全 文 :激钙流 , 使细胞内钙离子的摄取明显增加 [ 7] , 对其诱导的血小
板聚集的抑制提示血竭 、包合血竭与复方活化血竭有可能影响
了由 PAF引起的细胞摄钙量的增加 ,抑制了钙内流;可见血竭 、
包合血竭与复方活化血竭是一种多环节多途径的血小板活化
抑制剂。
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淡豆豉与黑大豆降糖作用比较*
葛喜珍 ,葛喜亮 1 ,林 强 ,张 静 2
(北京联合大学生物化学工程学院 ,北京 100023;1河北辛集市第一医院 , 辛集 052300;
2北京化工大学生命科学与技术学院 ,北京 100029)
摘 要 目的:探讨淡豆豉和黑大豆对糖尿病小鼠的降糖作用。方法:淡豆豉和黑大豆用醇回流法提取。四氧嘧啶腹腔注射
建立糖尿病小鼠模型 ,正常组和模型组灌胃自来水 , 大豆异黄酮组(55mg/kg.d)、黑大豆组(18.5g生药 /kg.d)、淡豆豉组(18.5g生
药 /kg.d)连续灌胃 21天 ,取血清测定生化指标。结果:与正常组相比 , 模型组血糖 、果糖胺 、游离脂肪酸 、MDA明显升高 , pH、SOD
明显降低。与模型组相比 , 淡豆豉组 MDA、血糖和果糖胺明显降低 , SOD明显升高;黑大豆组 MDA显著降低 , SOD明显升高;各组
pH值明显升高 。结论:淡豆豉对糖尿病小鼠有降糖和抗氧化作用 , 黑大豆降糖作用不明显。
关键词 淡豆豉;黑大豆;大豆异黄酮;血糖;果糖胺
流行病学调查和实验研究证明 , 大豆制品具有抗癌 、防治
骨质疏松 、改善妇女更年期症状 、防止脂质过氧化 、预防糖尿病
等多方面的生理功能 ,主要有效成分是大豆异黄酮 [ 1] 。淡豆豉
是黑大豆的成熟种子经蒸罨 , 与桑叶 、鲜青蒿或苏叶 、麻黄等辅
料发酵而成 , 为解表药 , 可解表 、除烦。 前期研究表明淡豆豉有
一定的降糖作用 [ 2] 。本研究以大豆异黄酮为对照 , 探讨淡豆豉
及其制备原料黑大豆的降糖作用。
1 材料和方法
1.1 试验药物 黑大豆 、淡豆豉购自河北安国长安药材加工
厂 , 经联合大学生物化学工程学院制药工程教研组鉴定为正
品。大豆异黄酮购自华北制药股份有限公司 , 纯度为 40%。分
别取淡豆豉 、黑大豆粉碎 , 称取 200g碎末 , 加入 600ml80%乙
醇 , 于 80℃水浴回流提取 3次 ,每次 2小时 , 提取液浓缩 、冷冻
干燥 , 得浸膏。 1g淡豆豉浸膏相当于 14.29g生药 , 1g黑大豆浸
膏相当于 15.57g生药。
1.2 动物 20 ~ 30g雄性昆明种小鼠 ,由军事医学科学院实
验动物中心提供 , 动物合格证号:医动字第 scsk-(军)2002-001
号。普通饲料常规喂养参加试验。
1.3 试剂 四氧嘧啶 sigma公司 , 分装。果糖胺测定试剂盒
(NBT-显色法), 上海名典生物技术有限公司出品。血糖测定试
剂盒(GOD-PAP法),上海荣盛生物技术有限公司出品。游离脂
肪酸(FFA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.4 仪器 全自动酶标仪:热电(上海)仪器有限公司;稳步血
糖仪:美国强生;TU-1810PC紫外可见分光光度计:北京普析通
用仪器有限责任公司;pH计:pHS-3C型 , 上海三信仪表厂。
1.5 方法 70只小鼠禁食 12小时 , 2%四氧嘧啶生理盐水溶
液腹腔注射 180mg/kg, 72h后空腹尾尖取血 , 血糖仪测血糖 , 血
糖值小于 10mmol/L的小鼠再次注射 180mg/kg四氧嘧啶。 72h
后筛选血糖值大于 10mmol/L的小鼠入选糖尿病模型 , 随机分
成 4组 , 每组 12只 , 分别为模型组 、淡豆豉 、黑大豆和大豆异黄
酮组 , 另取 12只正常小鼠为正常组。治疗组分别每日灌胃淡豆
豉提取物(18.5g生药 /kg)、黑大豆提取物(18.5g生药 /kg)、大
76 中药药理与临床 2008;24(3)
* 基金项目:北京市教育委员会科技发展计划资助项目(KM200611417013);北京联合大学生物化学工程学院生物化工重点建设学科项目
(0650411、 0660415)
DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2008.03.031
豆异黄酮(55mg/kg)连续 21天 , 观察小鼠一般状况 , 记录小鼠
进食量 、饮水量。实验结束时 ,所有小鼠禁食 24小时 ,断头取血
