全 文 :收稿日期:2014-04-25
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 11107010-3-1)
作者简介:何飞(1963-) ,男,高级实验师,主要从事中药药理、毒理学研究;Tel:0771-5869102,E-mail:ygmfrs@ 126. com。
* 通讯作者:李嘉,Tel:0771-586898。
千里香不同提取部位抑制胃肠运动作用的研究
何 飞1,韦桂宁1,苏 华1,曾宪彪1,韦 韡1,李 嘉1,2*
(1. 广西中医药研究院,广西 南宁 530022;2. 广西中药质量标准研究重点实验室,广西 南宁 530022)
摘要 目的:探讨千里香不同提取部位(水、氯仿、乙酸乙酯)对大鼠离体肠运动功能和小鼠胃排空、小肠推进
运动功能的抑制作用。方法:采用大鼠离体回肠自发运动实验和乙酰胆碱所致大鼠离体回肠痉挛性收缩实验,观
察千里香各提取部位抑制离体肠运动功能的作用;采用小鼠胃排空和小肠推进运动实验,观察千里香各提取部位
抑制在体胃、肠运动功能作用。结果:千里香水提部位、氯仿部位和乙酸乙酯部位对大鼠离体回肠自发运动以及乙
酰胆碱所致大鼠离体回肠痉挛性收缩均具有显著抑制作用;乙酸乙酯部位能显著抑制小鼠胃排空和小肠推进率,
氯仿部位能显著抑制小鼠胃排空,而水提部位对小鼠胃排空和小肠推进率则无显著影响。结论:千里香水提部位、
氯仿部位、乙酸乙酯部位均具有一定的抑制胃肠运动功能的作用,其中乙酸乙酯部位作用较强。
关键词 千里香;提取部位;胃肠运动功能
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2015)01-0153-03
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2015. 01. 040
千里香为芸香科植物千里香 Murraya paniculata
(L. )Jack的干燥叶和带叶嫩枝。味辛、微苦,性温,
具有行气止痛、活血散瘀之功效,用于胃痛、风湿痹
痛,外用冶疗牙痛、跌扑肿痛、虫蛇咬伤等〔1〕。千里
香主要含有香豆素类、黄酮类、生物碱类、萜类等化
学成分〔2〕,现代药理学研究表明,千里香具有广泛
的药理活性,其醚部分的 principle A,对大鼠离体小
肠平滑肌具有明显的舒张作用,不能对抗乙酰胆碱
引起的痉挛,但对组织胺和 BaCl2引起的痉挛具有
明显的拮抗作用〔3〕。为全面了解其对胃肠运动功
能的影响,本研究以不同极性的溶剂对千里香进行
提取,比较其不同提取部位对胃肠运动的影响,为对
其进行进一步研究与开发提供实验依据。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 SPF 级 Wistar 大鼠,体质量 200 ~
250 g,SPF级昆明小鼠,体质量 18 ~ 22 g,雌雄兼用;
购自广西医科大学实验动物中心,生产许可证号:
SCXK(桂)2009-0002。
1. 2 药材与试剂 千里香药材购自广西玉林市
场,经广西中医药研究院何开家主任中药师鉴定为
芸香科植物千里香 Murraya paniculata (L. )Jack 的
干燥叶和带叶嫩枝;硫酸阿托品注射液,批号:
1203021,河北凯威制药有限责任公司;溴化乙酰胆
碱(98%) ,批号:34832,Aladdin Chemistry Co. Ltd;
吐温-80 溶液,南京化学试剂有限公司。
1. 3 主要仪器 ZH-Z 离体器官测量系统,淮北正
华生物仪器设备有限公司;BL-420S 生物机能实验
系统,成都泰盟科技有限公司;JZ301 型微张力换能
器,北京新航兴业科贸有限公司;FA1004 型上皿天
平,上海精科天平厂;JY1002 电子天平,上海浦春计
量仪器有限公司。
2 方法〔4,5〕
2. 1 供试样品的制备
2. 1. 1 千里香水提部位:千里香药材饮片用水煎
煮提取,浓缩水提取液得药膏,1 g 药膏相当于 12. 0
g生药,批号:20120530。
2. 1. 2 千里香氯仿部位:千里香药材饮片用乙醇
提取,盐酸溶解成溶液,NH3·H2O沉淀,氯仿萃取,
浓缩氯仿液得药膏,1 g药膏相当于 53. 9 g 生药,批
号:20120620。
2. 1. 3 乙酸乙酯部位:香里香药材饮片用乙醇提
取,石油醚萃取,再以乙酸乙酯萃取,浓缩乙酸乙酯
液得药膏,1 g 药膏相当于 24. 0 g 生药,批号:
20120530。
2. 1. 4 药液配制:千里香氯仿及乙酸乙酯部位均
以 1%吐温-80 溶液配成所需浓度药液。
2. 2 千里香不同提取部位对大鼠离体回肠运动功
能的影响
