全 文 ：铜藻总萜提取物抗抑郁活性及作用机制
赵东海 李梦璐1 袁 臻1 罗维芸1 顾丽霞2 (吉林医药学院病理学教研室，吉林 吉林 132013)
〔摘 要〕 目的 探讨铜藻总萜提取物抗抑郁活性及作用机制。方法 采用乙醇浸提，借助超声波萃取得到铜藻总萜类提取物。采用经典的
小鼠强迫游泳实验和小鼠悬尾实验进行抗抑郁模型，以小鼠行为绝望的不动时间作为指标，考察铜藻总萜类物质的抗抑郁活性。高效液相-电化学
法检测小鼠小脑中 5-羟色胺(HT)水平。结果 小鼠悬尾实验结果显示，与空白组比较，铜藻总萜提取物低、中、高剂量均能减少小鼠悬尾不动时间，
且不同剂量抗抑郁活性有差异(P＜0. 05 或 P＜0. 01) ;铜藻总萜提取物各剂量组能够不同程度提高小鼠小脑 5-HT含量(P＜0. 05 或 P＜0. 01) ，并呈剂
量依赖性。结论 铜藻总萜提取物具有抗小鼠实验性抑郁作用，其作用机制可能与提高下丘脑 5-HT含量有关。
〔关键词〕 铜藻;总萜;抗抑郁
〔中图分类号〕 Ｒ364 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2014)22-6420-02;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2014. 22. 081
基金项目:吉林省教育厅课题(No．吉教科字 2011 第 266 号)
1 吉林医药学院临床医学院 2 浙江海洋学院食品与药学学院
第一作者:赵东海(1975-) ，男，副教授，主要从事中药药理学研究。
铜藻是我国浅海植被的珍贵物种，主要分布于辽宁、浙江、
福建、广东等地，是藻胶工业的优质饵料，因富含有益的生物要
素而被广泛应用到医药、食品、饲料和有机肥料中〔1〕。褐藻中
含有大量的萜类化合物，主要有倍半萜和二萜类化合物〔2 ～ 4〕。
有研究报道，从银杏中分得的萜类化合物能够显著增加大鼠纹
状体和边缘系统多巴胺的含量，对多巴胺(DA)代谢有一定的
抑制作用，表明萜类化合物具有抗抑郁活性〔5，6〕。铜藻属于褐
藻类，具有丰富的资源优势，但目前有关铜藻总萜提取物的抗
抑郁作用研究尚未见报道。本文对总萜提取物抗抑郁活性进
行研究，为铜藻抗抑郁中药研究提供实验基础和理论依据。
1 资料与方法
1. 1 材料 雄性 Balb /c小鼠(18 ～ 22 g) ，购自浙江省实验动
物中心。自然昼夜光照，自由饮水、摄食，适应性喂养 5 d 后进
行实验。铜藻:采集于舟山市海域。盐酸氟西汀(美国 Lilly 公
司)用前用 2%羧甲基纤维素钠水溶液配制成 1 g /L，备用;乙
醇、羧甲基纤维素钠等为分析纯。
1. 2 检测指标及方法
1. 2. 1 铜藻总萜提取物的制备 铜藻总萜提取物由浙江海洋
学院食品与药学学院提供，制备工艺参照文献〔7 ～ 11〕。将干燥的
铜藻粉碎过 80 目筛，8 倍量 90%乙醇浸泡 2 h 后，超声波辅助
萃取 30 min，80℃水浴提取 2 h，连续提取 3 次，合并提取液，回
收溶剂至浸膏，过滤，收集滤液。连续提取 3 次，合并滤液，蒸
发至浸膏状。总萜提取物浸膏状物质用 2%羧甲基纤维素钠溶
液分别配制一定的浓度，备用。
1. 2. 2 实验动物分组及药品处理 取雄性小鼠 100 只，实验
室适应性饲养 3 d，随机抽取 50 只分别纳入空白组、盐酸氟西
汀、铜藻总萜提取物低、中、高剂量组(每组 10 只)。盐酸氟西
汀剂量为 30 mg /kg;铜藻总萜提取物低、中、高剂量分别为 100、
200、400 mg /kg;空白组灌服同体积的 2%羧甲基纤维素钠水溶
液，连续灌胃 7 d，1 次 /d。于末次给药后 1 h 进行小鼠强迫游
泳、悬尾实验。实验结束后处死小鼠，分离小鼠下丘脑利用高
效液 相-电 化 学 法 (HPLC-ECD)检 测 下 丘 脑 5-羟 色 胺
(HT)水平。
1. 2. 3 小鼠强迫游泳实验 将小鼠放入 XSC-小鼠恒温游泳仪
内(水深 10 cm、直径 34 cm 的桶内，水温 25℃ ± 2℃) ，观
察 6 min内小鼠游泳情况，统计小鼠后 4 min 内游泳累积不动
时间(即小鼠停止挣扎或小鼠呈漂浮状态、四肢有轻微动作以
保持头部在水面)〔12〕。
1. 2. 4 小鼠悬尾实验 距小鼠尾尖部约 1 cm 处用胶布贴于
悬尾箱(30 cm×30 cm×25 cm)支架上，使小鼠呈倒挂状态，其头
部离箱底约 5 cm，1 次悬挂 2 只小鼠，中间用隔板隔开。悬挂
