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薜荔不同提取部位抗炎作用研究



全 文 :收稿日期:2010-08-29; 修订日期:2011-01-11
基金项目:海南省自然科学基金(No. 30840)
作者简介:毛彩霓(1977-) ,女(汉族) ,黑龙江海林人,现任海南医学院讲
师,硕士学位,主要从事中药新药研发工作.
* 通讯作者简介:刘明生(1960-) ,男(汉族) ,内蒙古武川人,现任海南医
学院教授,博士研究生导师,博士学位,主要从事热带药用植物的研究与
开发工作.
薜荔不同提取部位抗炎作用研究
毛彩霓,谭银丰,杨卫丽,刘明生*
(1.海南医学院药学院 海南省热带药用植物研究与开发重点实验室,海南 海口 571101)
摘要:目的 寻找薜荔药材抗炎作用的有效部位。方法 用系统溶剂法提取分离得到 3 个部分,分别为醋酸乙酯部位、正
丁醇部位和水液部位,通过小鼠耳肿胀实验、腹腔毛细血管实验和角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀实验对 3 个部位进行药效
学比较研究。结果 醋酸乙酯提取物组和水液组与空白组比较均有较好的抗炎作用。结论 薜荔药材醋酸乙酯提取部位
和水液部位可能为抗炎活性部位。
关键词:薜荔; 提取部位; 抗炎活性
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2011. 07. 021
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)07-1596-02
Anti - inflammatory Effects of Different Extracts of Ficus pumila
MAO Cai-ni,TAN Yin-feng,YANG Wei-li,LIU Ming-sheng*
(Key Laboratory of R&D on Tropical Medicinal Plants,College of Pharmacology,Hainan Medical College,
Haikou 571101,China)
Abstract:Objective To find the active parts of anti - inflammatory effect of Ficus pumila. Methods Three fractions were ob-
tained by systematic solvent extraction,ethyl acetate extract,butanol extract and water - soluble part. The models of auricular in-
flammation in rats induced by xylene were adopted,footpad inflammation induced by carragheenin and capillary permeability in
abdominal cavity of mice were adopted,anti - inflammatory effects of Ficus puaula extracs were observed. Results Ethyl acetate
extract and water - soluble part had significant anti - inflammatory activity. Conclusion Ethyl acetate part and water - soluble
part are the active parts of anti - inflammatory effect of Ficus pumila.
Key words:Ficus pumila; Extracts; Anti - inflammatory activity
薜荔 Ficus pumila L.是属桑科(Moraceae)榕属 Ficus L.攀援
植物,又名木莲、凉粉树、爬墙虎、王不留行等[1],薜荔的茎、叶可
供药用,性平,味淡酸微苦,可祛风除湿,通血活络,解毒消肿,主
治风湿痹痛、坐骨神经痛、泻痢、水肿、小便淋浊、闭经、产后瘀血
腹痛、咽喉肿痛、痈疮肿毒等。产于我国和日本,在我国主要分布
于江西、湖南、四川、海南和台湾等省区,在海南主要产于昌江,白
沙,文昌,万宁与保亭等市县[2],药理研究显示薜荔具抗菌、增强
免疫、抗肿瘤、抗诱导、抗炎镇痛与驱蛔虫等活性[3]。
本文首次通过系统溶剂法,获得薜荔不同溶剂萃取部位,结
合药理实验对其进行抗炎作用的筛选,确定薜荔具抗炎作用的有
效部位,为进一步寻找薜荔抗炎作用的有效成分提供科学依据。
1 材料与仪器
1. 1 仪器 AL104 电子分析天平(梅特勒 -托利多仪器有限公
司,上海) ;TGL - 16c 高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂) ;
