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酸浆果实中游离氨基酸与EPA、DHA分析



全 文 :33-37.
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(收稿日期:2008-09-18)  
文章编号:1673-2995(2008)06-0314-03 ·论 著 ·
酸浆果实中游离氨基酸与 EPA、DHA分析
张 岚 1 ,郭伟伟 2 ,宋春梅 1 (1.吉林医药学院 ,吉林 吉林 132013;2.长春市产品质量监督检验院 ,吉林 长春
130012)
摘 要:目的 研究酸浆果实中部分游离氨基酸及不饱和脂肪酸的含量。方法 应用离子色谱仪分析游离氨
基酸成分 ,应用气相色谱法分析不饱和脂肪酸 EPA、DHA。结果 在所测定的 10种氨基酸中 ,亮氨酸含量最
高 ,为 4225.12 mg/kg,酪氨酸次之 , 324.67mg/kg,再次为半必需氨基酸精氨酸 , 302.24 mg/kg。不饱和脂肪酸
EPA、DHA的含量分别为 170 mg/kg和 150 mg/kg。结论 酸浆富含丰富的营养成分 ,是极具市场前景的功能
性食品及药品资源。
关 键 词:酸浆;游离氨基酸;不饱和脂肪酸
中图分类号:R154   文献标识码:A
AnalysisoffreeaminoacidandEPA, DHAinthefruitofPhysalisalpepengi
var.francheti
ZHANGLan1 , GUOWei-wei2 , SONGChun-mei1 (1.JilinMedicalColege, JilinCity, JilinProvince, 132013;2.The
CourtyardofProductQualitySurveilanceExaminesinChangchun, Changchun, JilinProvince, 130012, China)
Abstract:Objective Tostudythecontentsofthepartialfreeaminoacidandunsaturatedfatyacidinthefruitof
Physalisalpepengivar.francheti.Methods ThepartialfreeaminoacidwasanalyzedbyIonchromatography, unsatu-
ratedfatyacidEPAandDHAwereanalyzedbyGCtechnique.Results In10kindsofdeterminedaminoacid, the
contentofleucinewashighest, 4225.12 mg/kg, thecontentoftyrosinetookthesecondplace, 324.67mg/kg, andthe
contentofhalfessentialaminoacidargininetookthethirdplace, 302.24mg/kg.UnsaturatedfatyacidEPAandDHA
contentrespectivelywas170 mg/kgand150 mg/kg.Conclusion Physalisalpepengivar.franchetwasfulofnutri-
tioningredients.Itwasabletoconsideredasanimportantfunctionalityfoodandthedrugresourceswithgoodmarket
prospect.
Keywords:Physalisalpepengivar.francheti;freeaminoacid;unsaturatedfatyacid
  酸浆(Physalisalpepengivar.franchet)为茄科酸
浆属多年生草本植物 ,别称红姑娘 、挂金灯 、锦灯笼
作者简介:张 岚(1980-),女(汉族),助教 ,硕士.
