全 文 ：植物资源与环境学报　2005, 14(1):56 -57　　　　　　　
Journa l of P lan tR esources and Environmen t　　　　　
　　　 多花野牡丹的抑菌活性及总黄酮含量测定
苏燕评 1 ,周孙英 1 ,刘剑秋 2
(1. 福建医科大学药学院 ,福建福州 350004;2. 福建师范大学生物工程学院 ,福建福州 350007)
Determ ination of ant i-m icrob ia l act ivity and the con ten t of flavonoid s ofM elastoma affine　SU Yan-ping1 , ZHOU
Sun-y ing1 , L IU Jian-qiu2(1. D iv ision o f Pharm acy, Fu jian M ed ica lUniversity, Fuzhou 350004, Ch ina;2. Bioeng ineering
College, Fu jian No rm a l Un ive rsity, Fuzhou 350007, China), J. P lant R esour. ＆Environ. 2005, 14(1):56 - 57
Abstrac t:The anti-m icrob ia l activ ities o f leave s and stem s from Melastom a affine D. Don w ere studied, and the con tent o f
flavono ids and the ir seasona l varia tion we re m easured by m eans o f po lyam ide puring and a lum inium color-deve loping
m ethod, ru tin w as used as a standa rd. Results showed that the ex trac t had no e ffects on Asperg illus flavus L ink, Asperg illus
n iger V. T iegh. and Penicillium chrysogenum Thom bu t ev ident inhibitive e ffects on Escherichia coli(M igula) Caste llani e t
Cha lm ers, Bacillus subtilis (Ehrenbe rg) Cohn, S taphy lococcus aureus Rosenbach, P roteus vulgaris Hauser and Sarcina
lutea Schrōe te r. The h ighest yie ld o f flavonoids from leaves w as 3. 95% in M ay, wh ich w as regarded as its ava ilab le
componen.t
关键词:多花野牡丹;抑菌活性;黄酮类化合物
K ey words:M elastom a a ffine D. Don;anti-m ic robial ac tivity;flavono ids
中图分类号:Q949. 762. 3　　文献标识码:A　　文章编号:1004 - 0978(2005)01 -0056 - 02
　　多花野牡丹(Melastom a affine D. Don)又名炸腰果 、野广
石榴 等 [ 1] , 属 野 牡 丹 科 (M elastom ataceae)野 牡 丹 属
(Melastoma L. )植物 , 在福建主要分布于南靖 、华安 、龙岩 、
漳平 、永泰 、福清 、福州等地 ,资源丰富 [ 2] 。多花野牡丹全株
可供药用 , 有消除积滞 、收敛止血 、散淤消肿等功效 ,捣烂外
敷 , 可治外伤出血 、刀枪伤 [ 3] 。其叶片中含有水不溶性黄酮 、
水溶性黄酮苷 , 具有抗炎 、抗菌及抗病毒的作用 [ 1] 。临床报
道多花野牡丹已在治疗肠道感染 、呼吸道感染 、烧伤 、宫颈糜
烂 、皮肤感染等多方面取得效果 [ 1 , 4] 。预实验证实 [ 5] ,多花野
牡丹提取物含有黄酮类化合物 、香豆素与萜类内酯化合物 、
酚类化合物和鞣质 、有机酸等 , 不含生物碱。本文对多花野
牡丹枝条和叶片的抑菌活性进行了研究并测定其 1 a内的总
黄酮含量的变化。
1　材料和方法
1. 1　材料
1. 1. 1　实验材料　多花野牡丹(Melastom a a ffine D. Don)采
自福州鼓山 , 分为叶片和枝条 , 洗净烘干 ,粉碎备用。
1. 1. 2　仪器　YJ-875B医用净化工作台;752型紫外光栅分
光光度计(上海精密科学仪器有限分司)。
1. 2　方法
1. 2. 1　抑菌活性测定　配置牛肉膏蛋白胨培养基 (用于培
养细菌)和马铃薯培养基(用于培养霉菌)[ 6] , 转接活化大肠
杆菌〔E scherich ia coli (M igula) Caste llan i e t Cha lm ers〕、枯草
杆菌 〔Bacillus subtilis (Ehrenbe rg) Cohn〕、普 通变形菌
(P roteus vulgaris H ause r)、金黄色葡萄球菌 (S taphy lococcus
aureusRosenbach)、藤黄八叠球菌 (Sarcina lutea Schrōe te r)和
黄曲霉(Aspergillus flavus L ink)、黑曲霉 (Aspergillus niger V.
