全 文 ：第 30 卷第 3 期 扬州大学学报(农业与生命科学版) Vol.30 No.3
2009年 9 月 Journal of Yangzhou Universi ty (Agricultural and Life Science Edi tion) Sep.2009
山绿茶总黄酮对小鼠高脂血症模型调脂作用的研究
魏　菁1 , 孙　云2＊
(1.苏北人民医院 , 江苏扬州 225001;2.扬州大学医学院 , 江苏扬州 225001)
摘　要:取 IC R小鼠 , 饲喂高脂饲料 , 以建立高脂血症动物模型。用山绿茶总黄酮[ 300 、150 、75 mg ·(kg · d)-1]连续
灌胃小鼠28 d , 检测模型小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C);取
肝脏制作切片 ,观察组织结构。结果表明:高脂血症模型小鼠的 TC 、TG、LDL-C 含量明显高于正常组 , HDL-C 含量低于
正常组;肝细胞中充满大量脂肪颗粒 , 细胞核呈固缩状。与模型组相比 , 山绿茶总黄酮高 、中剂量均能一定程度降低血清
LDL-C 含量 、提高 HDL 含量 ,差异极显著;山绿茶总黄酮能减少肝细胞质中脂肪颗粒及炎性细胞;部分细胞核无固缩现
象 ,较模型组其形态结构有所改善。说明山绿茶总黄酮在一定程度上可降低高脂血症模型小鼠 LDL-C 含量 、提高 HDL
含量 ,对血脂水平有调节作用;可改善肝细胞脂肪变性的形态结构。
关键词:小鼠;山绿茶总黄酮;高脂血症模型;调节血脂;形态结构
中图分类号:R 282.71;R 589.1　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1671-4652(2009)03-0064-03
Effect of hainan holly leaf total flavonoids on
serum lipids based on hyperlipidemia mice
WEI Jing1 , SUN Yun2
(1.S ubei Peop le s Hosp , Yangzhou 225001 , China;2.Coll of Med , Yangzhou Univ , Yangzhou 225001 , China)
ABSTRACT:ICR mice w ere fed with high fat die t to establish hyperlipidemia model.Three do sage g roups of hainan holly
total flav onoids [ 300 , 150 , 75 mg· (kg· d)-1] were intraga st ric administrated fo r 28 d to detect trig ly ceride(TG), to-
tal cho lestero l(TC), low-density lipopro tein cho lestero l(LDL-C), high-density lipopro tein chole ster ol (HDL-C);Par t
of liver tissue w as taken to make slices for observ ing liver s morphological structure.The da ta show ed that levels of TC ,
TG , LDL-C of the no rmal g roup we re remarkably highe r than the no rmal g roup;and HDL-C level wa s lower than the
no rmal gr oup.Liver cells w ere full of fat pa rticles and cell nucleus condensed.Compared w ith the model gr oup , the high-
mid-do se o f hainan ho lly leaf to tal f lavonoids both could significantly increase H DL-C leve l(P<0.01);Effect hainan holly
leaf could decr ea se fat par ticles and Inf lammato ry cells in liver cy toplasm;par t of cell nucleus don t condense.compared
with the model g roup , it could improve cell nucleus s morpholog ical str ucture.It is suggested that hainan holly leaf total
flavono ias can decrease TG , LDL-C levels based on hyperlipidemia mice, to some extent and can improve lipopro tein level
and Steatosis liver s morpho log ical structur e.
