全 文 ：接骨木镰刀菌 、 壳青霉和交链抱菌
化学防治与生物防治的初步研究 ’
兰州大学生物 系 工 业 微生物专业
张掖地区森管局寺大隆林场科研组
云杉幼苗碎倒病和种子霉烂是祁连山林区青海云杉种苗的严重病害 , 为了解决防治问题 , 在
中国科学院微生物研究所 、 南京林产工业学院 、 云南林学院 、 上海市农药研究所 、 山丹农场试验
站等单位的大力支持下 , 在张掖地区科委 、 森管局的领导关怀下 , 我们从 1 9 7 7年开始进行这项初
步研究 , 现简结如下 :
一 、 病原菌种类 :
1
. 接骨木镰刀菌 :
F u s a r i u m S a m b u e i n u m F u e k
属半知菌类 , 从梗袍 目 , 镰刀属 。
接骨木镰刀菌在马铃薯— 一葡萄糖琼脂培养基上分离到的气生菌丝 , 生长良好 , 丝状低平成棉絮状 , 紧密 , 粉红色 , 反面呈深浅不同的红色 。 镜检 , 菌 丝分枝 、 有隔 、 透明 。 有大小型分生
抱子 , 大型分生抱子呈弯月形或镰刀形 , 3 一 4 隔较多 , 1一 2 隔少 , 菌生在分枝或不分枝的分
生抱子梗 _匕 分生抱子梗集生于垫状的分生袍子座上 。 小型分生抱子无色椭圆形或圆形 。
接骨木镰刀菌是导致青海云杉发生碎倒病的主要致病菌 , 在种腐 、 芽腐 、 碎倒 、 立枯型致病
种苗上都能分离到 。
2
. 壳青霉 :
P e n i e i l l i u m C r u s t o s u m T h o m
在马铃薯 -一葡萄塘琼脂培养基上 , 菌落呈圆形 , 灰绿色 , 边缘整齐或光滑 , 质地致密 , 有放
射状沟纹或同心圆突起 。 反面呈深蓝色或培养基颜色 。 镜检 , 分生抱子数量极多 ,球形 、 光滑 , 分
生抱子梗光滑帚状 , 不对称或对称 。 在田间 , 菌丝把种子和砂粒团在一起 , 生出蓝绿色和白色细
丝 , 此菌可使青海云杉种子霉烂 。
3
. 交链抱菌 :
A l t e r n a r i a S P P
种子表面初生短绒状霉块 , 日久变黑绿色 , 边上是绿色 , 最外边有白色新的菌丝 。 霉块中央
令 菌名系由中国科学院微生物研究所陈庆涛同志、 兰州大学王维国同志鉴定 。
有黑色每粉状物 , 是病菌的抱子 。
在马铃薯 -一葡萄糖琼脂培养基上 , 菌落绒状 , 质地紧密 , 突起 , 黑褐色或黑灰色 , 反面黑
色 。 镜检 , 菌落黑色 , 中间透明 , 分隔清楚 。 分生抱子长椭圆形 , 有纵隔和横隔 , 鞋底状 , 基部
圆形 , 先端长条形 , 群尖 。 能使青海云杉烂芽 。
二 、 病害症状与致病菌的分离和鉴别 :
裹 I
种 芽 摔 倒 型
腐 腐
型 型 根 部 茎 部 根 部 节 部
接骨木镶刀菌 1 1 1 1 1 1
壳 青 霉 l } 0 0 1
交 链 抱 菌 0
一 1 0 1一
1
说明:
-
~ ` . 曲 、
1
: 巳分离到 O · 夫分离到
杀菌毒力的测定 :
接骨木镰刀菌 :
表 I〕{ 趁
