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接骨木根皮抗炎镇痛作用的实验研究



全 文 :接骨木根皮抗炎镇痛作用的实验研究
董培良 ,闫雪莹 ,匡海学 ,韩华
(黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:观察接骨木根皮的抗炎镇痛作用。方法:采用小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀法观察接骨木的
抗炎作用;采用热板法观察接骨木的镇痛作用 。结果:接骨木高 、中剂量组耳肿胀度均处于较低水平 ,差
异有显著意义(与空白组比较 P<0.05或 P<0.1);接骨木高 、中剂量组用药 1h 、2h 、4h和 6h足肿胀率
均处于较低水平 ,差异有显著性意义(与空白组比较 P<0.01或 P <0.05);接骨木各剂量组用药后 0.5 、
1和2h小鼠痛域值均处于较高水平 ,差异有显著意义(与空白组比较 P <0.01或 P<0.05)。结论:接骨
木根皮具有抗炎镇痛作用 。
关键词:接骨木;抗炎;镇痛
中图分类号:R285.5   文献标识码:A   文章编号:1002-2392(2008)05-0018-02
收稿日期:2008-09-02  修回日期:2008-09-15
基金项目:教育部博士点基金(20040228007);黑龙江省自然科学基金重
点项目(ZJY04-02);国家中医药管理局项目(04-05ZL08);
哈尔滨市科技局攻关项目(2005AA3CS188)
作者简介:董培良(1973-),男 , 博士 ,研究方向:中药药理学研究 , E-
mail:t jaliang@yahoo.com.cn
  接骨木(Sambucus williamsii Hance)为忍冬科(Ca-
prifoliaceae)接骨木属(Sambucus linn)植物 ,又名续骨
木 、大接骨丹 、公道老 、扦扦活 、马尿骚等[ 1 、2] 。接骨木
民间用药由来已久 ,大量临床观察表明 ,其治疗骨折有
疗程短 、恢复功能快 、疗效高的特点 。前期实验我们已
经确定了接骨木根皮促进骨折愈合的有效部位[ 3 、4] ,为
了深入探讨该有效部位在骨折愈合中的作用 ,我们从
动物实验角度设计了本实验 ,旨在考察接骨木根皮在
促进骨折愈合的同时是否具有抗炎镇痛作用 ,从而为
接骨木更广泛的应用于临床提供理论依据。
1 接骨木的抗炎作用
1.1 对小鼠耳肿胀的影响
1.1.1 动物
昆明种小白鼠 ,雌雄各半 ,体重 20±2g ,合格证号
P00201007号 ,由黑龙江中医药大学实验动物中心提
供。
1.1.2 药品与试剂
接骨木有效部位(1g 相当于 29.4g 生药):黑龙江
中医药大学药学院中药化学教研室自行制备 。
跌打丸:哈药集团世一堂制药厂生产 , 批号:
0505129。
1.1.3 实验仪器
G135型电子天平:梅特勒(上海托利多仪器有限
公司)。
1.1.4 分组及给药方法
取20±2g 小鼠 50只 ,雌雄各半 ,随机分为 5组 ,
每组 10 只 , 分别为空白对照组 、阳性药跌打丸组
(0.76g kg)、接骨木低(0.46g kg)、中(0.92g kg)、高
(1.84g kg)三个剂量组。各组均连续 7d灌胃给药 ,空
白对照组给同体积蒸馏水 。
1.1.5 实验方法与观测指标[ 5]
末次给药 50min 后 ,立即在小鼠左耳前后两面涂
抹二甲苯 0.02ml , 3.5h 后将小鼠脱臼处死 ,剪下左右
两片耳 ,用 3mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳
片 ,电子分析天平称两耳重量 ,用每只鼠的左耳片重量
减去右耳片重量 ,即为耳肿胀度。比较各组耳片的肿
胀度 。
1.1.6 统计方法
所有数据以 x ±s表示 ,组间比较用 t检验。
1.1.7 实验结果
结果见表 1.1 。由表 1.1可知 ,同空白组比较 ,接
骨木高 、中剂量组耳肿胀度均处于较低水平 ,差异有显
著意义(P <0.05或 P<0.01),且接骨木各组呈剂量
依赖关系 。
表 1.1 接骨对二甲苯所致的小鼠耳肿胀的影响( x±s)
组别 例数(只) 剂量(g kg) 耳肿胀度(mg) P值
空白对照 10 — 3.9±1.2
接骨木高 10 1.84 2.3±1.1 P<0.05
接骨木中 10 0.92 2.7±1.3 P<0.01
接骨木低 10 0.46 2.9±1.3
跌打丸  10 0.76 2.9±1.5
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Acta Chinese Medicine and Pharmacology
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Vol.36 , No.5 , 2008
1.2 对大鼠足肿胀的影响
1.2.1 动物
Wistar大白鼠 ,雌雄各半 ,体重 180±20g ,合格证
