全 文 :大接骨丹干燥树皮抗炎镇痛活性有效部位筛选
陈华栋1 ,张锦文2 ,4 ,张勇慧3 ,4*(1.浙江东阳市人民医院药剂科 东阳 322100;2.华中科技大学同济医学院附
属同济医院 武汉 430030;3.华中科技大学同济医学院药学院 武汉 430030;4.湖北省天然药物化学与资源
评价重点实验室 武汉 430030)
摘要:目的 初步确定大接骨丹干燥树皮抗炎镇痛活性的有效部位。方法 采用二甲苯致小鼠耳廓炎症和醋酸致小鼠扭体反应的动物模型 ,
分别观察大接骨丹干燥树皮的抗炎以及镇痛活性。结果 大接骨丹干燥树皮的石油醚部位和乙酸乙酯部位对二甲苯所致的小鼠耳廓炎症和
醋酸所致的扭体反应均有显著的抑制作用。结论 初步确定石油醚部位和乙酸乙酯部位为大接骨丹干燥树皮的抗炎 、镇痛药效学活性部位。
关键词:大接骨丹;抗炎作用;镇痛作用;活性部位
中图分类号:R969 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2012)-02-0029-02
作者简介:陈华栋 ,男(1985.11-)。毕业于华中科技大学同济医学
院 药 学 院。 职 称:药 师。 联 系 电 话:15888938025 , E-mail:
chuadong666@163.com
通讯作者:张勇慧 ,男(1972.04-)。毕业于华中科技大学同济医学
院药学院 ,教授 ,博导。联系电话:027-83692311
基金项目:国家自然科学基金(30973865),教育部新世纪优秀人才支
持计划(NCET-08-0224)
Research on the act ive extracts of Torricellia angulata Ol iv.of anti-inflam-
matory and analgesic effects
CHEN Hua-dong1 , ZHANG Jin-wen2 , 4 , ZHANG Yong-hui3 , 4*(1.Pharmacy department of Dongyang People′s
Hospital , Zhejiang Dongyang 322100 ,china;2.School of Pharmacy ,Tongji Medical College ,Huazhong Universi-
ty of Science and Technology , Hubei Wuhan 430030 China;3.Tongji Hospital of Tongji Medical College ,
Huazhong University of Science and Technology , Hubei Wuhan 430030 ,China;4.Hubei Key Laboratory of Natu-
ral Medicinal Chemistry and Resource Evaluation, Hubei Wuhan 430030 ,china)
ABSTRACT:OBJECTIVE To select pharmacodynamic active ex t racts of To rricellia angulata Oliv.for anti-in-
f lammatory and analgesic effects.METHODS To observe the pharmacodynamic effects of Torricellia angulata O-
liv.by the models of xy lene-induced ear acute inflammatory edema and acetic acid-induced to rsion of
mice.RESULTS The petroleum ether fraction and EtOAc fraction can prevent the development of ear tumefac-
tion caused by xy lene and torsion caused by acet ic acid.CONCLUSION The results show that the pharmacody-
namic active ex tracts of To rricellia angulata Oliv.are the petroleum ether fraction and EtOAc fraction.
KEY WORDS:Torricellia angulata Oliv.;Anti-inflammatory effect;Analgesic effect;Active parts
大接骨丹是贵州民间常用中草药 ,是山茱萸(叨里木科)
鞘柄木属植物裂叶鞘柄木(Torricellia angulata O liv.)、齿裂鞘
柄木(T.angulata Oliv.Var.intermedia(Harms ex Diels)Hu)及
鞘柄木(T.tiliifolia(Wall.)DC.), 别名水冬瓜 、接骨丹和水五
加等。该药具有活血 ,消肿止痛之功效 , 常用于跌打损伤 、抗
炎 、消肿 、止痛等症 , 疗效奇佳〔1 , 2〕。 本实验主要探讨大接骨
丹的抗炎镇痛活性 ,为临床应用提供理论依据。本实验将大
接骨丹的乙醇提取物分成 4 个极性部位 ,进而对总膏及 4 个
极性部位分别进行了抗炎镇痛药效学试验 , 从中筛选出了药
效学活性部位 , 为分离出该药的活性成分打下基础。
1 实验材料
大接骨丹采自湖北恩施自治州 , 由华中科技大学药学院