处死小鼠 , 留取血清用于相关指标测定。
2 结果
2.1 血糖和果糖胺含量的变化 与正常组相比 , 模型组血
糖明显升高 , 果糖胺也显著升高。与模型组相比 , 淡豆豉组血糖
和果糖胺明显降低 , 黑大豆组血糖 、果糖胺无明显变化;大豆异
黄酮组血糖和果糖胺明显降低 ,见表 1。
表 1 各组小鼠血糖和果糖胺含量的变化( x±s)
组别 鼠数(只)
血糖
(mmol/L)
果糖胺
(mmol/L)
正常对照 12 7.90±2.73** 1.42±0.19**
模型对照 8 23.81±3.90 2.12±0.57
淡豆豉 9 15.51±3.94** 1.51±0.46*
黑大豆 10 21.50±3.96 1.81±0.55
大豆异黄酮 10 12.51±4.24** 1.54±0.29**
与模型组比较 *P<0.05, ** P<0.01(下同)
2.2 血清中游离脂肪酸(FAA)和 pH值的变化 与正常组
相比 , 模型组游离脂肪酸(FAA)显著升高 , pH值显著降低。与
模型组相比 , 各治疗组 pH值明显升高;大豆异黄酮组游离脂肪
酸明显降低 , 其余各组游离脂肪酸变化不明显 , 见表 2。
表 2 各组小鼠血清中游离脂肪酸(FAA)和 pH值变化( x±s)
组别 鼠数(只) pH值
游离脂肪酸(FAA)
(mmol/L)
正常对照 12 7.01±0.11** 0.61±0.14**
模型对照 8 6.52±0.17 1.13±0.27
淡豆豉 9 7.09±0.23** 0.99±0.35
黑大豆 10 7.00±0.32** 1.10±0.21
大豆异黄酮 10 7.25±0.38** 0.85±0.18*
2.3 血清 SOD和 MDA含量的变化 与正常组相比 , 模型组
SOD活性明显降低 、MDA显著增加。与模型组相比 , 各治疗组
SOD活性明显升高 , MDA明显降低 , 见表 3。
表 3 血清 MDA、SOD活性变化( x±s)
组别 鼠数(只)
SOD
(NU/ml)
MDA
(μM/L)
正常对照 12 137.44±14.14** 3.26±0.14**
模型对照 8 72.37±9.35 7.68±0.82
淡豆豉 9 95.84±5.20** 5.78±0.64**
黑大豆 10 99.14±3.96 ** 6.07±0.99*
大豆异黄酮 10 123.21±10.23** 5.56±0.68**
3 讨论
胰岛素活性与体液 pH值有关 , pH值上升 0.1, 胰岛素的
活性上升 30%, pH下降则糖的利用率降低 [ 3] , 淡豆豉 、黑大豆
和大豆异黄酮均能有效调节小鼠体液酸碱平衡 , 提示上述各组
均能提高胰岛素的活性 ,对糖尿病小鼠降糖是有益的。本研究
表明 , 糖尿病小鼠 FFA水平明显增高 , 给药后 ,大豆异黄酮组小
鼠 FFA水平降低 , 因 FFA水平增高可使胰岛素抵抗敏感性增
加 [ 4] , 说明大豆异黄酮对胰岛素抵抗有较好的调整作用 , 其他
各组效果不明显。
本文结果表明 ,治疗组血糖有不同程度降低 , 但小鼠血糖降
低幅度存在差异 ,大豆异黄酮降血糖作用最明显 , 其次为淡豆豉
和黑大豆。在控制果糖胺方面淡豆豉和大豆异黄酮作用较显
著。前期体外试验证明 [ 5] , 大豆及其有效成分大豆异黄酮能抑
制蛋白非酶糖化 ,推测抑制果糖胺形成的主要成分可能与大豆
异黄酮有关。
综上述 ,在降糖 、降低游离脂肪酸和抗氧化方面 , 大豆异黄
酮组均表现出较好作用 ,淡豆豉组次之 , 黑大豆有一定抗氧化作
用 ,但降糖作用不明显。近年来由于大豆异黄酮的作用显著已
引起国际营养学界的高度重视 [ 6] ,从豆类植物中寻找缓解糖尿
病的功能性食品具有重要意义。我国产大豆中异黄酮含量一般
为 1.2 ~ 2.5%, 推测豆类疗效欠佳的原因可能是实验所选择的
豆类剂量远不及单独使用大豆异黄酮而致。
本研究所用淡豆豉是黑大豆的种子经蒸罨 ,与桑叶 、鲜青蒿
发酵而成 ,黑大豆加辅料经生物转化后所形成的淡豆豉相当于
一个复方 ,其化学成分会发生变化 , 进而导致疗效的差异。淡豆
豉化学成分比较复杂 , 有学者报道豆豉多糖为降糖有效成
分 [ 7] , 也有推测淡豆豉的有效成分主要是大豆异黄酮 [ 2] 。目前
尚未见对淡豆豉化学成分进行系统分析的报道 , 可能多糖和大
豆异黄酮均为有效成分 ,哪个成分更重要有待于进一步研究。
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