全 文 ：第 25卷　第 4期
2008 年 12月
河　 北　省　科　学　院　学 　报
Journal o f the Hebei Academy o f Sciences
Vo l.25 No.4
Dec.2008
＊
文章编号:1001-9383(2008)04-0052-03
凤尾草提取物的抗肿瘤活性的研究
王　刚 ,张利敏
(河北化工医药职业技术学院制药系 ,河北石家庄　050031)
摘 要:采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法测定凤尾草提取物的抗肿瘤活性 、胸腺指数和脾指数 , 并采用 MTT 法
测定了凤尾草提取物对小鼠脾细胞的增殖活性。 结果显示凤尾草提取物对移植性肿瘤(肉瘤 S180和肝癌
H22)具有显著的抑制作用 , 可提高胸腺指数和脾指数 , 对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用 , 并有较好的剂量
依赖关系 ,表明中药凤尾草有可能是通过增强机体的免疫能力来实现其抗肿瘤活性的。
关键词:凤尾草提取物;抗肿瘤活性;脾细胞;免疫能力
中图分类号:R 285 文献标识码:A
Study of the extractive from Pteris multi f ida Poir on anti-tumor activity
WANGGang ZHANG Li-min
(Depar tment of Pharmaceu tical E ngineer ing , H ebei Chemica l&Pharmaceut ical
Vocat ional Tech no logy Col lege , Sh i j iazhuang Hebei　050031 , China)
Abstract:To study the ant i-tumo r act ivity of the ex t ractive f rom P teris mult i f ida Poir .S180 and H22
were t reated in vivo on KM mice by the ex tractive for ten day s.The activi ty of mice spleen cells of
pro li feration w as detected by M TT me thod.The resul t show ed that the ex tractive had obvious anti-
tumo r activity on KM mice S180 and H 22 , meanwhile could markedly stimulate m ice splenocyte prolifer-
a tion and had signif icant dose-dependent relat ionship.Our resul ts indicate that the ext ract ive f rom
Pteris mult i f ida Poir can realize it s ant i-tumo r act ivity by promo ting immune competenc of body .
Keywords:The ext ractive f rom Pteris mul ti f ida Poir; Anti-tumo r act ivity ;Spleen cells;
Immune competenc
凤尾草(Pteris mul ti f ida Poir)为凤尾属蕨
类植物 ,现代药理研究表明凤尾草具有清热利湿 、
抗菌消炎 、消肿止痛 ,其根茎用于治疗糖尿病 、抗
肿瘤效佳[ 1] 。我国常把凤尾草与其他中草药制成
配方 ,治疗肝炎和各种癌症如食管癌 、直肠癌和妇
科肿瘤等[ 2] ,但其单味药的抗肿瘤作用及其作用
机制尚不清楚。作者以凤尾草的提取物进行了体
内抗肿瘤的实验 ,并观察了其对脾细胞的作用 ,以
期了解 、确定单味中药凤尾草的抗癌作用及对机
体免疫功能的影响。
1　材料与方法
(1)凤尾草:购自河北中医学院 ,经由河北化
药学院中药教研室鉴定确认。
(2)实验动物:昆明小鼠 ,体重量 18-22g ,合
格证号冀动字 07056号 ,由河北医科大学实验动
物中心提供。试验期间饲以该中心提供的饲料 ,
自由饮水 。
(3)肿瘤细胞株:小鼠肉瘤(S180)和小鼠肝癌
(H 22)由河北医科大学第四医院科研中心提供。
＊收稿日期:2008-11-10
作者简介:王刚(1969-),男 ,石家庄人 ,硕士 ,副教授 ,主要从事中药抗肿瘤成分的研究.
DOI :10.16191/j.cnki.hbkx.2008.04.009
第 4 期 王　刚等:凤尾草提取物的抗肿瘤活性的研究
(4)试剂和仪器:环磷酰胺为沈阳药学院制药
厂生产 ,批号 030701;M TT 为 sigma 公司产品 ,
由石家庄拜昂生物技术有限公司分装 ,批号 M -
2128;旋 转 薄 膜蒸 发 仪 , Heizbad WB No.
050106926;CO2 恒温培养箱:美国 SHELDON 生
产型号:TC2323;搏塞酶标仪为奥地利 Anthos
labtec Instruments 公司生产 , 型号:Biocell ht2
型;倒置相差显微镜:日本 OLYMPUS 生产 ,型
号:SCR20B 型 。培养板为美国 Costar 公司产
品。SW-CJ-IF 净化工作台:苏静集团苏州安泰空
气技术有限公司生产 。
2　实验方法
2.1　凤尾草醇提液(P teris mult i f ida Poir ex-
t ract by ethanol , PME)的制备
凤尾草干品经 95 %乙醇浸泡 15天后 ,减压
浓缩制备 ,得到 PME。
2.2　凤尾草对 S180和 H22的抑瘤活性的影响[ 3]
取昆明种小鼠 150只 ,18-22g ,雌雄各半 ,在
无菌条件下 ,将生长良好的S180和 H 22瘤细胞配制
成 1∶3悬液接种于右前肢腋下 ,随机分为 15组 ,
每组 10只 。凤尾草提取物组分 40.0 、80.0 、160.
