全 文 ：排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠
过氧化脂质含量的影响
余胜民1, 钟 鸣1, 黄琳芸1, 杨增艳1, 雷 晟2
( 1.广西民族医药研究所,广西南宁 530001; 2.广西壮族自治区卫生防疫站,广西南宁 530021)
摘 要: 观察排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠过氧化脂质含量的影响及其作用机理。通过预防实验和治疗实验,分别测
定大鼠肝脏线粒体过氧化物歧化酶( SOD)活性、丙二醛( MDA )、肝组织羟脯氨酸 ( Hyp)含量和血清中 SOD、谷丙转氨酶( SG-
PT )活性、MDA 和透明质酸( HA)含量,观察肝脏组织的病理改变, 并与秋水仙碱进行药效比较。结果证明: 无论是预防实验
或是治疗实验,排钱草总生物碱均能显著提高肝纤维化大鼠肝线粒体及血清中 SOD 活性, 降低肝线粒体及血清中 MDA 含
量,降低血清 SGPT 活性、HA和肝组织中 Hyp 含量, 效果与秋水仙碱相近,与模型组比较, 具有显著的统计学意义。指出, 排
钱草总生物碱具有抗脂质过氧化的作用。
关 键 词: 排钱草; 总生物碱; 肝纤维化; 过氧化脂质
中图分类号: R931. 6 文献标识码: A 文章编号: 1009 - 5276( 2001) 06 - 0645 - 02
排 钱 草 1 Desmodium pulchellum ( L . )
Benth 2,又名钱串草、双排钱和排钱树等,属豆科植
物, 主要分布于两广、福建和云南等地。味淡苦、性
平。具有清热利湿、祛风、活血化瘀、软坚散结等作
用。广西民间常用来治疗慢性肝炎、肝脾肿大和肝
硬化腹水等。笔者曾对其水、醇提取物进行过初步
的抗大鼠四氯化碳( CCl4)实验性肝纤维化药效学实
验研究,证实排钱草具有明显的抗肝纤维化作用。
1 材料与方法
动 物 Wistar大鼠,雌性,体重 232. 7? 13. 2g,
广西中医药研究所动物室提供。
药 物 排钱草总生物碱,本室提取,临用时以
0. 1mol /L的盐酸溶解,蒸馏水稀释至所需浓度并调
PH值至 6. 5;秋水仙碱, 昆明制药股份有限公司出
品,批号 980825, 用研钵研成粉末,蒸馏水溶解并稀
释至实验所需浓度, 临用摇匀。
主要试剂 SOD、MDA、SGPT 测试盒均购自南
京建成生物工程研究所; HA 测试盒购自上海海研
医学生物技术中心; CCl4, 广东汕头西陇化工厂, 批
号 980413; L - Hyp, 上海康达氨基酸厂, 批号
931001; 氯氨 T, 广东汕头新宁化工 厂, 批号
980603;对二甲氨基苯甲醛,北京化学试剂公司, 批
号 980529。其余试剂均为国产分析纯。
收稿日期: 2001 - 04 - 16。
作者简介: 余胜民( 1970 - ) , 男,助理研究员。
研究项目: 广西科技厅青年科学基金资助项目。
造模方法 首次大鼠皮下注射纯 CCl4 5ml /kg
体重, 以后改为皮下注射 CCl440% , 花生油溶液
3ml /kg体重, 每周 2次,共 6周。喂正常固体饲料,
自由饮水。
分组及治疗方法 ¹ 预防实验 60 只大鼠自
造模之日起,随机分为总生物碱组( 20ml /kg 体重)、
秋水仙碱组 ( 0. 1mg /kg 体重)、模型组和正常组。
药物组均在造模开始的同时灌胃( ig )给药, 每天 1
次。模型组和正常组 ig 以等量的蒸馏水。至第 6
周末,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,在冰板上采集血液
和肝组织标本。º治疗实验 60只大鼠经 6周造
模后,停止模型处理因素,随机分为总生物碱高剂量
组( 15mg /kg 体重)、总生物碱低剂量组 ( 10mg /kg
体重)、秋水仙碱组和模型组。药物组给药方法与预
防实验相同。模型组和同期饲养的 15 只正常组大