时间为 6 min，统计小鼠后 4 min内悬尾累积不动时间(即小鼠
停止挣扎不动或无任何活动)〔13〕。
1. 2. 5 小鼠自主活动实验 于给药前和末次给药后 1 h检测。
采用 XZC-4 小鼠自主活动测定仪，将小鼠放入测定仪适
应 5 min后开始测定，以 10 min 内给药前后的活动次数之差为
指标，比较各组小鼠自主活动强度。
1. 2. 6 HPLC-ECD测定小鼠小脑(5-HT)水平 每 100 mg 脑
组织中加入 200 μl 冰冷 HClO4(0. 4 mol /L) ，冰浴超声匀浆，避
光 4℃静置 60 min，离心 20 min(4℃，4 500 r /min) ，取上清，加
入上清半量体积的混合液(柠檬酸钾 0. 2 mol /L，K2HPO4
0. 3 mol /L和 EDTA 0. 2 mol /L) ，震荡混匀 10 min，避光 4℃静
置 60 min，再次离心 20 min(4℃，4 500 r /min) ，取上清，HPLC-
ECD测定 5-HT水平。
1. 3 统计学处理 实验结果以 x±s 表示，采用单向方差分析
(ANOVA)。
2 结 果
2. 1 铜藻总萜提取物对小鼠强迫游泳不动时间的影响 与空
白组〔(147. 6±14. 8)s〕相对比，铜藻总萜类提取物中、高剂量
(400 mg /kg)能降低小鼠强迫游泳的不动时间〔(118. 3 ±
10. 7)、(109. 4 ± 9. 9)s〕(P ＜ 0. 05)。低剂量组 〔(135. 7
±13. 4)s〕未显示降低;盐酸氟西汀组小鼠不动时间〔(78. 5 ±
4. 9)s〕明显缩短(P＜0. 001)。
2. 2 铜藻总萜提取物对小鼠悬尾不动时间的影响 与空白组
·0246· 中国老年学杂志 2014 年 11 月第 34 卷
〔(135. 7±15. 2)s〕比较，铜藻总萜提取物高、中、低剂量均能够
降低小鼠悬尾的不动时间〔(98. 7 ± 8. 6)、(107. 8 ± 9. 4)、
(109. 4±10. 4)s〕，并且随着剂量增大，不动时间减少越明显，其
中高剂量组，小鼠悬尾不动时间减少最明显。而对照药盐酸氟
西汀组小鼠不动时间〔(65. 2±5. 6)s〕明显缩短(P＜0. 001)。
2. 3 铜藻总萜提取物对小鼠自主活动的影响 与空白
组〔(28±64)次〕比较，盐酸氟西汀组小鼠自主活动次数〔(123±
59)次〕显著减少(P＜0. 001) ，铜藻总萜提取物高剂量组小鼠自
主活动次数〔(114±86)次〕明显减少(P＜0. 01) ，低中剂量组
〔(46±74)、(88±39)次〕略减少(P＜0. 05)。
2. 4 铜藻总萜提取物对小鼠小脑 5-HT 含量的影响 与空白
组〔(84±11. 28)ng /g〕相比，铜藻总萜提取物高、中、低剂量组
均能提高小鼠小脑 5-HT水平〔(127±4. 23)、(112±6. 34)、(96±
78. 52)ng /g〕，并呈剂量依赖关系，其中铜藻总萜提取物中、高
剂量组作用更显著(P＜0. 01) ，盐酸氟西汀组也能明显提高 5-
HT水平〔(158±9. 65)ng /g〕(P＜0. 001)。
3 讨 论
小鼠强迫游泳实验和悬尾实验〔12 ～ 14〕模型提供了一个无法
回避的压迫环境，实验中小鼠表现出来的不动状态，反映了一
种被称之为“行为绝望和扭曲”或“对强压环境适应的失败”状
态〔15〕。这两种行为绝望模型对绝大多数抗抑郁药敏感，被广
泛用于筛选和观察抗抑郁药物的。动物在强迫这一应激条件
下，挣扎后出现绝望表现即不动状态，而抗抑郁剂可以减少动
物的不动时间，提高对应激的耐受性。随着竞争的加剧，抑郁
症发生与患病频率已经变得越来越高。而抑郁症的病理生理
机制迄今不明确，病理改变涉及神经、内分泌、免疫等多个系
统，是遗传因素和环境因素相互作用的结果。因此，从天然植
物药中寻找与研制具有良好抗抑郁作用的药物已越来越受到
学术界的关注。
本实验结果说明铜藻中总二萜能够增强实验动物的应激
耐受性，减少绝望动物的不动时间，具有明显的抗小鼠实验性
抑郁作用。5-HT 是脑内重要的神经递质，参与情感、睡眠、记
忆及食欲等代谢活动的调节〔16〕。本实验结果发现铜藻总萜提
取物各剂量组均能提高小鼠小脑 5-HT 水平，并呈剂量依赖关
系。初步证实铜藻总萜提取物可能通过提高脑内 5-HT水平而
发挥抗抑郁作用。
4 参考文献
1 孙建璋，庄定根，王铁干，等 . 南麂列岛铜藻的研究〔J〕．现代渔业信
息，2009;24(5) :19-21.