说明 : 十 : 菌生长良好 O : 生长不良 一 : 不生长
室内测定结果 , 对接骨木镰刀菌有明显拮抗作 用 的杀菌剂有 H : 5 0 ` 、 乙酸 、 退菌特 、 苯来
特 十福美双 、 百菌清 、 代森锌 、 克菌丹 、 T M T D共八种 。
2
. 壳青霉 :
衰 I一一爪
说明 :十 :菌生长良好e :生长不良 一 :不生长
室内测定结果 , 对壳青霉有明显拮抗作用的杀菌剂有 : H : 5 0 4 、 乙酸 、 C u S O ` 、 40 1 、 多菌灵 、
赛力散 、 敌克松 、 苯来特十福美双 、 代森锌 、 克菌丹 、 退菌特 、 T M T D共十二种 。
3
. 交链饱菌:
衰万
(瑞 对 照5形井岗霉素25 形苯来特十 20 形福美双苏农 6 4 0 175 书百菌清8 。拓代森锌4。男克菌丹25 书多菌灵50 书退菌特T M T D …_州二一…一竺生…一土 -…。 `州 一二 -{一全兰 {一望一卜一 , {一 二 -…一竺生…-一 一一} O· 2 { 一{二二…二亘二卜卫三 -…-二 一日亩
说明 : 十 : 菌生长 良好 田 : 生长不良 一 : 不生长
3 1
室内测定结果 , 对交链抱菌有明显拮抗作用的杀菌剂 有: H : 5 0 ` 、 F e S O ` 、 乙酸 、赛力散 、退
菌特 、 4 0 1 、 多菌灵 、 笨来特 + 福美双 、 百菌清 、 代森锌 、 克菌丹 、 T M T D共十二种 。
4
。 以上均为杀菌剂的离体测定法 , 把一定浓度的药剂和一定的培养基混合起来 , 然后接种
试验菌种 , 定期测定 。
通过 以上测定 , 各种药剂的筛选结果如下 :
①能拮抗三种菌的有: l % H : 5 0 ` 、 1 %乙酸 、 25 %苯来特 + 20 %福美双 0 . 2%液 、 80 %代森
锌 0 . 2 %液 、 40 %克菌丹 0 . 2%液 、 0 . 2% T M T D共六种 。
②能拮抗二种菌的有: 。 . 2 %赛力散 、 0 . 1% 4 01 、 0 5%多菌灵 、 75 % 百菌清 。 . 2%液 、 5() %退
菌特 0 . 1%液共五种 。
③能拮抗一种菌的有 : 2 % F e S O ` 液 、 0 . 5% C u S O `液 、 0 . 1%敌克松液共三种 。
④无拮抗作用的有 : 2 %甲醛 、 0 . 5% K M n O 4 , 0 . 2 %六六六 、 25 %多菌灵 l % 液 、 5%井岗
霉素 0 . 1%液 、 0 . 2% 6 4 0 1共六种 。
5
。 对以上九天测定的各种药品 , 用划槽法在培养基上划两条长方形的沟 , 沟内放入一定量
的药液 , 再用菌液在两侧划线 , 对药效进行了重复测定 。
衰 V
药 品 浓 度 万 接 骨 木 壳 青 霉 交 链 泡 菌
镰 刀 菌 +
5 多 井 岗 霉 素 0 。 1 + 十
25 多苯来特+ 20 拓福美双 0 . 2 O
苏 农 6 4 0 1 0 . 2 十 十 十
0
.