KEY WORDS:mice;hainan ho lly leaf to tal flavono ids;hyper lipidemia model;model modula te lipidemic;morpho lo gical
structur e
高脂血症由于脂质代谢异常引起的疾病 。血脂异常(dyslipdemia)一般是指血中总胆固醇(TC)、甘
油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)升高 ,超出正常范围 , 而高密度脂蛋白(HDL-C)低于正常水平。
血清脂质紊乱 ,容易造成“血稠” ,在血管壁上沉积 ,逐渐形成小斑块 。这些斑块增多 、增大 ,逐渐堵塞血
管 ,使血流变慢 ,严重时血流中断。随着动脉粥样硬化(AS)和心血管疾病防治研究的飞速发展 ,人们致
力于开发研究有效的调脂药物 。
中药调脂因其从抗炎 、抗氧化 、免疫调节等环节发挥多靶点作用 ,疗效优于现有的他汀类 、胆汁酸结
收稿日期:2009-04-16
基金项目:江苏省卫生厅开放基金资助项目(K T-2009-27)
作者简介:魏菁(1955—　), 女 , 江苏扬州人, 苏北人民医院副主任药剂师 ,主要从事药学研究。
＊联系作者 , E-mail:jgz7718@sin a.com
合树脂等 , 且副作用小 ,越来越受到国内外研究学者的关注。山绿茶为冬青科植物海南冬青(I lex
hainanensis Merr.)的干燥叶片经加工炮制而成 ,为广西少数民族民间中草药 。对山绿茶的现代研究表
明 , 山绿茶主要化学成分为总黄酮 、茶多酚 、叶绿素 、儿茶素 、咖啡碱 、三萜等多种活性成分[ 1] ;主要用
于降血压以及风热感冒 、肺热咳嗽等病症治疗[ 2] 。本文以高脂血症动物模型为试验对象 ,研究山绿茶总
黄酮调节血脂的作用 ,通过对高脂血症模型小鼠血清脂蛋白与肝脏形态结构的观察 , 评价山绿茶的调
血脂功效 。
1　材料与方法
1.1　试验动物及饲料
取清洁级 10 ～ 12 周龄 ICR小鼠 60只 ,体重为 28 ～ 30 g ,由扬州大学动物比较医学中心提供。试
验期间饲养温度(20±2)℃。普通饲料为扬州大学医学院试验动物中心提供的标准颗粒饲料;高脂肪饲
料由南京中医药大学动物饲料厂提供 ,其配方为 3 g ·kg -1胆固醇+100 g ·kg-1蛋黄粉+100 g ·kg-1
猪油+792 g ·kg-1基础饲料+5 g ·kg -1胆酸盐。
1.2　药品与试剂
山绿茶总黄酮为墨绿色粉末 ,由中国药科大学中药分析教研室提供。临用前研磨后 ,用蒸馏水配制
成 30 、15 、7.5 g ·L-1溶液;阳性对照药辛伐他汀为上海信谊万象药业股份有限公司产品 ,临用前用蒸
馏水配成 0.2 mL·L -1溶液 。
1.3　分组及给药方法
60只 ICR小鼠随机分为 6组 ,每组 10只 ,雌雄分笼饲养。分别为正常对照组 、高脂血症模型组 、阳
性对照组 、山绿茶高剂量组 、山绿茶中剂量组 、山绿茶低剂量组;连续灌胃 4周。
正常对照组:正常饲料喂养 ,每日 1 次常规灌服蒸馏水;高脂血症模型组:高脂肪饲料喂养 ,每日
1次常规灌服蒸馏水;阳性对照组:4 mg ·kg-1辛伐他汀;山绿茶总黄酮低剂量组(75 mg ·kg-1)、中剂
量组(150 mg ·kg-1)、高剂量组(300 mg ·kg-1):高脂肪饲料喂养 ,每日 1次灌胃相应的药物。
1.4　高脂血症模型建立
高脂血症小鼠模型:连续喂以高脂肪饲料 4周 。预试验表明该高脂肪饲料配方有效 ,可以成功建立
高脂血症模型。
1.5　标本的采集及测定
1)采集标本:末次给药后禁食 12 h ,而后摘眼球采血 ,血液静置 30 min ,放入 37 ℃水浴中 30 min ,
3 000 r ·min-1离心 20 min;取上清液 ,备用。处死小鼠 ,打开腹腔 ,分离肝脏 ,置 4%甲醛固定 ,石蜡包
埋 ,常规制作切片。将血清吸出 , 置于指形管中 ,冰浴 ,取血清于全自动生化分析仪测定 TC 、TG 、
HDL-C和 LDL-C 含量 。
2)制备组织切片:将肝脏用 4%甲醛溶液固定 , 脱水 ,石蜡包埋 ,切片 , HE 染色 ,光学显微镜下观
察组织形态结构并拍照。
1.6　统计学处理
用 SPSS15.0软件统计 ,均值比较采用成组比较的 t检验。
2　结果与分析
2.1　山绿茶总黄酮对高血脂模型小鼠血清生化指标的影响
由表 1可见 ,模型组血清 TC 、LDL-C 含量升高 ,明显高于正常对照组(P <0.01);LDL-C 含量亦
