全 文 ：作者简介:蒋桂华 ,女 ,四川成都 ,从事中药品种 、质量的研究及新药
源的开发。
四川产九牛造中总鞣质和没食子酸的含量测定
蒋桂华 ,贾敏如
成都中医药大学药学院 , 四川 成都 610075
　　摘要　目的:　测定九牛造三个品种中总鞣质和没食子酸的含量。方法:用皮粉法测定总鞣质 , 薄层扫描法测
定没食子酸。结果:总鞣质和没食子酸含量分别为支柱蓼7.386%、0.074%;细穗支柱蓼 6.265%、0.053%;抱茎蓼
8.543%、0.061%。没食子酸在 2.2～ 11.0 μg范围内线性关系良好 , 平均回收率 102.42%(n=6)。结论:方法简
便 、快速 、准确。
关键词　九牛造;鞣质;没食子酸;皮粉法;薄层扫描法
中图分类号:R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1006-0103(2000)04-0306-02
　　九牛造是一味常用的草药 ,经鉴定为蓼科植物
支柱蓼 Polygonum suf fultum Maxim.、细穗支柱蓼
P .S uf f ul tum Maxim.var .Pergracile (Hemsl.)
Sam.和抱茎蓼 P.amplexicaule D.Don的根茎 ,主
流品种是抱茎蓼[ 1] 。具散淤止血 、理气止痛的功
效[ 2] ;在四川民间还被用于壮阳 ,具收涩固精之效 。
其根和根茎中含有大黄素 、大黄酸 、大黄酚和鞣质
等[ 3] 。文献报道 ,支柱蓼鞣质含量达20.75%(高锰
酸钾法)[ 4] 。印度研究抱茎蓼较多 ,报道其根茎还
含有大黄素甲醚 、豆甾醇和三萜烯化合物 β-榄香
精[ 5] 。现通过 TLC实验 ,发现三种九牛造均含有没
食子酸 。为研究该药材的有效成分 ,现分别用皮粉
法和薄层扫描法测定了三种九牛造中总鞣质和没食
子酸的含量。
1　实验部分
1.1　样品 、仪器与试剂
支柱蓼 、细穗支柱蓼 、抱茎蓼均系 1998 年 7 月
自采于四川峨眉山 ,品种均经作者鉴定。日本岛津
CS-930薄层扫描仪;微量注射器 。皮粉(上海益民
制革厂);薄层层析硅胶 G(青岛海洋化工厂);没食
子酸对照品(中国药品生物制品检定所);所用试剂
均为分析纯。
1.2　总鞣质的含量测定
测定按文献[ 7] 方法(皮粉法)进行。各取三种
九牛造药材粉末(过 3号筛)约 10 g ,精密称定 ,置锥
形瓶中 ,加蒸馏水 150 ml ,置水浴上加热30分钟 ,常
水中冷却至室温后移入 250 ml量瓶中 ,水稀释至刻
度 ,滤过 ,滤液作为供试液 。
1.2.1　总水溶性部分的测定　精量供试液 25 ml ,
蒸干 ,残渣于 105℃干燥 3小时 ,称重 。
1.2.2　不与皮粉结合的水溶性部分的测定　精密
量取供试液 100 ml ,加皮粉(干燥品)6 g ,振摇 15分
钟 ,滤过 ,精密量取滤液 25 ml ,蒸干 ,残渣于 105℃
干燥 3小时 ,称重 。
1.2.3　皮粉水溶性部分的测定　精密量取蒸馏水
100 ml ,以下操作与“1.2.2”同。
鞣质的含量计算按药典公式进行 ,结果支柱蓼 、
细穗支柱蓼 、抱茎蓼中的总鞣质含量分别为
7.386%、6.265%、8.543%, 三者 RSD 分别为
2.18%、2.74%、1.21%(n =4)。
1.3　没食子酸的含量测定
1.3.1　供试液和对照液的制备　精密称取三种九
牛造粗粉各 2 g ,分别加入蒸馏水 40 ml回流提取 2
小时 ,乙酸乙酯萃取(20 ml×4),合并萃取液 ,回收
乙酸乙酯至干 ,再用乙酸乙酯定容于 5 m l量瓶中作
为供试品液 。精称没食子酸对照品 2.2 mg ,加乙酸
乙酯定容于 2 ml量瓶中 ,制成对照品液 。
1.3.2　实验条件　0.3%CMC-Na 的硅胶 G 板 ,室
温干后于 105℃活化 30 分钟 ,置干燥器中备用 。展
开剂为甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1),上行展开 ,
展距 10 cm 。以 1%三氯化铁乙醇液显色后 ,立即盖
上同样大小的玻板 ,胶布固定。单波长反射法锯齿
扫描 ,λ=585 nm ,线性参数 SX=3(图 1)。
1.3.3　线性关系考察　用微量进样器精密吸取没
食子酸对照品溶液 2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 μl ,点于
同一块薄层板上 ,依法展开 ,显色 ,扫描测定斑点峰
面积积分值。以斑点峰面积积分值为纵坐标 ,点样
量为横坐标 ,求得回归方程为:
Y =11139.3770X -13421.3477 , r =0.9952 。
结果表明没食子酸在 2.2 ～ 11.0 μg 范围内线
性关系良好 。
1.3.4　稳定性试验　精密吸取对照品溶液和供试
品溶液点于薄层板上 ,按上述条件展开 ,显色后 20
小时内峰面积基本稳定 ,对照品 RSD 为 3.193%,
供试品 RSD 为 2.079%(n =4)。
华西药学杂志
W C J · P S 　2000 , 15(4):306～ 307　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2000.04.025
　　Key words　Jiuniuzao;Tannin;Gallic acid;Hide pow der;TLC-scanning
CLC number:R282.5　　Document code:A　　Article ID:1006-0103(2000)04-0306-02
DETERMINATIONOF TOTAL TANNINSAND GALLICACID IN THE CHINESE
FOLK MEDICINE-JIUNIUZAO GROWING IN SICHUAN
JIANG Gui-hua , JIA M in-ru
Chengdu Universi ty of Trad it iona l Chinese Medica , Chengdu 610075 China
　　Abstract OBJECTIVE:To determine to tal tannins and gal-
lic acid in Jiuniuzao s three species.METHODS:Tannins and
gallic acid w ere determined by hide powder method and TLC-
scanning , respectively.RESULTS:The contents of tannins and
gallic acid in Polygonum suf f ultum Maxim were 7.386%, 0.
