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香草兰疫霉菌对9种杀菌剂的敏感性测定



全 文 :第47卷第11期
2008年11月
Vol. 47, No. 11
Nov. 2008
农 药
AGROCHEMICALS
香草兰疫霉菌对9种杀菌剂的敏感性测定
刘爱勤,桑利伟,孙世伟,苟亚峰
(中国热带农业科学院 香料饮料研究所,海南 万宁 571533)
摘要:采用生长速率法测定了香草兰疫霉菌对9种常用杀菌剂的敏感性。 试验结果表明:香草兰疫霉菌对
不同供试杀菌剂的敏感性存在明显差异,其中对50%烯酰吗啉WP、25%甲霜·霜霉WP和69%烯酰吗啉·锰
锌WP的敏感性最高,EC50值分别为0.385 5、0.407 4、2.818 4 mg/L;对50%琥铜·甲霜WP和72%霜脲氰WP
的敏感性次之。
关键词:香草兰疫霉菌;杀菌剂;敏感性
中图分类号:S482.2 文献标志码:A 文章编号:1006-0413(2008)11-0847-02
Sensitivity of Phytophthora nicotianae to Nine Fungicides
LIU Ai-qin, SANG Li-wei, SUN Shi-wei, GOU Ya-feng
(Spice and Beverage Crops Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultral Sciences, Wanning 571533, Hainan, China)
Abstract: By the mycelium growth rate methods, the sensitivity of nine fungicides to the vanilla Phytophthora
nicotianae were tested. The results showed that nine fungicides displayed various inhibition effects on mycelium
growth of vanilla Phytophthora nicotianae, while dimethomorph 50% WP, metalaxyl propamocarb 25% WP,
dimethomorph mancozeb 69% WP proved to be the most effective fungicide with EC50 values of 0.3855, 0.4074 and
2.8184 mg/L respectively and followed by those of copper metalaxyl 50% WP and cymoxanil mancozeb 72% WP.
Key words: vanilla Phytophthora nicotianae; fungicides; sensitivity
香草兰是一种名贵的多年生热带藤本香料植物,素有
“天然食品香料之王”的美誉,主要用作高档食品、香
烟、酒、化妆品、医药等的配香原料。 香草兰疫病是香
草兰的一种重要病害,该病主要危害香草兰嫩梢和果荚,
受害部位产生水渍状黑褐色病斑,斑点迅速扩大湿腐,湿
度大时可见白色絮状菌丝,干燥时病果脱落。 我国云
南西双版纳于1985年发现香草兰疫病[1],曾会才等[2]将云
南西双版纳的香草兰疫病病原鉴定为烟草疫霉
(Phytophthora nicotianae)。 在海南,笔者于2006年
3月在所内多块香草兰园发生疫病,经形态特征鉴定和
rDNA ITS序列测序分析,明确了其疫霉菌种类为烟草疫
霉。 2007年1月至2008年6月前往海南万宁、琼海、定
安、屯昌等市县对香草兰疫病的发生情况进行调查,结
果发现:温度在24~27 ℃,雨量较多的4—6、9—11月份
发病率为10%~15%。 目前香草兰疫病已成为香草兰推
广种植的一个重要限制因素,因此在实验室内进行香草
兰疫霉菌对不同杀菌剂的敏感性测定,以期筛选出几种
高效安全的农药供大田生产使用十分必要。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试菌种
香草兰疫病病菌(Phytophthora nicotianae),由2007年
9月在万宁香饮所基地采集的香草兰病果中分离、鉴定所
得,分离采用V8选择性培养基,V8培养基加入五氯硝基
苯(PCNB)100 mg/L,利福平20 mg/L,氨卞青霉素200 mg/L,
制霉菌素100 mg/L。 取新鲜病果,病部用70%的酒精消
毒,无菌水冲洗,切取病健交界处组织(0.5 cm×0.5 cm)放
入上述选择性培养基中,25 ℃下培养,纯化后选用感病
品种植株,刺伤叶片接种V8培养基25 ℃培养15 d的菌丝
块,鉴定证明是疫霉后保存备用。
1.1.2 供试培养基
番茄汁琼脂培养基:0.2 L番茄汁中加入去离子水0.8 L,
碳酸钙3 g,琼脂20 g。
1.1.3 供试药剂
25%甲霜·霜霉WP(有效成分:甲霜灵、霜霉威,江
苏宝灵化工股份有限公司);50%烯酰吗啉WP(德国巴斯夫
股份有限公司);69%烯酰吗啉·锰锌WP(有效成分:烯
酰吗啉、代森锰锌,北京施多富生物科技有限公司);
70%代森锰锌WP(西安田歌农化有限公司);72%霜脲
氰WP(上海杜邦农化有限公司);50%琥铜·甲霜WP(有效
成分:甲霜灵、琥胶肥酸铜,成都华西农药有限公司);
70%锰锌·乙铝WP(四川福达农用化工有限公司);50%敌
