全 文 ： 中国药学杂志 2009 年 7 月第 44 卷第 13 期 Chin Pharm J，2009 July，Vol. 44 No. 13 ·979·
作者简介：谭成玉，女，博士，副教授，硕士研究生导师 研究方向：天然药物化学 Tel：（0411）84763520 E-mail：tanchyu@sina.com
生菌可分为温和型和不温和型，可以初步认为
ASF-15，ASF-18 属温和型，ASF-12，ASF-17 属不
温和型。
3.2 17 种真菌接种的植株根可分为三类：第一类
为根黑色；第二类为根浅绿至暗绿色；第三类为根
体绿色表面呈淡黄褐色，有的根表面具黄褐色斑
点。这是由于真菌侵染程度不同造成的。
3.3 本实验建立双重培养体系原则为：①尽量接近
兰科植物生长的自然环境条件；②适合兰科植物与
共生菌间共生，并保持二者的共生平衡关系。因此，
最优共生体系的建立（包括最优培养基、接种方法
等）还需大量的实验与共生机制的研究。

REFERENCES
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（收稿日期：2008-09-20）




露水草中的植物甾醇
谭成玉 1a,3，李铣 2，刘宇 1a,1b，肖皖 2，李宁 2，李伟 1b（1. 大连水产学院，a. 海洋环境工程学院；b. 食品工程学院，辽宁 大
连 116023；2. 沈阳药科大学中药学院，沈阳 110016；3. 辽宁省高校近岸海洋环境科学与技术重点实验室，辽宁 大连 116023）

摘要：目的 研究植物露水草中的化学成分。方法 利用多种柱色谱进行分离提纯，通过理化常数和光谱数据确定化合物的
结构。结果 从中得到 2 个植物甾醇类化合物；分别为 5α -胆甾-7-烯-3β，22ξ -二醇（Ⅰ），5α -胆甾-7-烯-22ξ -醇-3-棕榈酸
酯（Ⅱ）。结论 化合物Ⅰ为一新天然产物，Ⅱ为一新化合物。
关键词：露水草；植物甾醇
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1001-2494(2009)13-0979-03
Phytosterols from Cyanotis arachnoidea
TAN Cheng-yu1a,3，LI Xian2，LIU Yu1a,1b，XIAO Wan2，LI Ning2，LI Wei1b（1. Dalian Fisheries University，a. Marine
Environmental Engineering College；b. Food Engineering College Dalian 116023，China; 2. College of Traditional Chinese
Medicine，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China；3. Key Laboratory of Nearshore Marine Environmental
Research，Dalian 116023，China）
ABSTRACT：OBJECTIVE To study the chemical constituents of Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke. MOTHODS The
compounds were isolated by column chromatography. The structures were identified by their physico-chemical property and spectral
data respectively. RESULTS Two phytosterols were elucidated as 5α-cholesta-7-en-3β，22ξ-diol (Ⅰ)，5α-cholesta-7-en-22
ξ -ol-3-palmitate (Ⅱ). CONCLUSION Compound Ⅰ is a new natural product and compound Ⅱ is found for the first.
KEY WORDS：Cyanotis arachnoidea; phytosterols

露水草(Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke)系鸭
趾草(Commelinaceae)科，蓝耳草属(Cyanotis D.Don)
多年生草本植物，具有补虚除湿，舒筋活络之功
效[1]。为了研究其中的活性成分，笔者进行了系统
的化学成分分离提纯[2-6]。本实验介绍从该植物中分
离得到的 2 种植物甾醇类成分，分别为 5α-胆甾-7-
Chin Pharm J，2009 July，Vol. 44 No. 13 中国药学杂志 2009 年 7 月第 44 卷第 13 期 ·980·
烯-3β，22ξ-二醇（Ⅰ），5α-胆甾-7-烯-22ξ-醇-3-棕
榈酸酯（Ⅱ）。其中化合物Ⅰ为一新天然产物，Ⅱ
为一新化合物。

1 仪器与材料
MP-S3 型熔点测定仪（未校正）（日本 Yanaco）；
BRUKER-APX-300 型核磁共振光谱仪（TMS 作内
标），VG-5050E 型质谱仪。Shimadzu CTO-6A 高
效 液 相 色 谱 仪 （ 色 谱 柱 为 岛 津 Shim-pack
PREP-ODS 柱，25 mm×21.6 cm，5 μm）。所用试剂
均为色谱纯。柱色谱用硅胶（200~300 目）及薄层
硅胶（青岛海洋化工厂），柱色谱用中性氧化铝
（100~200 目，上海五四化学试剂厂），其他试剂均
为 AR 级。露水草全草购于云南昆明，由沈阳药科
大学中药鉴定教研室许春泉高级工程师鉴定为露
水草（Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke）的全草。

