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覆盆子对衰老模型小鼠脑功能的影响



全 文 :覆盆子对衰老模型小鼠脑功能的影响
河北省医学科学院生化研究室 朱树森 (050021)
解放军总医院老年医学研究所 张炳烈 李文彬 张涛* 白书阁*
摘要 采用小鼠 D-半乳糖衰老模型 , 观察了中药覆盆子对学习记忆能力和脑单胺氧化酶 B(MAO-B)的
影响。结果表明:覆盆子可明显缩短衰老模型小鼠的游泳潜伏期 , 降低脑 MAO-B 活性 。提示覆盆子具
有改善学习记忆能力 , 延缓衰老的作用。
关键词 覆盆子 抗衰老 学习记忆 小鼠
  覆盆子为蔷薇科植物掌叶覆盆子的果实。许
多抗衰古方中含有覆盆子。据现代药理研究 , 覆盆
子含有多种具有抗氧化 , 调节免疫功能或调整物质
代谢等作用的成份[ 1] 。近年来有人从 100 个抗衰
延寿古方中进行筛选 ,并通过寿命实验 , 结果表明
覆盆子为作用最为显著的七味中药之一[ 2] 。 但覆
盆子对脑功能有何影响 , 国内外尚未见报道。本实
验采用小鼠 D-半乳糖衰老模型 ,以探讨覆盆子对
学习记忆的影响。
1 材料和方法
1.1 材料
  NIH 小鼠 44 只 , 2月龄 ,体重 23~ 26g , 由解放
军总医院医学实验动物中心提供。按雌雄各半随
机分为 3 组:空白对照组 , 16 只;模型对照组 , 12
只;模型给药组 , 16 只。华东覆盆子由解放军总医
院中药房提供并鉴定。 D-半乳糖由上海试剂二
厂生产。
1.2 动物模型制备和给药方法
  将 D-半乳糖配制成 5mg/ ml的溶液 , 过滤消
毒。模型对照组和模型给药组按无菌操作每天皮
下注射 D-半乳糖 , 剂量为70mg/ kg 体重。模型给
药组在皮下注射 D-半乳糖的同时 , 饲喂加药饲
料。加药饲料为根据小鼠食量和体重 , 按 5g/ kg 体
重给药剂量计算 , 将覆盆子生药粉掺入饲料配制而
成。用药时间为 6 周。空白对照组不作任何处理。
1.3 学习记忆力测试
  采用 Mor ris 水迷宫法[ 3] 。迷宫为直径 65cm ,
高 24cm 的圆形水池 , 水深 12.5cm ,水温保持在 25
±1℃。 池中置一直径 6.5cm , 高 12cm 的圆形平
台 ,台面于水面下 0.5cm , 不能看见。每只小鼠共
训练游泳 7 个组合 , 每个组合包括从 4 个不同点入
水的连续 4 次 , 4个入水点的先后顺序按随机原则
每次改变。从入水到登上平台的时间为潜伏期 ,记
录潜伏期。上台后停留 30 秒。两次之间间隔 5 分
钟。求 4 次潜伏期之和。
1.4 脑组织 MAO-B 活性的测定
  测试学习记忆后将小鼠脱颈处死 , 取脑组织 ,
参照戴尧仁比色法[ 4] ,酶蛋白测定按 Low ry法。
2 结果
2.1 覆盆子对衰老模型小鼠学习记忆功能的影响
  模型对照组与空白对照组比较 , 游泳潜伏期明
显延长。模型给药组与模型对照组比较 , 潜伏期明
显缩短。
2.2 覆盆子对衰老模型小鼠脑组织 MAO-B 活
性的影响
  如附表所示 , 模型对照组与空白对照组比较 ,
脑组织 MAO-B活性明显升高。模型给药组与模
型对照组比较 , 脑组织 MAO-B 活性明显降低。
附表 覆盆子对衰老模型小鼠脑组织
MAO-B活性的影响(x±s)
组别 n MAO(u/mg·pr·h)
空白对照组 16 4.84±0.694
模型对照组 12 6.87±0.956*
模型给药组 16 4.77±1.030**
   注:*P<0.01 ,与空白对照组比较;**P<0.01 ,
与模型对照组比较。
*佳木斯医学院生化教研室
收稿日期:1998-03-03
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     中 医 药 学 报
ACTA CHINESE MEDIC INE AND PHARMACOLOGY
           
