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野生巨大口蘑生物学特性研究



全 文 :野生巨大口蘑生物学特性研究
黎金锋*,覃培升
(广西大学农学院应用微生物研究所,广西 南宁 530005)
摘要:野生巨大口蘑菌株的生物学特性试验结果表明菌丝生长最适碳源为淀粉;最适生长温度范围25℃~30℃,适宜
的pH为8.0,黑暗条件下菌丝生长较好;耐CO2;最佳无机盐为MgSO4和KH2PO4;添加VB1对菌丝生长有利。
关键词:巨大口蘑;菌丝体;生物学特性
中图分类号:S646.9 文献标识码:A 文章编号:1003-8310(2008)03-0043-03
巨大口蘑 (TricholomagiganteumMassee) (Tricholo-
malobayenseHeim)巨大口蘑属担子菌亚门、层菌纲、伞
菌目、白蘑科 (口蘑科)、白蘑属 (口蘑属),是热带地区
的一种大型食用菌,生态习性与菌根菌及多数已人工栽培
的木腐菌不同。目前中国台湾已将野生菌株驯化栽培成
功。本文对野生巨大口蘑菌丝的生物学特性作了较为系统
的研究,为其人工驯化栽培提供科学依据。
1 材料和方法
1.1供试菌株
菌株LQ分离自广西南宁市友爱北路大树脚大榕树根
际土壤野生巨大口蘑。
1.2供试培养基
麦汁培养基:麦粒200g, 2%石灰温水浸泡过夜,清
水冲洗调 pH值至 8,加水煮沸 30min,2层纱布过滤取
汁,调水至1000mL,加葡萄糖20g、琼脂20g。
1.3实验方法
1.3.1碳源试验
以麦汁培养基为基础,分别用淀粉、麦芽糖、蔗糖代
替其中的葡萄糖,每个处理设5个重复,采用直径9cm的
培养皿平板培养,接种定量麦粒种1粒。置于28℃培养箱
中培养,当有1处理培养皿长满时,结束培养。观察记录
菌丝生长情况,并进行差异显著性分析。
1.3.2无机盐试验
分别在麦汁培养基中添加0.2g·L-1的CaSO4、FeSO4和
0.5g·L-1的K2SO4、MgSO4、KH2PO4,以未添加的麦汁培养
基为对照。不同处理各设置5个重复。每个培养皿定量接
种麦粒种1粒。
置于28℃培养箱中培养,当有1处理培养皿长满时,
结束培养。观察记录菌丝生长情况,并进行差异显著性分
析。
1.3.3 维生素试验
分别在麦汁培养基中添加 0.1g·L-1的 VC、VB2、VB6
和VB1,以未添加为对照。不同处理各设置5个直径9cm
的培养皿。每个培养皿定量接种麦粒种1粒。置于28℃培
养箱中培养,当1处理培养皿长满时,结束培养。观察记
录菌丝生长情况,并进行差异显著性分析。
1.3.4温度试验
以麦汁培养基为基础,分别设置 10℃、15℃、20℃、
25℃、30℃、35℃、40℃,7个培养温度,每个处理设5个
重复。采用平板培养法,定量接种,当有1处理培养皿长
满时,结束培养,观察记录菌丝生长情况,并进行差异显
著性分析。
1.3.5光照试验
以麦汁培养基为基础,分别设置连续光照、12h/12h
光暗交替、连续黑暗3个不同光照处理,每个处理设置5
个重复。采用培养皿平板培养法,均为28℃下培养,当有
1处理培养皿长满时,结束培养,观察记录菌丝生长情
况,并进行差异显著性分析。
1.3.6透气试验
以麦汁培养基为基础,分别设置不包扎 (正常的CO2
浓度),单层报纸包扎 (相对较高的CO2浓度),单层塑料
薄膜包扎 (很高的CO2浓度)3个不同处理,每个处理5
个重复。采用培养皿平板培养法,定量接种后置于28℃培
养箱中培养,当有1处理培养皿长满时,结束培养,观察
记录菌丝生长情况,并进行差异显著性分析。
1.3.7pH试验
以麦汁培养基为标准,培养基灭菌后,调节pH分别
为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0,6个处理,每处理5个
重复,采用平板培养法,置28℃培养箱培养,当有1处理
培养皿长满时,结束培养,观察记录菌丝生长情况并进行
差异显著性分析。
1.4菌丝干重的测定
*作者简介:黎金锋 (1962-),男, 广西北流人,广西大学工程师。E-mail:lijinf@gux.edu.cn
收稿日期:2008-01-23
中国食用菌 2008,27(3):43~45
EDIBLEFUNGIOFCHINA
CN53-1054/Q ISSN1003-8310
DOI:10.13629/j.cnki.53-1054.2008.03.018
表3不同维生素对菌丝生长的影响
结束培养的培养皿用开水融溶,倒于烧杯中,加水至
150mL,置于微波炉中融化,冲洗,定量滤纸过滤去液,
于60℃干燥箱中烤恒重,电子天平称量记录。
2 结果与分析
2.1不同营养源对菌丝生长的影响
碳源对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表1。从菌丝
生长速度看:以可溶淀粉为碳源生长最快,日均生长
2.07mm;其次是麦芽糖,日均生长1.99mm,经方差分析,
2者无显著差异;再次是蔗糖和葡萄糖,日均生长1.74mm
和1.71mm,2者方差分析差异不显著,与淀粉和麦芽糖有
极显著差异。从菌丝平均干重上看:以葡萄糖为碳源菌丝
干重最重,平均干重为0.37g;其次是可溶性淀粉;再次
是蔗糖和麦芽糖。因此,综合菌丝生长速度和菌丝平均干
重,在所试的4种碳源中,野生巨大口蘑菌株菌丝生长的
最佳碳源是可溶性淀粉。
2.2不同无机盐对菌丝生长的影响
无机盐对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表2。试验
结果表明:以无机盐 MgSO4生长速度最快、其次为
