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不同覆盖处理对罗布麻根黄酮类化合物含量的影响



全 文 :刘 萍.不同覆盖处理对罗布麻根黄酮类化合物含量的影响 [ J] .江苏农业科学 , 2011, 39(2):373-375.
不同覆盖处理对罗布麻根黄酮类化合物含量的影响
刘 萍
(吉林农业科技学院高职学院 ,吉林吉林 132109)
  摘要:用玉米秸秆 、大豆秸秆和塑料薄膜覆盖罗布麻 ,研究这 3种覆盖处理对罗布麻根中黄酮类化合物含量的影
响。结果显示 ,大豆秸秆覆盖的罗布麻长势最好 ,其鲜根粗 、叶面积 、株高的平均值最大;该覆盖条件下罗布麻根中的黄
酮类化合物含量最高 ,且稳定。说明采用大豆秸秆覆盖有利于罗布麻生长 ,可明显提高其根中黄酮类化合物的含量。
  关键词:覆盖处理;罗布麻;黄酮类化合物;含量
  中图分类号:S567.23+9.04  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2011)02-0373-02
收稿日期:2010-06-25
作者简介:刘 萍(1971—),女 , 吉林松原人 ,硕士 ,主要从事药用植
物方面的工作。 E-mail:mcylp@ 163.com。
  罗布麻(ApocynumvenetumL.)为夹竹桃科罗布麻属多年
生宿根草本植物 [ 1] ,别名野麻 、泽漆麻 、茶叶花等 ,以根 、茎 、
叶和花入药 。主要生长于沙漠盐碱地 、河岸、山沟 、山坡的沙
质地 ,盛产于新疆 。在辽宁、吉林 、内蒙古等地 ,罗布麻是一种
生长在盐碱沙荒地区的抗逆性很强的生态药用植物 ,发展罗
布麻生产具有巨大的生态效益 、社会效益和经济价值 [ 2] 。黄
酮类化合物包括黄酮和黄酮醇 、黄烷酮和黄烷酮醇 、异黄酮 、
异黄烷酮 、查耳酮 、二氢查耳酮 、橙酮、黄烷和黄烷醇 、黄烷二
醇等 。罗布麻不同器官总黄酮类化合物含量从低到高的顺序
为:茎 、花、果 、根 、叶 。大量的药理试验结果证明 ,总黄酮是罗
布麻的主要有效成分之一 ,文献报道其总黄酮主要含有芸香
苷 、金丝桃苷 、异槲皮苷 、三叶豆苷 、黄芪豆苷 、槲皮素 、山奈酚
等 [ 3] 。罗布麻根具有强心作用 [4 ] 。罗布麻在临床上有很多
的应用 [5 ] ,主要包括:(1)治疗心力衰竭;(2)治疗水肿 ,包括
肾性水肿、心性水肿 、肝硬化水肿、妊娠性水肿及其他水肿 。
如何提高罗布麻根中有效药用成分含量即总黄酮化合物含量
已成为罗布麻药用栽培技术的关键 。根据吉林市左家镇地区
的气候特点 ,本研究重点就罗布麻安全越冬的不同覆盖方法
对罗布麻根中黄酮类化合物含量的影响进行分析 ,为当地罗
布麻的高效生产提供技术指导 。
1 材料与方法
1.1 试验前期准备
在 2007年 11月下旬用玉米秸秆和大豆秸秆分别覆盖第
1、2畦罗布麻 ,用塑料薄膜覆盖第 3畦罗布麻 ,用以保护越冬
芽 , 2008年 4月中旬发芽时 ,撤去覆盖物 。
1.2 仪器与供试材料
1.2.1 仪器 电热套 、铁架台 、索氏抽提器 、722型分光光度
计 、烧杯 、圆底烧瓶 、台式天平 、分液漏斗 、电子天平等 。
1.2.2 试剂 60%乙醇 、70%乙醇 、乙醚 、5%亚硝酸钠溶液 、
10%硝酸铝溶液 、4%氢氧化钠溶液等 。
1.2.3 供试材料 吉林市左家镇地区 2008年生长的罗布麻
的根(2007年春天引种繁殖 , 2008年秋采收的);芸香苷对照
品;玉米秸秆 、大豆秸秆 、塑料薄膜等覆盖材料 。
1.3 方法
1.3.1 罗布麻根制备 罗布麻多为簇生生长 ,其根茎在整个
生长季内不断发芽并发育为新植株 ,这些植株经过营养生长 ,
一旦满足光周期信号 ,便可先后进入生殖生长 ,开花结实 ,到
9月中旬同时进入果熟期 ,地上部分逐渐枯萎死亡然后采收
根部 ,取新鲜根干燥后研磨 ,备用 。