等 。我国许多地区都有分布 ,它的野生性状很强 ,适
于各种土壤载培。酸浆的形态为完整的宿萼膨胀如
具五角的阔卵形囊状物 ,长 3 ~ 4 cm,直径 2 ~ 3 cm,
橙红色至朱红色 ,有时中 、上部较浅 ,表面具网状脉 ,
—314— 第 29卷 第 6期2008年 12月   吉 林 医 药 学 院 学 报Journal of Jilin Medical Colege  Vol.29 No.6Dec.2008   
几无毛 ,体轻 ,薄革质[ 1] 。性味甘 、酸 、寒 ,是《中华人
民共和国药典》(2005版)收录的常用中药 ,该药具有
清热解毒 、利咽化痰 、利尿等作用 ,用于咽痛 、音哑 、痰
热咳嗽 、小便不利;外治天疱疮 、湿疹[ 2] 。酸浆果实
中含有人体需要的多种营养成分 ,其中蛋白质 、脂肪 、
纤维素 、胡萝卜素 、矿质元素含量均较高 [ 3] 。酸浆营
养成分丰富 ,是药食兼用的植物 。
为了更好地了解酸浆的营养成分 ,本实验着重研
究了酸浆果实中部分游离氨基酸及不饱和脂肪酸的
含量 ,并为酸浆的进一步开发利用提供依据。游离氨
基酸的测定方法采用离子色谱法 ,该方法测定氨基酸
具有用量少 ,无衍生化误差 ,操作简单等优点 [ 4] 。不
饱和脂肪酸二十碳五稀酸(EPA)、二十二碳六稀酸
(DHA)的测定采用气相色谱法 。
1 材料与方法
1.1 材料 、仪器设备及试剂
  供试材料来源于吉林市抚松县。
离子色谱仪 (型号 ICS-3000,美国戴安);玻璃
柱 ,高 20 cm,内径 2cm;组织捣碎机;离心机;电子天
平;真空干燥器;GC14C气相色谱仪(日本岛津);旋
涡式震荡混合器;旋转蒸发仪。
阳离子交换树脂 , Dowex50W×4型 , 100 ~ 200
目;盐酸;氢氧化铵;氨基酸混合溶液标准物质 (产
地:国家标准物质中心);仪器分析用流动相:氢氧化
钠 、醋酸钠;仪器分析用茚三铜试剂 。正己烷(分析
纯),重蒸;甲醇(优级纯);盐酸(分析纯)、氯化钠 、浓
硫酸。
EPA、DHA标准溶液:精密称取 EPA、DHA各
50.0mg,加入正己烷溶解并定容至 100 ml,此溶液含
EPA和 DHA各 0.50mg/ml。全部试剂均为分析纯 ,
文中所提及用水均为超纯水(20℃ 18.2 MΨ·cm)。
1.2 一般营养成分分析
  常压干燥法测定水分;凯氏定氮法测定蛋白质;
索氏抽提法测定脂肪;铁氰化钾滴定法测定总糖;容
量法测定粗纤维;灼烧重量法测定灰分。
1.3 游离氨基酸分析
  称取酸浆样品 100 ~ 150 g,准确至 0.01 g,置于
捣碎机中 ,加入等量的水捣碎 1min,将已捣碎的样液
过滤 ,吸取 10 ml滤液放入离心管中 ,在 4 000 r/min
的转速下离心 15min。进行乙醇处理 ,准确吸取样液
5 ml,加入 96%乙醇 34 ml,过滤 ,用 80%乙醇 15 ml
分 3次冲洗滤纸 ,将滤液在 35℃下减压蒸馏。
固定柱的装置:将树脂装入玻璃柱中 ,离上端空
出约 10cm,用 6 mol/L盐酸 250ml活化树脂 ,然后用
水洗至无氯离子为止(用硝酸银检查 ,不产生白色沉
淀)。调节活塞 ,使溶液流速为 1 ml/min。
固定及洗脱:吸取 5 ml样液 ,置玻璃柱内 ,再加
5 ml水 ,待液体通过树脂后再加 2 mol/L氢氧化铵
50 ml,可分 3 ~ 4次加完 ,用 50 ml水洗涤 。
将加 2mol/L氢氧化铵流出的溶液收集在圆底
烧瓶内 ,在减压真空和加热条件(40 ~ 45℃)下蒸发
至干;用 0.1mol/L盐酸 5ml溶解。
脱氨:吸取待测液 1 ml,加入 3.5 mol/L氢氧化
钠溶液 2 ~ 3滴 ,调至 pH值 10 ~ 11,放在真空干燥器
内减压蒸干;用 1 ml水洗涤 ,再抽真空蒸干 。这样重
复 2次 ,使 pH值达到 10 ~ 11,再稀释 5 ~ 10倍后测
定 。
用离子色谱仪测定氨基酸含量 ,测定前需做 2 ~
3个氨基酸标样 ,待仪器稳定后再测试样 。
1.4 EPA、DHA分析
