全 文 :2009年
第 6期
2009
№6
辽 宁 林 业 科 技
Journal of Liaoning Forestry Science& Technology
裂褶菌生物学特性的研究
王丽丽 1,高国平 1*,张 伟 1,张浩洋 2,魏振宏 1,信 雯 1,唐 玲 1
(1.沈阳农业大学林学院,辽宁 沈阳 110161;2.辽宁林业职业技术学院,辽宁 沈阳 110101)
摘 要:文章采用室内纯培养法,对火炬树上的腐朽病原菌裂褶菌(Schizophyllum commune)在不同
的培养基、碳源、pH值、温度、光照条件下进行培养试验,筛选生长的最佳条件,结果显示:培养裂褶
菌的最佳培养基是PDA培养基,最佳碳源是果糖,最佳pH6.0,最佳生长温度范围为20~25℃,最
佳光照条件是全黑暗。
关键词:裂褶菌;培养;碳源;pH值;温度
中图分类号:S763.15 文献标识码:A 文章编号:1001-1714(2009)06-0015-03
Study on biological characteristics of Schizophyllum commune
WANG Li-li1,GAO Guo-ping1*,ZHANG Wei1,ZHANG Hao-yang2,
WEI Zhen-hong1,XIN Wen1,TANG Ling1
(1. College of Forestry,ShenyangAgricultural University,Shenyang 110161,China;2.Liaoning ForestryVocation-technical
College,Shenyang 110101,China)
Abstract: Schizophyllum commune of rot disease pathogen in Rhus typhina. is cultured in our laboratory. In order to select the opti-
mum medium for Schizophyllum commune growing,they are cultured under different culture medium,carbon sources,pH value,tem-
perature and photoperiod. It shows that the optimum culture medium is PDA,the optimum carbon source is fructose,the optimum
pH value is 6.0,the optimum temperature extent is 20~25℃,the optimum photoperiod is constant dark.
Key Words:Schizophyllum commune;culture;carbon sources;pH value;temperature
裂褶菌(Schizophyllum commune)隶属于真菌门
(Eumycophyta),伞菌目(Agaricales),裂褶菌科
(Schizophyllaceae),裂褶菌属(Schizophyllum),是活
立木的寄生真菌,能引起边材白色腐朽。通过调查
发现近年来在沈阳绿化树木的火炬树中发生较为
普遍,发病率在 6%左右,严重影响树木生长发育。
本文对裂褶菌生物学特性进行了研究,为该病害的
发生发展规律和生产防治的研究提供理论基础和
参考。
1 材料与方法
1.1 菌株的来源
2008年 5~10月于沈阳市绿地上发病的火炬
树上,采集裂褶菌子实体后带回室内[1],进行菌种分
离和纯化得到菌株以备试验[2]。
1.2 研究方法
1.2.1 常规培养基的筛选
将分离保存的纯培养菌丝块(直径 0.5mm大
小)接种到常规培养基PDA(马铃薯葡萄糖琼脂培
养基)、OA(燕麦片琼脂培养基)和CA(玉米粉琼脂
培养基)平板上,同时以 PA(PDA+火炬树剪枝液)
作为培养对照。置光照培养箱中25℃恒温培养,每
个处理设 5个重复。每隔 3d测量不同培养基上菌
落直径,并观察记录菌落生长特征,筛选生长最佳
培养基。
1.2.2 不同碳源对菌落径向生长测定
以PDA为基础配方,选择蔗糖、果糖、乳糖、麦
芽糖作为碳源更换PDA中的葡萄糖配作培养基,同
时以PDA培养基作培养对照,将分离保存的纯培养
菌丝块(直径 0.5mm大小)分别接种到 PDA等 5种
不同碳源的培养基上,置光照培养箱中25℃恒温培
收稿日期:2009-07-06
*通讯作者
— 15 —
养,每个处理设5个重复。每隔3d测量不同培养基
上菌落直径,并观察记录菌落生长特征,筛选生长
最佳碳源。具体配方如下[3]:
马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯
200g,葡萄糖20g,琼脂20g,无菌水1 000m1;
马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA):马铃薯 200g,
蔗糖 20g,琼脂 20g,无菌水1 000m1;
马铃薯果糖琼脂培养基(PFA):马铃薯200g,果
糖20g,琼脂20g,无菌水1 000m1;
马铃薯乳糖琼脂培养基(PLA):马铃薯200g,乳
糖20g,琼脂20g,无菌水1 000m1;
马铃薯麦芽糖琼脂培养(PMA):马铃薯 200g,
麦芽糖20g,琼脂20g,无菌水1 000m1;
1.2.3 不同pH值对菌落径向生长测定
在 PDA 培养基中分别滴加 1 mol/L HCl 或
1 mol/L NaOH溶液,调配为 pH4.0~10.0共 13个处
理,每个处理设5个重复,在25℃下恒温培养,每隔
3d测量不同 pH值培养基上菌落直径,观察菌丝生