高于对照组(P<0.05);HDL-C含量明显低于对照组 ,与正常组比较差异极显著(P <0.01),说明造模
成功 。高 、中剂量山绿茶总黄酮均能显著提高 HDL-C 含量 ,与模型组比较 ,差异极显著(P <0.01)。
65第 3 期 魏　菁等:山绿茶总黄酮对小鼠高脂血症模型调脂作用的研究
高剂量山绿茶总黄酮能明显降低 TC 含量 ,与模型组比较 ,差异极显著(P<0.01);中剂量对 TC 有降低
趋势 ,但与模型组比较 ,差异不显著。高 、中剂量山绿茶总黄酮均可降低 LDL-C 含量 ,但差异不显著。
低剂量对模型小鼠血清生化指标无影响 。
表 1　山绿茶总黄酮对高脂血症模型小鼠血清生化指标的影响★
Tab.1　The effect of total flavonoids on various indicators of Serum lipids based
on hyperlipidemia mice mol· L -1
组别 只数 TC TG LDL-C HDL-C
正常组 10 3.17＊＊±1.30 0.96±0.25 0.32＊＊±0.08 3.02＊＊±0.58
模型组 10 4.97△△ ±0.57 1.11△ ±0.27 0.43△ ±0.08 1.66△△±0.59
阳性对照组 10 3.79＊＊△ ±0.43 0.98±0.13 0.35△ ±0.06 2.08△±0.44
高剂量组 10 4.02＊＊△△ ±0.65 0.92±0.26 0.36±0.07 2.95＊＊±0.53
中剂量组 10 4.80△△ ±0.56 0.94＊±0.13 0.37±0.09 2.69＊＊△±0.47
低剂量组 10 4.95±0.52 1.10±0.26 0.43±0.10 1.70±0.5
★ 与模型组比较 , ＊ P<0.05 , ＊＊ P<0.01;与正常组比较 , △P <0.05 , △△P<0.01。
2.2　山绿茶总黄酮对高脂血症模型小鼠肝脏的病理改变
显微镜下可见(图 1),观察 ,正常对照组小鼠肝小叶结构完整 ,肝细胞板呈放射状排列;胞质丰富 ,
胞内脂滴少且无网状结构;肝血窦间隙适度 ,无充血现象;门管区未出现炎症细胞浸润 。高脂血症模型
组肝小叶境界模糊 ,肝细胞板排列紊乱;细胞质中充满脂滴;门管区可见炎症细胞浸润 ,胶原纤维增生。
阳性对照组肝细胞板排列欠规则 ,部分细胞质中还存在脂滴 ,相对于模型组有所减少;肝小叶结构完好。
山绿茶总黄酮高剂量组中央静脉形态结构比较完好 ,其周围肝细胞中出现脂粒明显减少;炎症细胞浸润
减少 。低剂量组部分细胞核无固缩现象 ,肝细胞板排列欠规则;细胞质中脂滴较模型组有所减少。
图 1　光学显微镜下肝脏器官病理改变
Fig.1　The pathology changes of liver under light microscope
1.正常对照组;2.高脂血症模型组;3.阳性对照组;4.山绿茶高剂量组;5.山绿茶低剂量组
3　讨论
AS和冠心病是危害人类健康最严重的心血管疾病[ 3] 。近年研究发现 ,AS 不仅是血流动力学异常
疾病 ,而且也是代谢紊乱疾病 。高血压患者比血压正常者有更高的 CH 含量[ 4] ,血 CH 含量与 AS 及血
压之间存在正相关。
黄酮类化合物指具有色酮环和苯环为基本结构的一类化合物的总称 ,可分为黄酮类 、黄酮醇类 、异
黄酮类 、黄烷酮类等 。广义的范围还包括查耳酮 、嗅酮 、异黄烷酮及茶多酚[ 5] 。黄酮类化合物广泛存在
于动植物中 ,是一类生物活性很强的化合物 , 具有降血脂 、预防血管内皮损伤 、防止血管动脉粥样硬化 、
降低心肌耗氧量 、增强免疫力等作用[ 6-8] ;同时也是一种天然抗氧化剂 ,具有抗衰老 、增强机体免疫力 、抗
癌防癌等功效 ,在医药 、食品等领域具有广阔的应用前景。
总黄酮为山绿茶的活性成分之一。山绿茶具有活血化瘀 、平肝熄风的功效[ 9] ,常用于治疗高血压疾
病。在研究其降压的过程中发现 ,收缩压偏高意味着小动脉硬化 ,舒张压偏高意味着大动脉硬化。山绿
茶总黄酮是否也有调血脂的作用 , 是否是通过调节血脂含量来发挥抗 AS 、降低血压作用 。倘诺如此既
(下转第 70面)
66 扬州大学学报(农业与生命科学版) 第 30卷
[ 2] 　Wallace R J , Margaret L , Brammall.The role o f diffe rent species o f bacteria in the hydro ly sis of pro tein in the ru-
men [ J] .J Gen M ic robio l , 1985 , 131:821-932.
