全 文 ：　　收稿日期：２０１４－１１－３０
　　基金项目：郑州重点科技攻关项目（２０１２ＺＺＫＪ００６）；河南省重大科技专项基金资助项目（１２１１００１１１０００）；郑州牧专博士启动基金资助项目
（２００９ＤＦ００３）
　　作者简介：赵凯科（１９８９－），男，硕士研究生。
＊通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｔｙ２００８＠１２６．ｃｏｍ
葎草醇提物对小鼠细菌性腹泻的治疗作用
赵凯科１，韩军艳１，郑　立２，刘太宇２＊　（１．河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州４５００００；２．河南牧业经济学
院，河南 郑州４５００００）
摘要：探讨葎草醇提物对金黄色葡萄球菌所致小鼠腹泻的治疗作用。金黄色葡萄球菌灌胃法制作小鼠腹泻模型，
通过观察小鼠精神变化、体质量变化、ＤＡＩ评分以及小肠病理切片变化的情况，评价葎草醇提物对小鼠的抗腹泻作
用。高剂量治疗组与模型组相比，对小鼠精神恢复、体质量变化以及小肠绒毛恢复等均有明显的作用，高剂量组的
治疗效果接近阳性对照组；高剂量治疗组和阳性对照组相对模型组体质量下降趋势明显降低，差异显著（Ｐ＜
０．０５）；与空白组相比，模型组ＤＡＩ评分明显增加，差异显著（Ｐ＜０．０５）相对于模型组，高剂量组ＤＡＩ、阳性治疗组
ＤＡＩ的评分明显降低，与空白组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５），治疗效果显著，而中、低剂组ＤＡＩ评分结果与空白组
相比差异显著（Ｐ＜０．０５），治疗效果不明显。病理组织学观察，空白组小鼠小肠绒毛排列整齐，各层次结构清晰，绒
毛间质无水肿、无小血管扩张充血，而模型组小鼠小肠绒毛排列紊乱，大部分绒毛脱落，绒毛表面有炎性渗出，绒毛
间质水肿，小血管扩张、充盈。高剂量组和阳性对照组与模型组相比症状明显改变，小肠绒毛排列整齐，绒毛表面
炎性渗出大部分消失，绒毛间质无明显水肿、无小血管扩张、充血，小肠结构与正常组织大致相同，治疗效果明显。
葎草醇提物对小鼠腹泻有明显的治疗效果，可为细菌性腹泻的治疗提供理论依据。
关键词：葎草醇提物；金黄色葡萄糖球菌；腹泻；小鼠
中图分类号：Ｓ８５９．３　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００５－４５４５（２０１５）１１－１８１４－０５
ＤＯＩ：１０．１６３０３／ｊ．ｃｎｋｉ．１００５－４５４５．２０１５．１１．１７
Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｈｕｍｕｌｕｓ　ｓｃａｎｄｅｎｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｏｆ
ｍｉｃｅ
　 ＺＨＡＯ　Ｋａｉ－ｋｅ１，ＨＡＮ　Ｊｕｎ－ｙａｎ１，ＺＨＥＮＧ　Ｌｉ　２，ＬＩＵ　Ｔａｉ－ｙｕ２＊　（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｖｅｔ－
ｅｒｉｎａｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　ａｎｄ　Ｅｃｏｎｏｍｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｈｕｍｕｌｕｓ　ｓｃａｎｄｅｎｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｉｎ－
ｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ　ｍｅｎｔａｌ　ｓｔａｔｅ，ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ，ｇｅｎｅｒａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ，
ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｄａｉｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｉｓｅａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ
ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｕｍｕｌｕｓ　ｓｃａｎｄｅｎｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｄｉａｒｒｈｅａ．
Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎｏｒｍａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｎ　ｍｅｔａｌ　ｓｔａｔｅ，ｂｏｄｙ
ｗｅｉｇｈｔ　ａｎｄ　ｓｍａｌ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｖｉｌｕｓ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ｉｔｓ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗａｓ　ｃｌｏｓｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ
ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ　ｄｅｃｌｉｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎ－
ｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｍａｒｋｌｙ　ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎｏｒ－
ｍａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ＤＩＡ　ｓｃｏｒｅ　ｍａｒｋｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｉｔｈ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｃｅ　ｗａｓ．Ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ＤＡＩ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｏｄｅｌ
ｇｒｏｐｕｐ，ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｅｆｆｅｃｔ　ｗａｓ　ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ；ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｍｉｄ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｄｏｅｓ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗｉｔｈ　ｎｏｒｍａｌ
ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ｉｄｅａｌ．Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ
４１８１ 　中 国 兽 医 学 报　２０１５年１１月　第３５卷　第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｓｃｉ　Ｎｏｖ．２０１５　Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１１　
ｎｏｒｍａｌ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｓｍａｌ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｖｉｌｕｓ　ｗｅｌ－ａｒｒａｎｇｅｄ，ｔｈｅ　ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｉｓ　ｃｌｅａｒ，
ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｍａｌ　ｖｅｓｓｅｌ　ｈｙｐｅｒｅｍｉａ　ａｎｄ　ｎｏ　ｖｉｌｏｕｓ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｅｄｅｍａ．Ｗｈｉｌｅ　ｓｍａｌ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｖｉｌｕｓ　ｏｆ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｅｄ，ｍｏｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｉｌｕｓ　ｆｅｌ　ｏｆｆ，ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｅｘｕｄａｔｉｏｎ　ｏｎ
ｔｈｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｏｆ　ｖｉｌｉ　ａｎｄ　ｖｉｌｏｕｓ　ｅｄｅｍａ　ａｎｄ　ｃｏｎｇｅｓｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｍａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｖｅｓｓｅｌｓ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ
ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｈｉｇｈｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｇｒｅａｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｃｅｌ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｅｘｕｄａ－
ｔｉｏｎ，ｅｄｅｍａ　ａｎｄ　ｃｏｎｇｅｓｔｉｏｎ．Ｈｕｍｕｌｕｓ　ｓｃａｎｄｅｎｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｄａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ
ｏｎ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｉｎ　ｍｉｃｅ，ｗｈｉｃｈ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｄｉａｒｒｈｅａ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｕｍｕｌｕｓ　ｓｃａｎｄｅｎｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ；Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ；ｄｉａｒｒｈｅａ；ｍｉｃｅ
＊Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｔｙ２００８＠１２６．ｃｏｍ
　　腹泻是许多疾病的一个共有临床特征，是严重
危害人类健康的全球性发病率和致死率较高的疾病
之一，对儿童危害极大，是造成儿童营养不良和生长
障碍的重要原因，也是造成畜禽幼仔死亡和生长缓
慢的主要原因［１］，严重危害我国养殖业的发展，因
此，腹泻病是我国重点防治的疾病之一。目前，临床
上多使用抗生素治疗腹泻，然而在动物中过度使用
抗生素引起的药物残留及细菌耐药性等问题，可通
过食物链传播给人，严重危害人类的健康。因此，寻
求新的药物治疗腹泻成为国内外研究的热点。
近年来研究发现，中草药可有效治疗腹泻，张永
国等［２］用小檗碱治疗小鼠分泌性腹泻，发现小檗碱
通过增强水钠的吸收可有效发挥治疗腹泻的作用；
张明发等［３］用半夏、射干、苍术等十多种中草药治疗
腹泻进行研究，结果表明都有较好的治疗效果。因
此，人们将新药研究的注意力转向了中草药。
野生葎草是一种传统的中草药，雌雄异体，在中
国东北部为一年生草本植物，在中国南部为多年生
桑科植物，通常又被称为拉拉秧、五爪龙、降龙草
等［４－５］。葎草具有清热、解毒、利尿、消瘀消肿、抗菌
消炎、抗骨质疏松、抗心率失常等功效，其主要成分
含有黄酮类（木犀草素、大波斯菊苷、７－葡萄糖苷）、
挥发油类、鞣质、树脂等［６］。目前，人们对于葎草的
化学成分及药用作用进行了深入的研究，葎草醇提
物可显著提高草鱼的生长参数；葎草被用来取代传
统饲料饲喂青年及怀孕的雷克斯兔，可显著提高
ＢＷ 和饲料效率［７］，但对于葎草治疗细菌性腹泻的
研究却鲜有报道。本试验对葎草醇提物不同剂量治
疗小鼠腹泻作用进行研究分析，探讨葎草醇提物不
同含量对小鼠腹泻治疗效果的影响，旨在为获得更