1.3.2 根提取液制备 取研磨好的罗布麻干燥根粉 1 g,用
滤纸包好 ,置于 50 mL60%乙醇中浸泡 2h,然后于索氏抽提
器中(圆底烧瓶内盛 60%乙醇 100mL)电热套回流提取 3 h,
得罗布麻根粗提液 。取粗提液在抽提筒中蒸去大部分乙醇 ,
冷却后于分液漏斗中用相同体积的乙醚洗 3次 ,以除去叶绿
素及蜡质等 ,加 5% NaNO3溶液 1 mL,摇匀 ,放置 6 min,加
10% Al(NO3)3溶液 1 mL,摇匀 ,放置 6min,加 4% NaOH溶
液10mL,再加 60%乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min,然后
用 60%乙醇定容至 100mL,待测 。
1.3.3 对照样品液制备 精密量取对照品溶液 0、2.0、4.0、
6.0、8.0、10.0mL,分别置 25 mL容量瓶中 ,各加水至 10mL,
加 5%亚硝酸钠溶液 1mL,摇匀 ,放置 6min,加 10%硝酸铝溶
液 1mL,摇匀 ,放置 6 min,加 4%氢氧化钠溶液 10 mL,再加
60%乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,放置 15min,分光光度计备测 。
1.3.4 芸香苷对照品标准曲线制定 选用芸香苷对照品溶
液及罗布麻根提取液 ,用 5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶
液 、4%氢氧化钠溶液于 400 ~ 720 nm间进行全波长扫描 ,均
在 510 nm处为最大吸收值 ,因此选择 510 nm下测定对照及
样品波长。以吸收度为纵坐标 ,浓度为横坐标 , 3次测得芸香
苷标准品平均值 ,标准曲线如图 1所示 。
1.3.5  总黄酮含量计算 [ 6-7]  吸取样本溶液 1mL,按上述
同样的步骤和方法测定得 D510 nm , 从标准曲线查得浓度
(mg/mL),然后根据下式计算每克干根中总黄酮的含量 。
干根总黄酮含量 =V×C
—373—江苏农业科学 2011年第 39卷第 2期
DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2011.02.133
式中 , V为 1 g根制得的提取液体积(mL),本试验为 100mL,
C为提取液中测得的总黄酮含量(mg/mL)。
1.3.6 精密度试验 取 1.0mL对照品溶液置 25 mL容量瓶
中 ,加乙醇定容至刻度 ,在 510nm处重复测定 6次 ,得其吸收
值 ,算得 RSD=0.23%。
1.3.7 重复性试验 取同一组罗布麻根 ,按同样的方法制备
样品 ,进行测定 。
1.3.8 稳定性试验 取重复性试验项下试验的供试品溶液 ,
每 2h进样 1次 ,每次 1mL,连续进样 6次 ,结果表明在 1 mL
内测定值基本稳定 ,表明本法稳定性很好 。
1.3.9 加样回收率试验 精密量取已知含量的 10月上中旬
采收的罗布麻根提取液 4份 ,每份 0.2 mL,置 25 mL容量瓶
中 ,分别精密加入含量为 0.251 4 mg/mL的芸香苷标准品溶
液 2mL,按照供试样品溶液制备方法处理 ,测定其吸光度 ,由
标准曲线计算总黄酮含量 ,并计算回收率 。
2 结果与分析
2.1 加样回收率
由表 1可以看出 ,加样回收率平均达 97.03%,表明罗布
麻根总黄酮提取方法可靠 。
表 1 加样回收率计算结果
试验

样品含量
(μg)
加入对照品含量
(μg)
测得含量
(μg)
加样回收率
(%)
1 0.543 20.112 20.293 98.2
2 0.543 20.112 20.172 97.7
3 0.543 20.112 19.730 95.5
4 0.543 20.112 20.032 97.0
平均 97.03
2.2 不同覆盖处理对罗布麻植株生长特性的影响
