全 文 ：· 实验研究·
宽叶返魂草对免疫功能影响的实验研究
陈 芬 钟 越 李 妍 王典瑞 第四军医大学吉林军医学院 吉林 132013
摘 要 目的:观察宽叶返魂草对小鼠免疫功能的影响。 方法:实验组小鼠灌胃宽叶返魂草煎液每
次 0. 5m l(含生药 0. 5g /m l) ,每日 1次 ,连续 7天。对照组小鼠灌胃等量生理盐水。结果:灌胃结束
后实验组小鼠免疫器官脾脏和胸腺萎缩 ,并抑制 LPS刺激后的脾细胞增殖反应 ,抑制小鼠碳廓清
指数 ;对 ConA刺激的小鼠脾细胞增殖反应、脾细胞 IL-2的产生无明显影响。结论:宽叶返魂草水
煎剂对小鼠的免疫功能有明显的抑制作用 ,对细胞免疫应答抑制不明显。对非特异性巨噬细胞吞噬
功能亦有抑制作用。
关键词 小 鼠 宽叶返魂草 免疫功能 IL-2 脾细胞增殖反应 巨噬细胞
宽叶返魂草 ,别名麻叶千里光 ,学名 Senecio
cannabifolius Less,菊科 ,主要生长在长白山区 ,其
药理作用尚未见报道 ,本文就其对免疫功能的影响
进行了实验研究 ,旨在为临床应用提供依据。
1 实验材料
1. 1 动 物 昆明种 BALB /C小鼠 ,雄性 ,体重 20
± 2g ,白求恩医科大学动物室提供。
1. 2 药 品 宽叶返魂草 ,采自吉林市郊 ,经吉林
省药检所鉴定为宽叶返魂草。全草晒干 ,煎煮两次 ,
每次 1h,浓缩至含生药 0. 5g /m l;刀豆蛋白 ( ConA)
与细菌脂多糖 ( LPS) ,美国 Sigma公司产品 ; 3 H-
TdR,比放射性 9. 25× 1011Bq,中国科学院原子能研
究所产品。
1. 3 仪 器 FJ2108型液体闪烁计数仪 ,西安 262
厂生产。
2 方法和结果
2. 1 免疫器官重量测定 实验组小鼠给返魂草水
煎剂灌胃 0. 5m l /d,对照组生理盐水灌胃 0. 5ml /d,
连续 7天 (以下实验同 )。用药后第 8天 ,解剖小鼠 ,
取出胸腺和脾脏 ,称其湿重 ,计算各脏器指数 ( mg /
10g体重 ) ,结果返魂草水煎剂可使小鼠脾脏和胸腺
重量明显减少 ,与对照组比较 , P均 < 0. 01,差异有
非常显著性意义 ,见表 1。
表 1 对免疫器官重量的影响 (x-±s ) mg /10g
n /只 脾 脏 胸 腺
对照组 12 43. 82± 6. 37 30. 22± 4. 21
实验组 12 30. 74± 5. 24△△ 16. 58± 7. 39△△
与对照组比较 ,△△P < 0. 01
2. 2 脾细胞增殖反应测定 用药后第 8天 ,无菌解
剖小鼠 ,取脾 ,用 RPM I 1640营养液配制 5× 106 /ml
脾细胞悬液 ,取 0. 1m l加入 96孔板中 ,再加入
10μg /ml的 ConA 0. 1ml ,或 20μg /ml的 LPS 0. 1
ml。 37℃ 5% CO2培养箱中培养 3d,收获前 16h每
孔加入 20μl 3 H-TdR,用液体闪烁计数仪测定 cpm
值 [1 ] ,结果显示 , T细胞有丝分裂原 ConA和 B细胞
有丝分裂原 LPS刺激后 ,实验组小鼠淋巴细胞转化
率均有所降低。 与对照组比较 , ConA刺激后 t检验
P> 0. 05; LPS刺激后 , t检验 P < 0. 01,见表 2。
表 2 对脾细胞增殖反应的影响 ( x-± s )
n /只
3HTdR掺入 /cpm
ConA LPS
对照组 10 40298± 7643 47925± 5287
实验组 10 34179± 6236 29703± 7825△△
与对照组比较 ,△△ P < 0. 01
2. 3 IL-2测定 无菌取出小鼠脾脏 ,用 RPM I
1640完全培养液配成 0. 1× 107 /ml细胞悬液 ,加入
ConA5μg /m l, 5% CO2 37℃培养箱中培养 24h后 ,离
心收集上清液 ,置 - 20℃待检。 IL-2含量测定取传
代的 CT LL-2细胞 ,配成 1× 105 /ml细胞悬液 ,接种
于培养板 ,加不同稀释度的待测标本 ,以标准 IL-2
作阳性对照 , RPM I 1640作阴性对照 , 5% CO2 37℃
培养 24h,于结束培养前 6h每孔加入 0. 5mCi 3 H-
TdR50μl,收集细胞 ,用液体闪烁计数仪测定 cpm
值 ,结果显示 ,实验组 IL-2为 61. 51± 17. 83u /ml,
对照组为 78. 67± 11. 83u /ml,返魂草煎剂可轻度抑
制小鼠脾细胞产生 IL-2,但两组比较无显著性差异
( P> 0. 05)。
