全 文 ：北方园艺２０１２（０５）：１１３～１１５ ·生物技术·
第一作者简介：徐凌飞（１９６９－），男，博士，副教授，现主要从事梨树
种质资源和生物技术改良研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｎｇｆｘｕ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ。
基金项目：现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目
（ＣＡＲＳ－２９－４０）。
收稿日期：２０１１－１２－０２
梨矮化砧木云南榅桲离体快繁研究
徐 凌 飞，李 致 慧，贾 东 峰，李 慧
（西北农林科技大学 园艺学院，陕西 杨凌７１２１００）
摘 要：以梨矮化砧木云南榅桲的茎段为外植体，进行了离体快繁研究。结果表明：茎芽增
殖的适宜培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ ０．３ｍｇ／Ｌ或 ＭＳ＋６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．５ｍｇ／Ｌ，增殖系数分别为３．６５和３．５８，并且试管苗长势健壮；云南榅桲不定根诱导的适宜培养
基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ，生根苗移栽成活率为９２％。
关键词：梨；矮化砧木；云南榅桲；离体快繁
中图分类号：Ｓ ６６１．２０４＋．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１２）０５－０１１３－０３
矮化栽培是现代果树栽培的发展趋势，利用矮化砧
木是实现矮化栽培的重要途径。榅桲（Ｃｙｄｏｎｉａ ｏｂｌｏｎｇａ
Ｍｉｌ．）是欧洲在西洋梨上广泛应用的矮化砧［１］。梨矮化
砧木在我国梨的密植栽培中尚未广泛应用，其主要原因
是没有适宜的矮化砧木［２］。陕西应用云南榅桲作为基
砧，以西洋梨品种“哈代”作为亲和中间砧在其上嫁接砀
山酥梨、早酥梨等，相比以杜梨为砧木的乔化栽培，表现
树体矮小、结果早、品质优等特点［３］。目前国内外榅桲
组织培养主要集中在榅桲ＢＡ－２９［４］、榅桲Ａ［５］和新疆苹
果型榅桲［６］等材料。云南榅桲繁殖采取扦插繁殖［７］，尚
未见到离体快繁研究的报道。以云南榅桲幼嫩茎段为
外植体，系统进行茎芽增殖、生根和移栽研究，以期为云
南榅桲无性快速繁殖和无性系选择研究奠定基础。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
２００９年５月，在西北农林科技大学梨种质资源圃采
集２ａ生云南榅桲植株嫩梢部分。剪取其１０～１５ｃｍ长
的嫩梢，去掉叶片，带回实验室备用。
１．２ 试验方法
１．２．１ 无菌苗的培养 将采集的嫩梢剪成５ｃｍ左右长
的茎段，用流水冲洗３０～６０ｍｉｎ，在超净工作台内用７０％
的酒精浸泡３０ｓ，再用０．１％ ＨｇＣｌ２ 溶液灭菌８ｍｉｎ，最
后用无菌水摇晃冲洗３次，然后将嫩梢剪成１．５ｃｍ左右
长的带腋芽茎段，接入 ＭＳ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ
０．３ｍｇ／Ｌ的初代培养基中，每瓶接种２个茎段。初代培
养２５ｄ后，用镊子小心取出试管苗，切成１．５～２．０ｃｍ
带芽茎段，接种到继代培养基 ＭＳ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋
ＩＢＡ ０．１～０．３ｍｇ／Ｌ中，每瓶接３～４茎段。
１．２．２ 茎芽的增殖培养 选取继代培养同一批生长期
３０ｄ左右的、长势好的试管苗，将其切成１．５～２．０ｃｍ带
芽茎段接入各种不同成分的增殖筛选培养基中，每种处
理最少接１０瓶，每瓶接种３个茎段，试管苗培养３０ｄ
后，观察试管苗生长状况，统计其增殖系数及试管苗高
度。增殖系数＝植株大于１ｃｍ长的分支／接种时茎段
的数量×１００％。
１．２．３ 生根培养和试管苗移栽 切取３～４ｃｍ的试管
苗茎段，接种到生根培养基上，３０ｄ后统计生根率和生
根条数等。然后将长势好的生根苗转入练苗室进行练
苗，瓶内练苗５ｄ后，移栽入基质中练苗，１５ｄ试管苗已
发新根，统计成活率。生根率＝生根植株数／接种茎段
总数×１００％；生根条数为植株基部诱导出的第一级根
的条数；移栽成活率＝移栽成活数／移栽生根苗
数×１００％。
１．２．４ 培养条件 以上培养基ｐＨ 均为５．８，蔗糖
３０ｇ／Ｌ，琼脂７ｇ／Ｌ，培养条件为温度（２５±２）℃，光照时
间１６ｈ／ｄ，光照强度１ ８００ｌｘ。
１．２．５ 统计分析 数据运用ＤＰＳ数据分析软件进行差
异显著性分析。
２ 结果与分析
２．１ 茎芽增殖
