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磨盘草不同部位中鞣质含量测定



全 文 :2010 年 3 月第 17 卷第 3期 中国中医药信息杂志 ·53·
磨盘草不同部位中鞣质含量测定
张 燕 1,张洪斌 1,胡海强 2,符冠烨 2
(1.琼州学院生命科学系,海南 五指山 572200;2.琼州学院化学系,海南 五指山 572200)
摘要:目的 建立磨盘草不同部位中鞣质含量测定方法。方法 以没食子酸为对照品,采用磷钼钨酸-干酪素比
色法测定鞣质含量。结果 没食子酸浓度在 2~10 mg/L 范围内与吸光度呈良好线性关系,平均加样回收率为
99.63%,RSD=1.08%,磨盘草叶、茎、根中鞣质含量分别为 0.34%、0.16%、0.27%。结论 本方法灵敏,准确性强,精
密度高,重复性好,适用于磨盘草中鞣质含量的测定。
关键词:磨盘草;鞣质;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2010)03-0053-02
Determination of Tannins in Different Vegetative Organs of Abutilon indicum (L.) Sweet ZHANG Yan1,
ZHANG Hong-bin1, HU Hai-qiang2, et al (1.Department of Life and Science, Qiongzhou College, Wuzhishan 572200,
China;2.Department of Chemistry, Qiongzhou College, Wuzhishan 572200, China)
Abstract:Objective To establish the analytical methods for determining the contents of tannins in
different vegetative organs of Abutilon indicum (L.) Sweet. Methods The content of tannins, expressed as
gallic acid equivalents, was measured by using the phospho molybdenum tungstic acid-casein colorimetry.
Results The good linearity between concentrations and absorbances of gallic acid was found in the range of
2~10 mg/L, the average recovery was 99.63% and RSD was 1.08%, the contents of tannins in leaves,
stems and roots of Abutilon indicum (L.) Sweet were 0.34%, 0.16% and 0.27% respectively. Conclusion The
proposed method is sensitive, precise, accurate and reproducible, and it is suitable for the determination
of tannins in Abutilon indicum (L.) Sweet.
Key words:Abutilon indicum (L.) Sweet;tannins;content determination
磨盘草[Abutilon indicum (L.) Sweet]为锦葵科苘麻属植
物[1],为 1年生或多年生亚灌木状草本。全草入药,甘淡平,疏风
清热、益气通窍、祛痰、利尿,用于感冒、久热不退、流行性腮
腺炎、耳鸣、耳聋、肺结核、小便不利。全草含有萜类、甾类、
酚类、黄酮苷、氨基酸、有机酸和糖等[2]。目前对磨盘草的研
究主要集中在生药学、部分化学成分等方面[3-4],尚未见对其次
生代谢产物鞣质的研究报道。鞣质又称单宁,是一类较复杂的
酚类化合物,广泛存在于植物界。鞣质有广泛的用途,能凝固蛋
白质且具收敛性,在抑菌、抗氧化、抗病毒、抗突变、抗衰老、
抗过敏等方面有一定的作用[5]。本试验采用磷钼钨酸-干酪素
比色法,对磨盘草不同部位中鞣质含量进行了测定分析,为磨
盘草药材的质量控制及其次生代谢产物的合理开发提供参考
依据。
1 仪器与试药
UV-2100 双光束紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器
公司);BS224S 电子天平(上海天平仪器厂);CO250 型超声波
清洗器(上海超声仪器厂)。
磨盘草采自海南五指山市文化村[由琼州学院生命科学系
林伟教授鉴定为磨盘草 Abutilon indicum (L.) Sweet 全草],
将其洗净,分成根、茎、叶三部分,在 60 ℃条件下烘干至恒重,
粉碎,过 40 目筛,放在干燥器中备用。没食子酸对照品购于中
国药品生物制品检定所(批号 110831-200302)。磷钼钨酸试液