2 提取与分离
取露水草干燥全草（2.5 kg），用体积分数 70%
乙醇回流提取，浓缩后，依次用石油醚、乙酸乙酯、
正丁醇萃取得到 3 个极性不同的部分。乙酸乙酯部
分进行氧化铝柱色谱，以氯仿-甲醇梯度洗脱，氯
仿-甲醇(100∶5)洗脱部分合并后，再进行 silica gel
柱色谱，石油醚-乙酸乙酯(100∶2)洗脱，重结晶得
化合物Ⅱ(10 mg)，(100∶5)洗脱，重结晶得化合物
Ⅰ(8 mg)。

3 结构鉴定
化合物Ⅰ：白色针晶（CHCl3），mp 105~107 ℃。
10% H2SO4 乙 醇 溶 液 显 色 为 紫 色 。
Liebermann-Burchard 反应阳性，提示分子中存在甾
体母核。EI-MS 谱中给出分子离子峰 m/z 402[M]+，
其他碎片峰为 m/z 384[M-H2O]+，369 [M-H2O-
CH3]+，351[M-2H2O-CH3]+，提示分子中存在 2 个
羟基，m/z 272 的碎片峰为典型的胆甾醇的碎片
峰[7]。1H-NMR 谱中，在δ 5.17（1H，brs）处为一
烯氢质子信号，13C-NMR 谱中共给出 27 个碳信号，
其中在δ 139.3 及 117.7 为双键碳信号，结合其他碳
谱、氢谱信号，推测该化合物为 27 个碳的植物甾
醇类化合物，分子式为 C27H46O2。
1H-NMR 谱中，高场区共给出 5 个甲基氢信号
（δ 0.56，0.80，0.92，0.92，0.94）；δ 3.58（2H，
m）为 2 个连氧氢信号，根据文献[8]，由δ 0.56（3H，
s，H-18）及 0.80（3H，s，H-19）的氢信号（表 1），
可以看出，化合物Ⅰ与Ⅰa 的化学位移值基本一致，
由此可以推测该化合物具有与Ⅰa 相同的母核结
构，为 5α-cholest-7-en-3β-ol 结构，见图 1。
13C-NMR 谱中，δ 60~90 的连氧碳区给出 2 个
连氧碳信号(δ 71.0，74.1)。在 HMBC 谱中，δ
0.56(3H，s，H-18)分别与δ 39.6(C-12)，43.8(C-13)，
54.7(C-14)，53.2(C-17)有远程相关，δ 0.80(3H，s，
H-19)分别与δ 37.2(C-1)，40.3(C-5)，49.5(C-9)，
34.2(C-10)有远程相关，δ 0.92，0.92(each 3H，m，
H-26 ， 27) 分 别 与 δ 36.2(C-24) ， 28.2(C-25) ，
23.0(C-26)，23.0(C-27)有远程相关，δ 0.94(3H，brs，
H-21) 分别与δ 53.2（C-17），42.8，74.1 的碳信号
有远程相关(图 2)，由此我们推测δ 74.1 的碳信号为
C-20 或 C-22 的碳信号，提示 C-20 或 C-22 上连有
一羟基。
在 1H-NMR 谱中，δ 3.58（2H，m）处有 2 个
连氧氢信号，其中一个为 C-3 上的连氧氢信号，另
外的一个氢信号则提示我们δ 74.1 的碳信号只能是
C-22，而不可能是 C-20 位（若为 C-20 上存在羟基，
则 C-20 上无连氧氢信号）的碳信号。将该化合物
的碳谱数据与文献[9]中的已知化合物 5α-cholesta-7，
22-dien-3β-ol 的碳谱数据相比，两者的 C1~C19 的化
学位移值基本一致，同时将该化合物的氢谱数据与
文献[10]中报道的已知合成产物（5α-cholesta-7-en-
3β，22ξ-diol）的氢谱数据比较，两者基本一致。结
合 1H-NMR、13C-NMR 谱、HMQC 谱和 HMBC 谱
的数据，鉴定该化合物为 5α-cholesta-7-en-3β，
22ξ-diol，为从植物中首次分离得到的新天然产物。
其碳谱数据见表 2。为确证化合物系植物中原有的
化合物，我们进行了补充验证实验。取植物药材用
甲醇超声提取，减压干燥的超声提取物，我们以化
合物Ⅰ为对照品，采用 HPLC 对甲醇超声提取物进

