全 文 ：２０１１年９月 Ｖｏｌ．２９　Ｎｏ．９
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　２０１１　 Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ９３７～９４１
谨以此文庆贺张玉奎院士七十华诞 ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１１．００９３７
＊通讯联系人：谭成玉，博士，副教授．Ｔｅｌ：（０４１１）８４７６３５２０，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔａｎｃｈｙｕ＠ｄｌｏｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
基金项目：国家自然科学基金项目（２１０７５０１２，３１０７１６１２）和辽宁省高等学校优秀人才支持计划项目（２００９Ｒ１３）．
收稿日期：２０１１－０７－３０
云南露水草中的一种新植物甾酮的分离与分析
谭成玉１＊，　孔　亮１，　李　铣２，　李　伟１，　李　宁２
（１．大连海洋大学，辽宁 大连１１６０２３；２．沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳１１００１６）
摘要：云南植物露水草富含植物甾酮类成分。为了研究其中的生物活性成分，采用多种色谱分离方法（氧化铝柱色
谱、硅胶柱色谱、常压反相Ｃ１８柱色谱、制备薄层色谱及反相高效液相色谱等）相结合，从露水草中分离得到一种新
植物甾酮。综合一维和二维核磁共振光谱以及电喷雾质谱数据分析，确定该化合物的结构为３β，４α，１４α，２０　Ｒ，
２２　Ｒ，２５－ｈｅｘａｈｙｄｒｏｘｙ－５α－ｃｈｏｌｅｓｔ－７－ｅｎ－６－ｏｎｅ，为一种较为少见的具有５α－Ｈ的植物甾酮。
关键词：色谱分离；核磁共振光谱；植物甾酮；露水草
中图分类号：Ｏ６５８　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１０００－８７１３（２０１１）０９－０９３７－０５
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａ　ｎｅｗ　ｐｈｙｔｏｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄ　ｆｒｏｍ
ＣｙａｎｏｔｉｓａｒａｃｈｎｏｉｄｅａＣ．Ｂ．Ｃｌａｒｋｅ
ＴＡＮ　Ｃｈｅｎｇｙｕ１＊，ＫＯＮＧ　Ｌｉａｎｇ１，ＬＩ　Ｘｉ　２，ＬＩ　Ｗｅｉ　１，ＬＩ　Ｎｉｎｇ２
（１．Ｄａｌｉａｎ　Ｏｃｅａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０２３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１００１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：：Ｃｙａｎｏｔｉｓ　ａｒａｃｈｎｏｉｄｅａｉｓ　ａ　ｐｌａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｐｌｅｎｔｙ　ｏｆ　ｐｈｙｔｏｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄ．Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ
ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｉｎ　ｉｔ，ａ　ｎｅｗ　ｐｈｙｔｏｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄ　ｗｉｔｈ　５α－ｃｈｏｌｅｓｔａ　ｓｋｅｌｅｔｏｎ，ｗａｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｗｈｏｌｅ
ｐｌａｎｔ　ｏｆ　Ｃｙａｎｏｔｉｓ　ａｒａｃｈｎｏｉｄｅａ　Ｃ．Ｂ．Ｃｌａｒｋｅ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｍｅｔｈｏｄｓ（ａｌｕｍｉｎａ
ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｓｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｏｃｔａｄｅｃｙｌ　ｓｉｌａｎｅ（ＯＤＳ）ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏ－
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｔｈｉｎ　ｌａｙｅｒ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＴＬＣ）ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
（ＨＰＬＣ））．Ｉｔｓ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｗａｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　１Ｄ　ａｎｄ　２Ｄ　ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅｓ
（ＮＭＲ），ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ　ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＥＳＩ－ＭＳ）ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｉｔ　ｉｓ　ａ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｗｉｔｈ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　３β，４α，１４α，２０　Ｒ，２２　Ｒ，２５－ｈｅｘａｈｙｄｒｏｘｙ－５α－ｃｈｏｌｅｓｔ－７－ｅｎ－６－ｏｎｅ，ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ａ　ｒａｒｅ　ｐｈｙｔｏ－
ｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄ　ｗｉｔｈ　５α－Ｈ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ；ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（ＮＭＲ）；ｐｈｙｔｏｅｃｄｙｓｔｅｒｏｉｄ；
Ｃｙａｎｏｔｉｓ　ａｒａｃｈｎｏｉｄｅａ　Ｃ．Ｂ．Ｃｌａｒｋｅ
　　露水草（Ｃｙａｎｏｔｉｓ　ａｒａｃｈｎｏｉｄｅａ　Ｃ．Ｂ．Ｃｌａｒｋｅ）
系鸭趾草（Ｃｏｍｍｅｌｉｎａｃｅａｅ）科、蓝耳草属（Ｃｙａｎｏｔｉｓ
Ｄ．Ｄｏｎ）多年生草本植物［１］。迄今为止，露水草是
昆明植物所聂瑞麟先生发现的自然界中含植物甾酮
类成分最丰富的药用植物之一［２］，其中２０－羟基蜕皮
甾酮含量占干燥全草的１．２％，在地下部分中其含量
达干重的２．９％，具有促进核糖核酸（ＲＮＡ）和蛋白质
合成、影响糖代谢、促进脂类代谢、免疫调节、影响中
枢神经系统等功效。有证据表明蜕皮甾酮具有较高
的药用价值［３－６］。然而关于露水草中化学组成的研
究报道相对较少［７，８］，这在一定程度上限制了露水
草有效成分的研究与应用。目前，以天然产物作为
化合物库，从中提取活性化合物，并在此基础上进行
新药研发是药物筛选的主要途径之一［９－１１］。但是
由于天然药物存在成分复杂的特点，使天然产物的
活性化合物的分离与提纯成为天然药物研究的主要
障碍［１２］。因此有必要对露水草中的化学成分进行
分离分析。
　　对于多数植物甾酮来说，其结构上的特点为：Ａ／
Ｂ环大多为顺式稠合，Ｂ／Ｃ环为反式稠合，Ｃ／Ｄ环大
都是反式稠合，甾核上具有７位双键△７及６－羰基
（即七烯－六酮结构），甾核Ｃ１７上存在侧链［１３］。本文
报道了一种从云南植物露水草中分离得到的Ａ／Ｂ环
反式稠合的新植物甾酮，并对其结构进行了分析。
色 谱 第２９卷
１　实验部分
１．１　仪器与试剂
　　Ｙａｎａｃｏ　ＭＰ－Ｓ３型熔点测定仪（未校正）（日本
Ｙａｎａｃｏ公司），ＢＲＵＫＥＲ－ＡＰＸ－３００型核磁共振光谱
（ＮＭＲ）仪（美国Ｂｒｕｋｅｒ公司）（四甲基硅（ＴＭＳ）作
内标），ＬＣＱ液相色谱－质谱联用（ＬＣ－ＭＳ）仪（配电喷
雾电离源（ＥＳＩ），美国Ｆｉｎｎｉｇａｎ公司），ＣＴＯ－６Ａ高效
液相色谱仪（日本Ｓｈｉｍａｄｚｕ公司）。
　　薄层色谱用硅胶ＧＦ２５４、柱色谱用硅胶（２００～
３００目）均由青岛海洋化工厂生产，柱色谱用中性氧