高效的治疗腹泻药物的葎草制剂及临床应用奠定基
础。
１　材料与方法
１．１　实验动物　ＳＰＦ小鼠，雄性，１１～１３周龄，（３０
±２）ｇ，由河南省实验动物中心提供。
１．２　主要试剂　金黄色葡萄球菌液：河南农业大学
微生物实验室提供；注射用氨苄西林钠（国药准字：
Ｈ１１０２０４７０）北京悦康凯悦制药有限公司；磷酸二氢
钠（Ｆ２００７１２０３）国药集团化学试剂有限公司；磷酸
氢二钠（Ｆ２００８０４１０）国药集团化学试剂有限公司；
甲醛（２０１３０４２８）国药集团化学试剂有限公司；３％过
氧化氢溶液；１％邻联甲苯胺冰醋酸；４％中性甲醛溶
液。
葎草醇提物的制备：自己收割葎草晾干，取干净
的晾干的葎草５ｇ，在７５％的乙醇浓度，料液比为１
∶２０，超声提取时间为５０ｍｉｎ，温度为５０℃进行超
声加热提取，用脱脂棉过滤得滤液，用旋转蒸发仪进
行浓缩至５０ｍＬ备用。以芦丁为标准品，用分光光
度计测得其中黄酮类物质含量３．４７％。
１．３　金黄色葡萄球菌致腹泻模型的建立　取ＳＰＦ
小鼠随机分为６组，每组１０只；设空白组、模型组、
阳性治疗对照组、葎草醇提物高、中、低剂量中药治
疗组。除空白组外，其余各组均用金黄色葡萄球菌
液（浓度为１×１０７　ＣＦＵ／ｍＬ）灌胃，每只０．３ｍＬ致
严重腹泻模型。攻毒２４ｈ后，空白组和模型组小鼠
灌以０．５４ｍＬ／只的生理盐水；阳性对照组灌以
０．５４ｍＬ／只的氨苄西林钠生理盐水（质量浓度为５０
ｇ／Ｌ）；葎草中药治疗组高、中、低剂量组分别灌以
０．６、０．４、０．２ｍｌ的葎草醇提物（黄酮含量３．４７％），
以上各组每隔１２ｈ给药１次。
１．４　小鼠一般状态的观察　每天下午４时观察各
组小鼠精神状态、采食量等变化，每天测量体质量并
记录数据、观察小鼠大便性状，对于大便，采用联苯
胺法检测大便潜血情况，并做记录。
１．５　疾病指数（ＤＡＩ）评分　将每天观察到的小鼠
５１８１　中 国 兽 医 学 报　２０１５年１１月　第３５卷　第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｓｃｉ　Ｎｏｖ．２０１５　Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１１　
体质量、大便性状和大便潜血情况，参照Ｃｏｏｐｅｒ　ＨＳ
进行评分［８］（表１），将体质量下降、大便性状和潜血
或血便情况的评分相加，得出每只小鼠的ＤＡＩ以评
估小鼠的疾病活动情况。
表１　ＤＡＩ评分
体质量下降／％ 大便性状 大便潜血／肉眼血便 计分
０
１～５
５～１０
１０～１５
＞１５
正常
松散
稀便
正常
潜血阳性
肉眼血便
０
１
２
３
４
　　＊正常大便：成型成颗粒状大便；松散大便：不粘附于肛门的糊
状、半成型大便；稀便：可粘附于肛门的稀水样粪便。
１．６　组织学指标观察　试验７２ｈ后对小鼠进行颈
椎脱臼处死，游离出十二指肠、空肠、回肠，肉眼观察
小肠浆膜层变化以及小肠周围组织的黏连情况，并
采取一段小肠沿肠系膜纵向剖开，用冷生理盐水冲
洗肠内容物后进行大体病理解剖学观察，剪取约１
ｃｍ病变部位的小肠，每只小鼠剪取部位相同，用
４％中性溶液充分固定后进行石蜡包埋，切片，ＨＥ
染色，光镜下观察病理切片组织学变化。
１．７　统计学分析　应用ＳＰＳＳ２０．０统计软件做数
据处理，所有数据均使用ｘ—±ｓ表示，采用Ｏｎｅ－Ｗａｙ
ＡＮＯＶＡ进行方差分析以及ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为
有统计学意义。
２　结果
２．１　小鼠精神及大便潜血情况　空白组小鼠精神
状态好，活动自如，反应灵敏，大小便正常，体质量增
加；其余各组小鼠攻毒２４ｈ后，精神萎靡，好卧懒
动，大便次数增加、饮食减少，个别小鼠甚至出现了
拒饮拒食的情况，体质量下降明显，粪便潜血试验结
果表明，大部分的小鼠在２４ｈ时都呈现出粪便潜血
检测阳性，模型组小鼠粪便经肉眼观察可见明显的
出血，其余组的小鼠有不同程度的粪便出血情况表
明造模成功。药物治疗后，阳性对照组和葎草醇提
物高、中剂量治疗组小鼠较模型组健康，低剂量治疗
组较之模型组无明显变化；随着给药时间的延长，阳
性对照组和高剂量治疗组小鼠精神好转明显，基本
恢复正常，粪便潜血试验已经呈现出阴性，食欲增
加，体质量下降较之模型组缓慢。
２．２　小鼠体质量变化情况　７２ｈ内各组小鼠体质
量变化见表２。从表２中可知，空白组小鼠体质量
呈上升趋势，模型组与低剂量治疗组小鼠体质量下
降最为严重，与空白组相比差异显著（Ｐ＜０．０５）；阳
性对照组和葎草醇提物高剂量治疗组小鼠体质量下