T iegh. )、产黄青霉 (Pen icillium chry sogenum Thom)。制直径
6 mm的滤纸片若干 ,湿热灭菌 ,取出后备用。称多花野牡丹
的叶片和枝条粗粉各 5 g,提取溶剂分别为 95%乙醇和蒸馏
水 , 恒温水浴加热 3 h, 温度 80℃。过滤 , 滤液定容至 100
mL,得 4种供试溶液。
制备菌悬液 ,吸取 0. 2 m L的菌悬液至相应的培养基中 ,
使菌液均匀涂布于培养基表面。将浸有不同溶液的滤纸片
贴于培养基上 ,分别以浸有无菌水和 95%乙醇的滤纸片做对
照。将培养皿翻转 , 置温箱中培养。待菌丝体生长良好后取
出观察抑菌效果 , 记录抑菌圈直径。实验重复 3次 , 计算平
均值。
1. 2. 2 制备芦丁标准曲线 [ 7] 芦丁为标准品 ,聚酰胺粉(60 ～
80目)以 60%乙醇预处理。以聚酰胺吸附-硝酸铝显色法于
510 nm处测不同浓度芦丁溶液的吸光度 ,根据所测得的芦丁
溶液的吸光度 ,得芦丁浓度 Y(m g mL - 1)与吸光度 A的线
性方程:Y =0. 872A - 0. 842×10- 2 , 线性范围 0 ～ 0. 5 mg, 相
关系数 r=0. 999 7。
1. 2. 3　总黄酮含量测定　从 2002年 3月至 2003年 3月 ,每
2个月采 1次多花野牡丹的叶片和枝条。取不同月份的叶片
和枝条粗粉各 1 g于磨口平底烧瓶中 , 以 70%乙醇为溶剂 ,
80℃水浴加热 3 h提取黄酮类化合物 , 过滤 , 取滤液(叶的滤
液需用石油醚萃取 , 去除叶绿素 ), 将滤液定容至 50m L。准
收稿日期:2004 - 07 -12
作者简介:苏燕评(1978 -), 女, 福建德化人 ,助教 , 理学硕士 ,主要
从事植物资源化学研究。
确吸取滤液 4. 0 m L, 加入 500 mg聚酰胺粉 , 搅匀 , 转移到砂
芯漏斗中 , 用 70%乙醇分数次洗脱 , 收集洗脱液 , 定容至 50
mL。精确吸取样液 5 mL于具塞试管中 , 加 5% N aNO
2
0. 3
mL,摇匀 , 放置 6 m in;加 10% A l(NO3)3 0. 3 mL, 摇匀 ,放置 6
m in;加 1 m o l L - 1 NaOH 4 mL和蒸馏水 0. 4 mL,摇匀 , 放置
15 m in。空白为:吸取 5 m L蒸馏水于具塞试管中 , 同上操作。
以空白为对照 , 于 510 nm测定吸光度 ,通过标准曲线线性方
程计算样液中的总黄酮含量(m g)。由所求得的值做总黄酮
含量年度变化曲线 [ 7] 。
样品中总黄酮含量(%)=CV1V3
WV2V4
×1
10
×100%。式中 , C
为样液所含的黄酮量(m g);V1为抽提定容体积(mL);V2为聚
酰胺处理时取样体积 (mL);V3为聚酰胺处理后定容体积
(m L);V4为显色反应测定取用样液体积(mL);W 为称样量
(g)。
2　结果和分析
2. 1　多花野牡丹枝条和叶片的抑菌活性
多花野牡丹枝条和叶片抑菌活性实验结果见表 1。
表 1　多花野牡丹叶片和枝条的抑菌活性 1)
Table 1　 The anti-m icrobial activ ities of leaves and stem s from
Me lastoma a ffine D. D on1)
样品
S amp le
抑菌圈直径 /mm　D iam eter of an ti-m icrobial zon e
EC BS PV SA SL AN AF PC
1 8. 5 - 8. 3 - - - - -
2 10. 0 - 8. 9 - 9. 0 - - -
3 10. 5 9. 0 9. 5 9. 5 10. 0 - - -
4 10. 5 9. 5 10. 7 10. 5 9. 0 - - -
5 - - - - - - - -
6 8. 6 7. 5 7. 5 8. 0 8. 0 8. 0 - 7. 0
　1) 1:枝条水提物 W ater extract from stem s;2:叶片水提物 W ater
extract from leaves;3:枝条 95%乙醇提取物 95% ethenol extract
from s tem s;4:叶片 95%乙醇提取物　 95% ethanol extract from
