全 文 :*陕西省科技厅项目(2013JQ4005)
△陕西省宝鸡市食品药品检验检测中心 (宝鸡721013)
▲西安大唐制药集团有限公司(西安710075)
·方药纵横·
马牙七提取物体外抗菌研究*
姜 祎 徐 虹 李稳柱 董桂颖 魏引平△ 张 明▲ 王红云 邓 翀
陕西中医药大学 (咸阳712046)
摘 要 目的:研究马牙七提取物体外抑菌作用。方法:采用琼脂扩散法研究马牙七提取物对金黄色
葡萄球菌、福氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、肠炎沙门菌、肺炎克雷伯氏菌、普通变形杆菌、生孢
梭菌、大肠埃希氏菌、乙型溶血性链球菌的体外抑制作用。结果:马牙七水提取物对痢疾志
贺氏菌、乙型溶血性链球菌有抑菌作用;马牙七正丁醇萃取物对痢疾志贺氏菌、乙型溶血性
链球菌和金黄色葡萄球菌有抑菌作用。结论:马牙七对痢疾志贺、金黄色葡萄球菌、乙型溶
血性链球菌有一定的抑菌作用,具有一定的应用前景。
主题词 @马牙七 中药药理学
【中图分类号】 R286 【文献标识码】 A doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2015.08.066
Antimicrobial test in vitro of Mayaqi extracts
Shaanxi University of Traditional Medicinal(Xianyang 712046) Jiang Yi Xu Hong Li Wenzhu et al
ABSTRACT Objective:Study the antibacterial effect of Mayaqi in vitro.Methods:The antibacterial effect of
Mayaqi on Staphylococcus aureus,clostridium sporogenes,shigela flexneri,shigela dysenteriae,salmonelaenteritidis,
K.Peneumoniae,P.vulgaris,E.coli,streptococcus hemolytic-βwere measured by agar diffusion method.Results:The
water extract exhibited inhibition effect on shigela flexneri,the N-butanol extract exhibited inhibition effect both on shi-
gela flexneri and staphylococcus aureus.Conclusion:Mayaqi exhibited antibacteria action on shigela flexneri and staphy-
lococcus aureus.
KEY WORDS @Mayaqi Pharmacology
马 牙 七 为 兰 科 虾 脊 兰 (Calanthe fimbriata
Franch.)和剑叶虾脊兰(Calanthe davidi Franch.)的
假鳞茎和根,具有清热解毒的作用,民间用于慢性咽
炎、肝炎、胃溃疡的治疗[1],尚未见其抑菌作用的详细
研究。本研究以马牙七为研究对象,采用琼脂扩散
法[2-5]测定马牙七提取物对金黄色葡萄球菌、福氏志贺
氏菌、痢疾志贺氏菌、肠炎沙门菌、肺炎克雷伯氏菌、普
通变形杆菌、生孢梭菌、大肠埃希氏菌、乙型溶血性链
球菌的抑菌作用,为其开发利用提供实验依据。
1 材料与仪器 马牙七,2013年8月采自陕西
省汉中市城固县,经陕西中医学院药学院,杨新杰(博
士)鉴定为流苏虾脊兰,取地下部分用于实验。罗红霉
素、阿莫西林购自联邦制药;金黄色葡萄球菌、福氏志
贺氏菌、痢疾志贺氏菌、肠炎沙门菌、肺炎克雷伯氏菌、
普通变形杆菌、生孢梭菌、大肠埃希氏菌、乙型溶血性
链球菌购自上海慧耘生物科技有限公司。
1.1 马牙七提取物的制备 1.1.1 马牙七水
提液的制备:称取一定量的马牙七,粉碎,取粗粉20g,
加蒸馏水80mL,煎煮2h,过滤,滤液浓缩至4mL,滤膜
过滤除菌,得到马牙七水提液(5g/mL),装入无菌试管
中备用。
1.1.2 马牙七正丁醇部位的制备:称取一定量的
马牙七,粉碎,取粗粉20g,加60%乙醇80mL,回流提
取2h,过滤,滤液浓缩至无醇味,加正丁醇萃取3次,
回收正丁醇干燥,加蒸馏水得马牙七正丁醇部位(5g/
mL),装入无菌试管中备用。
1.1.3 供试菌浓度测定:供试菌种经传代培养
后,接种于(MH)肉汤培养基中,37℃恒温箱培养6h,
经比浊法判定菌量后,再用 MH肉汤稀释至含菌量为
105CFU/mL的菌悬液。
1.2 方 法 1.2.1 抑菌浓度:取 MH肉汤培
养基分装于试管中,每只9mL,常压灭菌后加入马牙
七水提取物、正丁醇部位、阿莫西林、罗红霉素使 MH
肉汤培养基含药浓度分别为0.4,0.2,0.1,0.05,0.