[ 3] 　卢德勋.系统动物营养学导论 [ M] .北京:中国农业出版社 , 2004:139-140.
[ 4] 　Yao Jun , Wu Run-pei , Liu Jian-xin.Effects o f formaldehyde-t reated r apeseed meal on ruminal dig estibility and ni-
tro gen utiliza tion pe rcent [ J] .Acta Zoonut rimenta Sinica , 1992 , 4(2):32-36.
[ 5] 　王雅晶 , 李胜利.蛋白质过瘤胃保护途径 [ J] .中国饲料 , 2001(2):18-19.
[ 6] 　孙镇平 , 周业飞 , 朱王飞 , 等.蛋白质过瘤胃保护增强植物外啡肽对山羊生长代谢的调节作用 [ J] .畜牧兽医学
报 , 2004 , 35(1):6-9.
[ 7] 　周浩良 , 雷治海 , 陈嘉绩.家畜解剖学 [ M] .北京:中国农业科技出版社 , 1998:75-78.
[ 8] 　 Zio idrou C , S treaty R A , Klee W A.Opioid peptide s deriv ed f rom food proteins [ J] .J Bio Chem , 1979 , 25(7):
2446-2449.
[ 9] 　王修启 , 张兆敏 , 阎祥洲 , 等.麦谷蛋白源外啡肽研究进展 [ J] .食品与发酵工业 , 2003 , 29(10):75-89.
[ 10] 　F ro techel M A.Bioactiv e peptides in digesta that regula te ga strointestinal func tion and intake [ J] .J Anim Sci ,
1996 , 74(10):2500-2508.
(责任编辑　刘明寿)
(上接第 66面)
可以减少西药治疗造成的不良反应 , 又能同时有效地控制 “三高”者的血脂 、血压水平 ,进而预防 AS 的
形成 。
越来越多的试验结果显示 ,冠心病和AS 不限于 LDL-C增高 、糖尿病 、代谢综合征等病因 ,而 HDL-
C 降低 、TG 和 LDL 颗粒比率高也是重要的诱因 ,此类病人日益增多;HDL-C 降低也成为一个独立危险
因素 。
本试验结果表明 ,山绿茶高 、中剂量均能提高 HDL-C含量 ,与模型组比较差异显著 。另外 ,山绿茶
高剂量能显著降低 LDL-C 及 TC 含量;低剂量能一定程度降低 LDL 含量;两者也有降低 TG 含量的趋
势 ,但差异不显著。山绿茶总黄酮能使肝小叶周围的肝细胞质中的脂肪颗粒减少 、细胞核固缩现象得到
改善 、细胞质中炎性细胞减少 。
参考文献:
[ 1] 　杨雨田 , 武俊青 , 郁时威 , 等.中族山绿茶降压片治疗高血压病临床研究 [ J] .中国中医药信息杂志 , 2000 , 7(7):
36-37.
[ 2] 　陈　勇 , 谢　臻 , 刘　婧 , 等.H PLC 法测定山绿茶不同炮制品中绿原酸和芦丁的含量 [ J] .广西科学院学报 ,
2006 , 22(S1):416-418 , 421.
[ 3] 　顾复生.血脂异常———心血管病防治工作中的重要课题 [ J] .中华心血管病杂志 , 1997 , 25(2):97-100.
[ 4] 　Julius S , Jame rson K , Mejia A , et al.The asso ciation of bo rderline hyper tension with ta rget o rgan changes and
highe r cor onary risk:Tecumseh blood pressur e study [ J] .JAMA , 1990 , 264:354-358.
[ 5] 　张　彬 , 李彩侠 , 吴亚卿.黄酮类化合物的研究进展 [ J] .食品与机械 , 2005 , 25(5):70-72.
[ 6] 　李久长 , 马挺军 , 刘　诚.复方山楂黄酮的提取及调脂研究 [ J] .食品科学 , 2006 , 27(3):216-219.
[ 7] 　陈　鹏 , 王　莉 , 顾跃君 , 等.佛手叶用性状的分析研究 [ J] .扬州大学学报:农业与生命科学版 , 2004 , 25(3):
74-78.
[ 8] 　张宝康 , 王德云 , 孔祥峰 , 等.蜂胶黄酮增强免疫作用的研究 [ J] .扬州大学学报:农业与生命科学版 , 2006 ,
27(3):20-22.
[ 9] 　全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 1973:194-195.
(责任编辑　刘明寿)
70 扬州大学学报(农业与生命科学版) 第 30卷