2 ①75 多 百 菌 清
80 拓 代 森 锌 0 、 2 O
十 十 O40 耳 克 菌 丹 0 . 2
1 O
一~ ~ 一~ — 一一 一 一 一 ~25 万 多 菌 灵 一一一
一 一
一
50 万 退 菌 特 0 . 1 }一 一 +
T M T D 0 2 O } 一
{
说明: 一 : 拮抗效果好 ① : 较好 十 : 无拮抗作用
通过划槽法测定结果 :
①抑菌作用强的有 : 25 %苯来特 十 20 %福美双 0 . 2%液 、 75 % 百菌清 0 . 2 %液 、 80 %代森锌 0 . 2 %
液 、 2 5%多菌灵 1 %液 、 50 %退菌特 0 . 1%液 、 0 . 2% T M T D共六种 。
②无抑菌作用的 有 : 5 写井岗霉素 0 . 1%液 、 苏农 6 4 0 1 0 . 2%液 、 40 %克菌丹 0 . 2拓液共三
种 。
6
、 通过以上两种方法筛选的共同结果 :
① 25 %苯来特 + 20 %福美双 0 . 2%液 、 80 %代森锌 。 . 2%液 、 0 . 2% T M T D液 , 对青海云杉碎
倒病和种子霉烂有抗菌效果 。
② 0 . 2%苏农 6 4 0 1 、 5 %井岗霉素0 . 1% 液 , 龙抑菌作用 。
③ 4 0%克菌丹 0 . 2 %液 、 25 %多菌灵 ’ l % 液两种方法测定结果有矛盾 。
四 、 田间化学防治试验 :
通过室内初步筛选出的高效药剂 , 在田间进丫步筛选出对种苗无药害的药剂 。
( 等级 : l 等— 效果好 , 2 等— 效果中 , 3 等— 效果差 )l 。 种子消毒 :
裹 班一…筛选出75 %百菌清 0 . 2%液 、 0 . 2%赛力散 、 80 %代森锌 0 . 2%液 、 敌克松 0 . 1%液四种 , 浸催芽种 16 小时 , 防病效果好 , 药害轻 。2 。 上壤消毒 :
衰姐
鸽 品 一 }峥 处 理 方 法 出苗率 ( 6月 13 日检查 ) 保 苗 率 ( 10月 10 日检查 ) 等 级另 一份竺一…“ 对 ,“ “ `: 。 。。 …, 水 2 5 2 5 { 10 0 株 /M吕 保苗率男与对照比
25 %苯来特十 2。%福美双 { 。 . 2 一 8 5s o o m l /M , 2 52 5, , … ’ 2 2 14 6 10 0 3
9 8 2
/’ 23 2 7 2 19 3 94
,’ 19 5 8 7 7 19 2 4 }一 9 0 2} 1 0 5
80 , 代森锌 ! .0 2 {
T M T D 0
.
25。男退菌特 /, 公4 3
硫 酸 { “
·
1
醋 酸 一 2 , 2 39 3 2 2 0 3 9 2 10 3 1
一
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-一 - 一一 { 一 - 一 ,’ 2 9 7 8 1 1 8 22 7忿 了6 10 6 1竺 一一…一乡_ _ 1 16 97
4 0 1 。 . , 18 0 6 7 2 2 0 89 3醋 酸、 一…: 一 ,赛 力 散 2 16 3 8 8 10 1 2, 2 4 5 4 9 7
0
.
1 , 2 5 4 2 1 0 1 2 2 0 0 87 1 03 14 0 1
2 5 9 6 1 03 2 3 0 8 89 10 8 1敌 克 松
”一。朋一阳
筛选出 0 . 1%敌克松 、 0 . 1% 硫酸 、 50 %退菌特 。 . 1%液 、 0 . 1% 4 01 四种 , 5 0 m l/ M “ , 效果较
好 , 药害轻。
3
. 苗期喷洒 :
表植
药
10 月 l。 日保苗
株 / M ` 与 对
照 比 l 等 级
一平。不几甘一,二0.1,几曰.占对 照 19 7 22 5%苯来特十 2 。%福美双 2 19 88 。男 代 森 锌 19 3 6 e7一`8010.一6ǔ一T M T D 0 . 20 . 2 2 0 8 7
5 0书 退 菌 特 0 . 1 2 1 0 3
4 0 1 0
。
1
13 0 8
2 0 5 3
2 12 7
玛 8 1
筛选出25 %苯来特十 20 %福美双 0 . 2%液 、 。 . 2%散力 、赛液 50 %退菌特 0 . 1%掖 、 0 . 2% T M T D
液四种 , 效果好 , 药害轻 。
3碑
五 、 生物防治 :
.室内用划线法测定拮抗效果 :
表 l
一卜
… .菌 号 及 菌 名 接 骨 木 壳 青 霉 交 链 抱 菌
菌 ” 来 ”
}
一 镰 刀 菌
亩再一漏一蔺面 {1G H一 、 s oe 4细黄放线菌 O
,
W H :
、
5 4 0 6 细黄放给菌 ①
V :
、
5 4 0 6 细黄放线菌, 十
本场从云杉天然林菌根土中分离 菌 根 4 号 放 线 菌 O
,’
4
.