化铝（１００～２００目）为上海五四化学试剂厂生产，常
压ＯＤＳ填料（Ｃｏｓｍｏｓｉｌ　７５　Ｃ１８－ＯＰＮ型）为日本株式
会社生产，柱色谱中所用试剂均为分析纯。岛津
Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ　ＰＲＥＰ－ＯＤＳ色谱柱。所用色谱纯甲醇、乙
腈均为山东禹王试剂有限公司产品，其他未作说明
的试剂均为分析纯。
　　露水草全草购于云南昆明，由沈阳药科大学中
药鉴定教研室许春泉高级工程师鉴定为露水草
（Ｃｙａｎｏｔｉｓ　ａｒａｃｈｎｏｉｄｅａ　Ｃ．Ｂ．Ｃｌａｒｋｅ）的全草。
１．２　实验步骤
　　取露水草干燥全草（２．５　ｋｇ），用７５％乙醇回流
提取３次，每次３　ｈ，用旋转蒸发仪进行浓缩后，再调
乙醇浓度为７０％，沉降叶绿素，滤除沉淀，回收溶剂，
得乙醇浸膏。将浸膏加适量水稀释，依次用石油醚、
乙酸乙酯、正丁醇分别萃取３次，得到３个极性不同
的萃取液。将乙酸乙酯、正丁醇萃取液合并得总甾
酮部分，采用氧化铝柱色谱对其纯化，以不同比例的
氯仿－甲醇混合溶剂洗脱（氯仿－甲醇（１００∶０，ｖ／ｖ）洗
脱得流分１和２，氯仿－甲醇（１００∶５，ｖ／ｖ）洗脱得流
分３～５，氯仿－甲醇（１００∶１５，ｖ／ｖ）洗脱得流分６～
１０，氯仿－甲醇（１００∶２５，ｖ／ｖ）洗脱得流分１１～２３；每
个流分为１　０００　ｍＬ），合并第１１～１５流分；再经硅胶
柱色谱分离（氯仿－甲醇（１００∶０，ｖ／ｖ）洗脱得流分１
～４０，氯仿－甲醇（１００∶１，ｖ／ｖ）洗脱得流分４１～６５，
氯仿－甲醇（１００∶２，ｖ／ｖ）洗脱得流分６６～８５，氯仿－甲
醇（１００∶３，ｖ／ｖ）洗脱得流分８６～１２０，氯仿－甲醇
（１００∶４，ｖ／ｖ）洗脱得流分１２１～１３５；每个流分为
５００　ｍＬ），合并第１２１～１３５流分；再经常压ＯＤＳ柱
色谱、制备薄层色谱（ＰＴＬＣ）（展开剂为氯仿－甲醇
（１００∶１５，ｖ／ｖ）及反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分
离（色谱柱为Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ　ＰＲＥＰ－ＯＤＳ柱，流动相为
Ｈ２Ｏ－ＣＨ３ＣＮ（８０∶２０，ｖ／ｖ））得化合物１（４．０　ｍｇ）。
２　结果与讨论
　　对化合物１的结构进行了鉴定。
　　白色结晶（ＭｅＯＨ），熔点为２１１～２１３℃。１０％
Ｈ２ＳＯ４ 乙醇溶液显色为棕黄色。Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ－Ｂｕｒ－
ｃｈａｒｄ反应为阳性，提示分子中可能存在甾体母核。
　　ＥＳＩ－ＭＳ谱图中给出准分子离子峰 ｍ／ｚ　４８１（［Ｍ
＋Ｈ］＋），其他碎片峰 ｍ／ｚ　４６３（［Ｍ＋Ｈ－Ｈ２Ｏ］＋）、
ｍ／ｚ　４４５（［Ｍ＋Ｈ－２Ｈ２Ｏ］＋），结合其他氢谱、碳谱数
据，推测该化合物的分子式为Ｃ２７Ｈ４４Ｏ７。
　　１　Ｈ－ＮＭＲ谱中，在δ＝６．１５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ）处为一
烯氢质子信号，１３Ｃ－ＮＭＲ谱中共给出２７个碳信号，
其中在δ＝２０２．６处为ａ、ｂ－不饱和羰基碳信号，δ＝
１６６．５及１２２．８为双键碳信号。结合其他碳谱、氢谱
信号，推测该化合物为２７个碳的植物甾酮类化合物。
　　１　Ｈ－ＮＭＲ谱中，高场区共给出５个甲基氢信号
（δ＝０．９２、１．１８、１．３８、１．３８、１．５９）；１３　Ｃ－ＮＭＲ谱中，
ｄ＝６０～９０的连氧碳区给出７个连氧碳信号（ｄ＝
６０．２、６９．５、７２．５、７４．４、７６．８、７７．６、８３．８），其中，由
δ＝６９．５的碳信号并结合１　Ｈ－ＮＭＲ谱中δ＝１．３８
（６Ｈ，ｓ）的质子信号推测分子中存在２５－羟基，由
δ＝８３．８的碳信号推测分子中可能存在１４α－羟基，由
δ＝７６．８、７７．６的碳信号推测分子中可能存在２０　Ｒ，
２２　Ｒ－二羟基。由ＥＳＩ－ＭＳ谱结合氢谱、碳谱，可知分
子中含有７个氧原子，除去羰基中的一个氧原子，其
余６个氧原子则分别为６个羟基中的氧原子，由此
推测δ＝６０．２可能不是连氧碳原子的碳信号。
　　在检测氢的异核多键相关谱（１　Ｈ－ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｈｅｔ－
ｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ｂｏｎｄ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ，ＨＭＢＣ）（见图
１）中，δ＝１．１８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１８）的氢信号分别与
δ＝８３．８（Ｃ－１４）、４８．０（Ｃ－１３）、５０．１（Ｃ－１７）、３１．７（Ｃ－
１２）的碳信号有远程相关；δ＝１．３８（６Ｈ，ｓ，Ｈ－２６，
２７）的氢信号分别与δ＝４２．７（Ｃ－２４）、６９．５（Ｃ－２５）、
３０．０（Ｃ－２６）、３０．２（Ｃ－２７）的碳信号有远程相关；δ＝
１．５９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２１）的氢信号分别与δ＝５０．１（Ｃ－
１７）、７６．８（Ｃ－２０）、７７．６（Ｃ－２２）的碳信号有远程相关；
δ＝０．９２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１９）的氢信号分别与δ＝３６．２、
４６．８、４０．６ 和 ６０．２ 的 碳 信 号 有 远 程 相 关，则
δ＝６０．２的碳信号可能为Ｃ－ｌ、Ｃ－５、Ｃ－９、Ｃ－１０中的某
一碳信号。
　　在异核多量子关系谱（ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ
ｑｕａｎｔｕｍ　ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ，ＨＭＱＣ）中δ＝６０．２的碳信号
与δ＝２．３０（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．７　Ｈｚ）的氢信号相关
（由ＨＭＱＣ谱可知，δ＝２．３０处重叠的另一个氢信号
为Ｃ－２４上的一个氢信号），由此推测δ＝６０．２不可
能为Ｃ－１（Ｃ－１上有两个氢原子且其碳上的化学位移
达不到δ＝６０．２这样的低场）或Ｃ－１０（Ｃ－１０为季碳）
的碳信号，则δ＝６０．２只能为Ｃ－５或Ｃ－９上的碳信
·８３９·
　第９期 谭成玉，等：云南露水草中的一种新植物甾酮的分离与分析
图１　化合物１的异核多键相关谱
Ｆｉｇ．１　１　Ｈ－ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ｂｏｎｄ
ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ（ＨＭＢＣ）ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　１
号。同时在同核的１　Ｈ－１　Ｈ化学位移相关谱（１　Ｈ－１　Ｈ
ｎｕｃｌｅｕｓ　 ｃｈｅｍｉｃａｌ－ｓｈｉｆｔ　 ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ，１　Ｈ－１　ＨＣＯＳＹ）（见图 ２）中，δ＝２．３０
（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．７　Ｈｚ）的氢信号与δ＝４．３４（１Ｈ，
ｍ）的氢信号相关，而δ＝４．３４（１Ｈ，ｍ）的氢信号又
与δ＝３．８０（１Ｈ，ｍ）的氢信号相关。在 ＨＭＱＣ谱
中，δ＝４．３４（１Ｈ，ｍ）的氢信号与δ＝７２．５的碳信号
相关，δ＝３．５０（１Ｈ，ｍ）的氢信号与δ＝７４．４的碳信
号相关。通过以上分析，可知δ＝６０．２、７２．５、７４．４
这３个碳信号的碳原子依次相接。如果δ＝６０．２为
Ｃ－９上的碳信号，则δ＝７２．５、７４．４应分别为Ｃ－１１和
Ｃ－１２上的碳信号，那么，δ＝１．１８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１８）的氢
信号应与δ＝７４．４的碳信号有远程相关，这与ＨＭ－
ＢＣ谱中所给的信息不相符，因此通过以上分析，可
知δ＝６０．２为Ｃ－５的化学位移值，δ＝７２．５为Ｃ－４的
化学位移值，δ＝７４．４为Ｃ－３的化学位移值。同时
在ＨＭＢＣ谱中可以观察到δ＝２．３０（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝
９．７　Ｈｚ，Ｈ－５）与δ＝７４．４（Ｃ－３）、２０２．６（Ｃ－６）、４６．８
（Ｃ－９）、４０．６（Ｃ－１０）及１４．６（Ｃ－１９）的信号有远程相
关，进一步证明了δ＝２．３０（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．７　Ｈｚ）