磺钠SP(上海金桥化工有限公司);12%松脂酸铜EC(珠海焦
点科技有限公司)。
收稿日期:2008-08-08,修返日期:2008-09-20
基金项目:海南省自然科学基金项目(30709)
作者简介:刘爱勤(1966—),女,从事热带香料饮料作物及热带果树等病虫害防治研究与推广。 Tel :0898-62553680, E-mail :laq3680@163.com。
应用技术-
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1.2 试验方法
采用生长速率法,根据预备试验结果,每种供试药剂
有效成分在培养基中的含量设5个系列剂量,25%甲霜·
霜霉W P、50%烯酰吗啉WP、69%烯酰吗啉·锰锌WP、
70%代森锰锌WP、72%霜脲氰WP和50%琥铜·甲霜WP
的质量浓度梯度分别为0.1、0.5、1.0、2.0、3.0 mg/L,
70%锰锌·乙铝WP、50%敌磺钠SP、12%松脂酸铜EC的质
量浓度分别为5.00、10.0、50.0、100、300 mg/L。 用移液器
量取不同质量浓度梯度的供试药剂溶液,加入事先融化好
的番茄汁琼脂培养基。 充分混匀后倒在直径为9 cm的灭菌
培养皿中,每个浓度3皿。 凝固后在培养基中央接入直径
5 mm的经活化后的香草兰疫病菌菌饼,以上操作均在无菌
操作台进行。 接种后置于28 ℃恒温培养。 72 h后检查各处
理的菌落生长情况,十字交叉法测量菌落直径,计算抑制
生长率。 抑制生长率(%)=[(A-B)- C-B)]/(A-B)×100,其中A
为对照菌落直径,B为菌饼直径,C为处理菌落直径[3]。 将
抑制率转化为几率值,将剂量取对数,求出毒力回归方
程,进一步算出EC50值[4]。
2 结果与分析
2.1 不同杀菌剂对香草兰疫病菌的EC50值比较
各供试药剂毒力回归方程、相关系数r、斜率k和EC50值
结果见表1。
表1 生长速率法测定9种杀菌剂对
香草兰疫病菌的抑制作用
供试药剂 毒力回归方程 相关系数斜率值 EC50/
(y=) (r) (k) (mg·L-1)
2 5 %甲霜·霜霉W P 5.751 6+1.937 3x0.993 21.937 30.407 4
50%烯酰吗啉WP 6.010 7+2.439 8x0.999 22.439 80.385 5
6 9 %烯酰吗啉·锰锌W P4.559 9+0.988 7x0.979 70.988 72.818 4
70%代森锰锌WP 3.848 7+0.479 8x0.972 30.479 8 250.61
72%霜脲氰WP 4.062 2+0.984 8x0.988 40.984 88.912 5
5 0 %琥铜·甲霜W P 4.350 0+1.007 6x .974 31.007 64.415 7
7 0 %锰锌·乙铝W P 3.798 5+0.793 5x0.980 8 .793 5 2.359
50%敌磺钠SP 3.015 2+1.206 4x .991 2 .206 4 44.157
12%松脂酸铜EC 2.506 3+1.137 3x0.976 01.137 3 154.88
供试药剂按照EC50值基本上可以归为4类:50%烯
酰吗啉W P、2 5 %甲霜·霜霉W P、6 9 %烯酰吗啉·锰
锌W P、5 0 %琥铜·甲霜WP、72%霜脲氰WP,EC50值
介于0.385 5~8.9125之间,是供试药剂中EC50值非常小
的,说明这5种药剂抑菌效果好;7 0 %锰锌·乙铝W P、
50%敌磺钠SP,EC50值分别为32.359和44.157,是供试药
剂中EC50值较小的,说明这2种药剂抑菌效果较好;12%
松脂酸铜EC、70%代森锰锌WP,EC50值分别为154.88和
250.61,说明这2种药剂抑菌效果一般。
2.2 香草兰疫病病菌对不同杀菌剂的敏感性比较
回归方程的斜率与杀菌剂对病菌的敏感性成正比[5]。
按回归方程的斜率k,供试药剂可以分为3类:50%烯酰吗
啉WP、25%甲霜·霜霉WP,斜率k在1.937 ~2.439 8之
间,是供试药剂中斜率k最大的,说明香草兰疫病病菌对这
2种药剂的敏感性最高;50%敌磺钠SP、12%松脂酸铜EC、
50%琥铜·甲霜WP、69%烯酰吗啉·锰锌WP、72%霜
脲氰WP、70%锰锌·乙铝WP,斜率k在0.793 5~1.206 4之
间,是供试药剂中斜率k较大的,说明香草兰疫病病菌
对这6种药剂的敏感性较高;70%代森锰锌WP,斜率k为
0.4798,是供试药剂中斜率k最小的,说明香草兰疫病病
菌对这种药剂的敏感性最低。
3 讨论
不同杀菌剂室内毒力测定中EC50值越小、斜率越大说
明病原菌对药剂的反应灵敏度越高,即随着质量浓度的增
加,抑菌率明显增大。 在试验供试药剂中,EC50值低的药
剂其毒力回归方程斜率值往往也较小。 综合各供试药剂的
EC50值和斜率发现,50%烯酰吗啉WP、25%甲霜·霜霉WP
和69%烯酰吗啉·锰锌WP对香草兰疫病病菌的抑菌效果
好且敏感性高。 室内的药剂敏感性测定结果仅仅说明该
杀菌剂在离体条件下对香草兰疫病菌的抑制活性,田间的
防治效果受到的影响因素很多,有待于试验进一步证实。
上述抑菌效果好药剂,可进一步在田间进行药效比较,结
合室内、室外效果,选择优良的杀菌剂,在香草兰生产中
进行合理的利用。
参考文献:
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责任编辑:赵平
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