0mg/kg 3个剂量灌胃给药;环磷酰胺组腹腔注射
30mg/kg · d;空白对照组灌胃给与等容积水
(20ml/kg),每日给药 1次 ,连续10天 。第 11天 ,
处死小鼠 ,剥取瘤块称重量 ,比较各组瘤重量并计
算肿瘤抑制率 。
公式:肿瘤抑制率(%)=(C-T)/C＊100%
注:式中 C 为对照组平均瘤重量 , T 为给药
组平均瘤重量 。
2.3　胸腺指数及脾指数测定
脱颈处死小鼠 ,摘取胸腺及脾脏 ,经生理盐水
洗涤后用滤纸吸干称重 ,计算胸腺指数和脾指数。
胸腺指数=胸腺重量(mg)/ 体重(g)
脾指数=脾重量(mg)/ 体重(g)
2.4　体外脾细胞增殖试验
按照 MT T 法 ,将小鼠脾细胞(1×105/ml)接
种到 96孔细胞培养板上 ,加入不同浓度的凤尾草
提取物 ,均设 3复孔 ,设空白对照组 、ConA 组和
给药组。在 37℃、5%CO 2 饱和湿度的培养箱中
培养 72h , 在结束培养前 4h , 加入 5mg/ml 的
MTT ,继续培养 4h 后 ,加入二甲基亚砜(DMSO)
200μl ,振荡 ,用酶标仪测定 OD570值 ,比较各给药
组与空白对照组差异的显著性 。
3　结果
3.1　凤尾草提取物对小鼠移植性肿瘤 S180 、H22
的抑制作用
结果如表 1 所示 ,用凤尾草提取物高 、中 、低
表 1　凤尾草提取物对移植性肉瘤 S180和肝癌 H22的影响
组别 n 剂量(mg/kg)
S180 H22
瘤重(g) 抑瘤率(%) 瘤重(g) 抑瘤率(%)
空白对照 20 0 1.82±0.31 0 2.78±0.79 0
环磷酰胺 20 30.0 0.34±0.07＊＊ 81.53±2.27 0.28±0.18 ＊＊ 90.27±3.17
低剂量 20 40.0 1.10±0.08＊＊ 39.37±2.96 1.92±0.14 ＊ 30.94±2.67
中剂量 20 80.0 0.99±0.13＊＊ 45.57±4.38 1.74±0.19 ＊＊ 37.45±3.05
高剂量 20 160.0 0.86±0.06＊＊ 52.81±2.00 1.51±0.24 ＊＊ 46.08±4.17
剂量连续给药 10天 ,对小鼠 S180 、H 22的生长有显
著抑制作用 ,抑瘤率分别为 52.81%、45.57%、
39.37%和 46.08%、37.45%、30.94%,且不同剂
量组的不同肿瘤的瘤重与对照组相比均有显著性
差异(P<0.05)。
3.2　凤尾草提取物对小鼠胸腺指数和脾指数的
作用
结果如表 2所示 ,凤尾草提取物高 、中 、低剂
量连续给药 10天 ,对小鼠胸腺指数和脾指数有提
高作用 ,小鼠胸腺指数分别为 3.49 、3.71 、2.37和
1.28 、1.45 、1.38 ,且中 、高剂量组与对照组相比均
有显著性差异(P<0.05)。
53
河北省科学院学报 2008 年第 25卷
表 2　凤尾草提取物对小鼠胸腺指数和脾指数的影响
组别 剂量(mg/ kg) 胸腺指数 脾指数
空白对照 0 2.65±0.36 1.23±0.06
低剂量 40.0 2.37±0.56 1.38±0.07＊
中剂量 80.0 3.71±0.35＊ 1.45±0.09＊
高剂量 160.0 3.49±0.08＊ 1.38±0.10＊
3.3　凤尾草提取物对小鼠脾细胞增殖的影响
结果如图 1 所示 ,凤尾草提取物 10mg/ml和
5mg/ml组和空白对照组相比 ,对小鼠脾细胞增
殖有显著的影响 ,2.5mg/ml和 1.25mg/ml组中
对小鼠脾细胞增殖也有影响 ,说明凤尾草提取物
对小鼠脾细胞的增殖有促进作用 ,并呈剂量依赖
关系 。
图 1　凤尾草提取物对小鼠脾细胞增殖的影响
4　讨论
凤尾草在临床上是一种较常用的抗癌组方药
物 ,被广泛用于治食管癌 、直肠癌和妇科肿瘤 ,但
其单味药是否具有抗肿瘤作用及作用机制尚不清
楚[ 4] 。本研究通过对小鼠移植性肿瘤的体内实验
观察了凤尾草提取物对小鼠肉瘤(S180)和小鼠肝
癌(H22)的抑制作用 、对小鼠胸腺指数和脾指数
的作用 ,通过体外细胞培养的方法观察了凤尾草
提取物对小鼠脾细胞增殖的影响 。结果表明:凤
尾草提取物对体内移植的小鼠肉瘤株(S180)和小
鼠肝癌细胞株(H 22)具有显著的抑制肿瘤增殖活
性 ,同时结果显示凤尾草提取物对小鼠胸腺指数
和脾指数有提高作用 ,在体外实验中对脾细胞增
殖有促进作用 ,因此推测凤尾草提取物有可能是
通过增强机体免疫力来实现其的抗肿瘤作用的。
参考文献:
[ 1] 　国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(第二册)
[ M ] .上海:上海科学技术出版社 , 1999.
[ 2] 　韦金育 ,李延 ,韦涛 ,等.50种广西常用中草药 、壮药抗肿瘤
作用的筛选研究[ J] .广西中医学院学报 , 2003 , 6(4):3-7.
[ 3] 　李延忠 ,孙晓波 等.北豆根化学成分及其药理作用研究进
展[ J ] .特产研究 , 1999 , 21(3):61-62.
[ 4] 　QIN Bo ,ZHU Da-Yuan , etal.ChemicalC onst ituen ts ofPter-
ismult ifida and Their In hibitory Ef fect s on Grow th of Rat
Pros tatic Epithelial C ell s in vit ro[ J] .C hinese Journal of
Natural Medicines , 2006 , 4(6):431.
54