２．１．１ 不同浓度６－ＢＡ和ＩＢＡ组合对茎芽增殖的影响
由表１可看出，不同浓度６－ＢＡ和ＩＢＡ的组合对云南
榅桲茎芽增殖有不同的影响。增殖系数最高的是３．６５，
最低的是１．８８。当６－ＢＡ浓度不变，为０．５ｍｇ／Ｌ或
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·生物技术· 北方园艺２０１２（０５）：１１３～１１５
２．０ｍｇ／Ｌ时，不同浓度的ＩＢＡ处理之间的增殖系数没有
显著差异，６－ＢＡ浓度过低或过高都不适宜云南榅桲茎芽
增殖。ＩＢＡ对茎芽增殖有重要影响，缺乏ＩＢＡ组合的茎
芽增殖系数较低。适宜的茎芽增殖培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ
１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ ０．３ｍｇ／Ｌ，增殖系数最高，达到３．６５，试
管苗平均高度为２．３５ｃｍ，试管苗生长健壮。
表１ 不同浓度的６－ＢＡ和ＩＢＡ组合
对云南榅桲茎芽增殖的影响
激素组合／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ ＩＢＡ
增殖系数 平均苗高／ｃｍ
０．５ ０．０ ２．３５ｄｅｆ ２．３９
０．５ ０．１ ２．５５ｃｄｅｆ ３．０８
０．５ ０．３ ２．１５ｅｆ ２．６３
０．５ ０．５ ２．２０ｅｆ ２．７４
１．０ ０．０ ２．００ｆ ２．６４
１．０ ０．１ ２．０２ｆ ２．５３
１．０ ０．３ ３．６５ａ ２．３５
１．０ ０．５ ３．０９ａｂｃ ２．７０
１．５ ０．１ １．８８ｆ ３．５４
１．５ ０．３ ２．３４ｅｆ ２．４７
１．５ ０．５ ２．６９ｂｃｄｅ ２．２１
２．０ ０．１ ３．０３ａｂｃｄ ２．１９
２．０ ０．３ ３．２５ａｂ ２．７７
２．０ ０．５ ３．２３ａｂ ２．００
注：不同小写字母表示差异达０．０５显著水平，下同。
２．１．２ 不同浓度的６－ＢＡ和ＮＡＡ组合对茎芽增殖的影
响 由表２可知，６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ与不同浓度ＮＡＡ组
合的增殖系数均低于６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ与不同浓度 ＮＡＡ
组合。云南榅桲茎芽增殖适宜培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ，增殖系数最高，达到３．５８，
平均苗高为３．２３ｃｍ，并且试管苗健壮，长势好。
表２ 不同浓度的６－ＢＡ和ＮＡＡ组合对
云南榅桲茎芽增殖的影响
激素组合／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ ＮＡＡ
增殖系数 平均苗高／ｃｍ
０．５ ０．１ ２．８７ａｂ ２．８３
０．５ ０．３ ３．４５ａｂ ２．９３
０．５ ０．５ ３．５８ａ ３．２３
１．０ ０．１ ２．６４ｂ ２．５１
１．０ ０．３ ２．７９ｂ ２．７６
１．０ ０．５ ２．６６ｂ ２．４５
２．２ 生根
附加不同浓度ＩＢＡ、ＮＡＡ于１／２ＭＳ培养基上，进行
生根诱导。由表３可知，当培养基没有附加生长素时，
生根率为零；附加ＩＢＡ、ＮＡＡ均有生根。说明生长素对
云南榅桲试管苗生根是必需的。单独使用ＮＡＡ时，生
根率普遍较高，平均生根率及平均生根数明显高于单独
使用ＩＢＡ或者ＩＢＡ与 ＮＡＡ的组合。ＮＡＡ 浓度为
０．１～０．５ｍｇ／Ｌ的各处理中，０．３ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ处理生
根率高，并且根粗，须根密。
表３ 不同浓度的ＩＢＡ、ＮＡＡ及二者组合
对云南榅桲生根的影响
激素组合／ｍｇ·Ｌ－１
ＩＢＡ ＮＡＡ
平均生根率／％ 平均生根数／条
０．０ ０．０ ０．０ ０．０
０．１ ０．０ ４５．８ ２．５５
０．３ ０．０ １２．５ １．６７
０．５ ０．０ １２．５ ２．００
０．０ ０．１ ５４．２ ２．６２
０．０ ０．３ ６２．５ １．８６
０．０ ０．５ ４１．７ ３．００
０．１ ０．１ ３３．３ １．８６
０．１ ０．３ ２８．６ １．６７
０．３ ０．１ ５．６ ３．００
０．３ ０．３ ２７．８ ２．１９
２．３ 移栽
将生根苗转入练苗室进行练苗，瓶内练苗５ｄ后，移
栽入基质进行覆盖保湿。移栽１５ｄ后，成活的移栽苗有
新根发出，茎杆逐渐直立、叶片平展、长势健壮，试管苗
移栽成活率为９２％。
３ 结论与讨论
茎芽增殖是微繁的关键时期，微繁的失败多数都是
在这个时期发生的［８］，该研究表明，６－ＢＡ与ＮＡＡ、ＩＢＡ
