全 文 ：收稿日期:2000-11-14
文章编号:1006-2858(2001)04-0263-03
露水草中的植物甾酮类成分
谭成玉 , 王金辉 , 李　霞 , 孟大利 , 李　铣
(沈阳药科大学中药学院 ,辽宁 沈阳　110016)
摘要:为研究露水草(Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke)中的化学成分 , 将露水草的乙醇提取液经
中性 Al2O 3柱色谱 , 制备性薄层色谱 ,高效液相色谱分离得到 3 种植物甾酮类成分 , 根据理化常数
和波谱数据分析进行结构鉴定 , 3 个化合物分别为罗汉松甾酮 C(podecdysone C)(1), 土克甾酮
(Turkesterone)(2),β-蜕皮甾酮(β-ecdy sone)(3)。其中化合物 1 、2 为从该植物中首次分离得到。
关键词:露水草;罗汉松甾酮 C;土克甾酮
中图分类号:R 932　　　文献标识码:A
　　露水草(Cyanot is arachnoidea C.B.Clarke),
又名珍珠露水草 ,鸡冠参等 ,系鸭趾草科兰耳草属
多年生草本植物 ,广泛分布于云南省 ,具有补虚 ,
除湿 ,舒筋活络之功效[ 1] 。本实验通过 Al2O3 柱
色谱 ,制备性薄层色谱 ,高效液相色谱 ,从露水草
的乙醇提取物中分离得到 3种植物甾酮类成分 ,
经 UV 、 ESI-MS 、 1HNMR 、 13CNMR 、 1H-1H
COSY 、HMBC 、HMQC 鉴定分别为罗汉松甾酮 C
(podecdysone C)(1),土克甾酮(turkesterone)(2),
β-蜕皮甾酮(3),其中(1)、(2)为从该植物中首次
分离得到(结构见图 1)。
1　仪器与材料
紫外光谱 Shimadzu UV-260 型紫外-可见分
光光度计;核磁共振光谱:BRUKER-ARX-300型
核磁共振光谱仪(TMS 为内标);ESI-MS 质谱用
LCQ-液质联用仪测定;熔点用 Yanaco MP-S3显
微熔点测定仪测定(未校正);薄层色谱用硅胶
(200-300目)为青岛海洋化工厂生产;柱色谱用
Al2O3(中性)为上海新诚精细化工有限公司生产;
HPLC采用 Shimadzu SPD-6A 高效液相色谱仪 ,
色谱柱为 ODS(20 mm i.d., ×25 cm)。
2　提取与分离
露水草(2.5 kg)用 75%乙醇加热回流提取 ,
回收乙醇 ,得浓缩液 。用乙酸乙酯 、正丁醇萃取;
取乙酸乙酯萃取物 ,行 Al2O3(中性)柱色谱 ,以氯
仿-甲醇梯度洗脱 ,氯仿-甲醇(4∶1)洗脱部分经乙
酸乙酯-甲醇重结晶 ,得化合物 3(200 mg);3∶1洗
脱部分经制备性薄层色谱(固定相:硅胶 GF254;
流动相:氯仿-甲醇=5∶1)得化合物 1(10 mg);以
甲醇洗脱部分经制备性高效液相色谱(ODS ,甲醇
/水 =31∶69 , 242 nm 检测)分离得化合物 2
(5 mg)。
Fig.1　The compounds isolated from cyanotis arachnoidea C.B.Clarke
第 18 卷 第 4 期
2 0 0 1 年 7 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.18 　No.4
Jul.2001 p.263
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2001.04.009
3　结构鉴定
化合物 1:白色粉 末 , mp:173 ～ 175℃
(MeOH)。 Liebermann-Burchard 反应阳性 , 表明
其具有甾体母核 ,UV 谱在242 nm处有最大吸收。
1HNMR中 , 高场区共给出 4 个甲基单峰信号
(δ1.58 , 1.47 , 1.21 , 1.06), 一个烯氢质子信号
δ6.25(1H , br.s)。13CNMR中共给出 27 个碳信
号 ,其中有 7 个连氧碳信号(δ84.2 , 77.7 , 76.9 ,
72.6 ,70.9 ,68.2 ,68.1),一个α、β 不饱和羰基碳
信号(δ203.5)及双键碳信号(δ166.2 , 121.7),结
合其他碳 、氢信号 ,推测该化合物为植物甾酮类成
分。将该化合物的碳谱 、氢谱数据与蜕皮甾酮的
数据[ 2]比较 ,发现在1HNMR中少了一个甲基单峰
信号 ,多出了 δ3.88(2H , s)的羟甲基质子信号 ,
且在1H-1H COSY中没有氢与之相关;在13CNMR
中 ,C1-C22的化学位移值与 β-蜕皮甾酮一致 ,只是