2. 4 单核 -巨噬细胞功能测定 选用小鼠碳廓清实
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验 ,于末次给药后 24h,每鼠经尾静脉注射印度墨汁
0. 1m l /20g。注射后 2min( t1 )及 20min( t2 )从眼眶静
脉取血 40μl,溶于 4ml 0. 1%碳酸钠中 ,摇匀 ,用分
光光度计 680nm处测定吸光度 ( A) ,根据公式计算
廓清指数 K值 [ K= ( lo gA1 - logA2 ) /( t1 - t2 ) ][2 ] ,
结果显示 ,返魂草水煎剂使小鼠碳廓清指数明显降
低 0. 0402± 0. 0036,与对照组 0. 0246± 0. 0054比 ,
P < 0. 01,有非常显著性差异。
3 讨 论
吉林民间中医用宽叶返魂草治疗急性外感热
病 ,疗效确切 ,但目前该药的应用尚缺乏现代药理学
依据。本研究结果表明 ,宽叶返魂草水煎剂对小鼠的
免疫功能有明显的抑制作用。
宽叶返魂草可使小鼠脾脏萎缩 ,使脾脏 B淋巴
细胞转化率下降 ,表明宽叶返魂草有抑制体液免疫
应答的作用 ;宽叶返魂草使小鼠胸腺萎缩 ,使脾脏 T
淋巴细胞转化率轻度下降 ,使脾细胞产生的 IL-2轻
度减少 ,但统计学分析无显著性差异 ,说明宽叶返魂
草对细胞免疫应答抑制不明显。
碳廓清实验的结果显示 ,宽叶返魂草使小鼠碳
廓清指数明显降低 ,表明该药对非特异性巨噬细胞
吞噬功能亦有抑制作用。
参 考 文 献
1 杨贵贞 .免疫生物工程纲要与技术 .长春: 吉林科学技术
出版社 , 1991. 28～ 29
2 徐叔云 .药理实验方法学 .第 2版 .北京: 人民卫生出版
社 , 1994. 1233～ 1235
收稿日期: 2001-12-17
超声波导入中药治疗颞颌关节紊乱病
朱子强 浙江省永康市中医院 永康 321300
我们采用超声波导入中药治疗颞颌关节紊乱病
86例 ,疗效满意 ,现报道如下。
1 临床资料
本组 86例 ,其中男 34例 ,女 52例 ,年龄 18～
57岁 ,以青壮年为主。临床表现为颞下颌关节区疼
痛、弹响、张口受限 ,下颌运动异常。 发病时间: 局部
疼痛、张口困难、咀嚼功能障碍 1～ 10天 ;关节弹响、
张口受限、开口型异常 3个月～ 数年。发病部位:左
侧 36例 ,右侧 42例 ,双侧 8例。
2 治疗方法
2. 1 治疗仪 采用台湾产 TS- 2型超声波治疗
仪 ,工作频率为 800kc /s,声强输出功率为 0. 5～
2w /cm
2。
2. 2 中药酊剂 川乌、细辛、香附、当归、红花、乳
香、辣淑、元胡、没药 ,将以上药物浸入 60%酒精
200ml中 ,浸泡 1周 ,过滤药液去渣 ,加入聚乙烯醇
备用。
2. 3 方 法 患者仰卧 ,头偏向健侧。用棉签醮取
药液均匀涂在患侧耳屏前区或疼痛部位。 采用超声
波直接辐射移动法将声头紧贴皮肤 ,缓慢均匀呈螺
旋式移动。工作状态为连续超声 ,根据患者耐受程度
以温热感为宜 ,治疗时间每次 15min, 1日 1次 , 7次
为 1个疗程。
2. 4 口服药物 肠溶扶他林片 ,每次 25mg , 1日 3
次 ;安定片每次 2. 5mg , 1日 1～ 3次 ;维生素 B1片 ,
每次 10mg , 1日 3次。
3 治疗结果
3. 1 疗效标准 痊愈: 自觉症状完全消失 ,颞颌关
节活动正常 ,开口度、开口型正常 ,弹响消失 ,咀嚼功
能恢复。 显效: 主客观症状基本消失 ,开口度接近正
常 ,轻度关节弹响或大张口时有不适感。有效:主客
观症状均有好转 ,但未能全部消失。无效:主客观症
状于治疗后无改变或加重。
3. 2 结 果 86例中痊愈 52例 ,占 60% ;显效 22
例 ,占 26% ;有效 9例 ,占 11% ;无效 3例 ,占 3%。总
有效率 86% 。
4 讨 论
超声波通过机械震动波在介质中以纵波的方式
进行传播 ,由于声波的震动在组织中可引起细胞的
震动 ,细胞浆发生微流、环流的改变 ,使其颗粒和质
点发生旋转、颤动 ,可增加细胞膜的通透性 ,提高组
织细胞的代谢 ,增强其细胞活力和再生能力。超声能
量被组织吸收后转变为热效应 ,使局部组织温度上
升 ,血管扩张 ,血流量增加 ,血液循环改善。同时 ,超
声波能加速化学反应 ,使复杂的蛋白质较快地分解
为普通的有机分子 ,因此能活化多种酶的功能 ,使组
织的酸碱度发生改变 ,组织局部炎症消退并减轻疼
痛。 中药红花、当归、辣椒活血祛 (下转第 366页 )
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