号P00102004号 ,由黑龙江中医药大学实验动物中心
提供 。
1.2.2 药品与试剂 同 1.1.2
1.2.3 分组及给药方法
取健康大白鼠 50 只 ,随机分为 5组 ,每组 10只 ,
分别为空白对照组 、阳性药跌打丸(0.52g kg)组 、接骨
木低(0.32g kg)、中(0.64g kg)、高(1.28g kg)三个剂量
组。各组均连续 7d灌胃给药 ,空白对照组给同体积蒸
馏水 。
1.2.4 实验方法与观测指标[ 6]
采用容积测量法 。实验前先测量每鼠右后肢正常
足趾容积 ,末次给药 30min后将大鼠右后肢拉直 ,自足
趾中部皮下注射 10%鸡蛋清 0.1ml 爪致炎 ,同时每只
鼠灌胃给负荷水 2ml 100g 。致炎后分别在 0.5h 、1h 、
2h 、4h 、6h测定其足跖容积。致炎前肿胀率为 0 ,计算
鼠爪肿胀率。
肿胀率=(肿胀后容积-肿胀前容积) 肿胀前容

1.2.5 统计方法
所有数据以 x ±s表示 ,组间比较用 t检验。
1.2.6 实验结果
结果见表 1.2。由表 1.2可知 ,给药前各用药组足
容积与空白对照组比较差异没有统计学意义(P >
0.05)。同空白对照组比较 ,用药 0.5h 各组足肿胀率
没有明显差异性;用药1h 、2h 、4h和6h ,接骨木高 、中剂
量组和跌打丸组足肿胀率均处于较低水平 ,有显著性
差异(P <0.01或 P <0.05)。
表 1.2 接骨木对蛋清导致的大鼠足肿胀的影响( x±s)(n=10)
组别 剂量(g kg)
正常足
容积(ml)
足肿胀率(%)
0.5h 1h 2h 4h 6h
空白对照 — 1.13±0.23 0.67±0.21 0.76±0.14 0.68±0.20 0.45±0.18 0.35±0.16
接骨木高 0.32 1.10±0.12 0.60±.0.11 0..55±0.12** 0.46±0.11* 0.25±0.11* 0.20±0.10*
接骨木中 0.64 1.11±0.18 0.58±0.13 0.58±0.11** 0.50±0.10* 0.18±0.11** 0.22±0.12*
接骨木低 1.28 0.96±0.10 0.63±0.11 0.62±0.12* 0.56±0.13 0.36±0.10 0.33±0.10
跌打丸  0.52 1.12±0.10 0.61±0.11 0.49±0.10** 0.49±0.13* 0.22±0.13** 0.21±0.12
  注:同空白对照组相比*P<0.05, **P<0.01。
2 接骨木的镇痛作用
2.1 动物 同 1.1.1
2.2 药品与试剂 同1.1.2
2.3 实验仪器
ZXC-3R型恒温自控热板仪:石家庄永峰电子通
讯设备厂 。
2.4 分组及给药方法
取健康小鼠 ,实验前在热板仪上测鼠痛阈。凡 3s
内出现舔足或 30s不出现舔足者均弃去不用。取筛选
合格的小鼠 50只 ,随机分为 5组 ,每组 10只 ,分别为
空白对照组 、阳性药跌打丸组(10.4mg kg)、接骨木低
(0.46g kg)、中(0.92g kg)、高(1.84g kg)三个剂量组。
各组均灌胃给药 1次 ,空白对照组给同体积水 。分别
在给药后 0.5h 、1h 、2h 、4h 、测定其痛域值 。
2.5 实验方法与观测指标[ 6]
给药 30min后 ,将小鼠放在热板上 ,记录出现舔后
足所需时间作为该鼠的痛阈值 ,大于60s按 60s计算。
2.6 统计方法
所有数据以 x ±s表示 ,组间比较用 t检验。
2.7 实验结果
结果见表 2.1。由表 2.1可知 ,给药前各组小鼠痛
域值与空白对照组比较差异没有统计学意义(P >
0.05)。同空白对照组比较 ,给药后 0.5 、1和 2h 各组
小鼠痛域值均处于较高水平 , 差异有显著意义(P <
0.01或 P <0.05);给药后 4h ,各组小鼠痛域值无统计
学意义。
表 2.1 接骨木对热板法引起的小鼠痛域值的影响( x±s) (n=10)
组别 剂量(g kg)
正常痛
域值(s)
痛域值(s)
0.5h 1h 2h 4h
空白对照 — 15.1±3.51 15.3±3.40 15.2±3.20 15.4±3.10 15.3±3.50
接骨木高 1.84 14.8±3.82 17.1±3.54 25.0±3.54** 20.0±3.25** 17.2±3.82
接骨木中 0.92 15.2±4.00 18.2±3.50** 26.4±3.60** 21.4±3.20** 17.3±4.04
接骨木低 0.46 14.7±3.40 16.6±3.82* 20.8±2.82** 17.3±2.42* 15.0±3.47
跌打丸  0.76 15.0±3.81 18.0±3.32** 24.3±3.34** 19.3±3.25** 16.0±3.87
  注:同空白对照组相比*P<0.05, **P<0.01。
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中  医  药  学  报