1998年 第 4期
银翘利咽丸质量标准的研究
鸡西市药品检验所 苏玉娟 (158129)
鸡西市发电厂医院 苏晓杰     
关键词 银翘利咽丸 质量标准
  银翘利咽丸由银花 、连翘 、桔梗 、黄芪 、射干等
多味中药制成的复方制剂 , 用于治疗慢性咽炎 、喉
炎 ,经临床观察疗效确切 , 无毒副作用。为了更好
地控制产品质量 , 本文用对照药材连翘 , 对照品绿
原酸作阳性对照;以不含金银花 、连翘的群药粉末
作空白对照 ,对主药金银花 、连翘进行了薄层层析
(TLC),鉴别试验;对该品种的主要成分绿原酸进
行了含量测定。
1 仪器与材料
  仪器:日本岛津 UV-265 分光光度计,涂布器(可
涂 0.3mm 厚薄层板), QC250型超声波清洗器。
  材料:硅胶 G(青岛海洋化工厂),聚酰胺薄膜
(黄岩化学实验厂), 所用试剂均为分析纯 , 绿原酸
对照品(批号 753-9205),连翘对照药材(批号 908
-9406)均由中国药品生物制品检定所提供 , 样品
银翘利咽丸由黑龙江省牡丹江农垦中心医院制剂
室提供。
2 实验部分
2.1 样品供试液的制备
  取样品 1 丸 , 精密称定 , 切碎 , 加适量硅藻土 ,
研碎 , 置 50ml棕色容量瓶中 , 加乙醇至刻度 , 超声
波处理 20 分钟 , 过滤 , 滤渣用乙醇洗 3 次(每次
10ml),合并滤液及洗液 , 蒸尽乙醇 , 残渣用乙醇定
量转移并定容至 2ml的容量瓶中 ,即得。
3 讨论
  D-半乳糖可诱导动物产生拟衰老改变已被
许多研究所证实。近年一些研究进一步表明 , 经 D
-半乳糖处理动物在脑组织结构和学习记忆功能
上都发生与自然脑老化相吻合的改变[ 5] 。本实验
结果显示 , D-半乳糖可引起小鼠学习记忆能力下
降 ,脑组织MAO-B 活性增高 ,这与文献报道一致。
  有人认为 , 学习记忆和免疫功能障碍是机体衰
老的两大突出特征。学习记忆功能障碍在结构上
主要表现为神经元数目减少 , 代之以胶质细胞增
生 ,神经元树突和树突棘减少等。研究表明 , 存在
于脑组织中的 MAO-B 活性随增龄而升高 , 而
MAO-A 则无明显增龄性变化[ 6] 。由于 MAO-B
主要存在于胶质细胞中 , MAO-A 则是神经元
MAO的主要形式 , 因此 , 脑组织 MAO-B 活性的
增高可能是脑老化时神经细胞改变的结果 , 与学习
记忆功能减退有着密切的联系。此外 , MAO 的作
用是催化单胺类氧化脱氨 , 脑 MAO-B 活性升高
可能与老年脑内儿茶酚类递质的减少有关 , 儿茶酚
类递质减少进一步加重学习记忆功能障碍。本实
验结果表明 , 覆盆子可防止 D-半乳糖引起的小鼠
学习记忆功能障碍和脑组织 MAO-B 活性的升
高 ,说明覆盆子具有改善学习记忆能力 , 延缓衰老
的作用。
4 参考文献
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报 , 1994 , 17(2):51
2 莫新民 ,等.抗衰延寿方对家蝇寿命的影响.中草药 ,
1993 , 24(7):358
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procedure for studying spatial learning in the rat.J Neu-
rosci.Meth.1984 , 11:47
4 戴尧仁 ,殷莹.中药 B型单胺氧化酶抑制作用的研究.
中华老年医学杂志 , 1987 , 6(1):27
5 李文彬 ,等.D-半乳糖在小鼠上诱导的拟脑老化效
应.中国药理学与毒理学杂志, 1995;9(2):93
6 Benedett i M.S.and Keane P.E.Different ial changes in
monoamineoxidase A and B activity in the aging rat
brain.J Neurochem.1980 , 35(5):1026
收稿日期:1998-03-06
43
       
1998年 第 4期   
     中 医 药 学 报
ACTA CH INESE MEDIC INE AND PHARMACOLOGY