为Ｈ－５信号，δ＝６０．２为Ｃ－５的碳信号。
　　将该化合物的碳谱数据与已知化合物ｅｃｄｙｓｔｅ－
图２　化合物１的１　Ｈ－１　Ｈ化学位移相关谱
Ｆｉｇ．２　１　Ｈ－１　Ｈ　ｎｕｃｌｅｕｓ　ｃｈｅｍｉｃａｌ－ｓｈｉｆｔ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒｏ－
ｓｃｏｐｙ（１　Ｈ－１　ＨＣＯＳＹ）ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　１
ｒｏｎｅ的相应碳谱数据［１４］进行比较，可以发现两个化
合物的Ｃ１１～Ｃ２７（除Ｃ１９外）基本一致，提示我们该化
合物分子中Ｃ、Ｄ环及侧链的结构均未发生变化，即
分子中存在１４α，２０　Ｒ，２２　Ｒ，２５－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙ；而Ａ、
Ｂ环中由于羟基位置的位移（由ｅｃｄｙｓｔｅｒｏｎｅ的２、３
位移至３、４位），而使Ａ／Ｂ环上相应碳的化学位移
发生了变化。
图３　化合物１的核奥弗豪泽增强谱
Ｆｉｇ．３　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｏｖｅｒｈａｕｓｅｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ
（ＮＯＥＳＹ）ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　１
　　另外，Ａ／Ｂ环上羟基及Ｃ－５的构型可以通过二
维核奥弗豪泽增强谱（ｎｕｃｌｅａｒ　Ｏｖｅｒｈａｕｓｅｒ　ｅｆｆｅｃｔ
ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ，ＮＯＥＳＹ）（见图３）来确定。在ＮＯＥＳＹ
谱中可以清楚地观察到δ＝０．９２（３Ｈ，ｓ）的１９－ＣＨ３
·９３９·
色 谱 第２９卷
与δ＝４．３４（１Ｈ，ｍ）的Ｈ－４质子信号有ＮＯＥ效应；δ
＝２．３０（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ）的Ｈ－５质子信号与δ
＝３．８０（１Ｈ，ｍ）的 Ｈ－３质子信号及δ＝３．０９（１Ｈ，
ｍ）的 Ｈ－９质子信号有 ＮＯＥ（ｎｕｃｌｅａｒ　Ｏｖｅｒｈａｕｓｅｒ
ｅｆｆｅｃｔ）效应。由Ｄｒｅｉｄｉｎｇ立体分子模型可知，只有
当化合物１构型为模型ｌ时，即Ｈ－４为β构型，Ｈ－３
及Ｈ－５为α－构型时（Ａ／Ｂ环为反式稠合，Ｃ３－ＯＨ为β
构型，Ｃ４－ＯＨ为α－构型），才可观察到以上的ＮＯＥ效
应，由此确定了化合物４的结构为３β，４α，１４α，２０　Ｒ，
２２　Ｒ，２５－ｈｅｘａｈｙｄｒｏｘｙ－５α－ｃｈｏｌｅｓｔ－７－ｅｎ－６－ｏｎｅ。利 用
各种波谱数据对该化合物碳氢信号进行了全归属
（见表１）。由表１所列数据可推断该化合物为首次
从植物中分离得到的具有４－羟基取代的新植物甾
酮，命名为露水草甾酮Ｄ。
　　通过对分离得到的化合物１的一维和二维核磁
共振光谱以及电喷雾质谱数据进行分析，确定了其
结构为３β，４α，１４α，２０　Ｒ，２２　Ｒ，２５－ｈｅｘａｈｙｄｒｏｘｙ－５α－
ｃｈｏｌｅｓｔ－７－ｅｎ－６－ｏｎｅ。
表１　化合物１的核磁共振数据
Ｔａｂｌｅ　１　ＮＭＲ　ｄａｔａ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　１（ｉｎ　ｐｙｒｉｄｉｎｅ－ｄ５）
Ｃａｒｂｏｎ δＣ δＨ　　 １　Ｈ－１　ＨＣＯＳＹ　 ＨＭＢＣ　　
１　 ３６．２　 １．６５（２Ｈ，ｍ） Ｈ２－２
２　 ２８．９　 ２．００（２Ｈ，ｍ） Ｈ２－１，Ｈ－３
３　 ７４．４　 ３．８０（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－２，Ｈ－４
４　 ７２．５　 ４．３４（１Ｈ，ｍ） Ｈ－３，Ｈ－５
５　 ６０．２　 ２．３０（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．７　Ｈｚ） Ｈ－４　 Ｃ－３，Ｃ－６，Ｃ－９，Ｃ－１０，Ｃ－１９
６　 ２０２．６
７　 １２２．８　 ６．１５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ） Ｃ－９，Ｃ－１４
８　 １６６．５
