全 文 ： 2004, Vol. 25, No. 9 食品科学 ※基础研究74
大大提高了纯化的效率和产率[7～9]。
4.2SDS-PAGE测定纯化后的猪肺ACE酶分子量约为
185kD。
4.3双倒数作图法得出所提纯的猪肺ACE的酶反应动
力学常数Km为3.168mmol/L、Vmax为6.165nmol/min。
4.4保藏试验证明本研究所得ACE酶活力稳定，可满
足研究工作的需要。
参考文献：
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菊花脑茎叶抗病原菌活性及其有效成分研究
纪莉莲，张强华
(淮阴工学院生物工程系，江苏 淮安 223001)
摘 要：首次以菊花脑提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等6种常见的病原细菌及黑曲霉、啤
酒酵母等4种病原真菌进行了拮抗试验，结果表明菊花脑提取物A、B和C具有较强的拮抗病原菌的活性，且抗
菌活性有明显的量效关系，其对各种供试病原细菌的最低抑菌浓度为0.3%～0.5% (g/ml)，对供试病原真菌的MIC
值从0.3%～1.0%不等。菊花脑提取物A(挥发油)显示了广谱的抗菌范围，其对供试细菌和供试真菌的抑菌效力相
当，但菊花脑提取物B和C(非挥发性成分)对供试细菌的拮抗作用(MIC值为0.3%～0.5%)远大于对供试真菌(MIC值
为0.7%～1.0%)的作用。菊花脑中起抗菌作用的主要成分是挥发油、总黄酮、苦味素、野菊花内酯等活性成分。
关键词：菊花脑；提取物；抗菌活性；病原菌；最低抗菌浓度
Studies on the Anti-pathogenic Activities and Effective Components of the Leaves and Stalks
from Chrysanthemum nankingense Hand. Mazz
JI Li-lian，ZHANG Qiang-hua
(Department of Bioengineering, Huaiyin Institute of Technology, Huaian 223001, China)
Abstract：The anti-pathogenic activities of Chrysanthemum nankingense Hand. Mazz were evaluated against 6 pathogenic
bacteria and 4 pathogenic fungi. Results indicated that the 3 extracts (A, B and C) of Chrysanth mum nankingenseHand. Mazz
showed strong inhibitory effects on these pathogens in a concentration-dependent manner. The extract A (volatile fraction) was
收稿日期：2003-09-30
作者简介：纪莉莲(1965-)，女，副教授，博士，主要从事微生物及生化药学的研究。
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evidently active both in inhibiting the bacteria and the fungi with 0.3%～0.5% (g/ml) of MIC values. The extract B and C (non-
volatile fraction) exhibited a strong inhibition to the test bacteria at MIC values of 0.3%～0.5%, and a poor inhibi ion to these
fungi with the MIC of 0.7%～1.0%. Some main active components of Chrysanthemum nankingense Hand. Mazz wer isolated
and elucidated as volatile oil, total flavoniod, ailanthin, and lactone.
Key words：Chrysanthemum nankingense Hand. Mazz；extraction；anti-pathogenic activity；pathogens；
the minimum inhibitory concentration (MIC)
中图分类号：Q946 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2004)09-0074-04
菊花脑(Chrysanthemum nankingense Hand. Mazz)属
多年生草本菊科菊属植物，为植物野菊的一个变种，分
布于江苏、安徽、山东等地。野菊的花、叶含黄酮
类化合物、挥发油、内酯、苦味素、维生素等活性
成分，因而具有降压，抗病毒、抗菌，消炎等作用