日本 JascoV - 650 紫外分光光度计(日本分光) ;DK -98 - 11A电
热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司) ;R205 旋转蒸发仪
(上海申胜生物技术有限公司) ;游标卡尺(上海恒量量具有限公
司,精度 0. 02mm)。
1. 2 药品和试剂 薜荔采自海南省万宁市兴隆华侨农场,经中国
医学科学院药用植物研究所海南分所鉴定为桑科(Moraceae)榕
属 Ficus L.植物薜荔 Ficus pumila L.药材。荔花鼻窦炎片(批号:
070602 ,海南制药厂有限公司) ;阿司匹林肠溶片(批号:090201,
湖南新汇制药有限公司) ;角叉菜胶(批号:15750,上海晶纯试剂
有限公司) ;伊文思蓝(国药集团化学试剂有限公司,批号:
20090209) ;吐温 80、二甲苯、正丁醇、醋酸乙酯和石油醚均为分
析纯。
1. 3 动物 昆明种小鼠,清洁级,体质量 18 ~ 22 g,雄性,动物合
格证号:SCXK(湘)2009 - 0012,由长沙市开福区东创实验动物科
技服务部提供。
2 方法
2. 1 薜荔提取物的制备 取干燥的薜荔药材 3000g,以 10 倍量的
水煎煮提取两次,每次 1. 5 h,冷却,滤过,合并滤液,浓缩至适量
依次醋酸乙酯、正丁醇两种不同极性溶剂反复萃取,各萃取液减
压回收溶剂,经干燥分别得 5. 5 g(醋酸乙酯萃取物组)、16. 6 g
(正丁醇萃取物组)提取物,分别加 2. 5%的吐温 80 配制成所需
浓度;萃取后剩余水溶液浓缩备用(水液组)。
2. 2 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响[4] 取昆明种小鼠 60 只,
随机分为 6 组,雄性,每组 10 只,即给药组为醋酸乙酯萃取物组、
正丁醇萃取物组、水液组,剂量均为 100 g /kg(以生药量计) ;空白
组给予等容积的蒸馏水,阳性对照组为阿司匹林组和荔花鼻窦炎
片组,均按 20 ml /kg 每日 ig 给药 1 次,连续 7 d。末次给药后 60
min,将 20 μl二甲苯涂于小鼠右耳两侧,30 min后将小鼠脱颈椎
处死,剪下双耳用打孔器(直径 9 mm)分别在同一部位取下圆耳
片,电子天平称重,以左右耳片重量差作为肿胀度,并计算肿胀抑
制率:
肿胀抑制率(%)=(空白对照组平均肿胀率 -给药组平均
肿胀率)/空白对照组平均肿胀率 × 100%
2. 3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[4] 取昆明种小鼠 60
只,随机分为 6 组,每组 10 只,分组及给药方法同“2. 2”项,末次
给药 30 min后,尾静脉注射 0. 5% 伊文思蓝 0. 01 ml /g,同时腹腔
注射 0. 6% 冰醋酸 0. 2 ml /只。20 min 后脱颈椎处死小鼠,以 5
ml生理盐水冲洗腹腔,用注射器抽出洗液约 3 ml,3 000 r /min 离
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 7 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL. 22 NO. 7
心 5 min,取上清液,于 590 nm处测定吸光度(A)值。
2. 4 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响[4] 取昆明种小鼠 60 只,
随机分为 6 组,雌雄各半,每组 10 只,分组及给药方法同“2. 2”
项,于末次给药 30 min后于小鼠右后足跖皮下注射 1%角叉菜
胶,每只 0. 1 ml,并分别于注射前及注射后 1,2,3,4,6 h 用游标
卡尺测量右足跖厚度,以下式计算肿胀度:
肿胀度 =(注射后足跖厚度 -注射前足跖厚度)/注射前足
跖厚度
2. 5 统计学处理 数据以 珋x ± s 表示,量反应资料采用组间 t 检
验。
3 结果
3. 1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 与空白组比较,对二甲苯
所致小鼠耳廓急性炎性肿胀,醋酸乙酯萃取物(P < 0. 01)和水液
组(P < 0. 05)均有明显的抑制作用,但两者间无显著性差异。正
丁醇提取物与空白组比较,无显著性差异。表明薜荔醋酸乙酯提
取物和水液可对抗二甲苯所致的炎症反应,具有抗炎作用。结果
见表 1。
3. 2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 醋酸乙酯萃取物(P <
0. 01)和水液组(P < 0. 05)对冰醋酸致小鼠毛细血管通透性增加
有显著的抑制作用,都能降低小鼠腹腔染料的吸光度,表明薜荔
醋酸乙酯提取物和水液对以渗出为主要病理特征的急性炎症具
有抑制作用。结果见表 2。