KH2PO4,再依次为CaSO4、K2SO4、CK、FeSO4。经方差分
析,与对照比生长速度差异极显著,从菌丝平均干重看:
FeSO4生长速度比对照慢,且差异显著。从菌丝平均干重
看:CaSO4为最高,其次为KH2PO4、MgSO4、K2SO4,它们
都比对照平均干重高;无机盐FeSO4菌丝平均干重比对照
低。因此,综合菌丝生长速度和菌丝平均干重,FeSO4对
菌丝有明显的抑制作用,添加MgSO4、KH2PO4有利于菌丝
生长,添加CaSO4有利于菌丝的增重。
2.3不同维生素对菌丝生长的影响
维生素对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表3。试验
结果表明:供试的4种维生素中,VB1比其它及对照 CK
生长速度都快,且差异显著,菌丝平均干重也最高。综合
分析,添加VB1对菌丝生长速度及生长势均有促进作用。
2.4 不同温度对菌丝生长的影响
温度对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表4。试验结
果表明:菌丝在温度为15℃~35℃的范围内均能生长,适
宜的温度范围为25℃~30℃,但在35℃时菌丝生长速度急
剧下降,温度低于15℃或高于35℃时,菌丝生长缓慢且生
长势较弱,40℃下 24h菌丝逐渐死亡。在 10℃~15℃下菌
丝萌发需要很长时间或几乎不长,但若是28℃恢复培养,
15℃恢复较快,10℃恢复较慢,且生长势较差。
2.5不同光照条件对菌丝生长的影响
光照条件对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表5。试
验结果表明:在连续黑暗条件下,菌丝生长速度和菌丝平
均干重优势明显,光暗交替和连续光照条件下菌丝生长速
和干重显著降低。因此,光照抑制菌丝生长,黑暗促进菌
丝生长。
2.6不同透气条件对菌丝生长的影响
透气条件对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表6。试
验结果表明:在塑料膜包扎情况下,菌丝生长速度和菌丝
干重均优于报纸包扎和不包扎;不包扎情况下其生长速度
和生长势表现较差。综合生长速和生长势,菌丝生长可耐
受较高CO2浓度,提高CO2浓度有利于菌丝生长。
2.7不同pH值对菌丝生长的影响
表1不同碳源对菌丝生长的影响
表2不同无机盐对菌丝生长的影响
表4不同温度对菌丝生长的影响
中国食用菌 EDIBLEFUNGIOFCHINA Vol.27 No.344
黎金锋等:野生巨大口蘑生物学特性研究
表6不同透气条件对菌丝生长的影响
表7不同pH值对菌丝生长的影响
表5不同光照条件对菌丝生长的影响
pH值对野生巨大口蘑菌丝生长的影响见表7。试验结
果表明:菌丝在pH5~10之间均能生长,而在pH8.0时生
长速度最快,经方差分析,与其他pH范围差异显著。当
pH值低于8.0时,随着pH值降低,菌丝生长速度明显下
降,在pH5.0时,其生长速度和生长势表现最差,且生长
速度与其他差异极显著。当pH值高于8.0时,随着pH升
高,菌丝生长速度也明显下降。因此,菌丝生长的起点最
适pH值为8.0。
3 结论与讨论
3.1野生巨大口蘑分离菌株,在碳源利用上,以淀粉生长
速度最快,以葡萄糖的生长势最好;无机盐的利用上,添
加MgSO4、KH2PO4促进菌丝的生长,添加CaSO4利于生长
势;维生素方面,添加 VB1可促进菌丝生长速度和生长
势。依据营养源的试验结果,对生产上的菌种培养、培养
基的配制有很重要的指导意义。
3.2野生巨大口蘑分离菌株,最适温度范围25℃~30℃,为
高温型食用菌,菌丝在15℃时停止生长,而随着温度的下
降,菌丝生长变弱,因此在菌种保存时最好于15℃保藏,
而不能低于15℃。对于光照要求,完全黑暗条件下菌丝生
长良好。对于空气要求,菌丝极耐CO2。综合起来,菌株
适合于高温高湿的季节栽培,正好填补本地区6月~8月
高温多雨季节栽培空白。其黑暗条件和极耐CO2,也适于
山洞或防空洞周年安排栽培。
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Studies on Biological Characteristics of Tricholoma giganteum
LI Jin-feng, QIN Pei-sheng
(Institute ofApplied Microbiology, College ofAgricultural, Guangxi University, Nanning530005)
Abstract: The results of experiment on the biological characteristics of Tricholoma giganteum showed that the optimum carbon
source, temperature, pH and inorganic salts was starch soluble, 25℃~30℃, 8.0 and MgSO4and KH2PO4respe tively. Mycelial grewwell in
darkness and could tolerant the relativelyhigh carbon dioxide level. Vitamins B1had sign fi ntlystimulate effect on ycelial growth.
Key Words: Tricholoma giganteum; Mycelia; Biological characteristics
第27卷 第3期 45