全 文 ：［收稿日期］ 2010-10-18
［第一作者］ 朱庆玲，实验师，主要从事微生物检验方面的研
究，Tel:020-28854990，13533307074， E-mail:
alinghui@ 163. com
五爪龙不同提取物体外抗菌活性的研究
朱庆玲，冯翀
(广东食品药品职业学院实验实训中心，广州 510520)
［摘要］ 目的:比较五爪龙不同提取物体外抗菌活性。方法:使用 95%乙醇对五爪龙中化合物进行提取，然后分别使用石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水等萃取剂对乙醇总提物进行分极性段萃取。观察五爪龙各极性段对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草
杆菌、鳗弧菌的抑菌效果。结果:五爪龙四个极性段对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、鳗弧菌均具有一定的抑制作用，其中
Ⅰ、Ⅱ段作用更强。结论:五爪龙各极性段和抑菌作用强度有明显差别，其中以乙酸乙酯、石油醚萃取的抑菌作用更强。
［关键词］ 五爪龙;不同提取物;抑菌活性
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2011)11-0232-02
五爪龙 Cayratica Jeponicae Herba 又名五指毛
桃、乌蔹莓、拉拉秧、拉拉藤等。属于葡萄科植物乌
蔹莓的全草，多生于旷野、山谷、林下及路旁［1］。五
爪龙具有清热解毒、活血散瘀、利尿等功能，可以用
于治疗咽喉肿痛、疖肿、痈疽、疔疮、痢疾、尿血、白
浊、跌打损伤、毒蛇咬伤等疾病［2-3］。常用于治疗呼
吸及消化系统疾病。至今对其不同提取物的药理活
性研究较少。因此，本研究就五爪龙在抗菌方面的
作用进行探讨。
1 材料
1. 1 药物 五爪龙全草，由广州中医药大学提供。
1. 2 菌株和培养基 大肠杆菌 Escherichia coli、金
黄色 葡 萄 球 菌 Staphylococcus aureus、枯 草 杆 菌
Becillus subtilis、鳗弧菌 Vibrisis angnillarumz，均由中
山大学提供。使用牛肉膏蛋白胨培养基以及 2216E
培养基。
1. 3 试剂 牛肉膏、琼脂、酵母膏、蛋白胨、氯化镁、
乙醇、乙酸乙酯、溴化钠、正丁醇、石油醚、二甲基亚
砜、氯化钠、氢氧化钠等，均由中山大学提供。
1. 4 仪器 超净工作台、培养皿、分液漏斗、高压灭
菌锅、真空干燥箱、旋转蒸发仪、恒温控制箱。
2 方法
2. 1 五爪龙提取液的制备 五爪龙全草使用乙醇
浸泡，后将乙醇提取物经过旋转蒸发。将所得醇提
物分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水等萃取剂在
分液漏斗中萃取，每种溶剂萃取 3 次，最终得到Ⅰ，
Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ段提取物，在真空干燥箱中放置 2 h 烘干。
取干燥后提取物样品各 100 mg，使用二甲基亚砜配
成 100 g·L － 1的药液，即得五爪龙提取液。
2. 2 各种细菌悬液的制备［4］ 牛肉膏蛋白胨培养
基用于大肠杆菌、枯草杆菌以及金黄色葡萄球菌的
生长;2216E 培养基用于鳗弧菌的生长。将上述菌
种接种于适合的试管斜面培养基上。放置于 37 ℃
恒温箱中培养 18 ～ 24 h 后再用接种环分别挑取少
量菌体置于装有无菌生理盐水的试管，然后震荡均
匀，制备成菌悬液。调整至菌悬液的密度，使用平板
菌落计数法对其菌液浓度进行测定，最后用生理盐
水将菌液稀释至 105 ～ 106 CFU·mL － 1的浓度，即得
菌悬液。
2. 3 抑菌圈的测定［5］ 使用滤纸片法对五爪龙提
取物液抑菌圈进行测定。在超净工作台上使用无菌
吸管吸取 0. 1 mL 的菌悬液，置于相应的营养平板
上，再用涂布棒将菌液涂布均匀。然后用已浸过药
液的干燥药敏滤纸片(直径为 6 mm)紧贴在含菌培
养皿上，每皿贴 3 片(使用二甲基亚砜作对照)，每种
菌重复上述步骤 3 次。将培养皿置 37 ℃恒温箱中
培养 24 h，最后测定含药滤纸片抑菌圈的直径大小，
取其平均值。
2. 4 MIC 测定 五爪龙各极性段的最小抑菌浓度
(MIC)［5］用液体稀释法进行测定。即按每管 5 mL
分装试管将配置细菌液体培养基加入不同浓度的药
液，后可配成系列浓度梯度的培养基。再接种相同
量的菌液，于 37 ℃的恒温震荡培养箱中进行培养 48