10 3 6 庆丰链霉菌
, 一{ {
3
.
3 7 0 6 微 紫 青 霉 O O
, 3
.
38 7 算 麻 青 雄 O ① e
十
, { + 十
4
.
89 2 产色放线菌
,’ 4 . 8 9 6 金色链霉菌 十 十1 . 76 6 干燥瓦色杆 禾 测 +
十 O
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·
2 3 9 酚 菌 十 +
3
.
2 9 4 2 绿 色 木 霉3 0 32 木 ①
/,
一卜
+ 十
经测定 , 对接骨木镰刀菌有明显拮抗作用的有 G H 4 、 菌根 4 号 、 4 . 1 0 3 6 、 3 . 29 42 、 3 . 3 03 2五
种 。
对壳青霉有明显拮抗作用的有 G H 4 、 菌根 4 号 、 菌根 1 号 、 4 . 1 0 3 6四种 。
对交链饱菌有明显拮抗 作 用 的 有G H 4 、 菌根 4 号 、 菌根 l 号 、 4 . 1 0 3 6 、 3 . 2 9 42 、 3 . 3 0 3 2六
种 。 对三种菌有广谱拮抗作用的有G H 4 、 菌根 4 号 、 4 . 1 0 3 6三种 。
2
。 田间生物防治试验 :
①菌液浸种 :
通过测定 , 菌液浸种以 1 : 4V 2母剂 曼催芽种 16 小时较好 , 其它各种效果不明显 。 见表 X
以上菌液浸种出苗率系 6 月 24— 28 日检查 , 保苗率 10 月 10 日检查 。
3 5
衰父
一一~ 一一一一一一一一 , - -一 芭_
与对照 比 株 /M: 保苗
]0 0
” %…
苗!l处理力法
川
株 /M l|洲
一一一 -一
种时对 昆竿 2 2 9 7 10 0 2 2 9 4
2 3 0 8
22 7 8
104一5V , 母 介 .】 23 8 6
W H : 母 剂 2 7 2 3
G H一 母 剂 2 0 3 3 2 16 3 10 6
菌 根 1 号 22 49
菌 根 4 号
2 0 4 8
2 8 7 7 1 2 5 19 3 2
3
.
2 9 4 2绿色木霉 2 3 5 1 102 19 2 1
3
·
3 0 3 2木 霉 16 9 7 1 7 63 10 4
10 1 2
9马 3
9 4 3
8 9 3
8 4 3
84 3
一
②菌肥作基肥施用 :
裹 l
出苗率 ( 6月 2连一 2 5日 ) 保 率 ( 10月 2 0日 )
用 量 处理方法 等 级
苗一
|…一l株 / M l 与对照比 株 /M . 保苗率拓 与对照比
对 照 1斤 /M 吕 作 基 肥 15 3 8 10 0 7 3 6
V t 2 15 1 14 0 15 9 1 生…
W H :
G H
-
菌根 1 号
一…一竺一…土…一坐一兰…一 59 一 …立一卜{坐 一 {一 ~ -竺一卜一竺竺一…兰一卜望一二 -} 1 9 6 6 1 12 8 } 1 63 6 { 8 3 } 2 2 2 { z
菌根 4号 18 3 8 …一几))- …一 -石万一 6 2一 …一瓜- …万
通过测定 , 菌肥作基肥施用 , 以G H 4 、 W H Z , l 斤 / M “具有高效低毒的效果 。
3
. 生产 5 4 0 6菌肥及菌根的原料配方 , . 卜
①斜面培养基 : 二
可溶性淀粉 1 % , 一 K : H P 0 4 · 。 . 1界 ,…硝酸钾 0 . 2 % 硫酸镁 0 . 1杯 : 一N a C I 0 . 1% C a C O 。 0 . 3 %
琼脂 2 写 、 水 1。。耐 . ` , j
PH
.