不同浓度组合对云南榅桲的试管苗增殖有着重要的影
响。６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ ０．３ｍｇ／Ｌ组合的试管苗增殖
系数为３．６５，６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ组合的
增殖系数为３．５８，二者的试管苗长势均较好，均可以作
为云南榅桲茎芽增殖的适宜培养基，但６－ＢＡ的浓度有
一定差异，说明试管苗增殖和生长不仅与激素种类和浓
度有关，还与不同激素的相对比例密切相关。
生根时一般应用一种生长素ＩＢＡ或ＮＡＡ，也有使
用２种生长素配合提高生根率。李云等［９］研究表明，
ＩＢＡ和ＮＡＡ配合有利于四倍体宽叶刺槐无性系生根，
最适的组合是ＩＢＡ ０．４ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．２５ｍｇ／Ｌ。但对
于云南榅桲试管苗生根，ＩＢＡ和ＮＡＡ组合并不能提高
生根率，单一生长素ＮＡＡ生根效果好，这与材料的基因
型有关。
参考文献
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ｇｒｏｗｔｈ，ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ
ｑｕｉｎｃｅ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｔｉａ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，２０１０，１２５：１５１－１５８．
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ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｇｒｏｗｎ ｑｕｉｎｃｅ ｌｅａｖｅｓ ａｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄ ｂｙ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｏｆ
ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｗｉｔｈ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｔｉａ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，２００６，１０７：
１９４－１９９．
４１１
北方园艺２０１２（０５）：１１５～１１８ ·生物技术·
第一作者简介：孙靖棣（１９８１－），女，在读硕士，研究方向为番茄遗
传转化。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｘｗ０６１０６１６＠１２６．ｃｏｍ。
责任作者：周晓馥（１９６４－），女，博士，教授，硕士生导师，现主要从事
植物基因工程的研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｏｕｘｉａｏｆｕ＠ｊｌｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。
基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０９７０２１９）。
收稿日期：２０１１－１２－０８
激素配比对不同基因型番茄再生体系的调控
孙 靖 棣，未 晓 巍，蔡 蕊，周 晓 馥
（吉林师范大学 生物资源与环境信息吉林省高校重点实验室，吉林 四平１３６０００）
摘 要：以“粉桃”、“春秀”、“中蔬四号”、“齐研矮粉”、“红润”５种基因型番茄品种为试材，取７ｄ的
无菌苗子叶作为外植体，研究不同激素配比对不同基因型番茄愈伤组织、不定芽及根诱导的影响。
结果表明：不同基因型番茄再生体系受不同激素配比的调控差异显著。筛选得出愈伤组织诱导最佳
培养基为：ＭＳＢ５＋６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ ０．２～０．５ｍｇ／Ｌ；不定芽诱导最佳培养基为：ＭＳＢ５＋６－ＢＡ
２．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ ０．１５～０．５０ｍｇ／Ｌ；不定芽生根最佳培养基为：１／２ＭＳ＋ＩＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ。
关键词：番茄；基因型；激素配比；再生体系