基金项目:海南省自然科学基金(808170)
按 2005 年版《中华人民共和国药典》(一部)附录 XB 方法配
制[6];干酪素为分析纯;水为二次蒸馏水;其他试剂均为分析
纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品 50 mg,置 100 mL 棕色量瓶中,
加水溶解并稀释至刻度,精密量取 5 mL,置 50 mL 棕色量瓶中,
用水稀释至刻度,摇匀,即得 0.05 mg/mL 的对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备
精确称取磨盘草的根、茎、叶粉末各 2 g,分别置 250 mL
棕色量瓶中,加水 150 mL,放置过夜,超声(250 W,40 kHz)处理
10 min,放冷,用水稀释至刻度,静置,滤过,弃去初滤液 50 mL,
精密量取续滤液 20 mL,置 100 mL 棕色量瓶中,用水稀释至刻
度,摇匀,即得。
2.3 标准曲线的制备
精密量取没食子酸对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL
分别置 25 mL 棕色量瓶中,各加入磷钼钨酸试液 1 mL,再分别
加水 11、10、9、8、7 mL,用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀。
以随行试剂为空白。30 min 后,将对照品溶液在 400~900 nm
波长范围内进行光谱扫描,最大吸收波长为 760 nm。于 760 nm
波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准
曲线。计算得回归方程:Y=0.090 9X+0.051 9,r=0.999 9。
结果表明,没食子酸浓度在 2~10 mg/L 范围内,与吸光度呈良
好的线性关系。
·54· Chinese Journal of Information on TCM Mar.2010 Vol.17 No.3
2.4 含量测定方法
总酚:精密量取供试品溶液 2 mL,置 25 mL 棕色量瓶中,
照“2.3”项下方法,自“加入磷钼钨酸试液1 mL”起,加水 10 mL,
依法测定吸光度,从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的
量(mg),计算即得。
不被吸附的多酚:精密量取供试品溶液 25 mL,加至已盛
有干酪素 0.6 g 的 100 mL 具塞锥形瓶中,密塞,置 30 ℃水浴
中保温 1 h,时时振摇,取出,放冷,摇匀,过滤,弃去初滤液,精
密量取续滤液 2 mL,置 25 mL 棕色量瓶中,照“2.3”项下方法,
自“加入磷钼钨酸试液 1 mL”起,加水 10 mL,依法测定吸光度,
从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg),计算即得。
按下式计算鞣质的含量:鞣质含量=总酚量-不被吸附的
多酚量。
2.5 精密度试验
精确量取对照品溶液 2 mL 置 25 mL 棕色量瓶中,照“2.3”
项下方法,自“加入磷钼钨酸试液 1 mL”起,加水 10 mL,依法
测定吸光度,重复测定5次,吸光度的RSD=0.28%,表明精密度
良好。
2.6 重复性试验
精确称取同一供试品粉末 5 份,各 2 g,按照“2.2”项下
方法制成供试品溶液,再按照“2.4”项下方法测定吸光度,测
得总酚吸光度的 RSD=1.97%,不被吸附的多酚吸光度的 RSD=
1.78%,表明重复性良好。
2.7 稳定性试验
取显色后的同一供试品溶液,分别于 0、0.5、1、1.5、2、
2.5、3、3.5 h 测定吸光度,结果供试品溶液在显色后 0.5~3 h
内吸光度稳定,吸光度的 RSD=2.06%。表明供试品溶液应在显
色 0.5 h 后开始测定,并在 3 h 内测定完毕。
2.8 加样回收率试验
取已知鞣质含量的同一样品 5 份,分别准确加入近等量的
没食子酸对照品,按供试液的制备及“2.4”项下方法操作,依
法测定,并计算回收率。结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果
称样量
(g)
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1.000 1 2.63 2.70 5.31 99.26
1.000 1 2.72 2.70 5.38 98.52
1.000 1 2.74 2.70 5.45 100.37 99.63 1.08
1.000 1 2.75 2.70 5.48 101.11
1.000 1 2.66 2.70 5.33 98.89
2.9 样品含量测定
精确称取磨盘草的根、茎、叶粉末各 2 g,按照“2.2”项
下方法制成供试品溶液,再按照“2.4”项下方法测定吸光度,
根据回归方程求出鞣质的含量,再计算出样品中鞣质的含量。结
果见表2。
表 2 磨盘草不同部位中鞣质的含量测定结果(%)
样品号 叶 茎 根
1 0.332 0.157 0.272
2 0.346 0.164 0.275
3 0.342 0.159 0.263
平均值 0.340 0.160 0.270
RSD(%) 2.120 2.250 2.310
3 讨论
磷钼钨酸法的原理为:在碱性溶液中,酚类化合物可以将
钨钼酸还原(使 W6+变为 W5+),生成蓝色的化合物,颜色的深浅与
酚含量呈正相关,且在 760 nm 处有最大吸收。以干酪素作为鞣
质吸附剂,可以选择性地吸附有生理活性的鞣质,因此测出的
是有疗效的鞣质,而无疗效的鞣质如鞣酐等则不被测定。
以没食子酸为对照品,通过磷钼钨酸-干酪素比色法,采用
紫外可见分光光度计在 760 nm 波长处测定了磨盘草不同部位
中鞣质的含量,由表 2 可知,鞣质含量在磨盘草叶中最高,其次
是根,茎中最低。可见,在磨盘草不同部位中鞣质含量有明显差
异。本试验发现,该方法在测定鞣质时,为了保证测定结果的准
确,应现用现配且在避光的方式下进行。
本试验结果表明,该方法具有操作简便、效率高、精密度高、
稳定性和重复性好、测定结果可靠的优点,适用于磨盘草中鞣质
的定量分析,可为磨盘草药用质量评价提供可靠的检测标准。
参考文献:
[1] 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(第二册)[M].北京:科学
出版社,1985.811.
[2] 中华本草编委会.中华本草(第 14 卷)[M].上海:上海科学技术出版社,
1999.336.
[3] Deokule SS, Patale MW. Pharmacognostic study of Abutilon indicum
(L.) Sweet[J]. Journal of Phytological Research,2002,15(1):1-6.
[4] 刘 娜,贾凌云,孙启时.中药磨盘草的化学成分[J].沈阳药科大学学报,
2009,26(3):196-197.
[5] 徐 勤.鞣质的研究进展[J].华夏医学,2004,17(1):113-115.
[6] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 2005 年版(一部)[S].北京:化
学工业出版社,2005.附录 XB.
(收稿日期:2009-08-10,编辑:陈静)

国际标准化组织中医药技术委员会秘书处落户上海
2009年 9月,国际标准化组织(ISO)通过我国提案,成立了
传统中医药技术委员会,代号为 TC249,并由我国承担秘书处
工作。秘书处由国家标准化管理委员会和国家中医药管理局共
同负责指导和管理。卫生部副部长、国家中医药管理局局长王
国强在最近召开的中医药标准化国际研讨会上指出,TC249 的
成立说明 ISO 对传统医药标准化特别是中医药标准化的认同
和期待,是国际传统医药进一步发展的必然要求;中医是源于
中国传统医学的经验、理论和技术,在世界许多国家不同程度
推广、应用和发展。国家中医药管理局等相关政府部门将积极
支持中医药标准化工作。 (本刊通讯员)