鼠均 ig 以等量的蒸馏水。至第 11 周末, 戊巴比妥
钠腹腔注射麻醉, 在冰板上采集血液和肝组织标本。
观测项目与方法 ¹ 肝线粒体和血清 SOD活
性测定采用邻苯三酚法; 肝线粒体和血清 MDA 含
量测定采用 TBA 反应比色法;血清 SGPT 活性测定
采用改良赖氏法; 血清 HA含量测定采用放免法;肝
干粉中 Hyp含量测定参考许志勤等方法。º病理
学观察 取肝右叶, 用 10%的中性福尔马林液固
定,石蜡包埋, 分别作 HE 染色和胶原纤维特殊染
色,光镜下观察肝脏组织、细胞的变化。
资料统计方法 采用双侧 t检验。
2 结 果
645
20 0 1年 1 2月第 1 9卷第 6期
December 2001, Vol. 19, No. 6
中 医 药 学 刊
Study Journal of T raditional Chinese Medicine
DOI：10.13193/j.archtcm.2001.06.116.yushm.070
预防实验结果 ¹排钱草总生物碱对大鼠肝线
粒体 SOD 活性、MDA、肝组织 Hyp 含量和血清
SOD、SGP 活性、MDA 及 HA 含量的影响。大鼠造
模 6周后,与正常组比较,模型组肝线粒体和血清中
SOD活性显著降低( P < 0. 001) , 肝线粒体 MDA、
肝粉中 Hyp含量和血清中 SGPT 活性、MDA 和 HA
含量则显著增高。排钱草总生物碱组肝线粒体和血
清中 SOD活性比模型组的高( P < 0. 001) , 肝线粒
体 MDA、肝粉中 Hyp 含量和血清中 SGPT 活性、
MDA和 HA含量虽略有增高, 但与模型组比较, 仍
有显著性差异,效果与秋水仙碱组相近。详见表 1。
表 1 预防实验各组大鼠肝线粒体 SOD活性、MDA、肝组织 Hyp含量和
血清 SOD、SGPT活性、MDA及 HA含量比较( n= 15,ŠX ? SD)
组别
剂量
( mg /kg)
SOD( NU /mg. prot) MDA( nmol /ml)
肝线粒体 血清 肝线粒体 血清
SGPT
( U /L)
HA
( ng/ml)
Hyp
( mg /g肝粉)
正常组 ) 190. 24 ? 27. 50* * * 462. 25 ? 27. 03* * * 5. 06 ? 2. 69* * 6. 09 ? 0. 43* 43. 91 ? 19. 71* * * 42. 24 ? 8. 75* * * 20. 87 ? 3. 63* * *
模型组 ) 59. 97 ? 18. 27 102. 23 ? 52. 83 36. 18 ? 15. 45 6. 70 ? 0. 81 365. 43 ? 51. 49 57. 45 ? 8. 12 26. 51 ? 4. 12
秋水仙碱组 0. 1 79. 07 ? 14. 17* * 248. 02 ? 49. 40* * * 17. 41 ? 7. 66* * 6. 19 ? 0. 32* 168. 20 ? 62. 90* * * 47. 32 ? 10. 17* * 21. 69 ? 3. 44* *
总生物碱组 20 88. 78 ? 17. 84* * * 190. 13 ? 52. 83* * * 22. 27 ? 11. 66* * 5. 86 ? 0. 63* * 160. 13 ? 23. 03* * * 49. 33 ? 9. 36* 21. 05 ? 2. 93* * *
注:与模型组比较, * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 0 01(下表同)
º病理组织学观察 HE 染色标本观察: 模型
组肝小叶失去正常结构,肝板排列紊乱。肝细胞普
遍变性,表现为胞质内有大量脂滴积聚,少数肝细胞
肿胀或气球样变。部分肝细胞坏死,在坏死区及周
围可见炎症细胞浸润,肝细胞增生活跃,核分裂相多
见。肝窦受压变窄。Kupffer. s细胞增生。门脉区