降较为缓和，与模型组相比，差异显著（Ｐ＜０．０５）。
高剂量治疗组较中、低剂量治疗组的治疗效果好。
表２　小鼠体质量记录表 ｇ
组　别 ０ｈ ２４ｈ ４８ｈ ７２ｈ
空白组 ３１．１±０．４２　 ３２．４±０．２８ｃ　 ３３．０±０．２８ｄ　 ３５．３±０．５６ｅ
模型组 ３０．３±０．７７　 ２７．８±０．５６ａ ２６．４±０．２８ａ ２４．１±０．９８ａ
阳性组 ３２．０±０．４２　 ３１．９±０．６３ｃ　 ３０．１±０．７７ｃ　 ３０．６±０．２１ｄ
低剂量组 ３１．３±０．４９　 ２９．０±０．４２ａｂ　 ２６．４±０．１４ａ ２４．９±０．９８ａ
中剂量组 ３１．５±０．３５　 ２９．７±１．１３ｂ　 ２８．０±０．９８ｂ　 ２６．３±０．２８ｂ
高剂量组 ３１．３±２．３３　 ２９．０±０．４２ａｂ　 ２８．６±１．４１ｂ　 ２７．２±０．２１ｃ
注：角标相同字母表示差异不显著（Ｐ＞０．０５）；不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）。下同
２．３　小鼠ＤＡＩ评分情况　对试验２４、４８、７２ｈ的小
鼠ＤＡＩ评分情况进行统计，统计结果见表３。模型
组与空白组ＤＡＩ得分比较差异显著（Ｐ＜０．０５），在
７２ｈ时模型组小鼠ＤＡＩ评分达到最高，说明小鼠疾
病情况处于加重状态。阳性对照组和高剂量治疗组
ＤＡＩ评分呈明显下降趋势，与空白组ＤＡＩ评分差异
不显著（Ｐ＞０．０５），说明治疗效果明显；低剂量组与
中剂量组ＤＡＩ评分结果跟空白组比较，ＤＡＩ评分差
异显著（Ｐ＜０．０５），说明低剂量组与中剂量组小鼠情
况严重，治疗效果不理想。
表３　小鼠ＤＡＩ评分情况统计表
组　别 ２４ｈ ４８ｈ ７２ｈ
空白组 ０．３３±０．５７ａ ０．３３±０．５７ａ ０．６７±０．５７ａ
模型组 ３．４±１．１５ｂ　 ４．３±０．５７ｂ　 ５．３±０．５７ｃ
阳性组 ３．４±１．１５ｂ　 ２．７±１．１５ｂ　 １．７±０．５７ａｂ
低剂量组 ３．６±１．５２ｂ　 ４．３±０．５７ｂ　 ４．７±１．１５ｃ
中剂量组 ２．７±１．１５ｂ　 ２．７±１．１５ｂ　 ２．３±０．５７ｂ
高剂量组 ２．７±１．１５ｂ　 ２．７±１．１５ｂ　 １．７±０．５７ａｂ
２．４　小鼠小肠解剖及病理切片情况　空白组小鼠
小肠外观正常，粪便成型，无充血水肿；与空白组相
６１８１ 　中 国 兽 医 学 报　２０１５年１１月　第３５卷　第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｓｃｉ　Ｎｏｖ．２０１５　Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１１　
比，模型组小鼠小肠壁变薄呈透明状，与周围肠系膜
出现严重粘连，充血水肿，肠腔内有大量粘液和血溶
物溢出；与模型组相比，阳性对照组和高剂量治疗组
小鼠小肠轻度水肿，肠内有稀便，且伴随出血，但出
血未及模型组严重；低、中剂量治疗组小肠形态与模
型组小肠形态相似，小肠炎症较为严重，小肠失去正
常形态；
光镜下观察，空白组（图１Ａ）：小肠绒毛排列整
齐，小肠黏膜完整连续，各层次结构清晰，绒毛间质
无水肿、无小血管扩张充血，无炎性细胞浸润；模型
组（图１Ｂ）：与空白组相比，小肠绒毛排列紊乱，大部
分绒毛脱落，绒毛表面有炎性渗出，绒毛间质水肿，
小血管扩张、充血，黏膜及黏膜下层大量炎性细胞浸
润；阳性对照组（图１Ｃ）：经氨苄西林钠治疗后，小肠
绒毛排列整齐，绒毛表面炎性渗出减少，绒毛间质水
肿减轻，无小血管扩张、充盈，间质有少许炎性细胞
弥散；低剂量治疗组（图１Ｄ）：注射葎草醇提物０．２
ｍＬ后，小肠绒毛排列大致整齐，部分小肠绒毛仍有
脱落；绒毛表面仍有较多炎性渗出，绒毛间质水肿减
轻，无小血管扩张、充盈，间质仍有大量炎性细胞弥
散；中剂量治疗组（图１Ｅ）：注射葎草醇提物０．４ｍＬ
后，小肠绒毛排列基本整齐，少许小肠绒毛脱落；绒
毛表面有少许炎性细胞渗出，绒毛间质水肿减轻，无
小血管扩张、充盈，间质仍有炎性弥散；高剂量治疗
组（图１Ｆ）：注射葎草醇提物０．６ｍＬ后，小肠绒毛排
列整齐，绒毛表面炎性渗出大部分消失，绒毛间质无
明显水肿、无小血管扩张、充血，间质少许炎性细胞
弥散。小肠结构与正常组织大致相同。
图１　各组小鼠小肠绒毛变化情况（×１００）　Ａ．空白对照；Ｂ．模型组；Ｃ．阳性对照组；Ｄ．低剂量治疗组；Ｅ．中剂量治疗组；Ｆ．
高剂量治疗组
３　讨论
细菌性腹泻是对公共卫生和人类健康造成巨大
危害的临床四大常见病之一，其中金黄色葡萄球菌