陈家春教授鉴定;阿司匹林肠溶片(圣宝药业太原制药有限公
司生产 , 批号 070119);冰醋酸(天津恒兴化学试剂有限公司 ,
批号 070405);二甲苯(天津恒兴化学试剂有限公司 , 批号
070802);医用酒精(武汉市武昌中北酒精厂 , 批号:070815);
YLS-Q4 系列打耳器(山东省医学科学院设备站);昆明种小
鼠 , ♂,体重 18.0~ 22.0g(华中科技大学同济医学院实验动
物中心)。
2 方法及结果
2.1 样品的提取分离 取大接骨丹干燥树皮粗粉(7.52kg),
用 95%的乙醇浸泡。每次 50L , 浸泡 1 周 , 共浸泡 4 次 , 过滤
后 , 浓缩回收溶剂 ,得总浸膏 716.0kg(得膏率 9.52%)。称取
上述总浸膏 120.0g混悬于适量纯化水中 ,依次用水饱和的石
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 24 No.2 2012
油醚 、乙酸乙酯和正丁醇萃取 , 萃取液分别回收石油醚 、乙酸
乙酯和正丁醇 ,得石油醚部位浸膏 15.9g(得膏率 13.2%)、乙
酸乙酯部位浸膏 24.5g(得膏率 20.4%)和正丁醇部位浸膏
31.9g(26.6%), 最后将水溶液浓缩得水部位浸膏 38.2g(得
膏率 31.8%)。
2.2 剂量设定原理 实验剂量设定是以人的临床用药量换
算成小鼠用量为基础 , 综合浸膏的收率 、浸膏量等多种因素 ,
结合实际经验所设定。人的临床剂量为 15g·d-1 , 总膏得膏
率为 9.52%,各个极性部位的得膏率见“ 2.1”项下 , 结合这两
个百分率得到各个极性部位所相当的临床剂量 , 根据小鼠与
人的体表面积比率 0.0026 得到理论的小鼠实验用量。
2.3 各极性部位对二甲苯所致小鼠耳廓炎症的影响〔3 , 4〕
取昆明种雄性小鼠 70 只 , 随机分为 7 组 ,每组 10 只。总膏给
药组 、石油醚部位给药组 、乙酸乙酯部位给药组 、正丁醇部位
给药组 、水部位给药组每日根据剂量混悬后灌胃给药;阳性对
照组灌服阿司匹林 15mg/(kg·d);模型组每日灌胃生理盐水
做对照。连续给药 7d , 各组在末次给药 1h 后于小鼠右耳两
侧均匀涂抹二甲苯 0.05mL 致肿 , 左耳作对照。 1h 后处死动
物 ,用直径 8mm 打孔器切各组小鼠双耳对称处耳片称重 , 以
左右耳片重量差表示肿胀度 , 计算肿胀抑制率 ,并作 t 检验 ,
结果(见表 1), 表明大接骨丹醇提物的石油醚部位和乙酸乙
酯部位有显著的抗炎活性。
肿胀抑制率=(模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组
肿胀度×100%
表 1 各极性部位对二甲苯致小鼠耳廓炎症的影响 (n=10 , x±s)
分 组 耳肿胀度(mg) 肿胀抑制率(%)
模型组 12.16±3.83 --
阳性对照组 5.62±2.13b 53.78b
总浸膏给药组 9.67±2.37 20.48
石油醚部位给药组 8.15±2.60 a 32.98a
乙酸乙酯部位给药组 7.69±3.10 a 36.76a
正丁醇部位给药组 9.62±2.19 20.89
水部位浸膏给药组 11.29±3.18 7.16
注:aP<0.05与模型组相比有显著性差异;bP<0.01与模型组相比有
显著性差异。
2.4 各极性部位对醋酸所致小鼠扭体反应的影响〔5〕 取昆
明种雄性小鼠 70 只 , 随机分为 7 组 ,每组 10 只。总浸膏给药
组 、石油醚部位给药组 、乙酸乙酯部位给药组 、正丁醇部位给
药组 、水部位浸膏给药组每日根据剂量混悬后灌胃给药;阳性
对照组灌服阿司匹林 15mg/(kg·d);模型组每日灌服等量的
生理盐水做对照。连续给药 6d , 各组在末次给药 1h 后于小
鼠腹腔注射 0.6%冰醋酸 20mL·kg-1。记录各组小鼠注射后
15min 内扭体(腹部收缩内凹 、伸展后肢)的次数 , 计算镇痛
率 , 并作 t 检验 , 结果(见表 2), 表明石油醚部位和乙酸乙酯
部位具有显著的镇痛作用。
镇痛率=(模型组扭体次数-给药组扭体次数)/模型组
扭体次数×100%
表 2 各极性部位对小鼠醋酸扭体反应的影响 (n=10 , x±s)
分组 扭体次数 镇痛率(%)
模型组 28.63±7.13 --
阳性对照组 13.13±3.40b 54.14b
总浸膏给药组 22.63±8.18 20.96
石油醚部位给药组 18.88±7.22a 34.06a
乙酸乙酯部位给药组 20.13±7.74a 29.69a
正丁醇部位给药组 25.75±6.34 10.06
水部位浸膏给药组 26.38±9.12 7.86
注:aP<0.05与模型组相比有显著性差异;bP<0.01与模型组相比有
显著性差异。
3 讨论
本实验结果表明 , 大接骨丹干燥树皮的石油醚部位和乙
酸乙酯部位均能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀度和提
高小鼠醋酸刺激致痛的痛阈值 , 具有明显的抗炎镇痛活性 , 故
认为石油醚部位和乙酸乙酯部位为大接骨丹抗炎镇痛活性的
有效部位。但大接骨丹抗炎镇痛活性部位的具体活性成分 ,
作用机制仍有待进一步研究。本实验结果证明了大接骨丹干
燥树皮具有抗炎镇痛活性 , 为大接骨丹抗炎镇痛有效成分的
提取以及临床的开发利用奠定了基础。
参考文献
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海峡药学 2012年 第 24卷 第 2期