02,0.01g/mL,接种痢疾志贺氏菌实验菌液0.05mL
(105CFU/mL),接种3皿;MH 肉汤培养基接种痢疾
3701陕西中医2015年第36卷第8期
志贺氏菌作为空白对照,于37℃恒温箱培养18h,结
果见表1。
表1 不同浓度马牙七提取物对痢疾志
贺氏菌的抑菌作用
浓度 马牙七水提取物 马牙七正丁醇部位 阿莫西林 罗红霉素
0.01 + + + + + + +++ +++
0.02 + + + + + + + ++
0.05 + + + + + + 0 0
0.1 + + + + + 0 0
0.2 0 0 - -
0.4 0 0 - -
注:+ + +:细菌明显生长;+:细菌少量生长;0:无菌生长;-:未测试
1.2.2 马牙七提取物抑菌作用的测定:取 MH
肉汤培养基分装于试管中,每只9mL,常压灭菌后加
入马牙七水提取物、正丁醇部位使 MH肉汤培养基含
药浓度为0.2g/mL;加入阿莫西林、罗红霉素使 MH
肉汤培养基含药浓度分别为0.05g/mL。然后接种金
黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、肠炎沙
门菌、肺炎克雷伯氏菌、普通变形杆菌、生孢梭菌、大肠
埃希氏菌、乙型溶血性链球菌实验菌液0.05 mL
(105CFU/mL),接种3皿,并以空白 MH 肉汤培养
基,接种相同菌种作为对照。于37℃恒温箱培养18
h,结果见表2。
表2 马牙七提取物对细菌的抑菌作用
菌种
马牙七水提取
物(0.2g/mL)
马牙七正丁醇
部位(0.2g/mL)
阿莫西林
(0.05g/mL)
罗红霉素
(0.05g/mL)
金黄色葡萄球菌 + + + 0 0 + + +
福氏志贺氏菌 + + + + + + 0 + +
痢疾志贺氏菌 0 0 0 +
肠炎沙门菌 + + + + + + 0 + +
肺炎克雷伯氏菌 + + + + + + 0 0
普通变形杆菌 + + + + + + 0 + +
生孢梭菌 + + + + + + 0 0
大肠埃希氏菌 + + + + + + 0 0
乙型溶血链球菌 0 0 0 0
2 结 果 马牙七提取物对痢疾志贺氏菌相对
生长率的影响见表1。从表1可看出,随着提取物浓度
的增加,细菌的生长受到抑制,浓度为0.2g/mL时,
马牙七水提物、正丁醇部位对痢疾志贺氏菌完全抑制,
抑菌效果与0.05g/mL的阿莫西林和罗红霉素相当。
马牙七提取物对金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、痢疾
志贺氏菌、肠炎沙门菌、肺炎克雷伯氏菌、普通变形杆
菌、生孢梭菌、大肠埃希氏菌、乙型溶血性链球菌的抑
菌作用见表2。浓度为0.2g/mL时,从表2可看出,马
牙七水提取物对痢疾志贺氏菌、乙型溶血链球菌有抑
菌作用,抑菌作用与0.05g/mL的阿莫西林相当;马
牙七正丁醇提取物对痢疾志贺氏菌、乙型溶血链球菌
和金黄色葡萄球菌有抑菌作用,抑菌作用与0.05g/
mL的阿莫西林相当。马牙七水提物对痢疾志贺氏菌
抑制效果优于正丁醇部位,而正丁醇部位具有明显的
抗金黄色葡萄球菌效果,其抗金黄色葡萄球菌的有效
成分集中在正丁醇部位。
实验结果表明马牙七不同溶剂的提取物对痢疾志
贺氏菌、乙型溶血链球菌和金黄色葡萄球菌有一定的
抑制作用。
3 讨 论 本实验采用体外抗菌试验测定马牙
七的抗菌作用,该方法简便经济,广泛用于初步筛选。
马牙七不同溶剂的提取物对痢疾志贺氏菌、乙型溶血
链球菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,而链球
菌、葡萄球菌感染是引起咽炎的主要病因之一,且多出
现耐药性[4],马牙七民间用于咽炎的治疗[1],本实验结
果与民间用药吻合。体外实验证明马牙七不同溶剂的
提取物对痢疾志贺氏菌、乙型溶血链球菌和金黄色葡
萄球菌有一定的抑制作用,需动物实验进一步验证,其
抗菌有效成分不明有待进一步研究。
参考文献
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(收稿2015-03-25;修回2015-04-11)
4701 陕西中医2015年第36卷第8期