表 1 薜荔药材不同提取部位对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg -1 肿胀度 m /mg 抑制率(%)
阿司匹林肠溶片给药 0. 2 5. 7 ± 3. 3* 42. 3
荔花鼻窦炎片给药 100. 0 5. 4 ± 2. 6* 42. 0
空白对照 - 8. 9 ± 1. 8 -
醋酸乙酯提取物 100. 0 6. 2 ± 2. 4** 37. 2
正丁醇提取物 100. 0 8. 7 ± 3. 6 14. 6
水液 100. 0 7. 1 ± 3. 2* 32. 0
与空白对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;n = 10
表 2 薜荔药材不同提取部位对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(珋x ± s)
组别 A值
阿司匹林肠溶片给药 0. 180 0 ± 0. 093 0**
荔花鼻窦炎片给药 0. 207 8 ± 0. 066 7**
空白对照 0. 511 4 ± 0. 306 8
醋酸乙酯提取物 0. 211 9 ± 0. 085 4**
正丁醇提取物 0. 264 1 ± 0. 049 5
水液 0. 228 4 ± 0. 110 7*
与空白对照组比较,* P < 0. 05;n = 10
3. 3 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响 小鼠足跖皮下注射角叉
菜胶溶液致炎后,足肿,足肿胀度先增后减,给药 2 h后足肿胀最
明显。给予醋酸乙酯提取物和水液均能显著降低致炎后 6 h 内
不同时间的小鼠足肿胀度,正丁醇提取物组与空白对照组相比无
显著性差异。结果见表 3。
表 3 薜荔药材不同提取部位对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响(珋x ± s)
组别
足肿胀度(致炎后)
1 h 2 h 3 h 4 h 6 h
阿司匹林肠溶片给药 0. 358 ± 0. 194* 0. 570 ± 0. 276* 0. 628 ± 0. 269** 0. 428 ± 0. 228* 0. 338 ± 0. 215*
荔花鼻窦炎片给药 0. 526 ± 0. 158** 0. 632 ± 0. 305* 0. 706 ± 0. 302 0. 604 ± 0. 331* 0. 480 ± 0. 269*
空白对照 0. 880 ± 0. 195 1. 028 ± 0. 252 0. 960 ± 0. 206 0. 928 ± 0. 251 0. 688 ± 0. 137
醋酸乙酯提取物 0. 483 ± 0. 099** 0. 633 ± 0. 187* 0. 765 ± 0. 255 0. 740 ± 0. 349 0. 533 ± 0. 196
正丁醇提取物 0. 732 ± 0. 244 0. 792 ± 0. 290 0. 800 ± 0. 197 0. 900 ± 0. 234 0. 592 ± 0. 265
水液 0. 593 ± 0. 193** 0. 669 ± 0. 303 0. 716 ± 0. 181 0. 709 ± 0. 299 0. 536 ± 0. 335
与空白对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;n = 10
4 结论与讨论
本实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、腹腔注射醋酸、角叉菜
胶致大鼠足跖肿胀模型实验显示,与生理盐水比较,薜荔药材醋
酸乙酯萃取物及水液可减轻化学刺激导致的小鼠腹腔毛细血管
通透性的增高和炎性物质的渗出,具有一定的抗炎消肿作用。
血管扩张、通透性增加和白细胞渗出是炎症发生的重要病理
机制,三者又互为因果。血管扩张、通透性增加又与化学介质(组
胺、缓激肽、白细胞三烯等)、细胞介质(白细胞介素 1 肿瘤坏死
因子等)及血管内皮细胞等因素有关。本实验采用整体动物实验
法初步探讨了薜荔药材抗炎作用的有效部位,为其今后进行深入
研究提供了实验依据。
参考文献:
[1] 吴松成.薜荔的开发利用及栽培技术[J].林业科技通讯,2001,1:
38.
[2] 中华本草编委会. 中华本草[M]. 上海:上海科学技术出版社,
1999:499.
[3] 钟小清,徐鸿华. 榕属药用植物研究概况[J]. 中草药,2000,31
(9) :3.
[4] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理学实验方法学,第 3 版[M].北京:人
民卫生出版社,2002:911,750,1298.
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL. 22 NO. 7 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 7 期