全 文 ：2016年9月第22卷第18期 September.2016 Vol.22 No.18
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（收稿日期：2015-11-17 编辑：蒋孟良）
五叶泡为蔷薇科植物蔷薇莓Rubus rosaefolius smith.干
燥根，别名空心泡、托盘子、黄牛泡等，为广西壮族民间常用
药材，具有祛风除湿、活血止痛的功效，主要用于筋骨痹痛、
跌打损伤。本品分布于广西、福建、江西、广东、四川、云南等
五叶泡质量标准研究*
饶伟源1，2，兰保强1，2，邓聿胤1
（1.广西中医药研究院，广西 南宁 530022；
2.广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022）
[摘要] 目的：建立五叶泡的质量标准。方法：对五叶泡药材进行显微鉴别和TLC鉴别，对总灰分、水分、浸出
物进行检查，采用HPLC法，使用C18色谱柱，以甲醇—0.05%磷酸(5∶95)为流动相，以272 nm为检测波长测定没食子
酸的含量。结果：确定了五叶泡的显微特征，建立了TLC鉴别方法；水分限度为≤13%，总灰分限度为≤6.0%；醇
溶性浸出物限度为≥10%；建立了没食子酸的含量测定方法。结论：建立的方法简便、准确、重现性好，可有效控
制五叶泡药材的质量。
[关键词] 五叶泡；显微鉴别；没食子酸；含量测定
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2016）18-0060-03
Quality Standard of Wuyepao（Rubus rosaefolius Smith）
RAO Wei-yuan1,2, LAN Bao-qiang1,2, DENG Yu-yin1
（1.Guangxi Academy of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences, Guangxi Nanning 530022, China;
2.Guangxi Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Quality Standard, Guangxi Nanning 530022, China）
[Abstract] Objective: To establish the quality standard of Rubus rosaefolius Smith. Methods: The microscop－
ic identification and TLC identification of Rubus rosaefolius Smith was carried out, and the tests of total ash,
contents of moistures and ethanol extracts were carried out. HPLC was used with C18 Chromatographic column
for determination of Gallic acid. Mobile phase consisted of methanol-0.05% phosphoric acid (5∶95). The detec－
tion wavelength was 272 nm. Results: The microscopic identification and TLC identification were identified. The
limit for total ash was≤6.0%, contents of moistures was≤13% and for ethanol extracts was≥10%. Conclusion:
The method is simple, accurate and reproducibile, which is effective for the quality control of Rubus rosaefolius
Smith.
[Keywords] Rubus rosaefolius Smith; microscopic identification ;Gallic acid; determination
*基金项目：广西科技计划项目（桂科重1355001-4-9）；广西卫生和计生委中医药科技专项（GZZX15-40）
通讯作者：兰保强，E-mail：lanbaoqiang2008@126.com
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2016.18.017
2016年9月第22卷第18期 September.2016 Vol.22 No.18
省区，生于山谷、村旁、山脚、草地或山地灌木林间[1]。本品历