长的最适pH值。
1.2.4 不同温度对菌落径向生长测定
将分离保存的纯培养菌丝块定量接种到 PDA
平板上,分别置于 15、20、25、30、35℃下恒温培养,
每个处理5次重复,每隔3d测量不同温度下培养基
上菌落直径,观察记录菌落培养性状,并进行比较,
以求得菌落生长的温度范围和最适生长温度[5]。
1.2.5 不同光照对菌落径向生长测定
将分离保存的纯培养菌丝块定量接种到 PDA
平板上,分别在室内全光照、半光照、全黑暗条件下[1],
25℃恒温培养。每个处理5次重复,每隔3d测量不
同光照条件下培养基上菌落直径,观察光照对菌落
生长特征的影响。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对菌落径向生长的影响
培养过程中,裂褶菌在PDA培养基上的菌落生
长速度最快,其次为CA、PA、OA培养基上的菌落生
长,速度较慢,但均在15d长成了满皿(表1)。从菌
落性状上看:裂褶菌在 4种培养基上生长的状况几
乎一样,菌落呈近圆形或不规则形,有些边缘呈波
浪状,气生菌丝极细,极薄,白色绒毛状。菌落紧贴
在培养皿壁生长。
表1 不同培养基对裂褶菌菌落生长的影响
注:表 1中菌落直径数据均为 5次重复的平均值,以下
表同。
2.2 不同碳源对菌落径向生长的影响
通过不同碳源的培养试验,结果显示:裂褶菌
对果糖的利用最好、菌落直径最大,其次为葡萄糖、
蔗糖和麦芽糖,对乳糖的利用最差(表 2)。所以在
培养该菌时用果糖作为培养基的碳源最好。从菌
落性状上看:5种培养基上菌落生长相似,菌落近圆
形或不规则形,边缘呈波浪状,气生菌丝薄,呈白色
絮状。
2.3 不同pH值对菌落径向生长的影响
通过不同pH值条件9 d的培养,可见裂褶菌在
pH4.0~10.0均能生长,但 pH6.0~7.0时生长最好,
为最适生长范围,pH6.0菌丝生长速度最快,为最
适 pH值。pH>6.0或 pH<6.0时,菌落生长势下降,
生长相对缓慢(表 3)。从菌丝培养性状上看,pH
值过高过低时菌落菌丝稀疏、色淡,其它未见明显
区别。
表3 不同pH值对菌落生长的影响
表2 不同碳源对裂褶菌菌落生长的影响
辽 宁 林 业 科 技第 6期 2009年
— 16 —
2.4 不同温度对菌落径向生长的影响
通过不同温度梯度条件培养可见,裂褶菌在
15~35℃范围内均能生长,20~25℃生长较好,且
生长速度较快,为最适生长温度范围。在温度低于
20℃和高于 30℃,菌落生长缓慢(表 4)。从培养性
状上看,低温条件菌落层稍厚,高温度条件下菌丝
层薄,其它未见明显差异。
表4 不同温度对裂褶菌菌落生长的影响
2.5 不同光照对菌落径向生长的影响
3种不同光照处理,对裂褶菌的生长有一定影
响。裂褶菌在全黑暗条件下,菌落直径生长速度最
快,其菌落 6d就长满培养皿。其次为漫射光,最大
菌落直径在 12d为 8.794cm。全光照条件生长最慢
(表5)。各种光处理未见菌落特性有明显差异。
表5 光照对菌落生长的影响
3 结 论
3.1 裂褶菌在PDA(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)培
养基上菌丝生长速度最快,在OA(燕麦片琼脂培养
基)上菌丝生长速度最慢。
3.2 裂褶菌对多种单糖、双糖和多糖都能利用,但
对果糖的利用最好,其次为葡萄糖、蔗糖和麦芽糖,
对乳糖的利用最差。
3.3 裂褶菌在 pH4.0~10.0均能生长,在 pH6.0~
7.0时生长较好,为最适生长范围,pH6.0菌丝生长
速度最快,为最适 pH值。pH>6.0或 pH<6.0时,菌
落生长势下降。
3.4 裂褶菌在 15~35℃均能生长,20~25℃生长
较好,且生长速度较快,为最适生长温度范围。在
温度低于20℃和高于30℃时,菌落生长比较缓慢。
3.5 在全黑暗条件下,裂褶菌菌落直径生长速度最
快,其次为漫射光,全光照生长速度最慢。
参 考 文 献:
[1] 戴玉成.中国林木病原腐朽菌图志[M].北京:科学出版
社,2005.
[2] 戴玉成,秦国夫,徐梅卿.中国东北地区的立木腐朽菌
[J].林业科学研究,2000,13(1):15-22.
[3] 陈文强,周选围,邓百万.姬松茸母种培养基筛选研究初
报[J].食用菌学报,2002,9 (2):31-34.
[4] 程东升.森林微生物生态学[M].哈尔滨:东北林业大学
出版社,1993.103-121.
[5] 方中达.植病研究方法 [M].北京:中国农业出版社,
1998.131.
[6] 池玉杰.木材腐朽与木材腐朽菌[M].北京:科学出版社,
2003.18-52.
(责任编辑:苑 辉)
王丽丽等:裂褶菌生物学特性的研究第 6期 2009年
参 考 文 献:
[1] 张俭,秦官属.郁金香[M].北京:中国林业出版社,2005.
[2] M G M. Van Creij,DM F J Kerckhoffs,J M Van Tuyl.
The effect of ovule age on ovary-slice culture and ovule
culture in intraspecific and interspecific crosses with
Tulipa gesneriana [J].Euphytica,1999,108:21-28.
[3] Gude H,Dijkema M HGE. Somatic embryogenesis in
tulipa[J].Acta Horticulturae,1997,430:275-280.
[4] 包满珠.园林植物育种学[M].北京:中国农业出版社,
2004.
[5] 罗建让,张延龙.克服百合自交及杂交障碍方法的初步
研究[J].西北农业学报,2007,16(4):260-263.
(责任编辑:张素清)
(上接第14页)
— 17 —