表 1 化合物Ⅰ、Ⅰa 1H-NMR 数据
Tab.1 Parts of 1H-NMR data of compound Ⅰ，Ⅰa
1H-NMR data
Compound
18-H 19-H
I 0.56 0.80
Ia 0.54 0.80

HO
H

图 1 化合物Ⅰa 结构图
Fig. 1 Partial stuctrures of Ⅰa
中国药学杂志 2009 年 7 月第 44 卷第 13 期 Chin Pharm J，2009 July，Vol. 44 No. 13 ·981·
行分析，以乙腈-水为洗脱剂梯度洗脱，在 tR=14.2
min 处可见化合物Ⅰ色谱峰。
化合物Ⅱ：类白色固体，mp 42~44 ℃。10%
H2SO4 乙醇溶液显色为紫色。Liebermann -Burchard
反应阳性，提示分子中存在甾体母核。EI-MS 谱中

CH3
CH3
H3C CH3
OH
HO
H
图 2 化合物ⅠHMBC 远程相关图
Fig.2 Key correlations of compound Ⅰ in HMBC

表 2 化合物Ⅰ、Ⅱ的 13C-NMR 数据，CDCl3，75 MHz
Tab.2 13C-NMR data of compound Ⅰ and Ⅱ in CDCl3，75
MHz
Carbon No. Compound Ⅰ Compound Ⅱ
1 37.2 36.9
2 31.5 28.9
3 71.1 73.1
4 38.0 36.9
5 40.3 40.0
6 29.7 29.7
7 117.7 117.5
8 139.3 139.2
9 49.5 49.3
10 34.2 34.2
11 21.6 21.5
12 39.6 39.5
13 43.8 43.7
14 54.7 54.6
15 22.5 22.4
16 27.8 27.7
17 53.2 53.1
18 11.9 11.8
19 13.0 12.9
20 42.8 42.8
21 12.6 12.6
22 74.1 74.0
23 27.2 27.2
24 36.2 36.1
25 28.2 28.1
26 23.0 23.0
27 23.1 22.9
Ester group
1′ 173.3
2′ 35.0
3′ 25.6
4′ 29.4
5′ 29.6
6′ 29.6
7′ 29.8
8′~13′ 30.0
14′ 32.1
15′ 22.9
16′ 14.4
401 [M-C16H31O]+，384 [M-H2O-C16H31O]+。
1H-NMR 谱中，在δ 5.16（1H，brs）处为一烯
氢质子信号，高场区 5 个甲基氢信号δ 0.55（3H，s，
H-18），δ 0.81（3H，s，H-19），δ 0.85~0.94（9H，
m）为 H-21，26，27 信号重叠峰以及δ 1.25 处的长
链烷烃质子信号。13C-NMR 谱中，在δ 139.3 及 117.7
为双键碳信号，δ 60~90 的连氧碳区给出 2 个连氧
碳信号（δ 73.1，74.0），δ 170 以上的羰基碳区有一
个酯羰基碳信号（δ 173.4），δ 25.1，27.5，29.1~31.9，
33.8，34.7 之间有一系列长链烷烃碳信号，推测分
子中存在一个长链脂肪酸酯基团。将该化合物的碳
谱数据与化合物Ⅰ的相应数据相比，可以发现该化
合物中除去长链脂肪酸酯部分外其余碳信号与化
合物Ⅰ相应信号相同（表 2），只是 C-3 的化学位
移值向低场移动 2，C-2 和 C-4 的化学位移则分别
向高场移动 2.4，3.3，由位移规律，推测该化合物
为Ⅰ的 C-3 位酰化产物。
将该化合物进行碱水解后，用 HCl 中和后，加
水稀释，并依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，石油醚
部分浓缩后，经 EI-MS 检识为棕榈酸，乙酸乙酯部
分浓缩后经与化合物Ⅰ TLC 共薄层，斑点一致，
故该化合物为 5α-cholesta-7-en-22ξ-ol-3-palmitate。
该化合物为未见文献报道的新化合物。

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