2. 2. 1 千里香不同提取部位对大鼠离体回肠自发
运动的影响:将大鼠禁食(不禁水)24 h,处死,取 1
cm左右回肠,置内装有一定体积克氏液的浴槽中,
恒温水浴温度为(37 ± 0. 5)℃。连接生物机能实验
系统,调节肠管基础张力约为 2. 0 g,首先记录一段
正常的张力曲线,然后按表 1 所示的组别、剂量给
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药,对照组、溶媒组分别给予同体积 NS 和 1%吐温-
80 溶液。每次换药液前均用克氏液冲洗,待基线恢
复平稳后方可再次加药。加药后继续观察、记录 5
min内肠管的张力变化曲线,选择给药前和给药后
1. 0、2. 5、5. 0 min 时间点的张力大小(g)及其抑制
率进行统计分析。
2. 2. 2 千里香不同提取部位对 Ach 所致大鼠离体
回肠痉挛性收缩的影响:方法同“2. 2. 1”项。调节
肠管基础张力为 0. 5 g 左右,首先记录一段基础张
力曲线,然后加入 Ach(终浓度 0. 01 /L) ,在肠管痉
挛性收缩平稳期(即张力曲线平台期) ,按表 2 所示
组别、剂量给药,给药后继续观察、记录 5 min 内肠
管张力变化曲线。选择给 Ach 前(基础张力)、给
Ach后张力平台期以及 Ach +给药后 1. 0、2. 5、5. 0
min 共 5 个时间点的张力大小(g)以及给药后 1. 0、
2. 5、5. 0 min的张力抑制率(%)进行统计分析。
张力抑制率(%)=(加 Ach 后张力曲线平台期张力 -
给药后某时间点张力)÷(加 Ach 后张力曲线平台期张力 -
基础张力)× 100
2. 3 千里香不同提取部位对小鼠胃排空和小肠推
进运动的影响 取小鼠 90 只,按表 3 所示组别随机
分为 9 组,每组 10 只。灌胃给药,1 次 /d,连续 3 d,
溶媒组灌胃给予等体积 1%吐温-80 溶液,硫酸阿托
品组皮下注射给药并灌胃等体积蒸馏水。末次给药
后 1 h,将已禁食(不禁水)18 h 的小鼠灌胃给予半
固体黑色糊,每只 0. 8 mL。20 min 后脱颈处死小
鼠,结扎胃喷门和幽门,取称全胃质量,洗去胃内容
物后称净质量。以胃全质量和胃净质量的差值作为
胃内残留物质量,计算胃内残留物占所灌半固体糊
质量的百分比为胃内残留率。同时取出小肠,剥离
肠系膜将小肠拉直,测量幽门至回盲部的小肠全长
及幽门至黑色半固体糊前沿的距离。以幽门至黑色
半固体糊前沿的距离占幽门至回盲部全长的百分率
作为小肠推进率。
2. 4 统计学处理 数据均以 珋x ± s 表示;采用 SPSS
11. 0 软件进行统计学处理。各指标采用单因素方
差分析后进行多组间两两比较。以 P < 0. 05 差异
有统计学意义。
3 结果
3. 1 千里香不同提取部位对大鼠离体回肠自发运
动的影响 结果如表 1 所示,与对照组比较,水提部
位生药 3. 6 g /L 给药后 2. 5、5 min,生药 1. 8 g /L 给
药后 5 min;氯仿部位、乙酸乙酯部位生药 3. 6、1. 8
g /L给药后 1、2. 5、5 min 以及硫酸阿托品给药后 5
min均能显著提高大鼠离体回肠张力抑制率(P <
0. 05 或 P < 0. 01) ;与溶媒组比较,氯仿部位、乙酸
乙酯部位生药 3. 6、1. 8 g /L 给药后 1、2. 5、5 min 均
能显著提高离体回肠张力抑制率(P < 0. 05 或 P <
0. 01)。
表 1 千里香不同提取部位对大鼠离体回肠自发运动的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /L) 给药前张力 /g
给药后 1 min 给药后 2. 5 min 给药后 5 min
张力 /g 抑制率 /% 张力 /g 抑制率 /% 张力 /g 抑制率 /%
对照组 - 2. 87 ± 0. 66 2. 41 ± 0. 73 16. 78 ± 9. 09 2. 28 ± 0. 58 20. 71 ± 9. 16 2. 53 ± 0. 76 12. 96 ± 10. 85
硫酸阿托品组 0. 002 2. 16 ± 0. 37 1. 39 ± 0. 47 35. 98 ± 19. 42 1. 30 ± 0. 40 40. 65 ± 13. 74 1. 30 ± 0. 45 40. 65 ± 13. 99**
水提部位组 3. 6 2. 71 ± 0. 76 1. 71 ± 0. 59 35. 09 ± 23. 93 1. 48 ± 0. 64 45. 82 ± 14. 05* 1. 25 ± 0. 40 53. 48 ± 10. 30**