2 田由芸，袁 璟 . 褐藻的药用食用研究进展〔J〕． 海洋通报，
1996;15(3) :81-6.
3 吴毓林，何子乐 . 天然产物全合成荟萃-萜类〔M〕． 北京:科学出版
社，2010:31-2.
4 陈雪梅，田德美，李海兵 . 具有杀菌活性的新型二萜化合物合成
〔J〕．有机化学，2010;30(3) :461-4.
5 韩迎辰 . 抑郁症及抗抑郁天然药物研究进展〔J〕． 药学实践杂志，
2005;23(1) :3-5.
6 张林娜，陈振强 . 银杏叶片治疗老年抑郁症的疗效观察〔J〕．辽宁中
医杂志，1999;26(12) :560.
7 段志芳，陈庆华 . 超声波法提取溪黄草中总二萜的最佳工艺研究
〔J〕．时珍国医国药，2006;17(12) :2436-8.
8 成 英，何兴金 . 续随子种子中两种大环二萜类物质的提取工艺
〔J〕．时珍国医国药，2011;22(5) :1267-9.
9 胡晓雪，卢 平，陈洪燕 . 雷公藤根醋酸乙酯提取物总二萜含量测
定〔J〕．时珍国医国药，1999;10(3) :177.
10 韦 玮，金日显，陈燕军 . 二萜类化合物的提取与纯化工艺研究进
展〔J〕．中国实验方剂学杂志，2007;13(12) :66-70.
11 简 丽，贾慧凯，庞丽纹，等 . 超声波辅助提取狼毒大戟中二萜类
物质〔J〕．精细化工，2007;24(10) :972-4.
12 Porsolt ＲD，Bertin A，Jalfre M. Behavioural despair in mice:a primary
screening test for antidepressants〔J〕． Arch Int Pharmacodyn Ther，
1977;229(2) :327-36.
13 Steru L，Chermat Ｒ，Thierry B，et al． The tail suspension test:a new
method for screening antidepressants in mice〔J〕． Psychopharmacology，
1985;85(3) :367-70.
14 李 骥，石 鑫，高彦宇，等 . 乌腺金丝桃抗抑郁作用的药理研究
〔J〕．中医药信息，2012;29(2) :16-7.
15 Wiillner P. Animal models as simulations of depression〔J〕． Trends
Pharmacol Sci，1991;12(4) :131-6.
16 高 隽，朱国庆 . 5-羟色胺与睡眠和抑郁症的关系〔J〕． 国外医学
·精神病学分册，2000;27(3) :148-52.
〔2013-12-05 修回〕
(编辑 袁左鸣)
2014 年《国际护理学杂志》征订启事
《国际护理学杂志》是中华人民共和国卫生部主管、中华医学会和吉林省医学期刊社主办的中央级护理学专业杂志，所载文章
被《中国核心期刊(遴选)数据库》、《CMCC数据库》、《中国学术期刊(光盘版)》收录。欢迎广大护理工作者在全国各地邮局办理订
阅手续，或向编辑部直接订阅。《国际护理学杂志》为月刊，大 16 开，144 页。刊号 ISSN 1673-4351，CN22-1370 /Ｒ，邮发代号 12-116，
每期定价 9 元，全年 108 元。地址:长春市建政路 971 号《国际护理学杂志》编辑部，邮政编码:130061，垂询电话:0431-88920584。
·1246·赵东海等 铜藻总萜提取物抗抑郁活性及作用机制 第 22 期