是引起细菌性腹泻的重要病原菌之一，其发病机制
主要是破坏肠黏膜结构，引起肠道黏膜充血、水肿、
炎性渗出等病理变化，导致消化吸收障碍，从而引起
腹泻。随着抗生素不良反映和细菌耐药性不断增
加，在化学合成物中寻找有效药物的难度加大，我们
需要找到一个能持久代替抗生素的药品［９］，天然中
７１８１　中 国 兽 医 学 报　２０１５年１１月　第３５卷　第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｓｃｉ　Ｎｏｖ．２０１５　Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１１　
药成为新药研究的宝贵资源，中草药在我国资源丰
富，价格低廉，相对于抗生素和化学合成药物而言，
中草药含有多种有效成分，其作用是多靶点的，中草
药的毒性较低且不宜产生耐药性，在防病治病抗菌
的同时还能促进生长，增强动物免疫力，提高机体的
整体抗病能力，因此研制开发中草药制剂治疗腹泻
具有十分重要的意义。
葎草是传统的中草药，具有清热、解毒、利尿、消
瘀消肿、抗菌消炎等功效，这与其主要成分黄酮有很
大的关系。黄酮类化合物的抗菌机制：（１）黄酮类化
合物具有抑制菌体能量的生成和代谢的作用。具有
生物活性的黄酮类物质能与能量生成和代谢相关的
酶相结合从而导致其空间结构变化降低酶的活性甚
至失去活性，最终达到抑制微生物的生长和抗菌的
目的。（２）黄酮类化合物对细胞壁的通透性及完整
性也有一定的影响。主要通过抑制细胞中Ｄ－丙氨
酸－Ｄ－丙氨酸连接酶、Ｆａｂ　Ｇ、Ｆａｂ　Ｚ、Ｆａｂ　Ｉ等的活性
来阻碍细胞膜的合成并能诱导产生降解细胞壁的活
性酶进而使细胞壁通透性大大增加。促使微生物的
菌体扭曲变形、细胞壁破裂、内容物外漏、直至成为
空壳或者分解为颗粒状的残渣，最终达到抑菌的效
果。（３）大多黄酮类化合物含有酚羟基团对蛋白质
具有较强的亲和力，可作为生物合成途径的抑制剂
来抑制蛋白质，此外，黄酮类化合物也可通过抑制
ＤＮＡ或ＲＮＡ的合成从而抑制蛋白质的合成［１０－１１］。
有研究表明，葎草可有效治疗金黄色葡萄球菌
和大肠杆菌引起的细菌性腹泻。陆波等［１２］研究发
现葎草提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制
作用，且提取液浓度越大，抑菌效果越好，其对金黄
色葡萄球菌的抑制作用更强。陈伟光等［１３］发现葎
草水提取液对革兰氏阳性菌具有较强的抗菌作用，
并证实抗菌作用与葎草中所含的黄酮类成分有关。
李俊捷［１４］和邹素华等［１５］试验研究发现葎草水提液
对革兰氏阳性菌的抑菌活性较强，尤其对金黄色葡
萄球菌、表皮葡萄球菌有很强的抑制作用。
建立小鼠腹泻模型是研究药物抗腹泻机制常用
的方法，本试验通过金黄色葡萄球菌诱导细菌性腹
泻模型，研究葎草醇提物对细菌性腹泻的治疗效果。
结果表明，金黄色葡萄球菌攻毒２４ｈ后，除空白组
小鼠外其他各组小鼠精神萎靡，懒动，大便次数增
加、饮食不振，体质量减轻，粪便潜血试验结果显示
大部分小鼠在２４ｈ时都呈现出粪便潜血检测阳性。
从剖检变化观察，模型组小鼠肠壁变薄，肠腔充满大
量粘液，肠系膜粘连严重，不易剥离，十二指肠呈暗
红色，后段肠管充血严重，肠内充满黄色稀薄的内容
物，光镜下观察小肠病理切片显示，小肠绒毛断裂，
脱落，排列紊乱，绒毛表面有炎性渗出，绒毛间质水
肿，绒毛上皮细胞肿胀，粘膜下层充血严重，水肿，有
大量的炎性细胞浸润，中性粒细胞及淋巴细胞增多，
固有层淋巴细胞增多，小血管扩张、充盈，肠腺严重
变形。模型组小鼠ＤＡＩ分高于空白组，该模型稳定
可靠，构建成功。
腹泻模型构建成功后，给予氨苄西林钠和葎草
醇提物高、中、低剂量治疗，葎草黄酮高剂量治疗组
与抗生素治疗组可明显改善小鼠症状，显著减少小
鼠大便潜血，有效抑制小鼠体质量下降趋势，给药
７２ｈ后，ＤＡＩ评分与空白组比较差异不显著（Ｐ＜
０．０５），表明治疗效果显著。组织病理切片显示，肠
绒毛排列整齐，黏膜完整，绒毛表面炎性渗出减少，
绒毛间质水肿减轻，无小血管扩张、充盈，间质有少
许炎性细胞弥散，但较之模型组明显减少，小肠结构
和正常组织大致相同，这与葎草醇提物具有保护粘
膜抵抗损伤或者促进粘膜恢复的作用有关。
综上所述，高剂量的葎草醇提物对金黄色葡萄
球菌所引起的细菌性腹泻有很好的治疗效果，在以
后的生产实践过程中，充分利用我国葎草资源治疗
临床腹泻是解决抗生素治疗腹泻带来药物残留的一
个有效途径。
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