所采取的 3种薄膜覆盖处理方法分别是用玉米秸秆覆
盖 、大豆秸秆覆盖 、塑料薄膜覆盖 ,不同覆盖方法条件下罗布
麻的鲜根粗 、叶面积 、株高的平均值见表 2。
  由表 2可以看出 ,经过覆盖处理后得到的罗布麻的鲜根
粗 、叶面积 、株高平均值与正常情况下种植的罗布麻有明显的
差别 。用大豆秸秆和塑料薄膜覆盖处理得出的数据要远高于
正常种植下的罗布麻 ,而用玉米秸秆覆盖得到的数据则小于
正常情况下的罗布麻 。
表 2 不同覆盖处理罗布麻的鲜根粗 、叶面积 、株高
覆盖方法 鲜根粗(mm)
叶面积
(cm2)
株高
(cm)
玉米秸秆 5.8 0.75 40
大豆秸秆 8.1 4.18 58
塑料薄膜 6.6 3.21 50
正常种植 6.4 1.38 45
2.3 不同覆盖处理对罗布麻根总黄酮含量的影响
测定 3种不同覆盖处理的罗布麻根黄酮类化合物含量的
变化 ,结果见表 3。
  由表 3可知 ,用大豆秸秆覆盖的罗布麻收获的根中黄酮
类化合物含量最高 ,且稳定;其次是用塑料薄膜覆盖的罗布
麻;含量最不稳定的是用玉米秸秆覆盖的罗布麻 。通过覆盖
表 3 不同覆盖处理对罗布麻根总黄酮类含量的影响
覆盖方法
总黄酮含量(mg/g)
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均值
玉米秸秆 0.685 0.574 0.723 0.661
大豆秸秆 0.985 0.995 1.004 0.995
塑料薄膜 0.868 0.872 0.879 0.873
正常种植 0.708 0.724 0.736 0.723
  注:n=3。
处理后 ,罗布麻的鲜根粗、叶面积 、株高都有明显的变化 ,而且
可以改变其根中黄酮类化合物的含量 。
2.4 不同覆盖处理效果方差分析
由表 4可知 , 3种不同覆盖处理对罗布麻根中黄酮类化
合物的含量有显著的影响 。说明可以采用不同的覆盖方法进
行处理以提高罗布麻根中黄酮类化合物的含量 。
表 4 不同覆盖处理效果的方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 临界值 结论
组间 0.171 2 0.085 5 42.75 10.92 P<0.05
组内 0.012 6 0.002
总和 0.183 8
3 讨论与结论
试验结果表明 ,大豆秸秆覆盖的罗布麻根中黄酮含量为
最高且稳定 ,其次是用塑料薄膜覆盖 ,最不稳定的是用玉米秸
秆覆盖 。由于大豆秸秆覆盖层分解快 ,可自然腐烂 ,增加土壤
有机质和提供稳定的腐殖质 ,使土壤有机质得到更新和补偿 ,
改变土壤理化性状 ,覆盖保温性良好 ,有利于罗布麻的生长 ,
也明显提高了罗布麻根中黄酮类化合物含量 。用塑料薄膜覆
盖有很好的保温效果 ,可使土壤总积温升高 ,光合作用增强 ,
提高根系活力 ,对罗布麻的生长起一定的促进作用 ,同时也相
对地提高了罗布麻根中黄酮类化合物的含量 ,但要做好通透
气处理 ,避免温度过高而抑制罗布麻生长 。用玉米秸秆覆盖 ,
也有促进生长的效果 ,但对土壤、温度和水的影响难以控制 ,
覆盖后温度过高 ,对罗布麻根的生长有影响 ,同时也造成罗布
麻根中黄酮类化合物含量不稳定 。
采用大豆秸秆覆盖有利于提高罗布麻根中黄酮类化合物
的含量 [ 8-9] 。本试验仅局限于吉林市左家地区 ,试验结果并
不一定适合其他地区 ,各地区可根据地理位置 、生长环境 、温
度 、气候 、水等综合因素 ,在生产中采用最合理的栽培管理措
施 ,以提高罗布麻根中黄酮类化合物的有效含量 。
参考文献:
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(下转第 375页)
—374— 江苏农业科学 2011年第 39卷第 2期
程傲星 ,潘 漫 ,汪亚运 ,等.菠萝皮部分替代棉籽壳对几种食用菌菌丝生长的影响 [ J] .江苏农业科学 , 2011, 39(2):375-376.