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第 17 卷第 11 期
2011 年 6 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 11
Jun．，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.11.068
h，另外取不接种任何菌种的培养基作为空白对照。
最后，培养基中完全没有细菌生长时的最低浓度即
为各极性段的最小抑菌浓度。
2. 5 最小杀菌浓度(MBC)测定 分别从各极性段
的 MIC 和大于 MIC 的试管中吸取培养物 0. 1 mL 并
转接在相应的培养基上，37 ℃中培养 48 h，观察菌
落的生长情况，记录无菌落生长的最小浓度即为该
极性段对该菌株的 MBC［6］。
3 结果与分析
3. 1 五爪龙各极性段的抑菌作用 五爪龙 4 个极
性段的药液(100 g·L － 1)对大肠杆菌、枯草杆菌、金
黄色葡萄球菌、鳗弧菌均具有一定的抑制作用。Ⅰ，
Ⅱ，Ⅲ段对 4 种菌的抑制作用均非常明显，极性段Ⅱ
对 4 种细菌的抑制效果都很明显。极性段Ⅳ的抑菌
效果较弱。见表 1。
表 1 五爪龙 4 个极性段提取液的抑菌作用 mm
组别 大肠杆菌 枯草杆菌 金黄色葡萄球菌 鳗弧菌
Ⅰ 12. 3 17. 5 6. 9 11. 7
Ⅱ 11. 6 21. 8 7. 1 14. 8
Ⅲ 14. 8 15. 5 16. 9 8. 9
Ⅳ 7. 3 12. 5 8. 0 7. 2
二甲基亚砜 0 0 0 0
3. 2 MIC 测定结果 五爪龙Ⅰ，Ⅱ段对枯草杆菌的
MIC 均≥12. 5 g·L － 1，其中Ⅰ段对大肠杆菌、鳗弧菌
的 MIC 均≥50 g·L － 1，而极性段Ⅱ对大肠杆菌、鳗弧
菌的最小抑菌浓度≥25 g·L － 1。极性段Ⅲ，Ⅳ对上
述 4 种菌的 MIC 均≥50 g·L － 1。见表 2。
表 2 五爪龙各极性段的 MIC 的测定
药物
质量浓度
/ g·L － 1
大肠杆菌 枯草杆菌
金黄色
葡萄球菌
鳗弧菌
Ⅰ 50 － － + －
25 + － + +
12. 5  －  
6. 25  +  
Ⅱ 50 － － + －
25 － － + －
12. 5 + －  +
6. 25    
Ⅲ 50 － － － +
25 + + + 
12. 5    
6. 25    
Ⅳ 50 + － + +
25 + +  +
12. 5    
6. 25    
注:“”高度浑浊，“”中度浑浊，“ + ”轻微浑浊，“ － ”不
浑浊。
3. 3 MBC 测定结果 极性段Ⅰ对枯草杆菌的 MBC
为 25 g·L － 1，而对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鳗
弧菌的 MBC 均为 100 g·L － 1;极性段Ⅱ段对枯草杆
菌的 MBC 为 25 g·L － 1，对大肠杆菌、金黄色葡萄球
菌的 MBC 为 50 mg． mL － 1，对鳗弧菌的 MBC 为 100
g·L － 1;极性段Ⅲ对枯草杆菌的 MBC 为 50 g·L － 1;极
性段Ⅳ无明显的杀菌效果。将结果与表 2 数据比较
可得五爪龙各极性段的 MIC 均小于 MBC。
4 结论
本实验表明:五爪龙各极性段的抑菌作用强度
有明显差别，其中以乙酸乙酯、石油醚萃取的抑菌作
用最强，对弧菌、杆菌、革兰阴性菌以及阳性菌均有
一定的抑制作用。可能是因为乙酸乙酯部分所含化
学成分多为黄酮类，此类化合物本身就具有很好的
抑菌作用。而石油醚部分所含化学成分多为单萜
类、倍半萜类，同样具有较好的抑菌作用［5，7］。五爪
龙长期以来被作为一种杂草或动物饲料使用，其药
用价值仍有待开发利用，本实验证实了五爪龙的抗
菌作用，为临床应用提供了实验证据。
［参考文献］
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鉴定和中药防治试验［J］． 中国兽医杂志，2006，42
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［7］ 刘雪萍，蒋伟哲，黄兴振，等 ．芒果叶提取物体外抗菌作
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［责任编辑 何伟］
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朱庆玲，等:五爪龙不同提取物体外抗菌活性的研究