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刺梨叶醇提物体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究



全 文 : 中国现代应用药学 2015 年 6 月第 32 卷第 6 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2015 June, Vol.32 No.6 ·685·
节细胞周期,调节细胞凋亡等生物学效应[13]。野
百合碱可减少肺动脉内皮细胞表面 Cav-1 的表达,
导致细胞增殖[14],这与笔者研究结果类似,本研
究提示,低氧诱导的 PASMC 中 Cav-1 表达降低,
且雷洛昔芬治疗后可显著增加 Cav-1 表达,调节细
胞增殖和凋亡的平衡缓解血管重构。
本研究证实雷洛昔芬参与慢性低氧刺激的肺
血管结构重建可能是通过调节细胞膜 Cav-1 的表
达,抑制氧化应激反应,减少细胞增殖和细胞外
基质积聚实现的。这对重新认识慢性低氧性肺部
疾病发病机制、寻找一条新的预防和治疗途径具
有重要意义。
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收稿日期:2015-01-27



刺梨叶醇提物体外抗氧化活性和 α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

李福明 1,汪洋 2*,韦敏 3(1.杭州口腔医院,杭州 310006;2.浙江英特医药药材有限公司,杭州 310004;3.江苏省中国科学院植物研
究所,南京 210014)

摘要:目的 测定刺梨叶醇提物的抗氧化活性和 α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法 采用 DPPH 和 ABTS 氧化自由基清除试
验对刺梨叶乙醇提取物的抗氧化活性进行研究,并对刺梨叶乙醇提取物的 α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了测定。结果 刺
梨叶乙醇提取物具有较强的 DPPH 和 ABTS 氧化自由基清除能力及 α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论 刺梨叶具有较好的抗
氧化活性和 α-葡萄糖苷酶抑制活性。
关键词:刺梨叶;抗氧化;α-葡萄糖苷酶抑制
中图分类号:R285.5 文献标志码:B 文章编号:1007-7693(2015)06-0685-04
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2015.06.010


作者简介:李福明,男,硕士,主治医师 Tel: 18857182436 E-mail: lfmkq@163.com *通信作者:汪洋,女,博士,助理研究员 Tel:
(0571)81398735 E-mail: wangyangsyx@163.com
·686· Chin J Mod Appl Pharm, 2015 June, Vol.32 No.6 中国现代应用药学 2015 年 6 月第 32 卷第 6 期
Study on in Vitro Antioxidant and α-Glucosidase Inhibitory Activities of Ethanol Extract from Rosae
Roxburghii Leaves

LI Fuming1, WANG Yang2*, WEI Min3(1.Hangzhou Stomatological Hospital, Hangzhou 310006, China; 2.Zhejiang Int’l
Herbal Medicine Co., Ltd., Hangzhou 310004, China; 3.Institute of Botany, Jiangsu Province and Chinese Academy of
Sciences, Nanjing 210014, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To study in vitro antioxidant activity and α-glucosidase inhibitions of ethanol extract from leaves
of Rosae roxburghii Tratt. METHODS Antioxidant and free radical scavenging activities of ethanol extract of Rosae
roxburghii leaves were determined by DPPH and ABTS radical scavenging assay. α-Glucosidase inhibitions was determined by
α-glucosidase inhibitory assayed in vitro. RESULTS The ethanol extract of Rosae roxburghii leaves showed significant DPPH
and ABTS radical scavenging activities. The extract also exhibited a significant α-glucosidase inhibitory effect in vitro.
CONCLUSION Rosae roxburghii leaves show significant antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities.
KEY WORDS: Rosae roxburghii leaves; antioxidant activity; α-glucosidase inhibitory activity