leaves;5:无菌水 W ater;6:95%乙醇 95% eth anol;EC:大肠
杆菌 E scherich ia coli (M igu la) C aste llan i et Chalm ers;BS:枯草杆菌 B aci llus subtilis (Eh renberg) C ohn;PV:普通变形菌
P roteus vu lgaris H auser; SA:金黄色葡萄球菌 S taphylococcus
aureu s Rosenbach;SL:藤黄八叠球菌 Sarcina lu tea S chrō eter;
AN:黑曲霉 Asperg illu s nigerV. T iegh. ;AF:黄曲霉 Asperg i llus
flavus Link;PC:产黄青霉 Pen icillium chrysog ernum Thom.
从实验结果看 , 多花野牡丹叶片和枝条的提取物对黄曲
霉 、黑曲霉 、产黄青霉没有抑制作用而对大肠杆菌 、枯草杆
菌 、普通变形菌 、金黄色葡萄球菌 、藤黄八叠球菌具有较强的
抑菌活性。叶片和枝条的水提液对大肠杆菌和普通变形菌
有抑制作用 , 对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌不敏感 ,二者的
95%乙醇提取液则对 5种细菌均有较大抑制作用 , 这说明乙
醇更容易将植物体内有效抑菌物质提取出来。 叶片提取液
的抑菌圈直径大于枝条提取液 ,说明叶片含有更多的抑菌活
性物质。
2. 2　枝条和叶片总黄酮含量的季节性变化
多花野牡丹枝条和叶片的总黄酮含量在 1 a内的变化趋
势基本一致(图 1),叶片的总黄酮含量明显高于枝条。枝条
总黄酮含量在 1月时最低 , 为 0. 95%;叶片总黄酮含量在 11
—●— 枝条 S tem;—■— 叶片 Leaf
图 1　多花野牡丹枝条和叶片总黄酮含量的季节性变化
F ig. 1　The sea sona l varia tion of conten t o f to ta l
flavono ids in stem s and leaves fromMelastoma a ffine D. D on
月时最低 , 为 1. 03%;两者的总黄酮含量均在 5月份达到最
高峰 , 分别为 2.73%和 3. 95%;叶片总黄酮含量比枝条高
1. 22%。究其原因 , 5、6月份是多花野牡丹的花期 , 在花期之
前 , 植物的营养生长达到最高点 , 叶片和枝条中的黄酮类化
合物含量也达到最高水平 , 在生殖生长过后的 7、 8月份 , 其
含量迅速降低。多花野牡丹化学成分中的黄酮类化合物具
有抗炎 、抗菌作用 ,故采收多花野牡丹以 5月份为宜。
参考文献:
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社 , 1977. 941.
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四卷)[M ] . 福州:福建科学技术出版社 , 1989. 113 - 114 .
[ 3] 　中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志(第五十三卷
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[ 5] 　肖崇厚. 中药化学 [M ] . 上海:上海科学技术出版社 , 2000.
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[ 6] 　沈　萍 ,范秀容 ,李广武. 微生物学实验(第三版)[M ] . 北京:
高等教育出版社 , 1999. 214 - 215.
[ 7] 　元晓梅 ,蒋明蔚. 聚酰胺吸附-硝酸铝显色法测定山楂及山楂
制品中的总黄酮含量 [ J] . 　食品与发酵工业 , 1996, 22(4):
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(责任编辑:张垂胜)
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