代本草未见记载，仅见于我国南方地区中草药手册或植物学
专著中，如《广西本草选编》、《广西药用植物名录》等，为广西
制药企业生产中成药品种“五松肿痛酊”使用的原料药材。本
药材目前尚未有法定质量标准，难以控制药材质量。为保证
用药的安全、有效，本文对五叶泡药材，建立显微鉴别、薄层
色谱鉴别等鉴别方法，采用高效液相色谱法，对药材中没食
子酸进行含量测定[2-4]，并按《中国药典》的检查方法，对药材
中的水分、总灰分、浸出物等制订检查限度；为五叶泡及其制
剂的质量控制提供了依据。
1 仪器与试药
LC-20AT型高效液相色谱仪，SPD-20A紫外检测器
（SHIMADZU）；AUW220D型电子天平（SHIMADZU）；B2200S
型超声仪（BRANSON）；SX-2.5-10型电阻炉（上海沪越实验
仪器有限公司）；DZF-6051型真空干燥箱（上海精宏实验设备
有限公司）；Ni-U高级生物显微镜（JAPAN）。
没食子酸对照品（批号：110831－201204，供含量测定用，
含量按89.9%计，中国食品药品检定研究院提供），五叶泡药
材7批（由广西中医药研究院采集及购于玉林药材市场、经广
西中医药研究院饶伟源副主任药师鉴定）；甲醇为色谱纯；水
为重蒸水；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 药材性状 本品为类圆柱形，稍弯曲，表面棕黄至棕褐
色，具分生细根和纵皱纹，略粗糙，直径0.2～1.8 cm。质坚硬，
不易折断，断面纤维性，皮部棕褐色，木部黄白色或白色，根
茎部位稍彭大。分生横向根，根茎头部残留有短茎，圆柱形，
有的可见小皮刺及黄褐色茸毛。断面木部呈放射状纹理。气
微，味微苦。（见图1）
图 1 五叶泡药材图
2.2 根横切面显微鉴别 木栓层细胞数列，扁方形或方圆
形，胞腔内含棕黄色物质。皮层细胞数列，类圆形、长圆形或
不规则形，薄壁细胞中有的含草酸钙方晶或簇晶，草酸钙结
晶直径6~26 μm，中柱鞘纤维数个一群散在分布。韧皮部厚，
筛管群细胞类圆形，韧皮射线延伸至皮层。形成层不明显。木
质部约占茎的2/3，导管单个或几个相连放射状分布，直径15~
138 μm，射线细胞3~13列。（见图2）
2.3 粉末显微鉴别 粉末黄棕色。纤维成束或分离，黄棕色，
细胞壁平直或稍弯曲突起，壁较厚，胞腔小，纤维直径12～
28 μm。草酸钙方晶或簇晶多散在，直径12～32 μm。木薄壁细
胞方形或长方形，淡黄色，细胞壁较厚，孔沟明显。木栓细胞
淡棕色或黄棕色，壁稍厚，表面观呈多角形。淀粉粒单粒或复
粒，直径3~8 μm。导管黄棕色，主要为螺纹导管及具缘纹孔导
管，直径21～58 μm。（见图3）
1.木栓层 2.皮层 3.中柱鞘纤维 4.韧皮部 5.形成层
6.木质部 7.射线 8.导管
图 2 五叶泡横切面详图
1.纤维 2.草酸钙方晶 3.草酸钙簇晶 4.木薄壁细胞 5.木栓
细胞 6.淀粉粒 7. 导管
图 3 五叶泡粉末图
2.4 薄层色谱鉴别 取本品粉末1.0 g，加甲醇20 mL，超声处
理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试
品溶液。另取五叶泡对照药材1.0 g，同法制备，作为对照药材
溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试
验，吸取上述两种溶液10 μL，分别点于同一含羧甲基纺织纤
维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇（85：15）
为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，热风
吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应
的位置上，显相同颜色的斑点。（见图4）
1.五叶泡（桂平） 2.五叶泡（玉林）3.对照药材
4.五叶泡（大明山）5.五叶泡（高峰）
图 4 五叶泡薄层色谱鉴别
2.5 检查
2.5.1 水分 按照《中国药典》2010年版一部附录Ⅸ H第一
法测定。（见表1）
2.5.2 总灰分 按照《中国药典》2010年版一部附录Ⅸ K测
定。（见表1）
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2.5.3 浸出物 用稀乙醇作溶剂，照醇溶性浸出物测定法
（《中国药典》2010年版一部附录Ⅹ A）项下的热浸法测定。(见
表1)
表 1 五叶泡测定结果
No. 产地 水分(%) 总灰分(%) 浸出物(%) 没食子酸（mg·g-1）
1 桂平 11.4 4.8 13.5 0.23
2 高峰林场 11.0 3.6 16.4 0.43
3 大明山 9.9 3.5 18.2 0.36
4 陆川1 11.4 3.7 14.1 0.29
5 陆川2 10.3 3.2 12.6 0.32
6 玉林1 9.4 5.2 12.1 0.26