缫丝花为蔷薇科蔷薇属 (Rosae roxburghii
Tratt.)植物,分布于陕西、甘肃、江西、福建、湖
南、湖北、安徽、浙江、四川、 云南、贵州、西
藏等地。缫丝花叶又称刺梨叶,为缫丝花的干燥
叶,其味甘、酸涩;归脾、肾、胃经,功能主治
健胃消食,用于治疗积食饱胀、疥痛金疮[1]。刺梨
叶中含有黄酮、多糖、三萜等[2-3]成分,有关刺梨
叶的药理活性报道较少。本研究采用体外试验法
对刺梨叶的抗氧化活性和 α-葡萄糖苷酶抑制活性
进行研究,为探索刺梨叶的生理活性机制,和进
一步开发其药用价值提供基础。
1 仪器与材料
1.1 仪器与试剂
EL204 电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司);
SpectraMax Plus 384 型酶标仪(Molecular Devices
公司);Finnpipette 精密单通道加样器(赛默飞世尔
科技公司)。
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH,分析纯)、
2,2-联氮 -二 (3-乙基 -苯并噻唑 -6-磺酸 )二铵盐
(ABTS,分析纯)、α-葡萄糖苷酶、4-nitropheny-α-
D-glucopyranose(pNPG)均购自美国 Sigma-Aldrich
公司;阿卡波糖(拜糖平,拜耳医药保健有限公司);
过硫酸钾,无水乙醇,二甲亚砜(DMSO)均为分析
纯(上海国药集团);抗坏血酸(维生素 C,分析纯,
南京化学试剂厂)。
1.2 材料
刺梨叶:收集于浙江省杭州市,经浙江省食
品药品检验研究院主任中药师祝明鉴定为蔷薇科
蔷薇属缫丝花(Rosae roxburghii Tratt.)的叶子。常
温阴干,60 ℃干燥后,粉碎过 60 目筛备用。
2 方法
2.1 样品制备
称取刺梨叶粉末 30.0 g,置圆底烧瓶中加入
240 mL 80%乙醇,加热回流 2 次,每次 2 h。合并
2 次提取液,60 ℃减压浓缩至干,得刺梨叶提取物。
2.2 抗氧化活性的测定
2.2.1 清除 DPPH 自由基试验 DPPH 用无水乙
醇配制成浓度为 0.16 mmol·L1 的溶液,置于棕色
瓶中备用。取刺梨叶提取物,用 DMSO 溶解配制
成浓度为 1 mg·mL1 的母液。向 96 孔板中分别加
入 2 μL 稀释成不同浓度的样品溶液,然后再加入
98 μL 无水乙醇,再加入 0.16 mmol·L1 DPPH
100 μL,震荡混匀。25 ℃下反应 30 min,于 517 nm
处测定得样品吸光度(A1),将体系中的样品改为加
入无水乙醇,其他试剂量不变,测定得空白对照
吸光度(A0);当向体系中加入 100 μL 无水乙醇代
替 DPPH 时,测得样品本底吸光度(A2),每个样品
作 3 个重复,取平均值,以抗坏血酸作阳性对照,
按下面公式计算清除率,并计算 IC50 值。
%100)(%/
0
210 
A
AAA清除率
2.2.2 清除 ABTS 自由基试验 ABTS 工作液的
配制:将 5 mL浓度为 7 mmol·L1的ABTS和 88 mL
浓度为 140 mmol·L1 的过硫酸钾溶液混合,在室
温、避光条件下静置过夜,制成 ABTS 储备液,
使用前用无水乙醇稀释成工作液,要求其在
734 nm 处的吸光度为 0.5±0.02。
取刺梨叶提取物,DMSO 溶解,配制成
1 mg·mL1 母液。向 96 孔板中分别加入一系列稀
释成不同浓度的样品溶液 2 μL,然后再加入 48 μL
无水乙醇,再加入 200 μL 的 ABTS 工作液,震荡
中国现代应用药学 2015 年 6 月第 32 卷第 6 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2015 June, Vol.32 No.6 ·687·
混匀,在 30 ℃下反应 6 min,于 734 nm 处测定样
品吸光度(A1),将体系中的样品改为加入无水乙
醇,其他试剂量不变,测定得空白对照吸光度(A0);
当向体系中加入50 μL无水乙醇代替ABTS工作液
时,测得样品本底吸光度(A2),每个样品作 3 个重
复,取平均值,以抗坏血酸作阳性对照,计算清
除率,并计算 IC50 值。
2.3 α-葡萄糖苷酶抑制活性测定
取刺梨叶提取物,加入 DMSO,配制成浓度
约 1 mg·mL1 的溶液,再稀释成系列浓度,作为供
试样品。
酶活测定:在 96 孔板中依次加入 2 μL 酶液、
78 μL磷酸盐缓冲液(67 mmol·L1,pH 6.8),在 37 ℃
反应 10 min,加入 20 μL 反应底物(0.1 mmol·L1
pNPG,磷酸盐缓冲液配制),反应 10 min 后,测
定 405 nm 处的吸光度(A 酶活),将体系中的酶液改
为加入磷酸盐缓冲液,其他试剂量及操作不变,
测定吸光度(A 酶空白)。
样品测定:在反应孔中依次加入 2 μL 酶液、
77 μL 磷酸盐缓冲液、1 μL 样品,在 37 ℃反应
10 min,加入 20 μL 反应底物,反应 10 min 后,
测定 405 nm 处的吸光度(A 样品),将体系中的酶液
改为加入磷酸盐缓冲液,其他试剂量及操作不变,
测定得(A 样品空白)。
以上所有样品及空白反应均重复 3 次,取平
均值作为实验数据。
供试样品对 α-葡萄糖苷酶的抑制百分率=
[(A 酶活A 酶空白)(A 样品A 样品空白)]/(A 酶活A 酶空白)×100%;
并计算 IC50 值。
2.4 数据处理
本试验数据采用 SPSS 17.0 软件进行统计分
析,所有数据均以 sx  表示。
3 结果
3.1 刺梨叶提取物清除 DPPH 自由基活性
刺梨叶提取物清除 DPPH 自由基活性结果见
表 1 和图 1。提取物在 1~20 μg·mL1 内抗氧化活性
随浓度升高而升高。刺梨叶提取物具有良好的清
除 DPPH 自由基活性。
3.2 刺梨叶提取物清除 ABTS 自由基活性
刺梨叶提取物清除 ABTS 自由基活性结果见
表 1 和图 2,提取物在 1~15 μg·mL1 内抗氧化活性
随浓度升高而升高。刺梨叶提取物清除 ABTS 自
由基活性明显高于阳性对照药抗坏血酸的活性。
表 1 刺梨叶提取物对自由基清除活性和 α-葡萄糖苷酶抑
制活性
Tab. 1 Antioxidant and α-glucosidase inhibitory activities
of Rosae roxburghii leaves extract in vitro assay
样 品
DPPH 清除
活性 IC50/
μg·mL-1
ABTS 清除
活性 IC50/
μg·mL-1
α-葡萄糖苷酶
抑制活性 IC50/
μg·mL-1
刺梨叶醇提物 6.32±0.17 4.08±0.11 5.59±0.20
抗坏血酸 18.00±0.97 6.38±0.13 
阿卡波糖   560.97±2.03

