHAPOVA L E E S , et al .Ant iinf lammato ry activity of exract s and f ract ions from the leaves
of Gochnatia po lymorpha[ J] .Phytotherapy Research , 2000:14(8):638-640.
[ 10] 　CH IANG L C , CHIANG W , CHANG M Y , et al.An tiviral act ivity of plantago m ajo r ext ract s and related compounds in
vit ro[ J] .Ant ivi ral Research , 2002 , 55(1):53-62.
[ 11] 　SUSAN K WMGE , PA Ul A H edin .Quercet in 3-O-Galactosyl-(l ※6)-Glu coside , a compound f rom narrow leaf vetch wi th
ant ibacterial activi ty[ J] .Phytochemis try , 1985 , 24(2):243-245.
[ 12] 　KEIKO M ORIKAWA , MITSUKO NONAKA , M ISA NA RAHARa , et al.Inhibitory ef fect of qu ercet in on carrageenan-in-
duced inflamm at ion in rat s[ J] .Life Sciences , 2003 , 74 (6):709-721.
[ 13] 　MOHAM ED ABO U-KA RAM , T HOMAS SH IER W .Isolation and characterizat ion of an ant iviral f lavon oid f rom Wa ld stein-
121
东 北 师 大 学 报(自 然 科 学 版) 第 41卷
ia f ragar ioides[ J] .Journal of Natu ral Products , 1992 , 55(10):1525-1527.
[ 14] 　DELCY V , RODRIG UEZ DE SO TILLO , HADLEY M .Ch lorogenic acid modifies p lasma and liver concen t rat ions of :ch oles-
t erol , t riacylglycerol , and minerals in (f a/ f a)Zu cker rat s[ J] .Jou rnal of Nu t ri tional Biochemist ry , 2002 , 13(12):717-726.
[ 15] 　PILAR NICASIO , LUC A AGUILAR-SAN TAMAR A , EDUARDO ARANDA , et al.Hy pogly cemic effect and ch lorogenic
acid conten t in tw o Cecropia species[ J] .Phytotherapy Research , 2005 , 19(8):661-664.
[ 16] 　LIEN-CHAI CHIANG , LEAN TEIK NG , WEN CHIANG , et al.Immun om odu latory act ivityes of f lavonoids monotepenoids ,
t rit erpenoids , i ridoid glycosides and phenolic compound s of Plantago species[ J] .Planta Med , 2003 , 69(7):600-604.
[ 17] 　H IROSHI SHIMODA , EMI SEKI , MICHIO AIT ANi .Inhibitory ef fect of g reen cof fee bean ext ract on fat accumu lation and
body w eigh t gain in mice[ J] .Bio Med Cent ral.2006 , 6(17):1-9.
[ 18] 　M ELZIG M F , PERTZ H H , KRENN L.Anti-inf lammatory and spasmolytic activity of ext ract s f rom Droserae Herba[ J] .
Phytomedicine , 2001 , 8(3):225-229
[ 19] 　JACQUELINA FERNANDEZ , RICARDO REYES , HECTOR PONCE.Isoquercit rin f rom A rg emone p la tyceras inhibi t s
carbach ol and leu kot riene D4-in duced con t ract ion in guinea-pig airw ay s[ J] .European Jou rnal of Pharm acology , 2005 , 522(1-
3):108-115
[ 20] 　王继彦 ,李丽静 ,张莲珠.HPLC法测定返魂草及其注射剂中绿原酸[ J] .中草药 , 2005 , 36(8):1166-1167.
[ 21] 　刘艳清 ,汪洪武 ,鲁湘鄂.RP-HP LC测定返魂草颗粒中绿原酸和咖啡酸含量[ J] .中草药 , 2007, 29(10):1451-1453.
Multi-index synthetic study on extracting technology
for the extract of Senecio cannabi f olius Less.
NIU Tian-zeng1 , MENG Yue-juan2 , LIN Hua2 , ZHANG Xiao-ping1 , MENG Xiang-y ing1 ,
BAO Yong-li2 , 3 , WU Yin2 , 3 ,YU Chun-lei2 , 3 , SUN Ying2 , 3 , LI Yu-xin1
(1.Insit itute of Genetic and Cytology , No rtheast Normal University , Changchun 130024 , China;
2.National Engineerin g laboratory for Druggable Gene and Protein Screening , NorthEas t Normal University1 ,
Changchun 130024 , China ;
3.Research C enter of Ag riculture and Medicine Gene Engineering of M inist ry of Education , NorthEast Norm al University 2 ,
Changchun 130024 , China)
Abstract:A reasonable ext ract ion process to the chemical constituents of Senecio cannabi f ol ius Less.
was designed .Method o f L9(34)orthogonal design w as employed w ith content of ef fective consti tu-
ents chlo rogenic acid , caffeic acid , isoque rcit rin as assay ing investig ating indexes fi rst time and regard-
ing total so lids yield simultaneously .The three compounds content w as determinated by RP-HPLC
and approached seve ral inf luencing facto rs of ex t racting techno logy of Senecio cannabi f ol ius Less..
Test result w as detected wi th range analy sis and variance analy sis .Optimum extract ion process con-
sisted of refluxing for 3 times , at 90℃, w ith 60 %ethanol and 6 h each time.Such a convenient pro ce-
dure is steady , reliable , and provides base fo r it s new preparation.
Keywords:Senecio cannabi f olius Less .;o rthogonal design;chloro genic acid;caf feic acid;isoque rcit rin
(责任编辑:方　林)
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