Acta Chinese Medicine and Pharmacology
3 讨论
骨折是骨科的常见病 ,是骨结构连续性的中断。
骨折后 ,骨折断端的骨细胞 、骨膜以及周围组织细胞坏
死 ,坏死物刺激局部产生创伤性炎症 ,包括血管扩张 、
血浆渗出 、水肿 、炎性细胞浸润等炎症反应 ,病人会有
疼痛的感觉。本文是在前期实验已经确定了接骨木根
皮具有促进骨折愈合作用的基础上[ 3 、4] ,深入探讨接骨
木根皮在骨折愈合中的抗炎镇痛作用。实验结果接骨
木可明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀和蛋清引起的
大鼠足肿胀 ,可使热板法引起的小鼠痛域值明显增加 ,
具有抗炎镇痛作用。
参考文献:
[ 1]  余传隆 ,黄泰康.中药辞海[M] .中国医药科技出版社, 1997:10~
12.
[ 2]  江苏新医学院.中药大辞典[ M] .上海科学技术出版社 , 1985:
2093.
[ 3]  吕芳.接骨木根皮化学成分的研究[ D] .黑龙江中医药大学, 2002.
[ 4]  韩美华.接骨木根皮化学成分及其复方制剂成型工艺的研究
[ D] .黑龙江中医药大学 ,2003.
[ 5]  陈奇.中药药理研究方法学[ M] .人民卫生出版社 , 1993:297-
307.
[ 6]  陈奇.中药药理研究方法学[ M] .人民卫生出版社 , 1993:366-
367.
溃疡平抗大鼠乙酸胃溃疡作用及其机理研究
王滨1 ,赵红晔1 ,李雪岩1 ,卢长柱1 ,曹军2*
(1.齐齐哈尔医学院 ,黑龙江 齐齐哈尔 161001;2.中国中医科学院中药研究所 ,北京 100000)
摘 要:目的:研究溃疡平对大鼠乙酸胃溃疡的影响 ,并对其作用机理进行初步探讨 。方法:采用改良
Okabe法制备慢性乙酸胃溃疡模型 ,实验设正常对照组 、模型对照组 、溃疡平高 、中 、低剂量组 、盐酸雷尼
替丁组 ,观察溃疡指数和溃疡抑制率的变化 ,测定大鼠胃液量 、胃液pH、胃蛋白酶活性 、血清SOD活性及
MDA和NO含量 。结果:溃疡平能明显降低大鼠乙酸胃溃疡的溃疡指数(P<0.05),溃疡平低 、中 、高剂
量组的溃疡抑制率分别达 28.43%、66.72%和92.26%;明显减少胃液分泌量(P<0.01)和降低胃蛋白酶
活性(P <0.01),降低MDA的含量(P <0.01);亦明显升高大鼠血清 NO 含量(P <0.05)和 SOD活性(P
<0.01)。结论:溃疡平对胃溃疡具有较好促愈合作用 ,其作用机理可能与减少胃液分泌及胃蛋白酶活
性 ,提高胃粘膜抵抗氧自由基能力 ,促进胃粘膜保护因子 NO的合成和释放有关。说明溃疡平可能通过
抑制损伤因子及增强保护因子两个环节发挥抗溃疡作用。
关键词:溃疡平;胃溃疡;作用机理
中图分类号:R573.1   文献标识码:A   文章编号:1002-2392(2008)05-0020-04
收稿日期:2008-07-24  修回日期:2008-09-03
基金项目:齐齐哈尔医学院博士基金资助项目
作者简介:王滨(1962-),女 ,医学博士 ,教授 ,硕士研究生导师。主要研
究方向为多基因病致病相关基因与防治的研究 、中药抗溃疡
作用及机制研究。
*通讯作者:曹军。
  胃溃疡(GU)是人类消化系统常见病 、多发病 ,其
的病因病机至今尚未完全阐明 。目前 ,胃黏膜的攻击
因子和防御因子之间的失衡理论为多数学者所接
受[ 1] 。GU一般采用综合性的治疗措施 ,其策略是减少
侵袭因素 ,增强粘膜防御能力 ,使两者达到生理性平
衡。现代医学使胃溃疡的治愈率得到了明显的提高 ,
由于本病属于慢性病 ,难于根治 ,容易复发 ,严重者还
会出现出血 、穿孔 、幽门梗阻及癌变等并发症 ,严重危
害人类健康。与西药相比 ,中医中药在改善全身状况 、
稳定病情及无副作用等方面显示出了独特的优势 。本
研究采用改良 Okabe法制备慢性乙酸胃溃疡模型 ,旨
在阐明临床验方溃疡平对大鼠乙酸胃溃疡的影响及其
可能机理 ,为临床应用和进一步研究提供理论基础 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物:Wistar大鼠 ,雄性 ,体重 200±20g ,购自北
京维通利华实验动物技术有限公司 ,动物质量合格证
编号:SCXK(京)2007-0001。受试动物饲养在金属笼
内 ,给予标准的大鼠食物和水 ,动物室内温度保持在
18 ~ 22℃,湿度保持在 60 ~ 70%。实验前在实验室内
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Acta Chinese Medicine and Pharmacology
         2008 年第 36卷第 5 期
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ABSTRACTS FROM ORIGINAL ARTICLES
Effects of the pharmacological serum of Siwu Decoction and its in-