用蒸馏水冲洗干净晾干 ,用组织捣碎机捣碎 、混
匀 ,备用 。
1.4.1 皂 化
称取样品 1 g于 50ml具塞容量瓶中 ,加入 10ml
正己烷轻摇使油脂溶解 ,并用正己烷定容至刻度 ,吸
取此溶液 5.00ml于另一 10 ml具塞比色管中 ,再加
入 2mol/L氢氧化钠 -甲醇溶液 1ml,充分震荡 10min
后放入 60℃的水浴中加热 1 ~ 2min,皂化完成后 ,冷
却至室温 ,待甲酯化用 。
1.4.2 甲酯化
标准溶液系列:准确吸取 EPA、DHA标准溶液
1.0、2.0、5.0 ml分别移入 10 ml具塞比色管中 ,再加
入 2 mol/L盐酸 -甲醇溶液 2ml,充分震荡 10 min,并
于 50℃的水浴中加热 2 min,进行甲酯化 ,弃去下层
液体 ,再加约 2 ml蒸馏水洗净并去除水层 ,用滴管吸
出正己烷层 ,移至另一装有无水硫酸钠的漏斗中脱
水 ,将脱水后的溶液在 70℃水浴上加热浓缩 ,定容至
1 ml,待上机测试用。此标准系列中 EPA或 DHA的
浓度依次为 0.5、1.0、2.5 mg/ml。
样品溶液:在经皂化处理后的样品溶液中加入
2 mol/L盐酸-甲醇溶液 2 ml,充分震荡 10 min,并于
50℃的水浴中加热 2 min,进行甲酯化 ,弃去下层液
体 ,再加约 2ml蒸馏水洗净并去除水层 ,用滴管吸出
正己烷层 ,移至另一装有无水硫酸钠的漏斗中脱水 ,
—315—第 6期 张 岚 ,等.酸浆果实中游离氨基酸与 EPA、DHA分析
将脱水后的溶液在 70℃水浴上加热浓缩 ,定容至
1 ml,待上机测试用 。
气相色谱测定条件:色谱柱为 1 m×4 mm(id),
填充涂有 10%DEGS/ChromosorbW DMCS80 ~ 100
目的担体;氮气 50 ml/min, 氢气 70 ml/min, 空气
100ml/min;柱温 185℃、进样口 210℃、检 测器
210℃。
2 结 果
  酸浆果实一般营养素测定结果(g/100g):水分
76.2,蛋白质 5.24,脂肪 1.13, 总糖 7.39, 粗纤维
2.96,灰分 0.97。
氨基酸混合溶液标准物质浓度见表 1,酸浆果实
中游离氨基酸组成成分及含量 (mg/kg):精氨酸
302.24,苯丙氨酸 10.81,赖氨酸 135.43, 天冬氨酸
2.84,缬氨酸 120.17,胱氨酸 1.66,亮氨酸 4225.12,
酪氨酸 324.67,组氨酸 102.89(见图 1)。
酸浆果实中 DHA、EPA的含量分别为 170 mg/kg
和 150mg/kg(分析见图 2)。
表 1 氨基酸混合溶液标准物质浓度(mmol/l)
氨基酸 标准值 不确定度
精氨酸 0.88 0.03
  盐酸赖氨酸 0.70 0.02
缬氨酸 1.15 0.04
亮氨酸 1.25 0.04
组氨酸 1.01 0.04
 苯丙氨酸 0.97 0.03
 天冬氨酸 0.99 0.03
胱氨酸 0.96 0.04
酪氨酸 0.89 0.03
图 1 酸浆果实中氨基酸离子色谱图
图 2 酸浆果实中 DHA、EPA气相色谱图
3 讨 论
  结果表明 ,酸浆果实具有丰富的营养成分 ,其中
蛋白质 、脂肪 、纤维素含量均较高。在所测定的游离
氨基酸中 , 必需 氨基 酸亮氨 酸含 量最 高 , 为
4225.12 mg/kg,占蛋白质总量的 11.7%;酪氨酸次
之 ,为 324.67 mg/kg;再次为半必需氨基酸精氨酸 ,
为 302.24 mg/kg。色氨酸在酸水解的时候被破坏 ,所
以含量在表中没有显示 。
不饱和脂肪酸 EPA、DHA的含量分别为 170mg/
kg和 150 mg/kg,分别占酸浆果实脂肪的 1.5%和
1.33%。
因此 ,酸浆是一种极具市场前景的功能性食品及
药品资源 。
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(收稿日期:2008-09-18)  
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