7 玉林2 11.8 3.6 14.5 0.29
2.6 没食子酸的含量测定
2.6.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Kromasil C18
(250 mm×4.6 mm，5 mm)，流动相：甲醇—0.05%磷酸(5:95)；检
测波长：272 nm；流速1.0 mL·min-1；进样量为10 mL；柱温为室
温。没食子酸峰理论板数≥5000。（见图5）
图 5 对照品(A)和供试品（B）溶液的 HPLC色谱图
2.6.2 对照品溶液的制备 取没食子酸对照品适量，精密称
定，加水制成每1 mL含10 mg的溶液，即得。
2.6.3 供试品溶液的制备 取本品粗粉约2.0 g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，加水50 mL，称定重量，置水浴中加热10 h，
取出，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，
取续滤液，即得。
2.6.4 线性关系考察 精密称取没食子酸对照品4.65 mg，置
50 mL量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品
贮备溶液（按89.9%含量计算得浓度为83.60 mg·mL-1）。精密
量取上述对照品贮备溶液0.5、1、2、5、10 mL，分别置25 mL量
瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得浓度分别为1.672，3.344，
6.688，16.720，33.440 mg·mL-1的对照品溶液，按“2.6.1”项下
的色谱条件分别进样10 mL测定，记录峰面积。以没食子酸对
照品峰面积对进样量(mg)进行回归，回归方程为：Y=4.32×
104X+1.76×103(r=0.9999)。结果表明：当进样量在0.0167~
0.3344 mg范围内时，没食子酸线性关系良好。
2.6.5 精密度试验 对同一供试品溶液，照“2.6.1”项下的色
谱条件，连续测定6次，记录没食子酸峰面积。结果6次测定峰
面积的RSD%为1.38%（n=6），表明仪器精密度良好。
2.6.6 稳定性试验 对同一供试品溶液，在0、2、4、6、8、10、
12 h分别进样测定，结果7次测定没食子酸峰面积的RSD%为
1.80%（n=7），结果显示供试品溶液在12 h内稳定。
2.6.7 重复性试验 对同一批样品（广西桂平产药材），照
“2.6.3”项下方法平行制备6份供试品溶液，进样测定，结果没
食子酸含量的平均值为0.225 mg·g-1，RSD%=1.86%（n=6）。结
果表明，本品在本法的色谱条件下重复性较好。
2.6.8 加样回收率试验 精密称取没食子酸对照品（供含量
测定用，按89.9%计）4.89 mg，置1000 mL量瓶中，加水使溶解
并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（浓度为4.396 mg·mL-1）。
精密称取五叶泡药材粉末（没食子酸含量为0.225 mg·g-1）约
1.0 g，平行取6份样，分别精密加入上述没食子酸对照品溶液
50 mL，称定重量，照“2.6.3”项下方法提取，测定，计算回收
率，结果平均回收率为102.75%，RSD%=1.04%（n=6）。（见表2）
表 2 加样回收率试验结果 （n=6）
取样量(g) 含量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%)
1.0028 0.2256 0.220 0.4527 103.22
1.0380 0.2336 0.220 0.4592 102.55
0.9989 0.2248 0.220 0.4515 103.06
1.0151 0.2284 0.220 0.4519 101.58
1.0362 0.2331 0.220 0.4629 104.44
1.0657 0.2398 0.220 0.4634 101.66
2.6.9 样品测定 按拟订的含量测定方法，测定了广西7个
不同产地五叶泡药材的没食子酸含量，结果7批样品没食子
酸含量范围为0.23～0.43 mg·g-1。（见表1）
3 小 结
本文对五叶泡药材建立了显微鉴别、薄层色谱鉴别等鉴
别方法，并依据中国药典的检查方法，制订药材中的水分、总
灰分、浸出物等检查限度[5]，采用高效液相色谱法，对药材中
没食子酸进行含量测定，为五叶泡及其制剂的质量控制提供
了依据，并为壮药五叶泡的开发利用提供参考。
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（收稿日期：2015-11-16 编辑：李海洋）
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