水提部位组 1. 8 2. 79 ± 0. 59 2. 07 ± 0. 87 27. 83 ± 17. 25 1. 98 ± 0. 99 31. 94 ± 22. 42 1. 74 ± 0. 91 40. 07 ± 22. 16*
溶媒组 - 2. 58 ± 0. 75 2. 16 ± 0. 68 15. 32 ± 14. 67 2. 00 ± 0. 67 21. 14 ± 18. 28 1. 96 ± 0. 91 25. 43 ± 16. 62
氯仿部位组 3. 6 2. 38 ± 0. 62 1. 37 ± 0. 82 43. 29 ± 24. 77* ## 1. 31 ± 0. 72 47. 02 ± 23. 14* # 0. 98 ± 0. 61 59. 19 ± 23. 06**##
氯仿部位组 1. 8 2. 70 ± 0. 58 1. 65 ± 0. 76 39. 27 ± 22. 93* # 1. 52 ± 0. 96 45. 09 ± 28. 39* # 1. 24 ± 1. 06 55. 64 ± 32. 08**##
乙酸乙酯部位组 3. 6 2. 47 ± 0. 77 0. 80 ± 0. 61 68. 32 ± 17. 99**## 0. 58 ± 0. 37 74. 64 ± 19. 17**## 0. 41 ± 0. 23 81. 00 ± 15. 50**##
乙酸乙酯部位组 1. 8 2. 68 ± 0. 68 1. 15 ± 0. 86 58. 35 ± 25. 30**## 1. 23 ± 1. 21 56. 87 ± 36. 09**## 1. 09 ± 0. 96 62. 11 ± 28. 19**##
注:与对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与溶媒组比较,#P < 0. 05,##P < 0. 01
3. 2 千里香不同提取部位对 Ach 所致大鼠离体回
肠痉挛性收缩的影响 结果如表 2 所示,与对照组
比较,千里香水、氯仿、乙酸乙酯部位生药 1. 8、0. 9
g /L和硫酸阿托品给药后 1、2. 5、5 min,均能明显对
抗 Ach所致离体回肠痉挛性收缩,显著提高其张力
抑制率(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。与溶媒组比较,千
里香氯仿、乙酸乙酯部位生药 1. 8、0. 9 g /L 给药后
1、2. 5、5 min,亦能显著对抗 Ach所致离体回肠痉挛
性收缩,显著提高其张力抑制率(P < 0. 05 或 P <
0. 01)。
3. 3 千里香不同提取部位对小鼠胃排空和小肠推
进运动的影响 结果如表 3 所示,与对照组及溶媒
组比较,千里香氯仿部位生药 18. 0 g /kg 和乙酸乙
酯部位生药 18. 0、9. 0 g /kg 以及硫酸阿托品能显著
抑制小鼠胃排空(提高胃内残留率) (P < 0. 05 或 P
< 0. 01) ;乙酸乙酯部位生药 18. 0 g /kg 还能显著抑
制小肠推进率(P < 0. 05)。而水提部位对小鼠胃排
空和小肠推进率均无明显影响。
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表 2 千里香不同提取部位对 Ach所致大鼠离体回肠痉挛性收缩的影响(珔x ± s,n =8)
组别
剂量 /
(g /L)
基础张力 /
g
给予 Ach
后张力 / g
给药后 1. 0 min 给药后 2. 5 min 给药后 5 min
张力 / g 抑制率 /% 张力 / g 抑制率 /% 张力 / g 抑制率 /%
对照组 - 0. 61 ± 0. 36 3. 08 ± 0. 94 2. 99 ± 0. 82 2. 90 ± 5. 74 2. 94 ± 0. 84 5. 09 ± 4. 78 2. 80 ± 0. 80 11. 12 ± 7. 64
硫酸阿托品组 0. 001 0. 44 ± 0. 27 3. 36 ± 0. 53 0. 68 ± 0. 35 90. 92 ± 9. 79** 0. 41 ± 0. 29 100. 78 ± 11. 55** 0. 37 ± 0. 29 102. 25 ± 10. 37**
水提部位组 1. 8 0. 33 ± 0. 23 2. 55 ± 0. 71 1. 88 ± 0. 67 33. 57 ± 21. 64** 1. 51 ± 0. 71 53. 11 ± 30. 04** 1. 19 ± 0. 65 66. 96 ± 29. 65**