中图分类号：Ｑ ９４３．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１２）０５－０１１５－０４
番 茄 （Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌ．）系 茄 科
（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ）番茄属（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ）１ａ生或多年生草本
双子叶植物，具有营养丰富，生长周期短，遗传背景较清
楚等优点，是基因工程研究中重要的模式植物。
番茄再生体系的建立是成功进行遗传转化的前提
和保障。据国内外研究报道，番茄外植体离体培养受到
激素及基因型［１］的影响，在相同的培养基上不同基因型
的番茄生长状态存在差异［２－４］。也有研究发现，番茄外
植体的选择与再生体系的建立也存在着密切的关系［５］。
为了使番茄植株再生体系得到进一步的优化，该研究以
“粉桃”、“春秀”、“中蔬四号”、“齐研矮粉”、“红润”为试
材，选取番茄子叶为外植体，系统地研究了供体基因型
以及植物激素浓度配比对番茄再生体系的影响，以期建
立一套优化的组织培养和再生体系，为进一步的番茄基
因工程提供技术参考。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
以番茄基因型“粉桃”、“春秀”、“中蔬四号”、“
齐研矮
［５］ 魏国芹，戴洪义，孙玉刚，等．榅桲离体培养繁殖的研究［Ｊ］．山东农业
科学，２０１０（１）：５－９．
［６］ 秦伟，韩晶，马生军，等．榅桲子叶不定芽再生研究初报［Ｊ］．新疆农业
大学学报，２００８，３１（５）：２８－３０．
［７］ 徐凌飞，刘亚杰，李慧，等．梨矮化砧木云南榅桲硬枝扦插繁殖试验
［Ｊ］．北方园艺，２０１１（１７）：５４－５５．
［８］ 李浚明．植物组织培养教程［Ｍ］．北京：中国农业大学出版社，２００２．
［９］ 李云，田砚亭，钱永强，等．ＮＡＡ和ＩＢＡ对四倍体刺槐试管苗生根影
响及不定根发育过程解剖观察［Ｊ］．林业科学，２００４，４０（３）：７５－７９．
Ｓｔｕｄｙ ｏｎｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｑｕｉｎｃｅ ａｓ ａ Ｄｗａｒｆ Ｒｏｏｔｓｔｏｃｋ ｏｆ Ｐｅａｒ
ＸＵ Ｌｉｎｇ－ｆｅｉ，ＬＩ Ｚｈｉ－ｈｕｉ，ＪＩＡ Ｄｏｎｇ－ｆｅｎｇ，ＬＩ Ｈｕｉ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ ７１２１００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｔｅｍ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｘｉｌａｒｙ ｂｕｄｓ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ ｑｕｉｎｃｅ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｓｈｏｏｔ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ
０．３ｍｇ／Ｌ ｏｒ ＭＳ＋６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ／Ｌ，ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ３．６５ａｎｄ ３．５８，ａｎｄ ｔｈｅ ｎｅｗ ｓｈｏｏｔ ｗａｓ
ｓｔｒｏｎｇ．Ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ １／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．３ｍｇ／Ｌ．Ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｗａｓ ９２％ ｗｈｅｎ ｒｏｏｔｉｎｇ
ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｉｎ ｓｏｉｌ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｐｅａｒ；ｄｗａｒｆ ｒｏｏｔｓｔｏｃｋ；Ｙｕｎｎａｎ ｑｕｉｎｃｅ；ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
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