在(δ60-100碳区多了一个碳信号 ,推测可能是侧
链发生了羟基化。在 HMBC 谱(图 2)中 , δ3.88
(2H , s)处的质子信号与 δ72.6(C25), δ24.5
(C27), δ38.0(C24)处的碳信号有远程相关 , δ1.48
处的 H27甲基质子信号与 δ38.0(C24), δ72.7
(C25), δ70.9 的碳有远程相关 , HMQC 谱中 ,
δ3.88处的氢与 δ70.9的碳相关 ,由此可以推测
δ3.88的氢信号为 26位碳上的氢信号 , δ70.9为
26 位碳信号 , 综上 , 推断化合物的结构为
podecdysone C(2β , 3β , 14α,20R ,22R ,26-hepta-hy-
droxy-cholest-7-en-6-one)。将该化合物的碳谱数
据与文献中 podecdysone C 的碳谱数据[ 3]比较基
本一致。因此鉴定其为 podecdysone C 。
Fig.2　The HMBC correlation of compound 1
1HNMR(300 MHz , C5D5N)δ:4.18(1H , m ,
H-2), 4.22(1H ,m ,H-3), 3.01(1H ,dd ,H-5),6.25
(1H ,br.s ,H-7),3.59(1H ,m ,H-9), 3.00(1H ,m ,
H-17), 1.58(3H , s , H-21), 1.21(3H , s , H-18),
1.06(3H , s , H-19), 3.92(1H , dd , H-22), 3.87
(2H , s , H-26), 1.47(3H , s , H-27)。 13CNMR
(75 MHz ,C5D5N):数据见表 1。
化合物 2:白色结 晶 , mp:172 ～ 174℃
(MeOH)。Liebermann-Burchard 反应阳性 , 表明
其具有甾体母核。ESI-MS 质谱中给出准分子离
子峰 497[ M+H] + , 结合碳谱 、氢谱 ,推测该化合
物的分子式为C27H44O8 。氢谱中给出 5个甲基单
峰信号(δ1.26 , 1.32 , 1.35 , 1.35 , 1.57),一个烯
氢质子信号 δ6.29(1H , br.s)。碳谱中共给出 27
个碳信号 ,其中有 7个连氧碳信号(δ84.3 , 77.5 ,
76.8 ,69.5 ,68.9 ,68.4 ,68.2),一个α、β不饱和羰
基碳信号 δ203.9 ,以及 δ164.3和 δ122.3处的双
键碳信号。结合其他碳氢信号 ,推测该化合物为
植物甾酮类成分 。由 δ68.4 , δ68.2 的 2 个连氧
碳信号 ,推测该化合物存在 2β ,3β-二羟基;δ84.3
的连氧碳信号说明 2 的结构中存在 14α-羟基;
δ68.9的连氧碳信号推测 2的结构中存在 11α-羟
基。将该化合物的碳谱数据与的筋骨草甾酮 C
(2β ,3β ,11α, 14α, 20R , 22R-六羟基-胆甾-6-羰基-
7-烯 )的碳谱数据[ 4] 相比 ,发现该化合物的 C1-
C19的化学位移基本一致 ,说明化合物的甾体母核
与筋骨草甾酮 C 一致;同时将其碳谱数据与 β-蜕
皮甾酮的进行比较 ,发现两者的 C20-C27化学位移
值基本相同 ,说明该化合物的侧链结构与 β-蜕皮
甾酮一致。根据以上推测 ,确定化合物 2 的结构
为 2β , 3β , 11α, 14α, 20R , 22R-六羟基-胆甾-7-烯-
6-酮(2β ,3β ,11α, 14α,20R ,22R ,25-hepta-hydrox-
y-cholest-7-en-6-one),将该化合物的碳 、氢谱数据
与文献中土克甾酮(turkesterone)的数据[ 2] 比较
基本一致 ,故鉴定该化合物为土克甾酮(turkes-
terone)。1HNMR(300 MHz ,C5D5N):δ6.29(1H ,
br.s ,H-7), 1.26(3H , s , H-18), 1.32(3H , s , H-
19), 1.57(3H , s , H-21), 1.35(6H , s , H-26 , 27)。
13
CNMR(75 MHz ,C5D5N):数据见表 1。
　　化合物 3:白色针晶(EtOAc/MeOH ), mp:
240 ～ 242℃, Liebermann-Burchard 反应阳性 ,表
明其具有甾体母核 , 13CNMR(75 MHz ,C5D5N)中
共给出 27个碳信号 ,由 δ203.5的不饱和羰基碳
信号和 δ166.1和 δ121.7处的双键碳信号 ,并结
合其他碳氢信号 ,推测该化合物为植物甾酮类成