7
.
6一7 , 忿 : _ · ` ; 州
韶
②二级原母剂 :
菜籽饼粉 ( 油渣 ) 1份 : 肥土 10 份 , 掺水拌涅 , 手捏成团 , 落地即散 。
/ ③曲盘培养 ( 三级母剂 ) :
二级原母剂 1份 : 油渣 10 份 : 肥土 1 0 份 。
④堆制 :
三级母剂 5 -一 10 份 : 油渣 10份 : 肥土 10 份 。 各级培养物均须在无菌条件下操作 , 温 度 控制
在 2 8℃ - -一32 ℃ 。
勺
J 一
/ 、 、 小结 :
l
。 青海云杉碎倒病的种腐 、 芽腐 、 碎倒 、 立枯型主要致病菌是接骨木镰刀菌 , 种子霉烂的
主要致病菌是壳青霉和交链抱菌 。
2
。 青海云杉碎倒病及种子霉烂的防治 , 应以改进育苗技术措施为主 , 因地制宜地选择合理
的化学 、 生物防治措施作为辅助手段 , 不可单纯依赖化学 、 生物防治 。
3
. 种子消毒以 75 %百菌清 0 . 2% 液 、 0 . 2%赛力散 、 80 %代森锌 0 . 2 %液 、 0 . 1%敌克松四种
浸催芽种 16小时效果较好 。
4
. 土 壤 消 毒 : 以 0 . 1% 敌 克 松 、 0 . 1% 硫 酸 、 50 % 退 菌 特 0 . 1%液 、 0 . 1% 4QI 四 种
s o o m l /米 2 , 效果较好 。
5
. 苗期喷洒 : 以 25 % 苯来特 + 20 % 福美双 0 . 2 %液 、 0 . 2 %赛力散 、 50 %退 菌 特 0 . 1%液 、
0
.
2 % T M T D 四种为好 。
6
。 常规药品 : 2 % 甲醛 、 2 % F e S O ` 、 0 . 5 % C u S O 4 、 0 . 5% K M n O ` 、 0 . 2% 六六六杀菌
效果远不及上述经过室内和田间筛选 出的药物 。
7
。 生物防治 : 以 G H 4 、 W H Z两种 5 4 0 6菌肥作基肥施用 1 斤 /米 2 , 效果 明 显 , 这两种菌 ,
室内和田间效果都很明显 。 菌液浸种效果不显著 。 菌根 4 号和菌根 l 号在室内拮抗效果 虽好 , 但
田间效果不理想 。 庆丰链霉菌室内测定 , 具广谱抗菌性能 , 因季节影响 , 庆丰链霉菌尚未在 田间
试验 。
8
。 对今后工作的意见 :
( l ) 对筛选出的各种 化学药剂在大 田扩大试验面积 , 重复测定效果 。
( 2 ) 扩大 G H 4 、 W H : 菌肥的生产 , 除在大田新育苗上大量使用外 , 还应对不同苗龄 的 留
床苗进行根外喷洒 , 并测定效果 。
( 3 ) 解决庆丰链霉菌的扩大生产技术 , 并进行田间效果测定 。
( 4 ) 进行病原菌显微计测及永久性玻片及病害标本的制作 。
( 5 ) 在不同季节分离致病菌 , 了解各种致病菌的蔓延和季节及气象条件的关系 。 通过不断
实验 , 发现新的致病菌 。
( 6 ) 进行幼苗病害的分离 、 培养 、 接种 、 再分离 , 以便鉴别病原菌和腐生的杂菌 。 采用的
方法 : 消毒的种子播于加入粉碎菌丝体的灭菌土内 , 幼苗根颈部与小三角纸片一 L的培养基纯培养
相接触 。