有大量成纤维细胞、纤维细胞和增生的胶原纤维, 伴
炎症细胞和增生的小血管, 组成纤维间隔向小叶内
伸展。与模型组比较, 排钱草总生物碱组肝小叶基
本正常,变性坏死的肝细胞少,可见少量的炎症细胞
浸润,与秋水仙碱组相似。小叶散在性坏死, 胶原纤
维增生明显。肝脏胶原纤维特殊染色: 模型组肝脏
内主要由胶原纤维组成的纤维间隔正在形成或已经
形成, 分割、包绕肝小叶, 部分切片可见假小叶。排
钱草总生物碱组和秋水仙碱组纤维化的程度较模型
组轻,未见假小叶形成。
治疗实验结果 ¹ 排钱草总生物碱对肝纤维化
大鼠肝线粒体SOD活性、MDA、肝组织 Hyp含量和
血清 SOD、SGPT 活性、MDA 及 HA 含量的影响。
模型动物在终止病因刺激 6周后, 肝线粒体和血清
中 SOD活性虽有一定程度的恢复、血清 SGPT 活性
亦有一定程度的下降, 但肝线粒体和血清中 MDA、
血清中 HA 和肝粉中 Hyp 含量不变甚至增高。而
各用药组上述指标均有不同程度的改善, 部分指标
与正常组相近,与模型组比较,均具有显著的统计学
意义。详见表 2。
表 2 治疗实验各组大鼠肝线粒体 SOD活性、MDA、肝组织 Hyp含量和
血清 SOD、SGPT活性、MDA及 HA含量比较( n= 15,ŠX ? SD)
组别 剂量
( mg /kg)
SOD( NU /mg. prot) MDA( nmol /ml)
肝线粒体 血清 肝线粒体 血清
SGPT
( U /L)
HA
( ng/ml)
Hyp
( mg /g肝粉)
正常组 ) 145. 17 ? 45. 84* * 415. 44 ? 67. 71* * * 5. 14 ? 2. 02* * 5. 59 ? 0. 49* * * 46. 88 ? 7. 70* * * 58. 45 ? 5. 19* * * 21. 57 ? 2. 50* * *
模型组 ) 89. 38 ? 43. 15 247. 52 ? 86. 23 31. 46 ? 13. 27 6. 85 ? 1. 07 180. 83 ? 18. 33 74. 73 ? 12. 83 31. 91 ? 7. 50
秋水仙碱组 0. 1 137. 76 ? 32. 31* * 383. 37 ? 61. 15* * * 13. 55 ? 6. 51* * 5. 25 ? 0. 51* * * 79. 26 ? 10. 24* * * 55. 85 ? 13. 88* * * 30. 21 ? 5. 17
总生物碱
高剂量组 15 189. 73 ? 54. 49
* * *
356. 25 ? 51. 74
* * *
14. 08 ? 9. 43
* *
5. 05 ? 0. 50
* * *
84. 12 ? 11. 11
* * *
51. 76 ? 6. 46
* * *
29. 24 ? 5. 88
总生物碱
低剂量组 10 136. 57 ? 58. 90
*
377. 70 ? 33. 02
* * *
18. 77 ? 10. 68
* *
5. 48 ? 1. 22
* *
80. 88 ? 11. 41
* * *
55. 77 ? 8. 17
* * *
25. 51 ? 5. 00
*
º病理组织学观察 模型组动物在终止病因刺
激 6周后, 仍呈典型的肝纤维化病理改变。模型组
动物肝组织 HE 染色光镜下见肝板结构紊乱, 肝细
胞肿胀甚至气球样变、再生活跃,部分切片仍有少量
的炎细胞。Kupffer. s细胞和贮脂细胞增多。纤维
组织大量增生并向小叶内伸展, 形成假小叶。而各
用药组肝组织结构恢复正常, 肝板排列规则, 变性的
肝细胞少,肝细胞再生活跃。无炎细胞浸润,纤维组
织明显减少。肝脏胶原纤维特殊染色: 模型组肝组
织内胶原纤维大量增生,在小叶内形成纤维间隔,大
部分切片可见假小叶, 而各用药组胶原纤维明显减
少,无假小叶形成。
本实验结果表明: 排钱草总生物碱具有明显的
抗肝纤维化作用。
646 中 医 药 学 刊 2001 年第 19卷