分。将该化合物的1HNMR 、13CNMR数据与文献
中蜕皮甾酮的13CNMR数据[ 2] 对照基本一致 ,所
以鉴 定 该 化合 物 为 β-蜕 皮 甾 酮。 1HNMR
(300 MHz , C5D5N):δ6.27(1H ,br.s , H-7), 1.20
264 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 18卷
(3H , s ,H-18),1.07(3H , s ,H-19),1.57(3H , s ,H-
21), 1.37(6H , s , H-26 , 27)。 13CNMR(75 MHz ,
C5D5N):数据见表 1。
Tab.1　The 13CNMR data of compounds 1、2、3(in C5D5N)
No 1 2 3 No 1 2 3
1 37.6 39.5 38.0 15 32.0 31.9 32.0
2 68.2 68.4 68.2 16 21.5 21.6 21.5
3 68.1 68.2 68.1 17 50.2 50.0 50.1
4 32.5 32.9 32.5 18 17.9 18.9 17.9
5 51.4 52.5 51.4 19 24.6 24.9 24.5
6 203.5 203.9 203.4 20 76.9 76.8 76.9
7 121.7 122.3 121.7 21 21.7 21.6 21.7
8 166.2 164.3 166.1 22 77.7 77.5 77.6
9 34.5 42.8 34.5 23 26.8 27.5 27.5
10 38.7 39.9 38.7 24 38.0 42.6 42.7
11 21.2 68.9 21.1 25 72.6 69.5 69.6
12 31.8 44.2 31.8 26 70.9 30.0 30.0
13 48.2 48.2 48.1 27 24.5 30.1 30.1
14 84.2 84.3 84.2
参考文献:
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ence and Technology Press , 1977.2736.
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[ 4] Jaroslav P , Milos B , Karel V , et al.Ecdysteroids from
the roots of Leuza car thamoides [ J] .Phy tochemistry ,
1994 , 37(3):707-714.
致谢　植物材料由本校 许春泉 高级工程师鉴定 , UV、
NMR 光谱由本校测试中心李文 、沙沂代测。
Constituents of phytosterone in Cyanotis arach-
noidea C.B.Clarke
TAN Cheng-yu , WANG Jin-hui , LI Xia , M ENG Da-li , LI Xian
(College of Tradit ional Chinese Medicines , Shenyang Pharmaceutical University , Shenyang 　110016 ,
China)
Abstract:To investigate the chemical consti tuents of Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke , column chro-
matog raphy (including Al2O3 、prepared silica gel)and HPLC were used in this experiment.Three phy tos-
terones w ere isolated and elucidated by UV 、NMR and chemical methods.These w ere podecdysone C(1),
turkesterone(2),β-ecdy sone(3).Among them , compounds 1 ,2 w ere isolated f rom Cyanot is arachnoidea
for the fi rst time.
Key words:Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke;podecdysone C;turkesterone
265第 3 期 谭成玉等:露水草中的植物甾酮类成分