[1]。菊花脑的嫩稍茎叶可食用，且菊香浓郁，清凉明
目，调中开胃，解毒降压[2]。南京地区已将其作为具
有传统特色的野生蔬菜而推广。目前，除对菊花脑中
的黄酮类化合物有个别报道外[3]，有关菊花脑的活性及
活性成分研究尚未见到报道。为此，为搞清菊花脑抗
菌活性的种类、强度及其相关的抗菌成分，我们以菊
花脑的嫩茎叶作为研究材料，对其拮抗病原菌的模型进
行了较为深入的研究。
1 实验材料
1.1菊花脑
采自江苏南京，取其嫩茎叶备用。
1.2供试菌种
细菌类：金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、
大肠杆菌B(Escherichia coli B)、枯草芽孢杆菌(Bacillus
subtilis)、普通变形杆菌(Proteus vulgatia)、铜绿假单
胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、沙门氏菌(Salmonella
typhimurium)。
真菌类：黑曲霉(Aspergillus niger)、啤酒酵母
(Saccharomyces cerevisiae)、交链霉菌(Alternaria
circinans)、桔青霉(Penicillium citrinum)。
1.3培养基
细菌培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)：牛肉膏0.5%，
蛋白胨1.0%，NaCl 0.5%，琼脂 2.0%，水 100ml，pH
7.0～7.2。
霉菌培养基(马铃薯葡萄糖培养基)：马铃薯 20%，
葡萄糖 2%，琼脂 2%，水 100ml，pH 自然。
酵母培养基：葡萄糖 5%，蛋白胨 1%，KH2PO4
0.3%，MgSO4 0.5%，琼脂 2%，水 100ml，pH 6.0。
2 实验方法
2.1抗菌提取物的制备
提取物A：新鲜菊花脑幼嫩茎叶洗净、切碎，水
蒸气蒸馏至馏出物无味止，得菊花脑挥发油。精油得
率约为1.5%，为黄绿色透明液体，有较浓的菊花脑清
香味。
提取物B：新鲜菊花脑幼嫩茎叶洗净、切碎，置
于80℃真空干燥。干燥品于蒸馏水中煮沸3h，冷却后
过滤，滤液真空浓缩后得浓缩液。浓缩液加入等体积
的95%的乙醇进行萃取，过滤后取滤液真空干燥，得
提取物B。
提取物C：新鲜菊花脑幼嫩茎叶洗净、切碎，置
于80℃真空干燥。干燥品于蒸馏水中反复煎煮，过滤
后滤液浓缩干燥得提取物C。
2.2抗菌谱测定
采用滤纸片法和双层平板法测定菊花脑提取物对10
种供试病原菌的抑菌圈直径。即预先配制好含1.5%琼
脂的底层培养基和上层培养基。先将底层培养基在平皿
上浇一层(约10ml)，铺平凝固；另取上层培养基置于锥
形瓶中，接入供试菌种，摇匀，立即倒在底层平板上，
铺平待凝。取经高压灭菌干燥的滤纸圆片，分别置于
0.5%的菊花脑各提取物溶液及0.5%的苯甲酸钠溶液(做为
阳性对照)中浸泡10min后真空抽干，平贴于上层平板表
面，每种菌做3皿，每皿放6个滤纸片。各皿置于32℃
下培养48h后，观察有无抑菌圈，并测量抑菌圈直径。
2.3菊花脑提取物浓度与抗菌的量效关系测定
将菊花脑各提取物配制成0.2%、0.4%、0.6%、
0.8%、1.0%、1.2%、1.4%(g/ml)等7个浓度系列。取
经高压灭菌干燥的滤纸圆片，分别置于各系列浓度的菊
花脑溶液中浸泡10min，按上述抗菌谱测定方法测定菊
花脑提取物在各种浓度下的抑菌圈直径。
2.4最低抗菌浓度(MIC)的测定
取10ml灭菌试管，分别装入8ml的培养基，再分
别接入0.1ml的供试菌种，然后依次装入1ml的上述配制
好的0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、
1.4%的菊花脑 7个浓度系列，并做两组重复。各试管
置于32℃下恒温培养48h后观察各试管微生物生长情
况。无菌生长的含菊花脑提取物浓度最低的那一管的浓
度即为最低抗菌浓度(MIC)。
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2.5抗菌组分分析与鉴定
采用溶济萃取及色谱法分离各提取物的活性单体，
用显色法、薄层层析及波谱分析法鉴定活性单体结构。
3 结果与分析
3.1菊花脑各提取物的抗菌谱
表1 菊花脑各提取物的抗菌谱
供试菌 抗菌活性* (mm)
提取物A 提取物B 提取物C 苯甲酸钠
细 菌
S. aureus++++ ++++ ++++ ++++
E. coli B+++ +++ +++ ++++
B. subtilis+++ ++++ ++++ ++++
P. vulgatia+++ +++ +++ +++
P. aeruginosa++ +++ +++ +++
S. typhimurium+++ ++++ ++++ ++++
真 菌
A. niger++++ ++ ++ +++
S. cerevisiae++ + ---- +++
A. circinans+++ + + +++
P. citrinum+++ ---- + +++
注：* +：抑菌圈直径＜5；++：5～10；+++：11～15；++++：