图 1 刺梨叶提取物清除 DPPH自由基活性
Fig. 1 DPPH radical scavenging effect of Rosae roxburghii
extract

图 2 刺梨叶提取物清除 ABTS自由基活性
Fig. 2 ABTS radical scavenging effect of Rosae roxburghii
extract
3.3 刺梨叶提取物 α-葡萄糖苷酶抑制活性
刺梨叶提取物 α-葡萄糖苷酶抑制活性结果见
表 1 和图 3。提取物在 1~20 μg·mL1 内 α-葡萄糖
苷酶抑制活性随浓度升高而升高。刺梨叶提取物
α-葡萄糖苷酶抑制活性明显高于阳性对照药阿卡
波糖的活性。

图 3 刺梨叶提取物 α-葡萄糖苷酶抑制活性
Fig. 3 α-glucosidase inhibitory activity of Rosae roxburghii
extract
·688· Chin J Mod Appl Pharm, 2015 June, Vol.32 No.6 中国现代应用药学 2015 年 6 月第 32 卷第 6 期
4 讨论
抗氧化活性物质是一种可通过抑制自由基的
产生,清除、熄灭自由基来抑制自由基参与的过
氧化反应即为抗氧化作用。大量的研究证明生物
体内过量的自由基会引起广泛的损伤效应,引起
蛋白质、核酸、脂类等生物大分子结构和功能的
改变,从而导致许多临床疾病的发生[4-6]。本研究
发现刺梨叶乙醇提取物对 DPPH 自由基和 ABTS
自由基均有良好的清除作用,说明刺梨叶有很好
的抗氧化活性。
在小肠刷状缘细胞的微绒毛上存在着多种葡
萄糖苷酶,如 α-葡萄糖苷酶,其作用是将多糖、
寡糖等水解成单糖,促进其被吸收进人血液循环。
葡萄糖苷酶抑制剂可通过竞争性结合葡萄糖苷酶
上的碳水化合物结合位点,使寡糖不能水解为单
糖,阻止其被吸收,从而使餐后血糖峰值渐变低
平、波动减小[7]。本研究发现刺梨叶乙醇提取物对
α-葡萄糖苷酶有很强的抑制作用,其活性明显高于
阳性对照药,说明刺梨叶有良好的 α-葡萄糖苷酶
抑制活性,可以作为降血糖药物进一步开发。
本研究结果表明刺梨叶有良好的抗氧化活性
和 α-葡萄糖苷酶抑制活性,具有很好的研究和开
发价值。
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收稿日期:2014-12-28




苦豆子提取过程中氧化苦参碱与苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的相互
转化

冷晓红,郭鸿雁,陈海燕(宁夏职业技术学院,银川 750021)

摘要:目的 研究苦豆子药用植物提取过程中氧化苦参碱与苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的相互转化。方法 采用不同
提取溶媒(水及 55%乙醇)、不同 pH 及不同提取时间 3 个因素,HPLC 测定苦豆籽、苦豆草植物中氧化苦参碱与苦参碱,
氧化槐果碱与槐果碱的含量。结果 随着提取时间的增加,氧化型生物碱转化为还原型生物碱的量随之增大;提取溶剂
对苦豆子中生物碱转化的影响无明显差异;随着提取时间的增加,氧化苦参碱与苦参碱总量呈缓慢下降的趋势,氧化槐
果碱与槐果碱总量也呈缓慢下降的趋势。结论 氧化型生物碱与还原型生物碱转化趋势可为苦豆子生物碱质量控制提供
依据,也可为工业化提取苦豆子生产工艺提供依据。
关键词:苦参碱;氧化苦参碱;槐果碱;氧化槐果碱;相互转化
中图分类号:R284.2 文献标志码:A 文章编号:1007-7693(2015)06-0688-04
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2015.06.011



基金项目:科技部国家科技支撑项目(2011BAI05B00)
作者简介:冷晓红,女,教授 Tel: (0951)2135045 E-mail: lxh-zss@163.com