９　 ４６．８　 ３．０３（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－１１
１０　 ４０．６
１１　 ２０．８　 ２．１１（１Ｈ，ｍ），２．４５（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－１２，Ｈ－９
１２　 ３１．７　 ２．５５（２Ｈ，ｍ） Ｈ２－１１
１３　 ４８．０
１４　 ８３．８
１５　 ３１．７　 ２．１５（２Ｈ，ｍ） Ｈ２－１６
１６　 ２１．４　 ２．４６（１Ｈ，ｍ），２．１１（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－１５，Ｈ－１７
１７　 ５０．１　 ２．９８（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－１６　 Ｃ－１３，Ｃ－１８
１８　 １７．９　 １．１８（３Ｈ，ｓ） Ｃ－１２，Ｃ－１３，Ｃ－１４，Ｃ－１７
１９　 １４．６　 ０．９２（３Ｈ，ｓ） Ｃ－１，Ｃ－５，Ｃ－９，Ｃ－１０
２０　 ７６．８
２１　 ２１．４　 １．５９（３Ｈ，ｓ） Ｃ－１７，Ｃ－２０，Ｃ－２２
２２　 ７７．６　 ３．９０（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．１　Ｈｚ） Ｈ２－２３
２３　 ２７．５　 ２．１５（１Ｈ，ｍ），１．７５（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－２４，Ｈ－２２
２４　 ４２．７　 ２．３０（１Ｈ，ｍ），１．８５（１Ｈ，ｍ） Ｈ２－２３　 Ｃ－２２
２５　 ６９．５
２６　 ３０．０　 １．３８（３Ｈ，ｓ）
２７　 ３０．０　 １．３８（３Ｈ，ｓ）
３　结语
　　露水草是一种富含植物甾酮的植物，由于植物
甾酮为多羟基的７－烯－６－酮结构，羟基的数目、位置
及空间构型，环的稠合方式的不同，使得其分离更为
复杂。本文通过多种色谱技术相结合的方法，从云
南植物露水草中分离得到了一种新植物甾酮，综合
一维和二维ＮＭＲ以及ＥＳＩ－ＭＳ数据分析，确定其结
构为３β，４α，１４α，２０　Ｒ，２２　Ｒ，２５－ｈｅｘａｈｙｄｒｏｘｙ－５α－ｃｈｏ－
ｌｅｓｔ－７－ｅｎ－６－ｏｎｅ，为一种较为少见的具有５α－Ｈ的新
植物甾酮。文献报道植物甾酮具有多种生物活性，
该化合物具有哪些生物活性，活性如何，还有待于进
一步的研究。
参考文献：
［１］　Ｈｏｎｇ　Ｄ　Ｙ．Ａｃｔａ　Ｐｈｙｔｏｔａｘｏｎｏｍｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ（洪德元．植物分类学
报），１９７４，１２（４）：４５９
［２］　Ｎｉｅ　Ｒ　Ｌ，Ｘｕ　Ｘ　Ｙ，Ｈｅ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ａｃｔａ　Ｃｈｉｍｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ（聂瑞麟，
许祥誉，何敏，等．化学学报），１９７８，３６（２）：１３７
［３］　Ｘｕ　Ｎ　Ｊ，Ｇｕｏ　Ｙ　Ｙ，Ｌｉ　Ｘ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕ－
ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（徐楠杰，郭月英，李铣．沈阳药科大学学报），１９９７，
１４（４）：３００
［４］　Ｌｉ　Ｋ　Ｊ．Ｙｕｎｎａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（李开
金．云南中医中药杂志），２００９，３０（１０）：３２
［５］　Ｔａｎ　Ｍ，Ｌｉ　Ｌ，Ｙａｎｇ　Ｊ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ
Ｄｒｕｇ（谭梅，李良，杨建鸣，等．中国兽药杂志），２００９，４３
（８）：２８
·０４９·
　第９期 谭成玉，等：云南露水草中的一种新植物甾酮的分离与分析
［６］　Ｍｕ　Ｌ，Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｃ，Ｇｕａｎ　Ｄ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌ－
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