＞15；----：无抑菌圈。
表1列出了菊花脑三种提取物对10种供试病原菌的
不同拮抗作用。提取物A、B、C在0.5%的浓度下对
6种供试细菌的抑制作用强度相当，抑菌圈直径均在
10mm以上，属强活性，且与 0.5%苯甲酸钠的活性相
一致。但就拮抗真菌来说，菊花脑提取物A的活性明
显高于提取物B和C。提取物B和C对供试真菌的抑制
圈直径均小于8mm，且提取物B对P. citrinum及提取物
C对S. cerevisiae无拮抗活性。提取物A对6种供试细
菌和4种供试真菌的拮抗效力相当，且类似于0.5%的苯
甲酸钠。
3.2菊花脑提取物与抗菌的量效关系测定
图1、2和3分别显示了菊花脑提取物A、B和C
的不同浓度对供试病原菌的拮抗效力。在低浓度(0.2%～
0.8%)时，量效关系显著，随着菊花脑各提取物浓度的
增加，抗菌活性有较大幅度提高；但在高浓度时，量
效关系趋势渐平缓，提高提取物浓度对抗菌活性的增加
已无实际意义。从各图曲线的密集程度来看，菊花脑
提取物A对供试细菌和供试真菌的抑菌效力类似，而提
取物B和C对供试细菌的拮抗活性强于对供试真菌的活
性，这与抗菌谱的测定结果相符合。
3.3菊花脑提取物的最低抗菌浓度
表2给出了菊花脑3种提取物对10种供试病原菌的
表2 菊花脑各提取物的最低抗菌浓度
供试菌 MIC*
提取物A 提取物B 提取物C
细 菌
S. aureus 0.4 0.3 0.3
E. coli B 0.4 0.4 0.4
B. subtilis 0.4 0.3 0.3
P. vulgatia0.4 0.5 0.4
P. aeruginosa0.5 0.5 0.5
S. typhimurium0.3 0.3 0.3
真 菌
A. niger 0.3 0.8 0.7
S. cerevisiae0.5 1.0 ----
A. circinans0.4 1.0 1.0
P. citrinum0.4 ---- 1.0
MIC值的大小。提取物A对细菌和真菌的MIC值基本
一致，变化范围不大(0.3%～0.5%)，说明提取物A的抗
菌范围广；提取物B与C对6种供试细菌的MIC值基本
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一致(0.3%～0.5%)，但对4种供试真菌的MIC值明显要
高，最大的达1.0%。因此，菊花脑提取物B和C抗细
菌的活性强，但对真菌作用不大。此结果与前两个实
验的结果是一致的。
3.4抗菌的有效组分
菊花脑提取物A用美国惠普公司HP6890/5973MSD/
DS分析，鉴定出主要的挥发油成分为：柠檬油、β-
金合欢烯、氧化倍半萜烯、芳樟醇、香茅醇等。
菊花脑提取物B经显色反应确定为粗黄酮，再以
TLC法定性分析此粗黄酮的组成[4]，鉴定出槲皮素、矢
车菊甙、山柰酚等黄酮类化合物。
菊花脑提取物C经硅胶层析柱反复分离，以不同配
比的甲醇和氯仿混合溶济进行洗脱，除鉴定出上述黄酮
类化合物外，另鉴定出苦味素、野菊花内酯2种活性单
体成分。
4 讨 论
4.1菊花脑具有较强的拮抗病原菌的活性，且抗菌活
性有明显的量效关系，其对大肠杆菌、金黄色葡萄球
菌等供试病原细菌的最低抑菌浓度为0.3%～0.5% (g/ml)，
对黑曲霉、啤酒酵母等供试病原真菌的MIC值从0.3%～
1.0%不等。菊花脑挥发油显示了广谱的抗菌范围，其
对供试细菌和供试真菌的抑菌效力相当，但菊花脑的非
挥发性成分对供试细菌的拮抗作用(MIC值为0.3%～
0.5%)远大于对供试真菌的作用(MIC值为0.7%～1.0%)。
4.2菊花脑含有多种活性成分，起抗菌作用的主要是
挥发油、总黄酮。其中的挥发油含有柠檬油、β-金
合欢烯、氧化倍半萜烯、芳樟醇、香茅醇等成分；总
黄酮中有槲皮素、矢车菊甙、山柰酚等成分；此外，
还含有苦味素、野菊花内酯等活性成分。
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世界小麦产量接近最高水平
华盛顿消息：8 月26日，美国农业部发布了关于小麦的季度国际贸易报告。报告称，全球小麦产量连续6年
下降后，今年预计将增加近6000万吨，增幅超过10％，原因是欧洲和独联体国家的产量实现恢复性增长，且北
非小麦再次获得高产。
这将是有史以来第二大产量，它将刺激更多的消费，使一些国家重建库存，并压低价格。
库存预计将因供应量增加而增加，反转已持续4 年的下降趋势。重建库存的国家将主要是出口国，库存量将
增加约900万吨，同比增长25％。
亚洲进口量将跳升，主要原因是中国的需求量将回升至800 万吨。巴基斯坦也重新成为重要的谷物进口国，预
计亚洲饲料小麦市场如韩国的进口将更加强劲。
虽然全球需求量将稳步增长，但出口国的供应量增加仍将导致激烈竞争。欧盟的出口量预计将增加500 多万
吨 。
独联体国家的饲料小麦和研磨小麦的出口量将增加，可能替代更多传统出口国的供应。预期加拿大和阿根廷的
产量将较大，也会给小麦市场带来更多竞争。
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信 息
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