gredient herbs on proliferation and cell cycle of breast cancer cell
line MCF-7 cells.
HAO Qing - xiu , WANG Ji- feng , NIU Jian -zhao , ZHAO Pi -
wan , CUI Ye
Abstract:Objective:To explore the phytoestrogenic effects of the phar-
macological serum of Siwu Decoction and serums of its ingredient herbs
on MCF-7 cells.Method:Immature female SD rats weighting 70±5g
were randomly divided into seven groups:normal control group , positive
control group and five Chinese medicine groups.The rats in different
groups were treated for four days.On the fifth day , animals were sacri-
ficed by abdominal aorta bleeding.The blood was collected and serum
was separated.The effect of the pharmacological serum on proliferation
assay with human breast cancer cell line(MCF7)was observed by means
of MTT assay.Cell-cycle analyses and apoptosis rate were evaluated
with propidium iodide staining by flow cytometry.Result:The pharmaco-
logical serum of Radix paeoniae alba , Radix angelicae sinensis and Rhi-
zoma Chuanxiong stimulated proliferation of MCF7 cell respectively com-
pared with normal control group(P<0.01).The pharmacological serum
of Radix rehmanniae preparata stimulated proliferation of MCF7 cell
compared with normal control group(P<0.05), The amount of cell in
Phase S and proliferation index increased with the serum of Radix reh-
manniae preparata , Radix angelicae sinensis and Rhizoma Chuanxiong(P<0.01).Proliferation index increased with the serum of Radix pae-
oniae alba(P <0.05).The pharmacological serum of Siwu Decoction
could , to a certain extent , increase the amount of MCF7 cells when its
ingredients are at the specific ratio.However , no statistical significance
was detected(P>0.05).The apoptosis could be inhibited by the phar-
macological serums of the decoction and its included herbs except Radix
rehmanniae preparata.Conclusion:The pharmacological serums of the
four ingredient herbs of Siwu Decoction possess phytoestrogenic effects.
However , the pharmacological serum of Siwu Decoction possesses less
phytoestrogenic effects than each of its ingredients when the ingredients
of the decoction were at the specific ratio.