菠萝皮部分替代棉籽壳对几种食用菌菌丝生长的影响
程傲星 , 潘 漫 , 汪亚运 , 韩晓弟
(山东大学威海分校海洋学院 ,山东威海 264209)
  摘要:为了优化传统的食用菌生产方式 , 提高资源利用率 ,对培养基的组分进行了调整 ,简化培养基组成 , 用菠萝
皮进行棉籽壳的部分替代性试验。结果表明 ,从菌丝生长状况来看效果明显 , 猴头菇在 40%菠萝皮培养基上生长状
况最佳 , 菌丝生长速度 1.13 mm/d,且菌丝纯白 , 杂菌感染率低;香菇在 60%菠萝皮培养基上生长状况良好 , 菌丝生长
速度 1.68 mm/d, 菌丝纯白浓密;平菇在 60%菠萝皮培养基上生长发育明显 , 菌丝生长速度 3.64 mm/d, 而且菌丝色
泽 、密度俱佳 ,感染率低。因此 , 菠萝皮可以适量替代棉籽壳 , 且在合适的比例下 ,可以促进菌丝生长 , 降低感染率。
  关键词:菠萝皮;猴头菇;香菇;平菇;菌丝
  中图分类号:S646.04  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2011)02-0375-02
(上接第 374页)
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  猴头菇(Hericiumerinaceus)肉质鲜嫩可口 ,是一种药食两
用真菌 ,能利五脏 、助消化 、滋补 、抗癌 、治疗神经衰弱 ,国内已
广泛应用于医治消化不良 、胃溃疡 、十二指肠溃疡 、食道癌、胃
癌等消化系统疾病 [ 1 -3] 。香菇(Lentinusedodes)是我国最著
名的食用兼药用菌之一 ,香菇肉质肥厚细嫩 、味道鲜美 、香气
独特 、营养丰富 ,并具有一定的药用价值 , 被誉为 “菇中皇
后 ”,深受国内外消费者喜爱 ,是不可多得的理想的健康食
品 。平菇(Pleurotusostreatus)在生物分类学中隶属于真菌门
担子菌纲伞菌目白蘑科侧耳属 ,含丰富的营养物质 [ 4] 。
近年来 ,用于生产食用菌的培养基的主要原料棉籽壳价
格大幅上升 ,另外 ,传统培养基组分相对而言较复杂 ,并且易
感染杂菌 ,对无菌操作要求较高 。为了降低生产成本 ,简化生
产流程和降低杂菌感染率 ,相关的调整培养基试验也偶有报
道 ,但用废弃菠萝皮做培养基应用于猴头菇 、香菇 、平菇的试
验还鲜见报道 。菠萝皮富含蛋白质 、维生素 、柠檬酸等营养物
质 ,有利于食用菌生长 [ 5 -6] 。笔者对传统培养基的组成成分
进行了新的调整 ,以菠萝皮替代部分棉籽壳进行试验 [ 7] 。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试菌株 猴头菇 HN菌株 ,香菇 (808)菌株 ,平菇
(539)菌株 。
1.1.2 试验仪器  紫外诱变箱(济南杰康净化设备厂 );隔
水式恒温培养箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)。
收稿日期:2010-04-26
基金项目:山东大学威海分校大学生科技项目(编号:A09065)。
作者简介:程傲星(1989—), 男 , 安徽六安人 , 本科生。 E-mail:
chengaoxingcax@163.com。
通信作者:韩晓弟,硕士 ,副教授 ,研究方向为植物生物学。 E-mail:
hanxiaodi@sdu.edu.cn。
1.2 试验条件和方法
1.2.1 温度控制 将接种后的培养基标号放置在恒温箱中 ,
设置温度 ,控制在(20±0.5)℃。
1.2.2 水分的控制  控制干料和水的质量比在 3 ∶2
左右 [ 8] 。
1.2.3 培养基原料配方 以不同比例的菠萝皮替代棉籽壳 ,
共配制 5种培养基(表 1)。
表 1 培养基原料配方
培养基
代号
各原料含量(%)
棉籽壳 菠萝皮 过磷酸钙 石灰
A 98 0 1 1
B 78 20 1 1
C 58 40 1 1
D 38 60 1 1
E 18 80 1 1
1.2.4 分装 将同一组的基料混合 ,充分搅拌 ,然后均匀分
装到各试管中 ,每支试管装料 10cm左右 。
1.2.5 接种与记录  猴头菇菌株定量接种面积 0.6 cm2厚
0.5 cm的菌落于定量培养基上 [ 9] (16 mm×18 cm的试管里
培养基 10cm深),标号 A1、B1、C1、D1、E1, (20±0.5)℃恒
温箱培养 ,当任一处理菌丝长满培养基时结束培养 ,分别测量
和观察记载菌丝的生长速度 、长势 [ 10] (菌丝形态 、疏密程度及
大致的感染情况)。
香菇菌株操作如猴头菇菌株 ,标号 A2、B2、C2、D2、E2。
平菇菌株操作如猴头菇菌株和香菇菌株 , 标号 A3、B3、
C3、D3、E3。
2 结果与分析
2.1 猴头菇试验结果
由表 2可见 ,猴头菇菌丝在纯棉籽壳培养基(A组)上不
—375—江苏农业科学 2011年第 39卷第 2期