07367%;in P .suf f ultum Maxim.var.Pergracile(Hemsl.)
Sam were 6.265%, 0.053% and in P.amplexicaule D.Don
were 8.543%, 0.06116% respectiv ely.The linearity o f gallic
acid w as good within 2.2-11.0μg.The average recovery in the
sample was 102.42%(n =6).CONCLUSION:The methods
were simple , rapid and accurate.
图 1　支柱蓼 、细穗支柱蓼 、抱茎蓼和没食子酸的薄层色谱图
Fig 1　TLC of gallic acid in Polygonumsufful tum Maxim(1), P.suf-
fultum Maxim var pergracile (Hemsl)Sam(2)and P .amplexicaul D.
Don(3)
1.3.5　精密度试验　同板效应取对照品溶液和同
一供试品溶液 ,取相同的点样量于同一薄层板上 ,依
法显色 ,扫描测定 ,结果对照品的 RSD =2.019%(n=4),供试品的 RSD=1.198%(n=6)。异板效
应取对照品溶液和同一供试品溶液 ,各取相同的点
样量 ,点于 4块薄层板上 ,依法显色 ,扫描测定 ,对照
品的 RSD =1.664%(n =4), 供试品的 RSD =
1.890%(n=4)。
1.3.6　样品提取方法考察　取同一采集号的支柱
蓼 ,分别用蒸馏水回流提取 3 次共 6小时和超声提
取 3次共 2小时 ,依法展开 ,显色 ,扫描测定 ,结果两
种方法提取没食子酸的含量分别为 0.07367%、
0.02765%, RSD 分别为3.78%、1.48%(n =3)。
说明回流提取方法优于超声提取方法。
1.3.7　加样回收实验　精称已知含量的支柱蓼 6
份 ,分别加入适量对照品 ,按上述方法制备 ,点样 ,显
色 ,测定 ,对照品的平均回收率为 102.42%, RSD =
3.39%(n =6)。
1.3.8　供试品测定　精密吸取供试品液 10 μl ,对
照品溶液 2 μl和 4 μl ,交叉点于同一薄层板上 ,按上
述条件展开 ,显色 ,扫描 ,用外标两点法计算。结果
支柱蓼 、细穗支柱蓼 、抱茎蓼中的没食子酸含量分别
为 0.074%、 0.053%、 0.061%, RSD 分 别为
3.78%、2.62%、3.37%(n =3)。
2　讨论
2.1　支柱蓼的测定结果与文献报道[ 4]的高锰酸钾
法测定结果 20.75%相差甚大 ,而与皮粉法测定结
果11.76%相差较小 ,这是否与测定方法 、药材产地 、
采收季节及加工方法有关。确切原因有待进一步探
讨 。
2.2　通过三种药材水提 、乙酸乙酯萃取液的薄层色
谱 ,首次发现了三种九牛造均含有没食子酸。
2.3　薄层扫描法测定中药九牛造中没食子酸的含
量 ,简便而迅速 ,所用色谱条件经反复试验 ,证明重
复性好 ,检出斑点清楚圆整 ,相互干扰小 ,可作为其
定量的参考 。
2.4　文献[ 8]报道 ,大黄没食子酸在硅胶 GF254薄层
板上易氧化 ,而以上试验展开后立即用 FeCl3 乙醇
液显色后 ,没食子酸斑点峰面积在 20小时内基本稳
定 ,克服了操作不及时造成的误差。
致谢:承学校测试分析中心张艺副研究员的大力帮助。
参 考 文 献
1　蒋桂华 ,贾敏如,罗启文 ,等.川产草药九牛造的生药学研究[ J] .
成都中医药大学学报 , 2000.(待发表)
2　中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典[ S] .一部.北京:
人民卫生出版社 , 1977.92
3　中国科学院药用植物资源开发研究所等.中药志[ M] .第三卷.北
京:人民卫生出版社, 1988.184
4　竺叶青 ,施大文 ,梁宏伟 ,等.拳参及其类似品的生药鉴别和鞣质
含量[ J] .上海医科大学学报 , 1994 , 21(2):129
5　Marks David L , Swain Tony.Chemical consti tuents of the rhizomes
of Polygonum amplexicaule[ J] .Indian Drugs , 1988 , 26(1):37
6　王鸿利 ,焦东海 ,刘训初 ,等.大黄有效单体止凝血机理的临床研
究[ J] .中西医结合杂志 , 1985 , 5(9):555
7　中华人民共和国卫生部药典委员会 ,中国药典[ S] .一部.北京:
化学工业出版社 , 1995.附录 61
8　陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[ M] .北京:人民卫生出版
社 , 1997.46
　收稿日期:2000-03
307第 4 期 蒋桂华 ,等。四川产九牛造中总鞣质和没食子酸的含量测定