水提部位组 0. 9 0. 59 ± 0. 44 2. 77 ± 1. 11 2. 40 ± 0. 95 17. 79 ± 11. 68* 2. 28 ± 0. 92 24. 02 ± 18. 29* 2. 15 ± 0. 96 30. 58 ± 18. 33*
溶媒组 - 0. 39 ± 0. 23 2. 79 ± 0. 94 2. 68 ± 0. 89 4. 07 ± 3. 20 2. 47 ± 0. 89 13. 37 ± 9. 06 2. 14 ± 0. 78 25. 65 ± 14. 91
氯仿部位组 1. 8 0. 41 ± 0. 27 2. 90 ± 1. 11 1. 94 ± 0. 94 41. 24 ± 12. 91**## 1. 38 ± 0. 87 64. 50 ± 23. 79**## 0. 98 ± 0. 58 79. 35 ± 18. 60**##
氯仿部位组 0. 9 0. 51 ± 0. 35 2. 61 ± 1. 39 1. 97 ± 0. 97 29. 80 ± 11. 40**## 1. 61 ± 0. 83 47. 81 ± 15. 60**## 1. 33 ± 0. 75 62. 21 ± 15. 95**##
乙酸乙酯部位组 1. 8 0. 28 ± 0. 14 2. 86 ± 0. 95 0. 81 ± 0. 65 83. 30 ± 20. 90**## 0. 46 ± 0. 34 94. 36 ± 13. 63**## 0. 25 ± 0. 23 102. 42 ± 12. 01**##
乙酸乙酯部位组 0. 9 0. 74 ± 0. 55 3. 07 ± 1. 09 1. 92 ± 1. 19 53. 03 ± 16. 60**## 1. 38 ± 1. 16 76. 58 ± 21. 46**## 1. 07 ± 1. 02 89. 67 ± 20. 57**##
注:与对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与溶媒组比较,#P < 0. 05,##P < 0. 01
表 3 千里香不同提取部位对小鼠胃排空和
小肠推进运动的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 胃内残留率 /% 小肠推进率 /%
对照组 - 43. 51 ± 12. 32 57. 68 ± 9. 06
硫酸阿托品组 0. 0004 60. 71 ± 19. 17* # 53. 82 ± 9. 28
水提部位组 18. 0 46. 49 ± 13. 54 65. 15 ± 9. 60
水提部位组 9. 0 44. 93 ± 12. 09 59. 69 ± 4. 46
溶媒组 - 50. 66 ± 15. 29 57. 32 ± 8. 31
氯仿部位组 18. 0 65. 96 ± 23. 53**# 62. 18 ± 8. 69
氯仿部位组 9. 0 45. 74 ± 19. 93 60. 95 ± 8. 92
乙酸乙酯部位组 18. 0 82. 72 ± 11. 08**## 48. 62 ± 7. 80* #
乙酸乙酯部位组 9. 0 66. 81 ± 16. 40**# 51. 94 ± 9. 00
注:与对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与溶媒组比较,#P <
0. 05,##P < 0. 01
4 讨论
胃肠道运动是消化道生理功能的主要组成,受
神经和体液双重调节。消化道及消化器官都接受交
感和副交感神经的双重支配,二者与肠神经系统一
起,共同调节消化道平滑肌的运动、腺体分泌和血管
运动。过度劳累、情绪紧张、家庭纠纷、生活和工作
上的困难等若长期得不到合理的解决,均可干扰高
级神经的正常活动,造成脑-肠轴的紊乱,进而引起
胃肠道功能障碍,主要为胃肠的运动与分泌机能失
调〔6,7〕。中医药对胃肠道功能障碍具有良好的改善
作用〔8,9〕。中药对胃肠道功能障碍作用的多靶点、
多环节的特性及毒副作用小的特点引起广大学者的
关注。
本实验通过运用不同极性的溶媒所提取的成分
初步研究了千里香抑制动物胃肠运动的作用,结果
显示,千里香水提部位、氯仿部位和乙酸乙酯部位对
大鼠离体回肠自发运动以及乙酰胆碱所致大鼠离体
回肠痉挛性收缩均具有显著抑制作用;千里香乙酸
乙酯部位能显著抑制小鼠胃排空(提高胃内残留
率)和小肠推进率,氯仿部位能显著抑制小鼠胃排
空,而水提部位对小鼠胃排空和小肠推进率均没有
显著影响。其中乙酸乙酯部位作用较强。但其具体
的物质基础和作用机理,还有待进一步研究。
参 考 文 献
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