Author s address:Beijing University of Chinese Medicine , Beijing
100029 , China
Key words:Siwu Decoction;pharmacological serum;phytoestrogen;
MCF-7 cell;cell proliferation;cell-cycle;apoptosis.(Original article on page 10)
Expression of NR1mRNA and NR2BmRNA in rats brain with post-stroke depression and interference effect of Chinese medicine
ZHAO Rui-zhen1 , TANG Qi-sheng2 , XU Xiang-qing3 , HOU Xiu-juan4 , XIE Hua1
Abstract:Objective:To observe the expression of N-methyl-D-as-
partic acid(NMDA)acceptors mRNA and interference effect of Yinao-
jieyu Formula on the rat model of post-cerebral hemorrhage depression(post-stroke depression , PSD).Method:Reverse transcription poly-
merase chain reaction(RT-PCR)was used in the rat model of post-
stroke depression.The expression of NR1mRNA and NR2BmRNA in
prefrontal cortex and hippocampus , and the interference of Yinaojieyu
Formula were observed.Result:The expression of NR1 and NR2BmRNA
in hippocampus and prefrontal cortex in groups of the model of PSD and
the false surgery PSD increased obviously compared to that of the normal
group.Yinaojieyu Formula reduced obviously the expression of NMDA
receptors.Conclusion:The expression of NR1mRNA and NR2BmRNA in
the brain of PSD rat model increased ,while Yinaojieyu Formula can re-
duce this expression.The result showed that the anti-depression effect
of Yinaojieyu Formula may be related to its function of reducing NMDA
expression.
Author s address:1.Beijing University of Chinese Medicine , Beijing
100029 , China;2.Third Affiliated Hospital of Beijing University of Chi-
neseMedicine, Beijing 100029 , China;3.Affiliated Hospital of Shandong
University of Chinese Medicine , Jinan 250100 , China;4.Dongfang Hos-
pital of Beijing University of Chinese Medicine , Beijing 100078 , China
Key words:post-stroke depression;post-cerebral;hemorrhage de-
pression;Yinaojieyu Formula;NMDAR (Original article on page 14)
Experimental study of Sambucus williamsii Hance on Anti-in-
flammatory and analgesia
DONGPei-liang , YAN Xue-ying , KUANG Hai-xue , HAN Hua
Abstract:Objective:To investigate anti-inflammatory and analgesia of
Sambucus williamsii Hance.Method:Xylene-induced mouse ear edema
models and carrageenan-induced rat paw edema models were used to
study the anti-inflammatory.Hot-plate test in mice was used to study
the analgesia.Result:It was observed that , Sambucus williamsii Hance
could obviously inhibitory effects on xylene-induced mouse ear edema
and carrageenan -induced rat paw edema.On the other hand , it can
raise mice s threshold of pain.Conclusion:Sambucus williamsii has anti-inflammatory and analgesia.
Author s address:Heilongjiang University of Chinese Medicine ,Harbin
150040 , China
Key words:Sambucus williamsii Hance;anti-inflammatory;analgesia(Original article on page 18)
Influence of different habitat and radiation to seed quality of Scut-
cllana Baicalensis Georgi
LIN Hui-bin1 , LU Jun - xian1 , QU Yong - sheng1 , LIN Jian -
qun2* , LIN Jian-qiang2*
Abstract:Objective:To research the influence to the seed quality of
Scutcllana Baicalensis Georgi of different habitat and radiation.Method:
Studing the thousand-seeds weight , vigor of germination , germination
capacity and researching the influence of radiation.Result:The thousand-seeds weight is 1.401g ~ 1.970g , germination capacity is 64.5%~
90.5%.The germination capacity is reduced 12% ~ 18% after 60
Coγradiation.Conclusion:The germination capacity is connected with
plumpness and storage time.The radiation in the test could inhibit germ-
ination capacity.
Author s address:1.Shandong Institute of TCM , Jinan 250014 , China;
2.School of Life Sciences , State Key Lab of Microbial Technology , Shan-
dong University , Jinan 250100 , China
Key words:Scutcllana Baicalensis Georgi;seeds;thousand - seeds
weight;sprouting rate;radiation (Original article on page 35)
Optimizing extraction technique of TanshinoneⅡA in Danshen and
determining it by HPLC method
SUN Yan , SUN Yu , LI Yong-ji , ZHANG Xi-wu
Abstract:Objective:Optimizing extraction craft of Tanshinone Ⅱ A in
Danshen.Method:Warm immersion , alcohol reflux , ultrasonic extractive
technique were used to treat the materia1.Orthogonal test was also used
toresearch the affect factors of the TanshinoneⅡA componens in Dansh-
en.The extraction yields of TanshinoneⅡA were determined by HPLC.
Results:The best extracting technique was 4 times of 95% alcohol su-
personic 30 minutes , twice.The linear ranges of TanshinoneⅡA is 25.2-126ug ml.Conclusion:Supersonic technical operation was simple , fast
and had good reproducibility , the result was satisfied.
Author s address:Heilongjiang University of Chinese Medicine ,Harbin
150040 , China
Key words:Danshen;TanshinoneⅡA;extraction;HPLC(Original article on page 37)